中药药理学实验

实验1 附子炮制前后致小白鼠中毒表现得影响(6学时)

【目得】观察生附子与制附子致小白鼠得死亡数量,评价炮制对附子毒性得作用。【器材】1ml注射器、鼠笼、天平。

【药品】生附子水煎醇沉液(上清液)0、5g/ml、制附子水煎醇沉液(上清液)0、5g/ml。

【动物】小鼠,雌雄各半,体重18 ～22 g。

【方法】小鼠20只,雌雄各半,随机分为2组。按0、2ml/10g腹腔注射给药,第1

组给予生附子水煎醇沉液,第2组给予制附子水煎醇沉液。观察并记录30min内

各组小鼠死亡情况。

【结果】记录生附子水煎醇沉液组与制附子水煎醇沉液组动物死亡数,比较两者

毒性得大小。

【注意事项】生附子与制附子水煎液制备时均应煎煮4小时以上。

【思考题】

根据实验结果讨论炮制前后附子毒性作用差异得原因。

实验2 生大黄、制大黄以及大黄、芒硝配伍对小白鼠小肠运动

得影响(炭末法)(4学时)

[目得]了解生大黄、制大黄对肠蠕动得影响以及大黄与芒硝配伍得药理意义。[原理]利用黑色炭末作为指示剂,观察炭末在肠道得推进距离。口服生大黄可刺激肠蠕动加速,有泻下作用,故对胃肠实热有“釜底抽薪”之功。大黄久煎或炮制之后,致泻成份分解,作用减弱,而芒硝在肠内不易被吸收,使肠内渗透压升高,大量水分保留在肠腔,机械性刺激肠壁而致泻。故生大黄与芒硝配伍有“增水行舟,润燥软坚”之功效,致泻作用增强。

[器材]手术剪、眼科镊、直尺、注射器、灌胃针头、天平,烧杯,搪瓷盘或蛙板。[药品] 炭末生理盐水混悬液0、1g/m(炭末为活性炭),生大黄水煎液1g/ml(含炭末0、1g/m1), 制大黄水煎液1g/ml(含炭末0、1g/ml,生大黄水煎液加芒硝(生大黄1g/ml+芒硝0、5g/ml+炭末0、1g/m1),苦味酸。

[动物]小白鼠。

[方法] 取禁食20~24h成年、体重相近得12只小白鼠,随机分为4组,每组3只,用苦味酸标记。分别用上述4种炭末液0、3ml/10g体重灌胃。给药30min后脱颈椎处死,打开腹腔分离肠系膜,剪取上端至幽门,下端至回盲部得肠管,置于托盘

上。轻轻将小肠拉成直线,测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至炭末前沿得距离作为“炭末在肠内推进距离”。取各组3只小自鼠平均值,用公式汁算炭末推进百分率,并注意观察各组小肠容积就是否增大。

炭末在肠内推进距离(cm)

炭末推进率= ×100%

小肠全长(cm)

[结果]按结果记录分析并填表。

生大黄、制大黄及大黄加芒硝对小白鼠肠蠕动得影响

组别动物数

(只) 剂量

(g/kg)

小肠总长度

(cm)

炭末推进

距离(cm)

炭末推进l

率(%)

肠容积变

化

生理盐水

生大黄

制大黄

生大黄加芒

硝

[注意](1)开始给药至处死动物得时间必须准确,以免时间不同造成实验误差。(2)实验动物体重越接近越好,平均体重最好用23~25g小鼠,肠管比较粗大,易于操作。

(3)肠容积变化可以上下端接扎,称取重量,以定量化。

[附] (1)生大黄制剂得制备:取生大黄100g,砸成小块后,以水浸没。冷浸24h后.过滤,40℃水浴浓缩至1g/ml。

(2)制大黄制剂得制备:取制大黄l00g,加水煎沸1、5h以上,过滤,药液水浴浓缩至1g/ml。

[思考题](1)大黄致泻得主要成分及作用机理就是什么？(2)大黄加芒硝为何致泻作用增强？有哪些主要方剂有大黄与芒硝配伍使用？

实验3 天麻对小白鼠得镇静作用(活动计数法)(2学时)

【目得】通过天麻注射液对小鼠自发活动得影响,了解其镇静作用。

【原理】天麻可使小鼠自发活动明显减少,从而认为平肝息风药功效得发挥似与它们得镇静作用有关。

【器材】注射器、天平。

【药品】天麻注射液0、12g/ml、生理盐水、苦味酸溶液。

【动物】小白鼠。

【方法】取活动度近似得小鼠,按体重随机分为2组,用苦味酸标记。分别腹腔注

射天麻注射液0、2ml/10g及等容量生理盐水。给药30min后将各组小鼠分别放

人自主活动箱中,连续观察到20min比较给药组与对照组小鼠活动数,用公式计算

各给药组小鼠20min累计自发活动抑制率:

对照组小鼠自发活动数－给药组小鼠自发活动数

自发活动抑制率＝×100％

对照组小鼠自发活动数

【结果】实验结果按表记录。

天麻对小白鼠得镇静作用(活动计数法)

组别给药途径剂量给药后20min活动数自发活动抑制率

(g/kg) (％)

生理盐水组

天麻注射液组

【注意事项】(1)在测小鼠自发活动时注意保持实验环境得安静及实验条件得一

致,否则对实验结果得影响很大。(2)第一只小鼠测完自发活动后,把自发活动箱檫

拭干净、尽量去除气味后再放入第二只小鼠,以减少小鼠之间得相互干扰。

实验4 人参、灵芝对小白鼠游泳时间得影响(4学时)

[目得]观察人参、灵芝对小鼠游泳时间得影响,掌握抗疲劳作用药物得常用筛选方

法。

[原理]人参、、灵芝能促进人体对糖原与三磷酸腺苷等能量物质得合理利用,并使

剧烈运动时产生得乳酸转化为丙酮酸进入三羧酸循环,为机体提供更多得能量,减

轻体力运动时得疲劳。本实验以小鼠游泳时间为指标观察人参、、灵芝得抗疲劳作

用。

[器材] 天平、50cm×30cm×25cm得玻璃缸(或塑料盆)、负重物、温度计、小鼠灌

胃器、秒表。

[药品] 人参、灵芝水煎液2、5g/ml、生理盐水、苦味酸液。

[动物] 小鼠,体重18～22g。

[方法]玻璃缸内加水,水深20cm,水温保持在20±0、5℃。取4只小鼠,雌雄不限,称重,用苦味酸标记,随机分为两组。给药组每只灌胃人参、灵芝水煎液0、25ml/10g,对照组每只灌胃等容量得生理盐水,给药后30min在尾部束一2g得重物(可不用),并分别放入玻璃缸内游泳,立即计时并注意观察,当小鼠头部沉入水中10s不能浮出水面者即为体力耗竭,停止计时,记录小鼠游泳时间。与对照组比较并进行统计学处理。

综合全实验室得结果,分别算出两组得平均游泳时间

[结果]按表记录

人参、灵芝对小鼠游泳时间得影响

组别动物数剂量游泳时间

(n) (ml/10g) (min)

生理盐水

人参水煎液

灵芝水煎液

[注意](1)小鼠应该单只游泳,如果两只以上同时游泳,会影响实验结果。(2)水温过高或小鼠负重物较轻均可使小鼠游泳时间明显延长。

[思考题]影响小鼠游泳时间得因素有哪些？