医学检验-微生物-棒杆菌属、动物源性细菌、其它革兰阴性杆菌

第13章棒杆菌属第15章动物源性细菌第16章其它革兰阴性杆菌

一.名词解释

1.人畜共患病：某些病原微生物既可感染动物，也可感染人类，且人类患病多是由于接触了感染动物。如布氏杆菌、炭疽等。

2.青霉素串珠试验：炭疽杆菌检测中，此菌可在0.05～0.5%青霉素的培养基中可发生形态变化，菌体肿大呈球形，似串珠，称为青霉素串珠试验

3.锡克（Schick）试验：是根据毒素抗毒素中和的原理，用少量白喉毒素测定机体内有无白喉抗毒素的皮内试验。同时取等量无毒力的白喉毒素做对照试验。本试验可用于调查人群对白喉免疫状态。

4.DPT（白百破三联疫苗）：由白喉类毒素、百日咳菌苗和破伤风类毒素组成，可预防白喉、百日咳和破伤风。

5.硫磺样颗粒：是放线菌在感染组织中形成的菌落。肉眼见为黄色小颗粒，镜下呈菊花状。

6.白喉毒素：是白喉棒状杆菌的主要致病物质，又β-棒状杆菌噬菌体毒素基因编码。完整的白喉毒素是一条大量含精氨酸的多肽链，经蛋白酶水解后，分为A 和B两个片段。白喉毒素是具有强烈的细胞毒作用，能抑制敏感细胞正常合成蛋白质，从而破坏细胞的正常生理机能，引起组织细胞变性坏死。

二.填空

1.鼠疫是一种的烈性传染病，通过传染给人。在临床上的病型有

、

、。

2.我国流行的布氏杆菌

有、、

，其中最常见的

是。

3.布氏杆菌侵袭力强，主要

经，，，等途径侵入机体引起波状热。

4.布氏杆菌是一类革兰染色

短小杆菌，我国流行的主要是

布氏杆菌。

5.布氏杆菌感染动物主要引

起，感染人主要引起。

6.布氏杆菌的侵袭力主要与

酶和的抗吞噬作用有关。

7.鼠疫杆菌属于菌属，引起的鼠疫是性疾病。1.自然疫源性，鼠蚤。腺鼠疫、肺鼠疫、败血型鼠疫。

2.牛布氏菌、猪布氏菌、羊布氏菌，羊布氏菌。

3.皮肤、呼吸道、消化道、眼结膜。

4.阴性，羊。

5.母畜流产，波浪热。

6.透明质酸酶荚膜。

7.耶尔森，自然疫源。

8.鼠疫杆菌革兰染色，在陈旧培养基中常呈。

9.鼠疫杆菌的荚膜抗原

是，与毒力有关；可制备类毒素的物质是。

10.鼠疫杆菌产生的毒素有

和。

11.白喉抗毒素可用于

和 .

12.炭疽杆菌的致病因素主要

有、，引起的疾病有、、三种类型.

13.军团菌是的病原体.培养时需提供和铁时才能生长 .主要通过传播.

14.培养白喉杆菌的培养基

有、，在

培养基上形成黑色菌落.

15.白喉毒素由产生 ,其毒性片段是 ,其能使

灭活 ,从而抑制易感细胞蛋白质的合成 .

16.锡克试验根据的原理 ,阳性反应说明 ,阳性反应说明 ,假阳性反应说

明 ,混合反应说

明 .

17.白喉的特异性预防方法

是 .

18.培养百日咳杆菌的培养基常

用 .该菌主要通过传播 ,引起 .病后可获

免疫力.预防用 .

19.军团菌广泛存在于各种 ,侵入人体可寄生在细胞内.

20.军团菌为革兰菌,其细胞壁中含大量 .

21.治疗军团菌病首选药物是 ,并可与联合应用. 8. 阴性，多形态性。

9.F1抗原，鼠毒素。

10. 鼠毒素，内毒素。

11.紧急预防和治疗.

12.荚膜、炭疽毒素，皮肤炭疽、肠炭疽、肺炭疽.

13.军团菌病.L-半胱氨酸，呼吸道.

14.吕氏血清培养基、亚碲酸钾培养基，亚碲酸钾培养基.

15.携带β-棒状杆菌噬菌体白喉杆

菌 ,A片段,EF2.

16.毒素抗毒素中和,机体对白喉无免疫力, 机体对白喉有免疫力,有免疫力,无免疫力.

17.接种白喉类毒素.

18.鲍金培养基.呼吸道，百日咳，牢固，百日咳杆菌死疫苗接种.

19.水环境,巨噬.

20.阴性,支链脂肪酸.

21.红霉素,利福平.

22.绿脓杆菌属于菌属 ,是重要的致病菌.

23.抵抗百日咳杆菌的再感染主要依靠粘膜局部 ,母体血清IgG对新生儿保护作用.

24.预防百日咳可接种

或 . 22.假单胞,条件.

23.sIgA,无.

24.百日咳死菌疫苗或白百破三联疫苗.

二．单选题

1.关于炭疽杆菌,下列哪项是错误的

A.革兰阴性大杆菌 ,可形成芽胞;

B.有荚膜 ,其与该菌致病力有关;

C.是人畜共患病病原体;

D.炭疽毒素由保护性抗原、致死因子和水肿因子三种成分构成;

E.临床可致皮肤炭疽、肺炭疽和肠炭疽;

2.在抗菌免疫中 ,下列不以细胞免疫为主的细菌是

A.结核杆菌;

B.军团菌;

C.布氏杆菌;

D.伤寒杆菌;

E.白喉杆菌;

3.菌毛作为致病因素之一的细菌 ,不包括

A.百日咳杆菌;

B.淋球菌;

C.炭疽杆菌;

D.布氏杆菌;

E.痢疾杆菌;

4.关于鼠疫杆菌下列哪项是错误的

A.鼠是重要传染源传播媒介;

B.陈旧培养物中菌体可呈多态性;

C.可通过鼠蚤传染给人;

D.临床类型有肺鼠疫、腺鼠疫和败血症鼠疫;

E.病人为循环障碍 ,有＂黑死病＂之称.

5.下列细菌中不以荚膜为致病因素的细菌是

A.炭疽杆菌;

B.布氏杆菌;

C.肺炎链球菌;

D.白喉杆菌;

E.百日咳杆菌;

6.下列哪种病原体不是人畜共患病病原体

A.鼠疫杆菌;

B.布氏杆菌;

C.炭疽杆菌;

D.莫氏立克次体;

E.百日咳杆菌;

7.下列细菌中侵袭力最强的是

A.破伤风杆菌;

B.白喉杆菌;

C.布氏杆菌;

D.军团菌;

E.流感杆菌;

8.布氏杆菌感染时 ,细菌可反复入血形成

A.菌血症;

B.败血症;

C.毒血症;

D.脓毒血症;

E.内毒素血症;

9.布氏杆菌的致病物质是

A.芽胞;

B.荚膜;

C.鞭毛;

D.血浆凝固酶;

E.链激酶;

10.食入未经消毒的羊奶 ,最有可能患的病是

A.波浪热;

B.结核病;

C.伤寒;

D.破伤风;

E.肉毒中毒;

11.分离布氏杆菌阳性率最高的患者标本是

A.血液;

B.粪便;

C.尿液;

D.痰; E骨髓;

12.培养布氏杆菌应接种于

A.血平板;

B.巧克力平板;

C.罗氏培养基;

D.肝浸液培养基;

E.吕氏培养基;

13.可寄生在巨噬细胞内的细菌是

A.布氏杆菌;

B.金黄色葡萄球菌; C肺炎链球菌; D.破伤风杆菌; E.炭疽杆菌

14.菌体呈卵圆形 ,两端浓染的细菌是

A.炭疽杆菌;

B.白喉棒状杆菌;

C.结核杆菌;

D.鼠疫杆菌; E伤寒沙门菌;

15.鼠疫杆菌产生的鼠毒素与一般外毒素的区别是

A.化学成分是脂多糖;

B.不可用甲醛脱毒制备类毒素;

C.免疫动物不能产生抗毒素;

D.由质粒控制;

E.菌细胞裂解或自溶才能释放;

16.鼠疫杆菌的传播媒介是

A.鼠蚤;

B.鼠虱;

C.恙螨;

D.蚊;

E.蜱;

17.下列细菌中属需氧芽胞杆菌的是

A.破伤风杆菌;

B.肉毒梭菌;

C.产气荚膜梭菌;

D.炭疽杆菌;

E.白喉棒状杆菌;

18.青霉素串珠试验阳性的细菌是

A.破伤风梭菌;

B.肉毒梭菌;

C.产气荚膜杆菌;

D.炭疽杆菌;

E.白喉杆菌;

19.白喉棒状杆菌的特点是

A.革兰染色阴性;

B.在普通培养基上生长迅速;

C.有异染颗粒;

D.内毒素致病;

E.对磺胺敏感

20.关于白喉毒素 ,错误的是

A.只有携带β-棒状杆菌噬菌体的溶原性白喉棒状杆菌才能产生白喉毒素;

B.完整的白喉毒素分子无酶活性;

C.A片段具有酶活性 ,作用于延伸因子2 ,最终使细胞蛋白合成受阻;

C.B片段在具有酶活性的同时 ,协助A片段进入细胞; E.B片段是诱导机体产生抗毒素的主要部位;

21.下列哪项不是白喉棒状杆菌感染的特点

A.白喉棒状杆菌是棒状杆菌属中唯一能引起人类白喉的病原菌;

B.白喉的传染源包括白喉病人和带菌者;

C.白喉棒状杆菌侵入鼻咽部粘膜生长繁殖;

D.白喉棒状杆菌在局部繁殖后入血;

D.白喉的早期致死原因是假膜脱落引起的窒息;

22.关于锡克试验 ,错误的是

A.可用于调查人群对白喉的免疫状态;

B.毒素抗毒素中和的原理是本试验的理论依据;

C.在使用白喉毒素的同时 ,用无毒力白喉毒素作为对照;

D.阳性反应说明机体对白喉棒状杆菌无免疫力;

E.假阳性反应说明机体对白喉棒状杆菌无免疫力 ,但有超敏反应;

23.使用白喉抗毒素 ,错误的是

A.使用前一定要做皮肤过敏试验;

B.发现过敏者 ,应进行减敏疗法;

C.可用

于紧急预防; D.可用于治疗; E.用于治疗必须早期足量;

24.绿脓杆菌的特征是

A.专性厌氧; B具有周身鞭毛的革兰阴性菌; C.在液体培养基中形成菌膜,

菌液呈蓝绿色; D.对青霉素等多种抗生素敏感; E.只引起创伤感染 ,较少

引起败血症;

25.下列细菌中属条件致病菌的是

A.金黄色葡萄球菌;

B.伤寒沙门菌;

C.霍乱弧菌;

D.绿脓杆菌;

E.结

核杆菌;

26.百日咳杆菌的分离培养应采用

A.鲍金(B-G)培养基;

B.巧克力培养基;

C.伊红-美蓝培养基;

D.罗氏培养基;

E.亚碲酸钾培养基;

27.百日咳杆菌由S型变异为R型是失去了

A.菌毛;

B.芽胞;

C.鞭毛;

D.荚膜;

E.微荚膜;

28.百日咳杆菌属于

A.假单胞菌属;

B.奈瑟菌属;

C.鲍特菌属;

D.分枝杆菌属;

E.棒状杆

菌属;

29.目前预防百日咳主要采用注射

A.类毒素;

B.减毒活疫苗;

C.抗毒素;

D.白百破三联疫苗;

E.白百破三

联疫苗和死疫苗均可;

30.百日咳免疫特点不包括

A.免疫力持久;

B.可产生多种特异性抗体;

C.细胞免疫起主要作用;

D.抵抗

再感染的主要因素是SIgA;

E.母体血清IgG 可保护新生儿不受感染;

31.放线菌感染其脓液特征是

A.粘稠 ,呈金黄色;

B.稀薄 ,呈血水样;

C.稀薄 ,呈蓝绿色;

D.稀薄 ,呈暗黑色;

E.可见到硫磺样颗粒;

32.对放线菌的错误叙述是

A.革兰阳性、非抗酸阳性菌;

B.引起内源性感染

C.形成慢性肉芽肿并伴瘘管

D.诊断可查找硫磺样颗粒压片镜检 E特异性抗体可抵抗再感染

四、问答题

1.主要的动物源性细菌有哪些?各引起哪些人畜共患病?

（1）布氏杆菌，引起布氏杆菌，也称波浪热。

（2）鼠疫杆菌，引起鼠疫。

（3）炭疽杆菌，引起炭疽病。

（4）土拉弗郎丝菌，引起土拉菌病，也称兔热病或野兔热。

2.简述布氏杆菌对人的致病作用.

羊、牛、猪是布氏杆菌的自然宿主，人通过接触感染动物或感染胎畜、羊水

和乳汁等分泌物而感染。细菌通过完整的皮肤黏膜进入宿主体内，被吞噬细胞吞

噬后可在吞噬细胞内增殖并扩散到局部淋巴结内形成原发感染灶；在淋巴结内增

殖到一定程度后可侵入血流并进一步扩散到肝、脾、骨髓等其他组织中繁殖，再

释放入血。依此反复多次造成间歇性菌血症和多脏器感染。菌血症时由于内毒素的作用可使病人表现为发热等中毒症状，故临床表现为反复发热，也称波浪热。该菌在宿主体内可顽强增殖和扩散，主要与荚膜的抗吞噬和透明质酸酶的扩散作用有关。

3.百日咳杆菌的致病物质有哪些?各有何毒性作用?

致病物质除菌体结构中的菌毛、荚膜和内毒素外，还有：

（1）不耐热毒素，可引起支气管和支气管纤毛上皮细胞炎症和坏死。

（2）百日咳毒素，可使呼吸道分泌物增多、淋巴细胞表面表面生长，造成细胞的损伤和坏死而出现阵发性咳嗽。

（3）血凝素，可助细菌粘附并使淋巴细胞增多。

4.放线菌属中对人致病的主要是何菌?怎样诊断鉴别?

放线菌属中对人致病的主要是衣氏放线菌，主要引起面颈部软组织的化脓性感染并常形成瘘管。最简单的诊断方法是在脓液中或硬化组织中取材仔细寻找硫磺样颗粒压片革兰染色镜检，见有棒状无隔菌丝放射状排列如菊花，菌丝未端膨大即可确诊。

5.白喉毒素的致病机制

革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌的区别

革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌自然界存在多种多样细菌，如何将这些细菌加以鉴别、分类，并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。革兰氏染色法，能够把细菌分为两大类：采用这种染色方法，是先用龙胆紫来染细菌，所有细菌都染成了紫色，然后再涂以碘液，来加强染料与菌体的结合，再用95％的酒精来脱色20～30秒钟，有些细菌不被脱色，仍保留紫色，有些细菌被脱色变成无色，最后再用复红复染1分钟，结果已被脱色的细菌被染成红色，未脱色的细菌仍然保持紫色，不再着色，这样，凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌；染成红色的称为革兰氏阴性菌。革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等；常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、不动杆菌属、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、奈瑟氏球菌属、百日咳杆菌、霍乱弧菌及脑膜炎双球菌等。在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。附：细菌的致病性凡能引起人类疾病的细菌,统称为病原菌或致病菌(pathogenic bacterium)。细菌在人体内寄生，增殖并引起疾病的特性称为细菌的致病性或病原性（pathogenicity）。致病性是细菌种的特征之一，具有质的概念，如鼠疫细菌引起鼠疫，结核杆菌引起结核。致病性强弱程度以毒力(virulence)表示，是量的概念。各种细菌的毒力不同，并可因宿主种类及环境条件不同而发生变化。同一种细菌也有强毒、弱毒与无毒菌株之分。细菌的毒力常用半数死量(me

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的区别

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的区别 Newly compiled on November 23, 2020

革兰氏阳性细菌与阴性细菌的比较把细菌采用龙胆紫染色，涂碘加强染色。然后用酒精脱色，革兰氏阳性菌不会被脱色呈现紫色，革兰氏阴性菌会被脱色呈现红色。在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。常见的革兰氏阳性菌有：（Staphylococcus）、(Streptococcus)、肺炎双球菌、、白喉杆菌、破伤风杆菌等；常见的革兰氏阴性菌有痢疾杆菌、伤寒杆菌、、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌及霍乱弧菌等。 1.阳性的肽聚糖厚，阴性的肽聚糖薄，如下图： 2.阳性菌有磷壁酸，阴性菌没有。磷壁酸如下图： 3.阳性菌无外膜，阴性菌有外膜，其图如下：

1884年革兰氏染色法被发明，用于细菌的形态观察和分类，根据革兰氏染色反应的基本特征，细菌可以主要分为两大类：G阳性（G+）和G阴性（G-）。前者经过染色后细菌细胞仍然保留初染结晶紫的蓝紫色，后者经过染色后细菌细胞则先脱去了初染结晶紫的颜色，带上了复杂蕃红或沙黄的红色。本文将从细胞形态和结构，生理特性以及在生产生活中不同的运用这三个方面，来对革兰氏阳性细菌与阴性细菌进行进一步比较。一、细胞形态和结构细胞的基本结构包括细胞壁和原生质体两部分。原生质体位于细胞壁内，包括细胞膜（细胞质膜）、细胞质、核质和内含物。另外细胞还含有有些特殊结构，主要有荚膜、芽孢、鞭毛和菌毛等4种。由于革兰氏阳性细菌与阴性细菌在结构上的差别主要在于细胞壁，故本文就细胞壁与非细胞壁结构两部分来进行集中比较。 1.细胞壁革兰氏染色的机理主要是抓住了革兰氏阳性细菌与阴性细菌在细胞壁的结构与组成上的不同，具体比较见下表：性质革兰氏阳性细菌革兰氏阴性细菌内壁层外壁层结构厚度（㎜）20~80 2~3 8 层次单层多层肽聚糖关系多层，75%亚单位交联，网络紧密坚固单层，30%亚单位交联，网络较疏松与细胞膜关系不紧密紧密组成肽聚糖占细胞干重的40%~90% 5%~10% 无

常见革兰阴性菌的天然耐药表

常见革兰阴性菌的天然耐药表微生物氨苄西林氨苄西林/ 舒巴坦阿莫西林/ 克拉维酸替卡西林替卡西林/ 克拉维酸哌拉西林哌拉西林/ 他唑巴坦头孢唑林、头孢噻吩头孢噻肟、头孢曲松氨曲南头孢他啶头孢西丁、头孢替坦头孢呋辛厄他培南亚胺培南美洛培南环丙沙星氨基糖苷类四环素类替加环素氯霉素多粘菌素 B/ 粘菌素呋喃妥因复方新诺明磷霉素所有肠杆菌科细菌对青霉素G、糖肽类、夫西地酸、大环内酯类（除了某些种类）、林可酰胺类、链阳霉素类、利福平、达托霉素、利奈唑胺天然耐药柯氏枸橼酸杆菌R R R 弗氏枸橼酸菌属R R R R R R 阴沟肠杆菌/产气肠杆菌R R R R R R 赫氏埃希菌R R 蜂房哈夫尼亚菌R R R R R 肺炎克雷伯菌R R 摩根菌属R R R R R R R 奇异变形杆菌R R R 普通变形杆菌/潘氏变形杆菌R R R R R R 雷氏普罗威登斯菌/斯氏普罗威登斯菌 R R R R R R R 粘质沙雷菌R R R R R R R R 小肠结肠炎耶尔森菌R R R R 假结核耶尔森菌R 所有非发酵革兰阴性杆菌天然耐药同肠杆菌科细菌，还对头孢唑林、头孢西丁、头孢孟多、头孢呋辛天然耐药铜绿假单胞菌R R R R R R R R R R R 鲍曼/醋钙不动杆菌复合群R R R R R R R R 洋葱伯克霍尔德菌R R R R R R R R R R R R R R R R 嗜麦芽窄食单胞菌R R R R R R R R R R R R R R R R R 木糖氧化无色杆菌R R R R R R 脑膜炎败血金黄杆菌R R R R R R R R R R R R 人苍白杆菌R R R R R R R R R R R R

革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性杆菌鉴定程序流程图

革兰氏阳性球菌、革兰氏阴性杆菌、革兰氏阳性杆菌鉴定程序流程图一、临床常见革兰氏阳性球菌的鉴定 %NaCL 触厌氧球菌血清凝集分群 ①－ ①＋ ②－ ②+/－草绿色 D 群链葡萄球菌属微球菌属血浆凝固酶肠球菌属气球菌属精氨酸革兰氏阳性球菌需氧培养 α溶血 β溶血 γ溶血 ①OP ①杆菌肽 ①胆汁七叶苷 ②胆汁七叶苷 ②CAMP ② ③%NaCI ③胆汁七叶苷 ①＋ ①－ ①－ ②－ ②－ ②＋ ③－ ③－ ③＋/－ ①＋②＋③＋均－ A 群 B 群 D 群其他肺炎链草绿色链 D 群链球球菌气球菌属鸟肠球菌气球菌属屎肠球菌粪肠球菌坚忍肠球菌 ①阿拉伯糖②甘露醇③山梨醇 ①－②＋③＋ ①＋②＋③－ ①－②－③－粪肠球菌屎肠球菌坚韧肠球菌金黄葡萄球菌表皮葡萄球菌（新生霉素S ）腐生葡萄球菌（新生霉素R ）非肠球菌属乳糖牛链球菌马肠链球菌

二、临床常见革兰氏阴性杆菌鉴定见图观察平板上菌落特征（特殊形态、漫延生长、拉丝、溶血、荧光、色素等） ①+②— 革兰氏阴性杆菌氧化酶（—） KIA 葡萄糖O/F 非发酵（O/-）肠杆菌科 ①－ ②－ ②－ ①赖氨酸 ②麦芽糖迅速分解 ③甘露醇 ④DNA 酶不动杆菌属（G-球杆菌）鼻疽假单胞（25%②＋ ②－ ③－ ③+ 嗜麦芽窄食单胞菌洋葱伯克霍尔德氏菌（93%氧化酶阳性）埃希菌属变形杆属菌克雷伯氏菌属志贺氏菌属（漫延生长）（动力-）沙门氏菌属普罗威登氏菌属沙雷氏菌属枸橼酸杆菌属摩根摩根氏菌（DNA 酶+）迟缓爱德华菌 (吲哚+，尿素+，哈夫尼亚菌属耶尔森氏菌属糖醇反应差）（蜂房哈夫尼亚）（G-短小杆菌肠杆菌属 37℃动力（—） 25℃动力（+）尿素（+）4℃生长糖醇分解/黄色素阴沟肠杆菌聚团多源菌产气肠杆菌板畸肠杆菌

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌

细菌的分类把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌、链球菌、李式杆菌属、丹毒丝菌属、肾杆菌属、芽孢杆菌属、梭菌属、分歧杆菌属、放线菌属、奴卡菌属、棒状杆菌属、红球菌属、丹毒杆菌、气肿疽杆菌、结核杆菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等；常见的革兰氏阴性菌有:伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、痢疾杆菌、肺炎杆菌、布式杆菌、流感副流感杆菌、卡他杆菌、不动杆菌属、耶尔森菌属、嗜肺军团菌、绿脓杆菌、（副）百日咳杆菌、志贺菌属、巴斯德菌属、霍乱弧菌、副溶血性杆菌及脑膜炎双球菌等。 G+ 球菌：金黄色葡萄球菌（葡萄球菌属）、乙型溶血性链球（链球菌属）、肺炎链球菌（链球菌属） G—球菌：淋球菌、脑膜炎双球菌（奈瑟菌属） G+ 杆菌：白喉杆菌（棒状杆菌属）、结核杆菌（分歧杆菌属）抗酸菌麻风杆菌（分歧杆菌属）抗酸菌 G—杆菌：大肠杆菌（埃希菌属）、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、志贺痢疾杆菌、福式痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌（志贺菌属）、百日咳杆菌（包特菌属）、肠炎杆菌（沙门菌属）、绿脓杆菌（假单胞菌属）、在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。附：革兰氏阳性细菌和阴性细菌感染可选药物清单一、革兰氏阳性细菌 1.主要抗革兰氏阳性菌的抗生素与抗菌药青霉素类：青霉素G，青霉素V 耐青霉素酶的青霉素：唑西林，邻氯西林，二氯西林，氟氯西林，甲氧西林，萘夫西林等内酰胺酶抑制剂合剂：阿莫西林／克拉维酸，氨苄西林／舒巴坦，氨苄西林／舒巴坦等大环内酯类：一代：红霉素，柱晶白霉素，乙酰螺旋霉素，麦迪霉素二代：罗红霉素，克拉霉素，阿奇霉素，地红霉素林可霉素类：林可霉素，克林霉素链阳霉素类：奎奴普丁／达福普汀糖肽类：万古霉素，去甲基万古霉素，替考拉宁嗯唑烷酮类：利奈唑酮其他：利福平，夫西地酸，杆菌肽 2.具有良好抗革兰氏阳性菌作用的广谱抗生素与抗菌药广谱青霉素：氨苄西林，阿莫西林头孢菌素：第一、二、四代头孢菌素碳青霉烯：亚胺培南，培尼培南，美洛培南青霉烯：法罗培南氨基糖苷：庆大霉素，阿米卡星，阿贝卡星四环素类：多西环素，米诺环素其他类抗生素：氯霉素，甲砜霉素，磷霉素

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的区别

革兰氏阳性细菌与阴性细菌的比较把细菌采用龙胆紫染色，涂碘加强染色。然后用酒精脱色，革兰氏阳性菌不会被脱色呈现紫色，革兰氏阴性菌会被脱色呈现红色。在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。常见的革兰氏阳菌等。 1.阳性的肽聚糖厚，阴性的肽聚糖薄，如下图： 2.阳性菌有磷壁酸，阴性菌没有。磷壁酸如下图：

3.阳性菌无外膜，阴性菌有外膜，其图如下：

1.细胞壁革兰氏染色的机理主要是抓住了革兰氏阳性细菌与阴性细菌在细胞壁的结构与组成上的不同，具体比较见下表：进一步的，革兰氏阳性细菌的细胞壁主要由肽聚糖和包括磷酸壁的酸性多糖构成，细胞表面整体带负电的部分原因就是因为磷酸壁带负电。同时，磷酸壁赋予了革兰氏阳性细菌以特异的表面抗原（殷士学.环境微生物

不常见革兰阴性菌的快速鉴定方法

不常见革兰阴性菌的快速鉴定方法病原学检测对于感染性疾病的诊断和治疗非常重要，因此，临床微生物实验室在医院感染治疗和控制中起到关键作用。目前，大部分临床微生物实验室采用商品化的鉴定系统鉴定临床分离的细菌，但是对于一些临床不常见的细菌，传统的鉴定方法(如革兰染色、生化反应等)更加实用有效。因此，本文参照CLSI M32-A2文件列举了一些临床不常见细菌的特征和鉴定方法，希望对临床微生物实验室的常规工作有所帮助。一. 不常见革兰阴性菌 1. 布氏杆菌属布氏杆菌属是一类革兰阴性细小杆菌，牛、羊、猪等动物最易感染。人类接触带菌动物或食用病畜及其乳制品，均可被感染。布氏杆菌病广泛分布世界各地，我国部分地区曾有流行。布氏杆菌属分为羊、牛、猪、鼠、绵羊及犬布氏杆菌6 个种，20个生物型。中国流行的主要是羊、牛、猪三种布氏杆菌，其中以羊布氏杆菌病最为多见。布氏杆菌属细菌为非抗酸性，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，呈球杆状(见图1)。血琼脂(BAP)上为透明或半透明、光滑且有光泽菌落。此细菌不在麦康凯琼脂上生长。布氏杆菌属细菌尿素阳性，触酶、氧化酶阳性，而吲哚阴性。由于该菌属细菌具有强的传染性，因此一旦怀疑应送往LRN B级参考实验室进行确认。 2. 空肠弯曲菌空肠弯曲菌是一种人畜共患病病原菌，可以引起人和动物发生多种疾病，并且是一种食物源性病原菌，认为是引起全世界人类细菌性腹泻的主要原因。其致病因素包括粘附、侵袭、产生毒素和分子模拟机制等四个方面，通过分子模拟机制可以引起最严重的并发症一格林一巴利综合征。空肠弯曲菌可以通过产生细胞紧张性肠毒素、细胞毒素和细胞致死性膨胀毒素而致病。空肠弯曲菌对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感，但近年发现了不少耐药菌株及多重耐药性菌株。空肠弯曲菌菌体轻度弯曲似逗点状。菌体一端或两端有鞭毛，运动活泼，在暗视野镜下观察似飞蝇。有荚膜，不形成芽胞。微需氧菌，在含2.5～5% 氧和10% CO2的环境中生长最好，在正常大气或无氧环境中均不能生长，最适温度为37～42℃。本菌在普通培养基上难以生长，在凝固血清和血琼脂培养基上培养36 小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落，单个菌落呈中心凸起，周边不规则，无溶血现象。空肠弯曲生化反应不活泼，不发酵糖类，不分解尿素。可还原硝酸盐，氧化酶和触酶为阳性。能产生微量或不产生硫化氢，甲基红和v-p试验阴性，枸椽酸盐培养基中不生长,在弯曲菌中马尿酸呈阳性反应具有重要鉴定价值。 3.“HACEK”群细菌 HACEK是指一组革兰阴性杆菌：嗜血杆菌属(H)、放线杆菌属(A)、人心杆菌属(C)、艾肯菌属(E)、金氏杆菌属(K)。这组微生物的共同特征是易导致心内膜感染，约占全部感染性心内膜炎的5-10%，它们是导致正常人群(非静脉药物滥用者)心

革兰阳性杆菌的鉴定20070425

革兰阳性需氧杆菌的鉴定一、概述革兰阳性需氧杆菌的种类繁多，与临床疾病有关的棒状杆菌属、李斯特菌属、需氧芽孢杆菌属、丹毒丝菌属。这类细菌多为腐生性，广泛存在于自然界的水和土壤中，其中有些为人和动物的正常菌群，可条件致病，有些对人和动物具有高度致病性。二、临床常见的革兰阳性需氧杆菌及鉴定要点（一）棒状杆菌属 1、定义及临床意义棒状杆菌属的细菌是革兰氏阳性、有独特形态（常排列为X、V、W形或中国字形、栅栏形）、菌体大小长短不一，常一端或两端膨大呈棍棒状的革兰氏阳性杆菌。大部分触酶阳性，动力阴性。除白喉棒状杆菌外，大多为条件致病菌，不产生外毒素，菌体较粗短，着色均匀，很少有异染颗粒，这些条件致病菌可致医院内感染，引起血液、组织器官感染，如菌血症、心内膜炎、骨髓炎等。 2、常见的棒状杆菌（1）假白喉棒状杆菌(类白喉棒状杆菌) ●微生物特性革兰阳性棒状杆菌，菌体形态酷似白喉棒状杆菌，较小，细长，无典型的异染颗粒。呈木栅栏样排列。 ●生化反应触酶阳性，还原硝酸盐，尿素阳性，不发酵糖类。 ●临床意义寄居于人类鼻腔、咽喉部外耳道、眼结膜、外阴和皮肤等的正常菌群，可引起心瓣膜修复术后的心内膜炎及肾移植病人致死性尿路感染。 3、常用实验触酶、动力、CAMP试验、吡嗪酰胺酶和碱性磷酸酶试验; 4、生化反应葡萄糖、木糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、麦芽糖、七叶苷水解、硝酸盐还原试验、尿素。其它非白喉棒状杆菌还有结膜干燥棒状杆菌、化脓棒状杆菌、溃疡棒状杆菌、假结核棒状杆菌、溶血棒状杆菌、杰克棒状杆菌等。（2）白喉棒状杆菌 ●微生物特性革兰阳性棒状杆菌，没有荚膜、鞭毛和芽孢。菌体大小、长短不一，直或微弯，一端或两端膨大，呈棒状。有明显的异染颗粒。 ●生化反应触酶阳性，分解葡萄糖、麦芽糖、半乳糖、糊精、还原硝酸盐。不分解乳糖，不液化明胶，吲哚阴性，尿素阴性。 ●临床意义白喉棒状杆菌是白喉的病原菌，白喉是一种急性呼吸道传染病，一般不侵入血流，在黏膜局部定植并产生白喉毒素，引起局部炎症和侵入血液后能形成毒血症致全身中毒症状。怀疑白喉棒状杆菌的必须进行毒力检测。 5、其它棒状杆菌的临床意义菌名临床意义干燥棒状杆菌可引起心瓣膜置换术后的心内膜炎及外伤后深部组织感染化脓棒状杆菌人类感染已有报道

革兰氏阳性菌

革兰氏阳性菌革兰氏阳性菌革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为两大类，革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。大多数化脓性球菌都属于革兰氏氏阳性菌，它们能产生外毒素使人致病，而大多数肠道菌多属于革兰氏阴性菌，它们产生内毒素，靠内毒素使人致病。自然界存在多种多样病菌，如何将这些病菌加以鉴别、分类，并选择有效药物进行治疗这是很革兰氏阳性菌重要的问题。革兰氏染色法，能够把细菌分为两大类：采用这种染色方法，是先用龙胆紫（亦称结晶紫）来染细菌，所有细菌都染成了紫色，然后再涂以革兰氏碘液，来加强染料与菌体的结合，再用95％的酒精来脱色20～30秒钟，有些细菌不被脱色，仍保留紫色，有些细菌被脱色变成无色，最后再用番红或沙黄复染1分钟，结果已被脱色的细菌被染成红色，未脱色的细菌仍然保持紫色，不再着色，这样，凡被染成紫色的细菌称为革兰氏阳性菌（G﹢菌）；染成红色的称为革兰氏阴性菌（Gˉ菌）。实际意义常见的革兰氏阳性菌有：葡萄球菌、链球菌、肺炎双球菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、破伤风杆菌等；常见的革兰氏阴性菌有：痢疾杆菌、伤寒杆菌、大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌、百日咳杆菌、霍乱弧菌及脑膜炎双球菌等。在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感（结核杆菌对青霉素不敏感）；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感（但奈瑟氏菌中的流行性脑膜炎双球菌和淋病双球菌对青霉素敏感），而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。结构特点革兰氏阳性菌细胞壁较厚，约20～80nm。肽聚糖含量丰富，有15～50层，每层厚度1nm,

约占细胞干重的50～80%。此外，尚有大量特殊组份磷壁酸(teichoic acid)。磷壁酸是由核糖醇(ribitol)或甘油(glyocerol)残基经由磷酸二键互相连接而成的多聚物。磷壁酸分壁磷壁酸(wall teichoic acid)和膜磷壁酸(membrane teichoic acid)两种，前者和细胞壁中肽聚糖的n-乙酰胞壁酸连结，膜磷壁酸又称脂磷壁酸(l 革兰氏阳性菌的细胞壁 ipteichoic acid)和细胞膜连结，另一端均游离于细胞壁外。磷壁酸抗原性很强，是革兰氏阳性菌的重要表面抗原；在调节离子通过粘肽层中起作用；也可能与某些酶的活性有关；某些细菌的磷壁酸，能粘附在人类细胞表面，其作用类似菌毛，可能与致病性有关。此外，某些革兰氏阳性菌细胞壁表面还有一些特殊的表面蛋白，如a蛋白等，都与致病有关。革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁结构显著不同，导致这两类细菌在染色性、抗原性、毒性、对某些药物的敏感性等方面的很大差异。革兰氏染色的结果取决于细菌细胞壁的结构即革兰氏染色原理为： G+菌细胞壁示意图 G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。 Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。 G-菌细胞壁示意图革兰氏阳性菌细胞壁厚约20-80nm，有15-50层肽聚糖片层，含20-40％的磷壁酸。革兰氏阴性菌细胞壁厚约10nm，仅2-3层肽聚糖，另外还有脂多糖、细菌外膜和脂蛋白。放线菌是另一大类革兰氏阳性菌，根据DNA中鸟嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的含量，放线菌被称为高G+C革兰氏阳性菌，而厚壁菌被称为低G+C革兰氏阳性菌。如果细胞的第二层膜是衍生特征，这两类革兰氏阳性菌可能是细菌基部的分支，否则它们可能组成关系相对较近的单系群。它们被认为可能是古细菌和真核生物的祖先，因为它们都缺乏第二层膜，并且具有一些生化上的相似性，比如含有固醇类。此外，尽管恐球菌-栖热菌(Deinococcus-Thermus)类细菌结

细菌鉴定流程

细菌鉴定流程：取一环标本四区划线接种平板（如为粪便标本接种SS,MAC平板）培养18-24小时后取一区菌落革兰染色，报告为革兰阳性球菌/革兰阴性球菌/革兰阳性杆菌/革兰阴性杆菌，注意区分细菌和真菌一般情况下不会给你们做革兰阳性杆菌和革兰阴性球菌革兰阳性球菌鉴定流程：先做3%触酶试验：阳性的为葡萄球菌或微球菌，阴性为链球菌或肠球菌葡萄球菌和微球菌的区别：葡萄糖OF试验，葡萄球菌为F型，微球菌为O型所以如果做到一个触酶阳性的革兰阳性球菌都要做下葡萄糖OF试验，DNA酶试验，新生霉素试验，血浆凝固酶试验链球菌和肠球菌的区别：链球菌高盐和胆汁七叶苷试剂均为阴性，而肠球菌都为阳性。链球菌属内区别：本来可以通过溶血来区分一些的，但是由于实验室的平板αβ溶血比较难区分所以如果做到一个触酶阴性的革兰阳性球菌都要做下高盐，胆汁七叶苷，杆菌肽，奥普托欣，CAMP 如果做到一个奥普托欣敏感的革兰阳性球菌再加做胆汁溶菌试验和菊糖试验（阳性为变红）可判定为肺炎链球菌革兰阴性杆菌鉴定流程：先做氧化酶试验：氧化酶阴性的革兰阴性杆菌都要做下KIA，MIU，葡磷两支(做MR，VP)，苯丙，枸橼酸盐，硝还，蛋白胨水（做吲哚试验），赖氨酸，鸟氨酸，氨对如果KIA结果为A/A或者K/A的应为肠杆菌科细菌，如上面向个反应还不能区分细菌到种根据教科书307页加做试验。一般情况下只会给你们做大肠埃希菌，志贺菌属（四种），沙门菌属（甲副，乙副，伤寒），弗劳地枸橼酸杆菌，肺炎克雷伯，产酸克雷伯，产气肠杆菌，阴沟肠杆菌，普通变形杆菌，奇异变形杆菌，沙雷菌属，摩根菌属，普罗威登斯菌属。如果KIA结果为K/K应怀疑为不动杆菌属或者嗜麦芽窄食单胞菌：这两个菌区分可通过麦芽糖和赖氨酸试验区分，如为氧化酶阳性，要做葡萄糖的OF试验（用非发酵），硝还产气，精氨酸双水解酶，一般情况下只有两种菌给你们做一个是铜绿假单胞菌，一个是粪产碱杆菌，真菌给你们做的一般情况只有白色念珠菌和新生隐球菌，通过墨汁负染，芽管试验，厚膜孢

革兰氏阳性菌应用

革兰氏阳性菌应用（1）梭菌属（Clostridium）严格厌氧，发酵能产生有用的终产物：乙醇、丁醇、丙酮，第一次世界大战的爆发导致梭菌发酵走向实际应用。1916年，丙酮丁醇梭菌（Clostridium acetobutylicum)的发酵成为产生丙酮的主要途径，从100吨糖浆中能生产出12吨丙酮。（2）乳杆菌属(Lactobacillus)、明串珠菌属(Leuconostoc)、片球菌属(Pediococcus)、链球菌属(Streptococcus) 通常称为乳酸细菌。能发酵葡萄糖产乳酸，耐酸性好。其中一些菌株常用于生产奶酪和发酵乳制品，全世界年产量2000万吨，产值达500亿美元。（3）芽孢杆菌属(Bacillus) 与梭菌不同，能在有氧时生长，是土壤的优势菌。许多芽孢杆菌能产生胞外水解酶，降解蛋白、核酸、多糖和脂类。其中有些酶已大批量生产用于商业：蛋白酶可用于洗涤剂；多糖水解酶可用于降解淀粉。有些芽孢杆菌是昆虫致病菌，其中苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)已被大规模开发用作杀虫剂。一些芽孢杆菌合成的抗生素在生产上已具有一定商业规模，如来自枯草芽孢杆菌(B.subtilis)的杆菌肽和来自多粘芽孢杆菌 (B.polymysa)的多粘菌素。（4）纤维单胞菌属(Cellulomonoas) 此属最显著特点为能降解纤维素。利用纤维单胞菌产生的纤维素降解酶可将富含纤维素的植物原料转变成酒精和蛋白质。（5）棒状杆菌属(Corynebacterium) 本属中的一个种，即谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum)是著名的味精生产菌，它能将原料中的大部分物质转换为谷氨酸，且将其分泌到培养基中。（6）链霉菌属(Streptomyces) 链霉菌以分支菌丝生长，孢子繁殖，与真菌特征相似，却为原核生物。灰色链霉菌(S.griseus)能产生高效抗菌物质——链霉素。在其他链霉菌中还相继发现了多种抗生素，包括四环素、红霉素、新霉素和庆大霉素等。（7）栖热菌属（Thermus）此类微生物首次发现于温泉中，为真细菌中目前所知的最嗜热细菌，最适生长温度70℃~72℃。水生栖热菌（Thermusaquaticus）是热稳定DNA聚合酶（Taq聚合酶）的主要来源，此酶在PCR扩增基因时很有价值。Taq聚合酶基因已在大肠杆菌中得到克隆和表达，可以大规模生产。

动物源性细菌

第十九章动物源性细菌一、名词解释 1、人畜共患菌 2、有菌免疫 3、波浪热 4、鼠毒素 5、F1抗原 6、水肿因子 7、串珠试验二、填空题 1、布氏杆菌是一类革兰染色——的短小杆菌，我国流行的主要是——布氏杆菌。 2、布氏杆菌感染动物主要引起——，感染人类引起——。 3、布氏杆菌是专性需氧菌，初次分离还需——气体。培养基内加入——浸液可促其生长。 4、布氏杆菌的侵袭力主要与——酶和——的抗吞噬作用有关。 5、布氏菌为——菌，所致布菌病较难根治，易转为——且——。 6、鼠疫杆菌属于——菌属，引起的鼠疫是——烈性传染病。 7、鼠疫杆菌的抗原种类较多，与其毒力有关的主要有——、——和——。 8、鼠疫杆菌革兰染色——，菌体两端浓染称为——，在陈旧培养物中形态常呈——。 9、鼠疫杆菌在肉汤培养液中生长48h后可形成——，稍加摇动可出现——状下沉。 10、鼠疫杆菌的荚膜抗原又称为——；与毒力有关，可制备类毒素的抗原是——。 1l、鼠疫杆菌的典型菌落是——型，其S型菌株的毒性——。 12、鼠疫杆菌产生的毒素有——和——。 13、杀死炭疽杆菌的芽胞除高压灭菌法外，还可采用1：2500 ——浸泡或干烤——℃，3h。 14、Ascoli沉淀反应检测的抗原是——杆菌的——抗原。 15、炭疽杆菌主要的致病物质是——和——。 16、人类炭疽因侵入途径的不同分为——、——和——三种临床类型。 17、对炭疽疫区的牧民、屠宰工、兽医等人员应接种——，其免疫力维持时间为——左右。 18、炭疽杆菌的抗原有——、——、——三种。三、最佳选择题 l、感染动物后引起母畜流产的病原是( ) A．布氏杆菌B．炭疽杆菌C．鼠疫杆菌D．钩端螺旋体E．空肠弯曲菌 2、布氏杆菌的致病物质是( ) A．芽胞B．荚膜C．鞭毛D．血浆凝固酶E．链激酶 3、食人未经消毒的羊奶，最有可能患的病是( ) A．波浪热B．结核C．伤寒D．破伤风E．肉毒中毒 4、慢性波浪热患者分离布氏杆菌阳性率最高的标本是( ) A．血液B．粪便C．尿液D．痰E．骨髓 5、培养布氏杆菌应接种于( ) A．血平板B．巧克力平板C．罗氏培养基D．肝浸液培养基E．吕氏血清斜面 6、可以寄生在巨噬细胞内的细菌是( ) A．布氏杆菌B．金黄色葡萄球菌C．肺炎链球菌D．破伤风梭菌E．炭疽杆菌 7、布氏杆菌与结核分枝杆菌的区别是( ) A．可以在巨噬细胞内生长B．致病性与超敏反应有关

临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第二十一章_其他革兰阴性杆菌及检验(小细菌)

第二十一章其他革兰阴性杆菌及检验（小细菌）本章内容嗜血杆菌属（一）流感嗜血杆菌（二）其他嗜血杆菌弗朗西斯菌属鲍特菌属布鲁菌属巴斯德菌属标题记忆关联记忆图像记忆小细菌 ·菌体小，形态近似球杆菌。 ·无动力，无芽胞。 ·对营养要求较苛刻。 ·主要包括嗜血杆菌属、鲍特菌属、布鲁菌属等。嗜血杆菌属 ·G-小杆菌，呈球杆状，有时呈杆状、长丝状等多形态。·无动力、无芽胞。 ·包括 16 个菌种，其中与临床有关的有流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、杜克及埃及嗜血杆菌。 ·须在人工培养基中加入新鲜血液才能生长，故称嗜血杆菌。流感嗜血杆菌——生物学特性 ·形态与结构形态：急性感染标本为短小球杆菌，恢复期或长期人工传代培养后可呈多形态性。 - 特殊结构：毒力株（黏液型菌株）在营养丰富的培养基上，6～8h 有明显荚膜。无鞭毛，无芽胞。流感嗜血杆菌——生物学特性 ·培养特性营养要求：高。气体环境：需氧或兼性厌氧。温度环境：最适37℃， pH7.6 ～ 7.8 。 ·培养特性菌落特点：

普通培养基中须加入X 和 V 因子。加热血平板（巧克力平板）：18～24h 后圆形、光滑湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。在其中加一定量抗生素（万古霉素/ 杆菌肽 / 克林霉素）制成选择培养基可提高检出率。在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落越远的菌落越小，此称为卫星现象，这有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。液体培养基：有荚膜的菌株均匀混浊生长，无荚膜的菌株颗粒状沉淀生长。流感嗜血杆菌——微生物检验及鉴定 ·标本采集：根据病情采集相应的临床标本。 - ·分离培养：巧克力琼脂平板或选择性巧克力琼脂平板，经 37℃培养 24～ 48h。根据菌落形态、涂片染色、卫星现象， X、 V 因子需求与否判断。 ·生化试验（鉴定）糖类发酵试验硝酸盐还原试验胆汁溶菌试验吲哚试验分解葡萄糖只产酸，不分解乳糖或甘露醇++部分+ ·荚膜肿胀试验流感嗜血杆菌——致病性及临床意义 ·主要通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。 ·原发性感染多由 b 型荚膜强毒株引起，为急性化脓感染，如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎及败血症等。 ·继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等感染后发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎等。其他嗜血杆菌 1. 副流感嗜血杆菌：形态、菌落与流感嗜血杆菌相似，也能产生卫星现象，在生长过程中只需要V因子而不需要X 因子。可引起呼吸系统的感染、心内膜炎等。 2.杜克嗜血杆菌：生长需要 X 因子，不需要 V 因子。可引起软性下疳。 3.埃及嗜血杆菌 4.嗜沫嗜血杆菌：生长只需 X 因子，不需 V因子。可引起心内膜炎、脑水肿、肺炎、脑膜炎、继发性菌血症等。 5.溶血嗜血杆菌：生长需 X 因子和 V 因子。可引起呼吸道感染。弗朗西斯菌属 ·主要有土拉弗朗西斯菌和新凶手弗朗西斯菌。 ·是野生动物的自然疫源性疾病，人类多由于接触患病动物而感染。鲍特菌属 ·G-小杆菌。·无芽胞，有荚膜。

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌

盛年不重来，一日难再晨。及时宜自勉，岁月不待人。革兰氏阳性菌与阴性菌【药师学习百科】——第9期20090614 <药理学-第六章β-内酰胺类抗生素> 我基础较差，有些基础性的知识也不明白，比如，啥是革兰氏阳/阴性菌呀？那么从头开始吧—— 前言自然界存在多种多样病菌，如何将这些病菌加以鉴别、分类，并选择有效药物进行治疗这是很重要的问题。革兰氏染色法，能够把细菌分为两大类。革兰氏染色法的意义就在于鉴别细菌，把众多的细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。先来看看什么是—— 革兰氏染色法革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884年由丹麦医师Gram创立细菌先经碱性染料结晶染色，而经碘液媒染后，用酒精脱色，在一定条件下有的细菌此色不被脱去，有的可被脱去，因此可把细菌分为两大类，前者叫做革兰氏阳性菌（G+），后者为革兰氏阴性菌（G-）。为观察方便，脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色，阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌，以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应；弧菌，螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。革兰氏染色的原理我叫不想知道了，但我很想知道—— 革兰氏染色法的方法步骤革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤。 1）涂片固定。 2）草酸铵结晶紫染1分钟。 3）自来水冲洗。 4）加碘液覆盖涂面染1分钟。 5）水洗，用吸水纸吸去水分。

6）加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30秒后水洗，吸去水分。 7）蕃红梁色液（稀）染10秒钟后，自来水冲洗。干燥，镜检。染色的结果，革兰氏正反应菌体都呈紫色，负反应菌体都呈红色。知道了这些，我最关心的还是哪些是—— 常见的革兰氏阳性菌葡萄球菌属，链球菌属，李式杆菌属，丹毒丝菌属，肾杆菌属，芽孢杆菌属，梭菌属，分支杆菌属，放线菌属，奴卡菌属，棒状杆菌属，红球菌属，炭疽杆菌丹毒杆菌破伤风杆菌李氏杆菌产气荚莫杆菌气肿疽杆菌结核杆菌。当然，也少不了哪些是—— 常见的革兰氏阴性菌除了大肠杆菌外，变形杆菌、痢疾杆菌、肺炎杆菌、布氏杆菌、产气夹膜杆菌、流感（嗜血）杆菌、副流感（嗜血）杆菌、卡他（摩拉）菌、不动杆菌属、耶尔森菌属、嗜肺军团菌、百日咳杆菌、副百日咳杆菌、志贺菌属、巴斯德菌属、霍乱弧菌、副溶血性杆菌等也是革兰氏阴性菌。混了这么久，我要怯怯地提点意见哦。这些细菌名字太复杂了哟！革兰菌简表类菌名 G+球菌金黄色葡萄球菌（葡萄球菌属）乙型溶血性链球（链球菌属）肺炎链球菌（链球菌属） G-球菌淋球菌脑膜炎双球菌（奈瑟菌属）G+杆菌白喉杆菌(棒状杆菌属)

动物源性细菌

第15章动物源性细菌动物源性细菌是人畜共患病的病原菌，即由一种病原菌同时可引起动物和人类的某些传染病，称为人畜(兽)共患病，其中绝大多数是以动物作为传染源的称为动物源性疾病(zoonosis)。由于人类直接接触病畜或其污染物及媒介动物叮咬等途径感染而致病，这些病主要发生在畜牧区或自然疫源地。动物源性细菌主要有布鲁菌、鼠疫耶氏菌和炭疽芽胞杆菌。第一节布鲁菌属布鲁菌属(Brucella)细菌是一类人畜共患传染病的病原菌，有4个生物种、13个生物型，因最早由美国医师 David Bruce首先分离出，故得名。本属使人致病的有牛布鲁菌（B.abortus又称流产布鲁菌）、羊布鲁杆菌（B.melitensis）、猪布鲁杆菌（B.suis）和犬布鲁杆菌（B.canis），在我国流行占绝对优势的是羊布鲁菌病，其次为牛布鲁菌病。一、生物学性状形态与染色革兰阴性小球杆菌或短杆菌。大小为0.4~0.8μm ×0.5~1.5μm。无芽胞，无鞭毛，光滑型菌有微荚膜。革兰染色经常着色不佳，故复染时间应适当延长至3min左右。培养特性需氧菌，牛布鲁菌在初分离时需5%~10%CO2。营养要求较高，在普通培养基上生长缓慢，如加入血清或肝侵液，或加硫胺、烟酸和生长素等可促进生长。最适生长温度为35~37℃，最适pH为6.6~6.8。经37℃培养48h可长出微小、透明、无色的光滑型（S）菌落，经人工传代培养后可转变成粗糙型（R）菌落。两种菌落可用吖啶黄玻片凝聚试验鉴别，S型在1:1000的吖啶黄中呈均匀混浊，而R型菌出现凝块。布鲁菌在血琼脂平板上不溶血，在液体培养基中可形成轻度混浊并有沉淀。生化反应大多能分解尿素和产生H2S。根据产生H2S的多少和在含碱性染料培养基中的生长情况，可鉴别羊、牛、猪等三种布鲁菌。（表 15－1）抗原构造与分型布鲁菌含有两种抗原物质，即A抗原和M抗原。两种抗原在不同的布鲁菌中含量不同，牛布鲁菌含A（abortus）抗原多，故又称牛布鲁菌抗原；羊布鲁菌含M（melitensis）抗原多故又称羊布鲁菌抗原。两种抗原量的比例不同可对菌

微生物检验其他革兰阴性杆菌及检验

第二十六章其他革兰阴性杆菌及检验本章考点： 1.概述：概念 2.嗜血杆菌属 ●生物学性状 ●临床意义 ●微生物学检查 3.军团菌属、鲍特菌属、布鲁菌属一、嗜血杆菌属（一）简述：嗜血杆菌属是一类无动力、无芽胞的革兰阴性小杆菌，常呈球杆状，有时呈杆状、长丝状等多形态。嗜血杆菌属包括16个菌种，其中与临床有关的为9个种，即流感、副流感、溶血、副溶血、嗜沫、副嗜沫、杜克、埃及、迟缓嗜血杆菌。嗜血杆菌须在人工培养基中加入新鲜血液才能生长，故称嗜血杆菌。因新鲜血液中含有X和V因子。X 因子是血红蛋白中的一种血红素及其衍生物，为高铁血红素，是细菌合成过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素氧化酶的辅基。V因子是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD），存在于血液和某些植物组织中，是脱氢酶的辅酶。（二）流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌，简称流感杆菌，不是流感的病原菌。 1.生物学性状：（1）形态与染色：大小为（ 1.0～1.5）μm×（0.3～0.4）μm。急性感染标本，如脑脊液中多为短小球杆菌，恢复期病灶或长期人工传代培养后可呈球杆状、长杆状、丝状等多形态性。毒力株（粘液型菌株）在营养丰富的培养基上，6～8h有明显荚膜，在陈旧培养物中荚膜消失。无鞭毛，无芽胞。革兰染色阴性，但着色较浅。用石碳酸复红或美蓝单染色，呈现两端浓染现象。（2）培养特性：需氧菌。最适生长温度为35℃，最适pH为7.6～7.8。初次分离培养时，最好在5%～10%C02环境中，以促进其生长。在普通培养基中须加入X和V因子，才能生长。血液中的V因子通常处于抑制状态，经80℃～90℃热10min破坏红细胞膜上的不耐热抑制物，可使V因子释放，故流感嗜血杆菌在巧克力琼脂平板上生长较佳。培养18～24h后生长直径为0.5～0.8mm、圆形、光滑、湿润、边缘整齐，呈露滴状的小菌落。48h后可形成直径 1.0～1.5mm灰白色较大的菌落。有荚膜菌株的菌落呈轻度粘稠。当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌在血琼脂平板上共同培养时，由于后者能合成较多的V因子，可促进流感嗜血杆菌的生长。因此，在葡萄球菌菌落周围生长的流感嗜血杆菌菌落较大，离葡萄球菌菌落越远的菌落越小，此称为卫星现象，这有助于对流感嗜血杆菌的鉴定。在液体培养基中，有荚膜的菌株呈均匀混浊生长，无荚膜的R型菌株则为颗粒状沉淀生长。（3）生化反应：本菌对糖发酵不稳定。一般分解葡萄糖只产酸，不分解乳糖或甘露醇，对麦芽糖、蔗糖或糊精的发酵不稳定。所有菌株还原硝酸盐。有荚膜菌株产生吲哚。典型菌株不溶血。产生自溶酶，可被胆汁溶解。根据流感嗜血杆菌产生吲哚，尿素酶及鸟氨酸脱羧酶反应，将其分为8个生化型。 2.致病性：致病物质为内毒素、荚膜、菌毛和酶类。主要通过呼吸道感染，引起原发性或继发性感染。原发性感染多由b型荚膜强毒株引起，为急性化脓感染，如脑膜炎、鼻咽炎、咽喉会厌炎、化脓性关节炎、心包炎及败血症等。继发感染主要在流感、麻疹、百日咳、肺结核等感染后发生，多为无荚膜菌株引起。如慢性支气管炎、中耳炎、鼻窦炎、肺炎等。

革兰氏阴性菌检测

选择培养基(selective medium) 选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。根据不同种类微生物的特殊营养需求或对某种化学物质的敏感性不同，在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。一种类型选择培养基是依据某些微生物的特殊营养需求设计的，例如，利用以纤维素或石蜡油作为唯一碳源的选择培养基，可以从混杂的微生物群体中分离出能分解纤维素或石蜡油的微生物；利用以蛋白质作为唯一氮源的选择培养基，可以分离产胞外蛋白酶的微生物；缺乏氮源的选择培养基可用来分离固氮微生物。另一类选择培养基是在培养基中加入某种化学物质，这种化学物质没有营养作用，对所需分离的微生物无害，但可以抑制或杀死其他微生物，例如，在培养基中加入数滴10%酚可以抑制细菌和霉菌的生长，从而由混杂的微生物群体中分离出放线菌；在培养基中加入亚硫酸铵，可以抑制革兰氏阳性细菌和绝大多数革兰氏阴性细菌的生长，而革兰氏阴性的伤寒沙门氏菌(Salmomnella typhi)可以在这种培养基上生长；在培养基中加入染料亮绿(brilliant green)或结晶紫(crystal vio1et)，可以抑制革兰氏阳性细菌的生长，从而达到分离革兰氏阴性细菌的目的；在培养基中加人青霉素、四环素或链霉素，可以抑制细菌和放线菌生长，而将酵母菌和霉菌分离出来。现代基因克隆技术中也常用选择培养基，在筛选含有重组质粒的基因工程菌株过程中，利用质粒上具有的对某种(些)抗生素的抗性选择标记，在培养基中加入相应抗生素，就能比较方便地淘汰非重组菌株，以减少筛选目标菌株的工作量。粪大肠菌群标准检验方法及注解GB 7918.3-87 化妆品微生物标准检验方法粪大肠菌群及注解中华人民共和国国家标准化妆品微生物标准检验方法粪大肠菌群UDC 668：576 .85.07 (GB7918.3－87) Standard methods of microbiological examination for cosmetics Fecal coliforms 粪大肠菌群细菌来源于人和温血动物的粪便。检出粪大肠菌群表明该化妆品已被粪便污染，有可能存在其他肠道致病菌或寄生虫等病原体的危险。因此粪大肠菌被列为重要的卫生指标菌。 1 方法提要根据粪大肠菌群所具有的生物特性，如革兰氏阴性无芽胞杆菌在44℃培养24～48h能发酵乳糖产酸并产气，能在选择性培养基上产生典型菌落，能分解色氨酸产生靛基质。 2 培养基和试剂 2.1 乳糖胆盐培养基

革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的区别 (1)

在治疗上，大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感；而革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感，而对链霉素、氯霉素等敏感。所以首先区分病原菌是革兰氏阳性菌还是阴性菌，在选择抗生素方面意义重大。附：革兰氏阳性细菌和阴性细菌感染可选药物清单一、革兰氏阳性细菌 1.主要抗革兰氏阳性菌的抗生素与抗菌药青霉素类：青霉素G，青霉素V 耐青霉素酶的青霉素：唑西林，邻氯西林，二氯西林，氟氯西林，甲氧西林，萘夫西林等内酰胺酶抑制剂合剂：阿莫西林／克拉维酸，氨苄西林／舒巴坦，氨苄西林／舒巴坦等大环内酯类：一代：红霉素，柱晶白霉素，乙酰螺旋霉素，麦迪霉素二代：罗红霉素，克拉霉素，阿奇霉素，地红霉素林可霉素类：林可霉素，克林霉素链阳霉素类：奎奴普丁／达福普汀糖肽类：万古霉素，去甲基万古霉素，替考拉宁嗯唑烷酮类：利奈唑酮其他：利福平，夫西地酸，杆菌肽 2.具有良好抗革兰氏阳性菌作用的广谱抗生素与抗菌药广谱青霉素：氨苄西林，阿莫西林头孢菌素：第一、二、四代头孢菌素碳青霉烯：亚胺培南，培尼培南，美洛培南青霉烯：法罗培南