真菌检验带答案
第十六章医学真菌学
一、单5选1
1.真菌区别于细菌的本质特征是：
A.具有高度分化的细胞核（有核膜、核仁）
B.有单细胞和多细胞等不同形态
C.有多种增殖方式
D. 对抗生素不敏感
E.细胞壁中无肽聚糖
2.为真核细胞型微生物的是：
A.细菌
B.真菌
C.支原体
D.衣原体
E.病毒
3.真菌的繁殖结构是：
A.芽孢
B.孢子
C.包涵体
D.原体
E.始体
4.真菌细胞壁不含有的成分是：
A.几丁质
B.葡聚糖
C.肽聚糖
D.蛋白质
E.脂质
5.真菌的致病性包括：
A.真菌毒素中毒
B.条件致病性真菌感染
C.真菌过敏
D.真菌毒素的致癌作用
E.以上全包括
6.真菌感染率明显上升与下列哪种因素相关性最小：
A.抗生素使用不当
B.抗癌药物使用增多
C.机体免疫力下降
D.激素使用增多
E.真菌发生耐药变异
7.培养真菌的最适pH是：
A.2.0～4.0
B.3.0～4.0
C.4.0～6.0
D.5.0～7.0
E.6.0～8.0
8.培养真菌首选下列哪种培养基：
A.普通琼脂平板
B.半固体培养基
C.玻片小培养
D.米汤培养基
E.沙保罗培养基
9.多细胞真菌的菌落类型是：
A.酵母型
B.类酵母型
C.丝状型
D.类丝状型
E.混合型
10.关于条件致病性真菌感染，下列说法错误的是：
A.引起的是内源性感染
B.致病性强，常造成AIDS或肿瘤等病人的致死性感染
C.是肿瘤、糖尿病及免疫缺陷性疾病治疗中的疑难问题
D.目前无特异预防措施
E.临床感染率呈明显上升趋势
11.检查新型隐球菌感染常用：
A.革兰染色法
B.抗酸染色
C.墨汁染色
D.瑞氏染色
E.吉姆萨染色
12.以下哪种真菌不属于浅部真菌：
A.红色毛癣菌
B.铁锈色小孢子菌
C.石膏样小孢子菌
D.卡氏肺孢菌
E.絮状表皮癣菌
13.*鹅口疮的病原菌是：
A.衣原体
B.细菌
C.真菌
D.螺旋体
E.立克次体
14.真菌感染不用青霉素治疗，是因为真菌：
A.缺乏细胞壁
B.真菌产耐青霉素的酶
C.长期使用青霉素已产生耐药
D.细胞壁缺乏肽聚糖
E.亲和力低
15.关于皮肤癣的描述是错误的是：
A.主要侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲
B.通过直接或间接触而感染
C.在沙保弱培养基上形成丝状菌落
D.一种皮肤癣仅能引起一种癣病
E.可以根据菌丝、孢子及菌落形成作出初步判断
16.下列何种真菌是我国主要的表面感染真菌：
A.着色真菌
B.絮状表皮癣菌
C.许兰毛癣菌
D.红色毛癣菌
E.糠秕马拉色菌
17.表皮癣菌属不引起：
A.毛发癣 B体癣 C甲癣 D足癣 E手癣
18.实验室诊断皮肤癣菌感染时，皮屑或病发须经哪种溶液处理后再镜检：
A.10%Nacl
B.70%乙醇
C.10%KOH
D.25%KOH
E.15%NAOH
19.具有假菌丝的真菌是：
A. 白色念珠菌
B. 新型隐球菌
C. 组织胞浆菌
D. 表皮癣菌
E.黄曲霉菌
20.具有多种繁殖方式的微生物是：
A.真菌
B.细菌
C.衣原体
D.立克次体
E.病毒
21.最易侵犯脑组织的真菌为：
A．表皮癣菌 B.新型隐球菌 C.假丝酵母君
D.曲霉菌
E.卡氏肺孢菌
22.下列真菌中已成为最普遍的全身性真菌病病原，也是医院感染中最重要的真菌病原的是：
A.新型隐球菌
B.曲霉菌
C.白假丝酵母菌
D.荚膜组织胞浆菌
E.卡氏肺孢菌
23.新型隐球菌的致病物质主要是：
A.芽生孢子
B.荚膜
C.假菌丝
D.侵袭性霉
E.毒素
24.下列那种真菌是AIDS患者最常见最严重病死率高的机会感染菌：
A.白假丝酵母菌
B.新型隐球菌
C.组织胞浆菌
D.马尔尼菲青霉
E.卡氏肺孢菌
25.白假丝酵母菌常常引起：
A.癣病
B.皮下组织感染
C.皮肤黏膜、内脏感染
D.真菌超敏反应性疾病
E.真菌中毒症
26.黄曲霉产生的黄曲霉损害的主要器官：
A.心脏
B.肾脏
C.肺
D.肝脏
E.造血器官
27.有关新型隐球菌的感染方式，下列说法正确的是：
A.咳痰，飞沫传播
B.鸽子粪便-土壤-经呼吸道传播
C.粪便-土壤-经消化道传播
D.尘埃-呼吸道传播
E.皮肤破烂，接触传播
28.新型隐形球菌用一般染色法难以着色，是因为其有：
A.荚膜
B.鞭毛
C.芽胞
D.孢子
E.菌丝
29.白假丝酵母菌侵入机体引起感染的主要原因是：
A.对抗生素耐药
B.侵入数量多
C.机体免疫力下降
D.致病力增强
E.维生素矿物质缺乏
30.*深部感染的真菌最适生长温度是：
A.25℃
B.28℃
C.30°C
D.33°C
E.37°C
31.卡氏肺孢菌主要通过哪种途径进行传播：
A.接触传播
B.血液传播
C.空气传播
D. 垂直传播
E. 性传播
32．一女性患阴道炎，曾因治疗其他疾病长期使用过激素类药物。泌尿生殖道分泌物标本镜检可见有假菌丝的酵母型菌，你认为引起该阴道炎的病原体是：
A.衣原体
B.解脲脲原体
C.梅毒螺旋体
D.白假丝酵母菌
E.淋球菌
33．男性患者，32岁，因持续高热入院2周，诊断为急性淋巴细胞性白血病。化疗1周后，发现患者口腔内有白色膜状物，最可能是：
A.口腔肺炎链球菌感染
B.口腔内白假丝酵母菌感染
C.口腔内厌氧菌感染
D.没注意口腔卫生
E.口腔内溶血葡萄球菌感染
34．一名肿瘤患者经化疗后出现顽固性腹泻，此时应做下列哪项检查：
A.血液细菌培养
B.超生检查
C. CT
D.镜道内窥镜检查
E.肠道菌群调查
35．一艾滋病患者，突发咳嗽、低热。采集痰液涂片吉姆萨染色后镜检发现有囊内小体，并且囊内小体的胞质呈浅蓝色，可初步诊断为该患者并发何种病原体感染：
A.卡氏肺孢菌
B.肺炎链球菌
C.曲霉菌
D.白假丝酵母菌
E.皮肤癣菌
36．在询问一已确诊为原发性肝癌患者的过程中，得知该患者有经常食用霉变的花生和玉米的历史，那么下列那种真菌很可能是诱发其肝癌的凶手：
A.毛霉菌
B.黄曲霉菌
C.皮肤癣菌
D.孢子丝菌
E.酵母菌
答案：
1.A
2.B
3.B
4.C
5.E
6.E
7.C
8.E
9.C 10.B
11.C 12.D 13.C 14.D 15.D 16.D 17.A 18.C 19.A 20.A 21.B 22.C 23.B 24.E 25.C 26.D 27.B 28.A 29.C 30.E
31.C 32.D 33.B 34.E 35.A 36.B
二、填空题
1.真菌可以分成_________细胞真菌和_________细胞真菌两类，其中后者由_________和_________组成。
4.大多数真菌对营养要求__________，常用__________培养基分离培养，最适PH值为__________。
和________。它属于一种________致病菌，可引起人体全身多个部位的感染。
和________即可报告。
9.
三个属，其中，
答案：
1.单；多；菌丝；孢子
2.酵母型菌落；类酵母型菌落；丝状菌落
3.单；假
4.不高；沙保弱；4-6；
5.浅部；深部
6.出芽；假菌丝；孢子；条件
7.难以着色；荚膜；墨汁负染法
8.KOH; 菌丝；孢子
9.毛癣菌属；小孢子癣菌属；表皮癣菌属；表皮癣菌；小孢子癣菌
三、名词解释
1.真菌
2.*孢子
3.*菌丝
答案：
1.真菌：是一类具有典型细胞核和完整细胞器，无根、茎、叶、不含叶绿素，细胞壁含几丁质和纤维素的单细胞或多细胞异养真核细胞型微生物。
2.孢子：是真菌的繁殖结构，分有性孢子和无性孢子两种，致病性真菌主要为无性孢子。
3.菌丝：真菌孢子在适宜环境条件下形成菌丝，菌丝继续成长形成许多分枝，并交织成团。
四、问答题
1.真菌孢子与细菌芽胞的区别有哪些？
2.真菌引起的疾病有哪些？
3.简述真菌按形态结构如何分类及培养特点。
答案：
1.真菌孢子与细菌芽胞的区别有哪些？
2.真菌引起的疾病有哪些？
（1）致病性真菌性感染：主要是外源性感染
（2）条件致病性真菌感染：主要是内源性感染
（3）变态反应性真菌病
（4）真菌毒素中毒症
（5）真菌毒素所致肿瘤
3.简述真菌按形态结构如何分类及培养特点。
真菌按形态和结构分为单细胞真菌和多细胞真菌两类。单细胞真菌为圆形
或卵圆形，单细胞真菌可形成酵母型或酵母样菌落；多细胞真菌由菌丝和孢子构成，多细胞真菌形成丝状菌落。大多数的真菌营养要求不高，常用沙保罗培养基培养，最适PH4-6,培养需要较高的湿度和氧气。真菌对干燥、紫外线和一般消毒剂抵抗力较强，对热抵抗力不强，对常规抗生素不敏感。
五、判断题
1.多数真菌对人无害，甚至有利。（）
2.真菌又称霉菌。（）
3.浅部真菌感染多属于外源性感染。（）
4.检查新型隐球菌最常用的方法是革兰染色法。（）
5.黄曲霉菌主要与肺癌的发生密切相关。（）
6.所有的霉菌都是真菌，但不是所有的真菌都是霉菌。（）
答案：
1.√ 2× 3.√ 4.× 5.× 6.√
六、是非改错题
1.条件性致病真菌感染主要是外源性感染。
2培养真菌所需的温度均为22~28℃。
3.花斑癣属于深部真菌感染。
4.白假丝酵母菌属于多细胞真菌。
5直接镜检发现菌丝和孢子能初步诊断真菌感染，同时又能鉴别菌种。
答案：
1.外源性感染（内源性感染）
2.培养真菌（培养浅部真菌）
3.深部真菌感染（浅部真菌感染）注：深部感染最适37℃
4.多细胞真菌（单细胞真菌）
5.同时又能鉴别菌种（一般不能鉴别菌种）
真菌的常规检验法
真菌的常规检验法 实验室检查： ?标本采集分离培养 ?直接镜检生化反应 ?染色镜检免疫学试验 一、临床标本的采集 ?1．皮肤的角质性物质：毛发、指(趾)甲、头屑、皮屑等。 2．各种分泌物和排泄物：生殖道分泌物、耳垢、痰、粪便、尿液等。 ?3．血液和体液：体液包括胸水、腹水、脑脊液、淋巴穿刺液等。 4．脓汁及渗出物。 二、检验方法 （一）标本直接检查法
不染色标本检查 染色标本检查 （二）培养检查 （三）鉴定 ①KOH溶液：本液适于检查致密的难以透明的材料（如毛发、指甲、鳞屑等）。 ②墨汁：主要用于检查有荚膜的真菌（如新型隐球菌等） ③水合氯醛－石炭酸－乳酸封固液：此液透明力较强，只限于不透明的标本。 ④生理盐水：为观察真菌的出芽现象可用生理盐水代替氢氧化钾溶液。 微生物学检查步骤： 取患部标本
（毛发、皮屑等）__置载玻片__加10%NaOH（或10%KOH）→微加温消化 →镜检（观察菌丝和孢子） 直接镜检的意义 ①有诊断意义，如浅部真菌病等； ②通过真菌的形态，可确定某些致病性真菌的属或种, 如假丝酵母菌的厚膜孢子等； ③判断某些真菌种的致病性等,如皮肤癣菌、曲霉等。 直接镜检的局限性： ①阴性结果不能排除真菌感染； ②有假阳性结果。 因此，对直接镜检可疑结果应作复查或用其他检验方法鉴定。 2. 染色标本检查 ?（1）革兰染色：各种真菌均染成革兰阳性。 ?（2）乳酸酚棉蓝染色
?（3）糖原染色： ?又称过碘Schiff（简称PAS或PASH）。真菌细胞壁由纤维素和几丁质组成，含有多糖。过碘酸使糖氧化成醛，再与品红－亚硫酸结合，成为红色，故菌体均染成红色。为真菌染色最常用的方法之一。 ?（4）嗜银染色（GMS）：染成黑色 ?（5）粘蛋白卡红染色法（MCS）：主要用于新生隐球菌荚膜的染色。隐球菌荚膜和细胞壁呈红色，细胞核呈黑色。 ?（6）荧光染色：主要使用吖啶橙和氢氧化钾来染直接涂片、培养涂片及组织切片。 （二）培养检查法 ?本法可确定菌种，辅助直接检查的不足。 ①菌落性质：酵母菌还是霉菌； ②菌落大小：致病性真菌菌落小，而条件致病性真菌菌落大； ③菌落颜色：病原性真菌颜色淡，污染真菌颜色深；
真菌检测方法
分离培养：无菌采取病料接种马铃薯琼脂培养基中，置37℃恒温箱中培养24小时，长成绒毛样菌丝，未见其它细菌生长。经48小时培养长成白色菌落。72小时菌落呈纽扣状，由中心向外周逐渐变深，转变成灰白色、灰绿色。取培养物镜检可见大量球形的分生孢子。 通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部通常人们把真菌和霉菌认为是一种病原的两种说法。真正真菌包括霉菌，霉菌只是众多真菌中的一种。真菌是由单细胞或多细胞组成，按有性或无性方式进行繁殖的真核细胞类微生物。根据其侵犯人体的部位分为前部真菌和深部真菌，包括皮肤癣菌、孢子丝菌、念珠菌、曲霉菌、隐球菌、组织胞浆菌等。而霉菌多为细胞真菌的一种，也为深部感染真菌，包括烟曲菌、黄曲菌、黑曲菌、土曲菌等，常发生于免疫力低下的患者，引起全身播散性感然，影响预后。 培养基的选择应根据实验材料和检验目的来确定。目前国标方法中使用的培养基有:马铃薯葡萄糖琼脂(PDA),孟加拉培养基(RBC)、高盐察氏培养基(CAO),其中PDA和RBC适合于一般的霉菌和酵母菌生长,而CAO则适合于高渗性霉菌生长,酵母菌几乎不长。在日常检测中我们发现,有些常见的耐高渗性霉菌,如局限曲霉、谢瓦曲霉、赤曲霉、Wallemia等在PDA、RBC上生长非常缓慢或不长,而这些菌在高渗培养基如M40Y、DG18(M40Y琼脂配方:蔗糖400g,麦芽提取汁20g,酵母提取汁5g,琼脂20g,氯霉素50mg,蒸馏水1000ml;DG18琼脂配方:葡萄糖10g,蛋白胨5g,KH2PO41g,MgSO4·7H2O 0.5g,氯霉素0.1g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH6.5)上则正常生长,孢子、形态特征发育良好,而且酵母菌也能在M40Y、DG18上生长,因此,若能同时采用PDA和M40Y(或DG18)分离培养各类样品中的霉菌,将能更全面地反映出污染霉菌的菌相。特别是对干燥食品、高糖食品、淹渍食品等,更有必要同时采用M40Y或DG18。 由于霉菌中很多种类不会产生有毒的霉菌毒素,危害较小,而有的菌株即使污染数量不多,但其产生的霉菌毒素却危害较大,因此仅作霉菌计数并不能全面反映其危害程度,重要的是要知道污染菌的菌相,才能更好地判断被污染食品的安全程度。为此,国外有些研究者设计出各类选择性培养基,可以识别产毒的霉菌。如AFPA培养基(配方:酵母提取汁20g,蛋白胨10g,柠檬酸铁铵0.5g,0.2%二氯硝基苯胺1.0mL,琼脂15g,蒸馏水1000mL,PH5.6)用于分离黄曲霉毒素产生菌高污染率的食品。产黄曲霉毒素的菌株黄曲霉和寄生曲霉在AFPA上30℃培养2~3天就形成背面有亮橙黄色的特征性菌落,非常容易识别。有人利用该培养基分离黄曲霉高污染食品花生、玉米等,取得了满意的结果。因此,针对不同样品,有目的地设计出相应的选择性培养基,以筛选污染菌中的危险菌群,将是一个值得探索的方向。 2接种方式 接种方式主要有倾注法和涂布法两种。目前国际方法中采用倾注法,但近来国际上有不少学者认为霉菌计数采用涂布法更合适。Beuchat和Matsuda等人分别对这两种方法作了大
临床医学检验高级职称题-真菌学
临床医学检验高级职称题-真菌学 1、慢性化率最高的病毒性肝炎是（） A.甲型肝炎 B.乙型肝炎 C.丙型肝炎 D.丁型肝炎病毒单独感染 E.戊型肝炎 2、马拉色菌毛囊炎属于（） A.细菌性皮肤病 B.微小棒状杆菌皮肤病 C.病毒性皮肤病 D.真菌性皮肤病 E.非感染性皮肤病 3、肠道病毒不包括（） A.脊髓灰质炎病毒 B.EV71 C.甲型肝炎病毒 D.HDV E.ECHO病毒
4、凝胶过滤法主要用于蛋白和核酸分离，又称为分子筛层析法，其常用介质是（） A.聚丙烯酰胺 B.琼脂糖 C.琼脂糖－聚丙烯酰胺 D.葡聚糖 E.琼脂糖－葡聚糖 5、具有急性肝炎临床表现的病人除去下列哪项均可以确诊为甲型肝炎（） A.抗HAVIgM B.抗HAVIgG C.粪便中检出HAV抗原 D.粪便中检出颗粒HAV E.粪便中检出HAVRNA 6、IFA是（） A.间接免疫荧光检测 B.玻片凝集试验 C.试管凝集试验 D.溶血空斑试验
E.间接凝集试验 7、女性，26岁，1周来发热，乏力，纳差，恶心呕吐，尿黄。近2天来热退，但黄疸迅速加重，嗜睡。查ALT660IU／L，AST450IU／L，总胆红素250μ;mol／L，下列各项检查中，哪一项你认为对进一步诊断最有价值（） A.抗HAv－IgM B.HBsAg C.HCV－RNA D.抗HEV E.凝血酶原活动度（PTA） 8、为预防乙型流感的主要措施是（） A.口服金刚烷胺 B.注射丙种球蛋白 C.接种疫苗 D.注意空气消毒 E.避免到公共场所 9、10月龄男婴，2007年10月突发水样便腹泻，10余次／天。伴呕吐、发热、轻度脱水。大便性状开始为蛋花状，后为水样。该患者所患胃肠炎的致病因子以下哪种最有可能（）
真菌标本检验标准操作规程
真菌标本检验标准操作规程 1.目的 规范真菌标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。 2. 适用范围 各类真菌检测的标本。 3. 标本采集及处理 3.1 标本类型痰、尿、粪、脓液、脑脊液、血、拭子、皮屑、甲屑、气管穿刺抽取的痰液等。 3.2 标本采集与处理 3.2.1 痰液、气管穿刺抽取的痰液。 3.2.2 尿液早晨中段尿10ml，离心取沉淀液1ml，作真菌涂片及培养。 3.2.3 口腔、咽喉、外耳道、阴道、和直肠粘膜的标本应迅速放入内装1-2ml无菌蒸馏水的试管送检。常规KOH 涂片及SDA培养。 3.2.4 粪便无菌盒送检，挑取黏液、脓血接种于含氯霉素培养基上。 3.2.5 脓液脓液标本应置无菌广口有盖玻璃瓶或小的无菌平皿中，立即送检。 3.2.6 脑脊液采集于无菌试管3-5ml，立刻送检。离心后以无菌吸管吸取离心沉淀物1ml，作墨汁涂片镜检和培养
（SDA）25°C及37°一周。 3.2.7 血液分别于左右两侧无菌抽血3-5ml，立即置于脑心浸出液肉汤。 3.2.8 体液支气管积液、关节腔积液、心包积液、腹水等10ml离心沉淀后取0.5ml沉淀液作直接镜检(注意颗粒)及培养。 3.2.9 组织标本置于无菌平皿中立即送检，置无菌研钵或组织匀浆器加2ml蒸馏水，研磨成浆或切成1-2mm3的小块作真菌直接镜检（KOH涂片）及培养。 3.2.10 皮屑皮损的边缘、疱壁、脓液、深层趾（指）间皮屑或活动边缘皮屑。取材前75%酒精棉球消毒取材处，标本作真菌直接镜检（KOH涂片）及培养。 3.2.11 甲屑用细锉或牙签研磨钻取病甲与正常甲交界处并且贴近甲床部的甲屑，标本用酒精浸泡待干燥后以十点接种法分别种于含放线菌酮及不含放线菌酮的SDA平皿，25°C-28°C培养3周，并同时作KOH涂片。 3.2.12 毛发取病发15根、75%酒精消毒，3-5根作直接镜检，5-10根种于SDA斜面（加氯霉素），稍划破斜面掩埋。 3.3 标本拒收标准及处理参见《标本拒收程序》 4.试剂、培养基及仪器 4.1 接种针、电热灼烧器、显微镜、恒温培养箱、冰箱、全排式生物安全柜等。
28.真菌检验
1.真菌是真核细胞型微生物，属真菌界。有细胞壁（几丁质） 2.真菌分类学上，分为①有性孢子②无性孢子。优先考虑的是有性孢子的特征 3.真菌无性繁殖包括①出芽生殖②分裂繁殖③芽管繁殖④生隔繁殖 4.真菌常用沙保弱培养基进行培养，大部分真菌在25-28℃生长良好，少数需要在37℃培养 5.不染色直接镜检真菌是最简单的检查真菌方法，标本检查和培养检查需要使用氢氧化钾处理 6.假丝酵母菌菌落呈灰白色或奶油色，大多数可形成芽管，只有白假丝酵母菌可形成厚壁孢子，可形成较长菌丝，常用革兰染色 7.白假丝酵母菌（白色念珠菌）通常存在于人类呼吸道、口腔（鹅口疮）、肠道、阴道中，当机体免疫力下降时可引起感染 8.隐球菌有肥厚的荚膜，一般染色不易发现。用墨汁染色镜检，可见黑色背景中有圆形透明菌体。新型隐球菌在25℃、37℃均可生长，非致病性隐球菌在37℃不能生长 9.新型隐球菌尿素酶试验（+）白假丝酵母菌尿素酶试验（-） 10.新型隐球菌在免疫功能低下者体内可引起隐球菌性脑膜炎 11.卡氏肺孢菌主要在空气传播，健康人体内多为无症状的隐形感染，免疫力下降后，可导致PCP肺炎（间质性肺炎） 12.卡氏肺孢菌生活史有两种形态；包囊（感染型）和滋养体（繁殖型），采用镀银染色法检查 13.组织胞浆菌与马尔尼菲青霉菌为双向型真菌 14.毛癣菌属：易侵犯人体皮肤、指甲、毛发的角蛋白组织并繁殖生长，标本经10%KOH溶液消化后镜检，可见菌丝或孢子 15.试验 ①厚膜孢子形成试验：白假丝酵母菌 ②TZC反应：鉴定热带假丝酵母菌 ③尿酶试验：鉴别新型隐球菌（+）与白假丝酵母菌（-），荚膜组织细胞菌（+）与杜波组织细胞浆菌（-） ④毛发穿孔试验：须癣毛癣菌（+）与红色毛癣菌（-）
真菌检验
1、什么是真菌？ 真菌为真核细胞型微生物，属于真菌界。具有典型的细胞核，不具有叶绿素，以腐生和寄生方式摄取营养，细胞壁含几丁质和纤维素，有完善的细胞器，能进行有性生殖和（ 或）无性繁殖。真菌在自然界分布极为广泛，约有20余万种，大多对人无害，仅有约150种对人和动物致病。 2、真菌的基本结构是什么？ 真菌的基本结构为菌丝和孢子，菌丝为微细的管状结构，具有细胞壁，细胞膜，细胞浆和细胞核，分枝或不分枝，分隔或不分隔，有粗有细，着色或不着色。一般致病真菌的菌丝较细而且分隔。孢子是真菌的繁殖器官，也是抵抗不良环境的结构，类似于高等植物的种子，是真菌分类坚定的最主要依据。 3、引起人和动物感染的真菌分为哪两类？ 引起人和动物感染的真菌分为病原性真菌和条件致病菌两大类。病原性真菌本身具致病性，而条件致病菌一般不具致病性，只有在一定条件下，即机体免疫力降低时才致病。 4、引起真菌病的常见诱因有哪些？ 长期使用广谱抗生素，皮质激素和免疫抑制剂，代谢障碍，血液病，尿毒症，慢性消耗性疾病，外伤，大手术，器官移植，静脉高营养，导插管，放化疗及爱滋病等都是重要的诱因。 5、真菌生长的特点？ 真菌在生长过程中有从中心向四周等距离生长形成圆形菌落的倾向。也正因为这一特点使体股癣的皮肤损害表现为环行或多环行。 6、实验室检查真菌包括什么？ 实验室检查主要包括真菌直接检查和真菌培养。 7 、真菌直接检查的意义？ （1）直接检查阳性有诊断意义，一般可确定有真菌感染，但阴性不能排除诊断。 （2）根据直接检查所见的真菌镜下形态可确定少数病原菌的种，如新型隐球菌，花斑癣菌等。有些可确定属，如念珠菌属等。 （3）直接检查所见的真菌形态，代表该菌在组织内的形态即组织象。（4）真菌镜下形态有时可提示该菌的活动性，如念珠菌出现真菌丝和假菌丝，皮肤癣菌的菌丝肥大粗长多分枝，胞浆浓都表示该菌处于活跃状态。 8 、真菌培养的目的是什么？
真菌检验带答案
第十六章医学真菌学 一、单5选1 1.真菌区别于细菌的本质特征是： A.具有高度分化的细胞核（有核膜、核仁） B.有单细胞和多细胞等不同形态 C.有多种增殖方式 D. 对抗生素不敏感 E.细胞壁中无肽聚糖 2.为真核细胞型微生物的是： A.细菌 B.真菌 C.支原体 D.衣原体 E.病毒 3.真菌的繁殖结构是： A.芽孢 B.孢子 C.包涵体 D.原体 E.始体 4.真菌细胞壁不含有的成分是： A.几丁质 B.葡聚糖 C.肽聚糖 D.蛋白质 E.脂质 5.真菌的致病性包括： A.真菌毒素中毒 B.条件致病性真菌感染 C.真菌过敏 D.真菌毒素的致癌作用 E.以上全包括 6.真菌感染率明显上升与下列哪种因素相关性最小： A.抗生素使用不当 B.抗癌药物使用增多 C.机体免疫力下降 D.激素使用增多 E.真菌发生耐药变异 7.培养真菌的最适pH是： A.2.0～4.0 B.3.0～4.0 C.4.0～6.0 D.5.0～7.0 E.6.0～8.0 8.培养真菌首选下列哪种培养基： A.普通琼脂平板 B.半固体培养基 C.玻片小培养 D.米汤培养基 E.沙保罗培养基 9.多细胞真菌的菌落类型是： A.酵母型 B.类酵母型 C.丝状型 D.类丝状型 E.混合型 10.关于条件致病性真菌感染，下列说法错误的是： A.引起的是内源性感染 B.致病性强，常造成AIDS或肿瘤等病人的致死性感染
C.是肿瘤、糖尿病及免疫缺陷性疾病治疗中的疑难问题 D.目前无特异预防措施 E.临床感染率呈明显上升趋势 11.检查新型隐球菌感染常用： A.革兰染色法 B.抗酸染色 C.墨汁染色 D.瑞氏染色 E.吉姆萨染色 12.以下哪种真菌不属于浅部真菌： A.红色毛癣菌 B.铁锈色小孢子菌 C.石膏样小孢子菌 D.卡氏肺孢菌 E.絮状表皮癣菌 13.*鹅口疮的病原菌是： A.衣原体 B.细菌 C.真菌 D.螺旋体 E.立克次体 14.真菌感染不用青霉素治疗，是因为真菌： A.缺乏细胞壁 B.真菌产耐青霉素的酶 C.长期使用青霉素已产生耐药 D.细胞壁缺乏肽聚糖 E.亲和力低 15.关于皮肤癣的描述是错误的是： A.主要侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲 B.通过直接或间接触而感染 C.在沙保弱培养基上形成丝状菌落 D.一种皮肤癣仅能引起一种癣病 E.可以根据菌丝、孢子及菌落形成作出初步判断 16.下列何种真菌是我国主要的表面感染真菌： A.着色真菌 B.絮状表皮癣菌 C.许兰毛癣菌 D.红色毛癣菌 E.糠秕马拉色菌 17.表皮癣菌属不引起： A.毛发癣 B体癣 C甲癣 D足癣 E手癣 18.实验室诊断皮肤癣菌感染时，皮屑或病发须经哪种溶液处理后再镜检： A.10%Nacl B.70%乙醇 C.10%KOH D.25%KOH E.15%NAOH 19.具有假菌丝的真菌是：
临床微生物学检验(理论)真菌部分 重点整理
第一节概述 真菌的特点：种类繁多、分布极广、与人关系密切 一、定义：真菌(fungus)是一类具有典型细胞核，有核膜和核仁，胞浆内有完整的细胞器，无根、茎、叶，不含叶绿素，无光合色素，细胞壁含几丁质和纤维素的，单细胞或多细胞异养真核细胞型微生物。 细胞壁：不含肽聚糖，含几丁质及纤维素 二、分类 临床分类(按致病部位)：浅部真菌、深部真菌 形态学分类：单细胞真菌、多细胞真菌 真菌的形态与结构在鉴定上起重要作用 三、生物学形状 （一）形态与结构 1、单细胞真菌：圆形或卵圆形，包括酵母型和类酵母型真菌。 酵母型真菌以芽生方式繁殖，芽生孢子成熟后脱落成独立个体，不产生菌丝，其菌落与细菌菌落相似。 类酵母型真菌也以芽生方式繁殖，菌落与酵母型真菌相似，但它产生的芽体不从母细胞上脱落，而是延伸入培养基内形成假菌丝。 对人致病的主要有新生隐球菌和白假丝酵母菌。 2、多细胞真菌：由菌丝和孢子两种基本结构组成 A.菌丝：在环境适宜情况下由孢子萌发长出芽管，逐渐延长呈丝状，称菌丝。 按照功能分为： ①营养菌丝：伸入培养基；②气生菌丝：露出培养基向空气中生长；③生殖菌丝 按照结构分为： ①有隔菌丝：多数致病性真菌；②无隔菌丝。 菌丝的形态大小不一(螺旋状/球拍状/鹿角状)、菌丝间有无分隔、形状特征(绒毛状/絮状/粉末状) →鉴别真菌 B.孢子：由生殖菌丝产生的一种繁殖体，是真菌的繁殖结构。有有性孢子和无性孢子两类（a）有性孢子：同一菌体或不同菌体上的2个细胞融合经减数分裂形成。包括：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担子孢子，多为非致病性真菌所产生。 （b）无性孢子：菌丝上的细胞分化或出芽生成，不经两性细胞的配合。病原性真菌大多形成无性孢子。 可分为三种 ①分生孢子：又可分为大分生孢子（其大小、细胞数和颜色是鉴定的重要依据）、小分生孢子（真菌都能产生，诊断意义不大） ②孢子囊孢子 ③叶状孢子：又可分为：芽生孢子（一般芽生孢子生长到一定大小仍不与母体脱离，则形成假菌丝）、厚膜孢子（是真菌的一种休眠形态）、关节孢子 真菌种类不同，孢子形状大小也不同→鉴别真菌 （二）培养特性 1、培养条件 营养：一般细菌用培养基上都能生长，常用沙保(Sabouraud)培养基 温度：22 ℃~28℃(深部真菌：28 ℃/ 37℃) pH：4.0~6.0 (弱酸性) 需氧、湿度高
真菌检验
真菌检验 医学真菌学检查是诊断真菌病的重要依据,随着真菌感染病例的日益增多,对实验室的诊断也提出了更高的要求.不论是患者浅部或深部感染诊断,几乎全依赖于临床标本的真菌学检查.特别是系统性真菌感染,其早期特异的诊断方法是挽救患者生命的关键,而病原真菌的形态结构十分多样,在不同条件下同一真菌也可有不同特点的形态.因此,在真菌的实验室检查中,必须熟练掌握各类真菌的形态特征以及在不同条件下的演变规律,才能获得对致病真菌正确的诊断.目前真菌感染的实验室检查方法主要包括常规检查法和特殊检查法两类.常规检查法主要包括①形态学检查(直接镜检+染色镜检).②培养检查.③组织病理学检查.特殊检查主要包括①血清学方法.②分子生物学方法. 一,进行真菌实验室诊断的注意事项 ①应有独立实验室,不应与其他细菌,病毒等实验室共用,以防发生相互污染.②在每天工作前与工作后,工作台均要以消毒水例如5%石碳酸或0.5%过氧乙酸擦拭,如遇操作台被真菌或标本污染,应即覆盖纸巾,并用5%石碳酸消毒20min,切忌工作台污染后即用水冲洗,以免污染扩散.③培养菌检体及真菌污染的物质在丢弃前,必须高压灭菌或焚烧.④在进行真菌检查时,不可试着闻平板培养基特殊的气味.⑤不可对Histoplasma capsulatum 以及Coccidioides immitis进行载玻片培养技术,因为其等具有高度感染性的孢子能够随着空气传播.⑥实验室禁止任意养花,草,动物等生物,以防实验污染.⑦工作环境应定期消毒.一般紫外线照射不能杀灭真菌,应用40%甲醛(可于每4㎡空间用35ml 40%甲醛加18g高锰酸钾)在密闭情况下熏蒸24h,或用环氧乙烷进行消毒,每2～4周消毒1次.⑧如果用平板培养基接种标本,必须将平板培养基密封,以免发生危险,在不常做真菌检测的实验室,最安全的培养方法是利用含有棉花塞的试管培养基(使空气能够循环).⑨美国梅育诊所主张利用平板培养基进行真菌的分离,步骤如下平板培养基必须在生物安全箱内操作及检查.平板培养必须用胶带封好,平板培养基必须含30ml的量,并保持培养箱60%以上的湿度,同时增加琼脂的浓度至2%,以免脱水.⑩真菌的诊断,需要经验的累积及备有良好的图谱参考书. 二,分离及鉴定真菌的培养基 配制培养基的一般原则 ①各成分混匀后以文火缓慢加热,并不断搅拌,煮沸1min,过热会破坏有效成分.②分装试管应在高压灭菌前,而分装平皿应在高压灭菌后.③高压灭菌一般在118～121磅,10～15min.④需加血液或不能高压的成分如抗生素,应在培养基冷却至50 左右时加入混匀.⑤试管分装量约7~8ml,平皿约15ml,如需培养4～6周,平皿内应有35～40ml的量.培养基中抗生素的浓度和添加方法氯霉素,庆大霉素和放线菌酮能耐热,可在培养基高压灭菌前加入,其他抗生素均在培养基高压灭菌后冷却至45℃～50℃时加入.青霉素20～100μgml,链霉素40～200μgml,氯霉素50μgml,放线菌酮500μgml,庆大霉素5μgml. 分离和鉴定真菌的培养基 各种医学真菌所用培养基的成分,又可根据不同要求,分成分离,富集,选择,特性研究等含不同成分培养基,具体见表. 表分离鉴定真菌培养基分类表 培养基种类分离用培养基使用目的 1.Brain heart infusion agar 分离腐生性及病原性真菌 2.Brain heart infusion agar with antibiotics 分离除了皮肤丝状真菌以外的真菌 3.Brain heart infusion biphasic blood Culture bottles 从血液中分离真菌 4.Dermatophyte test medium 分离皮肤丝状菌,建议仅做筛检用 5.Inhibitory mold agar 分离除了皮肤丝状真菌以外的真菌
真菌检测步骤(1)
真菌检查步骤 1.采集标本浅部真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂等，标本在分离前常先用75%的乙醇消毒。深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织，采集标本时应注意无菌操作。 2.检查方法真菌检查的方法主要有： （1）直接涂片：为最简单而重要的诊断方法。取标本置玻片上，加一滴10%KOH溶液，盖上盖玻片，在酒精灯火焰上稍加热，待标本溶解，轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。可用于检查有无菌丝或孢子，但不能确定菌种。 （2）墨汁涂片：用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子。医学教育|网搜集整理方法是取一小滴墨汁与标本（如脑脊液）混合，盖上盖玻片后直接镜检。 （3）涂片或组织切片染色：涂片染色可更好地显示真菌形态和结构。革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等；瑞氏染色适用于组织胞浆菌；组织切片通常用PAS染色，多数真菌可被染成红色。 （4）培养检查：可提高真菌检出率，并能确定菌种。标本接种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上，置室温或37℃培养1～3周，必要时可行玻片小培养协助鉴定。菌种鉴定常根据菌落的形态及显微镜下形态判断，对某些真菌，有时尚需配合其他鉴别培养基、生化反应、分子生物学方法确定。 四、真菌学检验的基本技术 （一）直接镜检 是最简单也是最有用的实验室诊断方法，常用的方法有：①氢氧化钾/复方氢氧化钾法：标本置于载玻片上，加一滴浮载液，盖上盖玻片，放置片刻或微加热，即在火焰上快速通过2～3次，不应使其沸腾，以免结晶，然后轻压盖玻片，驱逐气泡并将标本压薄，用棉拭或吸水纸吸去周围溢液，置于显微镜下检查。检查时应遮去强光，先在低倍镜下检查有无菌丝和孢子，然后用高倍镜观察孢子和菌丝的形态、特征、位置、大小和排列等。浮载液：A.10%~20%的KOH。配方：氢氧化钾10～20g，蒸馏水加至100ml，待氢氧化钾完全溶解后揺匀存放在塑料瓶内，适用于皮屑、甲屑、毛发、痂皮、痰、粪便、组织、耵聍等的检查。B.复方氢氧化钾溶液配方：氢氧化钾（AR）10g，二甲基亚砜（AR）40ml,甘油50ml, 蒸馏水加至100ml,配制方法：将氢氧化钾先加入30ml蒸馏水中溶解后，再依次加入DMSO、甘油揺匀后，用蒸馏水加到100ml，装入塑料瓶内。此配方的优点是：配方中加DMSO，能促进角质的溶解，有甘油涂片不易干，不易制成氢氧化钾结晶，氢氧化钾的浓度相对低，腐蚀性亦低，为进行大面积普查或大批量采集标本作镜检带来了方便。②胶纸粘贴法：用 1cm×1.5cm的透明双面胶带贴于取材部位数分钟后自取材部位揭下，撕去复带在上面的底板纸贴在载玻片上，使原贴在取材部位的一面暴露在上面，再进行革兰染色或过碘酸锡夫染色，在操作过程中应注意双向胶带粘贴在载玻片上时不可贴反，而且要充分展平，否则影响观察。③涂片染色检查法：在载玻片上滴1滴生理盐水，将所采集的标本均匀涂在载玻片上，自然干燥后，火焰固定或甲醇固定。再选择适当的染色方法，染色后，以高倍镜或油镜观察。常见镜检染色方法有：①革兰染色。所有真菌、放线菌均为革兰染色阳性，被染成蓝黑色。适用于酵母菌、孢子丝菌、组织孢浆菌及诺卡菌、放线菌的感染。②乳酸酚棉蓝染色：用于
最新医学真菌检验技术资料
医学真菌学检查是诊断真菌病的重要依据，随着真菌感染病例的日益增多，对实验室的诊断也提出了更高的要求。不论是患者浅部或深部感染诊断，几乎全依赖于临床标本的真菌学检查。特别是系统性真菌感染，其早期特异的诊断方法是挽救患者生命的关键，而病原真菌的形态结构十分多样，在不同条件下同一真菌也可有不同特点的形态。因此，在真菌的实验室检查中，必须熟练掌握各类真菌的形态特征以及在不同条件下的演变规律，才能获得对致病真菌正确的诊断。目前真菌感染的实验室检查方法主要包括常规检查法和特殊检查法两类。常规检查法主要包括：①形态学检查(直接镜检+染色镜检)。②培养检查。③组织病理学检查。特殊检查主要包括：①血清学方法。②分子生物学方法。 一、进行真菌实验室诊断的注意事项 ①应有独立实验室，不应与其他细菌、病毒等实验室共用，以防发生相互污染。②在每天工作前与工作后，工作台均要以消毒水例如5%石碳酸或0.5%过氧乙酸擦拭，如遇操作台被真菌或标本污染，应即覆盖纸巾，并用5%石碳酸消毒20min，切忌工作台污染后即用水冲洗，以免污染扩散。③培养菌检体及真菌污染的物质在丢弃前，必须高压灭菌或焚烧。④在进行真菌检查时，不可试着闻平板培养基特殊的气味。⑤不可对Histoplasma capsulatum 以及Coccidioides immitis进行载玻片培养技术，因为其等具有高度感染性的孢子能够随着空气传播。⑥实验室禁止任意养花、草、动物等生物，以防实验污染。⑦工作环境应定期消毒。一般紫外线照射不能杀灭真菌，应用40%甲醛(可于每4㎡空间用35ml 40%甲醛加18g高锰酸钾在密闭情况下熏蒸24h，或用环氧乙烷进行消毒，每2～4周消毒1次。⑧如果用平板培养基接种标本，必须将平板培养基密封，以免发生危险，在不常做真菌检测的实验室，最安全的培养方法是利用含有棉花塞的试管培养基(使空气能够循环)。⑨美国梅育诊所主张利用平板培养基进行真菌的分离，步骤如下：平板培养基必须在生物安全箱内操作及检查。平板培养必须用胶带封好，平板培养基必须含30ml 的量，并保持培养箱60%以上的湿度，同时增加琼脂的浓度至2%，以免脱水。⑩真菌的诊断，需要经验的累积及备有良好的图谱参考书。 二、分离及鉴定真菌的培养基 (一)配制培养基的一般原则 ①各成分混匀后以文火缓慢加热，并不断搅拌，煮沸1min，过热会破坏有效成分。②分装试管应在高压灭菌前，而分装平皿应在高压灭菌后。③高压灭菌一般在118～121磅，10～15min。④需加血液或不能高压的成分如抗生素，应在培养基冷却至50左右时加入混匀。⑤试管分装量约7~8ml，平皿约15ml，如需培养4～6周，平皿内应有35～40ml的量。培养基中抗生素的浓度和添加方法：氯霉素、庆大霉素和放线菌酮能耐热，可在培养基高压灭菌前加入，其他抗生素均在培养基高压灭菌后冷却至45℃～50℃时加入。青霉素20～100μg/ml，链霉素40～200μg/ml，氯霉素50μg/ml，放线菌酮500μg/ml，庆大霉素5μg/ml。 (二)分离和鉴定真菌的培养基 各种医学真菌所用培养基的成分，又可根据不同要求，分成分离、富集、选择、特性研究等含不同成分培养基，具体见表。 表分离鉴定真菌培养基分类表
真菌(1-3)-β-d葡聚糖检测操作sop文件
真菌（1-3）-β-D葡聚糖测定规范操作 1.目的 建立真菌（1-3）-β-D葡聚糖检测标准操作规范，保证实验结果的准确性。 2.授权操作人 经培训合格的微生物实验室检验人员。 3.实验原理 （1-3）-β-D葡聚糖检测原理：真菌（1-3）-β-D葡聚糖激活酶反应主剂中的G因子后形成凝固蛋白，根据其所引起的浊度变化对真菌（1-3）-β-D葡聚糖浓度进行定量测定。 4．产品性能指标 4.1 灵敏度10pg/ml 4.2 精密度批间CV≤10% 。 4.3 准确性回收率75-125%。 4.4 标准曲线相关系数r绝对值≥0.980 5．实验组成 5.1实验仪器及器具： MB-80微生物快速动态检测系统、洁净工作台、低速离心机、恒温仪，20~200μl 加样器、100~1000μl加样器、旋涡混合器、定时器。 5.2实验耗材： 200μl无热原吸头、1000μl无热原吸头、无热原平底试管、无热原真空采血管。 5.3试剂盒组成： 真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测试剂盒（光度法）： 试剂盒包括反应主剂和样品处理液。 6．工作环境 相对湿度：20%~80%； 温度控制：10~30℃； 电源电压：220V±10%，50Hz±2%。 7．标本采集及保存 7. 1检测样本： 血液、脑脊液、胸腹水、肺泡灌洗液等。 7.2采集要求： 采样过程要求无菌操作，用专用的无热原真空采血管（肝素类抗凝）。 常规病人早上用药治疗前采血/取样（血透患者透析前采血）。 7.3样本保存： 样本采集后应在3000转/分进行离心，若不能及时检测，应将血浆转移至无热原转移
管内，在-20℃冰箱中冷冻保存，一周内使用。 8．操作程序 8.1 打开MB-80微生物快速动态检测系统主机、电脑及恒温仪预热30min。 8.2 打开MB-80微生物快速动态检测系统软件，录入病人信息、样本种类及检测项目等 信息后点击采集。 8.3 血液前处理过程，无菌操作，用专用无热原真空采血管（肝素类抗凝）抽取静脉血 4ml轻轻混匀，按转速3000r/min进行离心1分钟，得到富含血小板血浆。 8.4 取上述富含血小板血浆100μl，加入到样品处理液中，轻轻摇匀10秒后插入恒温仪 加热区中进行70℃干热10min。 8.5干热结束后，将前处理液冷却5min，至室温后取出（取出时切忌震荡）。 8.6 取上述前处理液中上清液200μl加入到反应主剂中，轻轻混匀（一般混匀10秒即可）， 待完全溶解至透明后，全部移液至平底试管中(不要产生气泡)，立即插入MB-80微生物快速动态检测系统中进行检测。 8.7 反应结束后仪器自动计算结果并保存。 待测血浆样品制备、检测示意图 9．操作注意事项 9.1预热采集 在进行试验之前，仪器一定要提前预热30min，达到工作温度后，按要求填写表头信息，完毕后点击采集，使仪器处于采集状态后再进行试验。 9.2 样本预处理
【干货】真菌检测中常见问题专家解答
【干货】真菌检测中常见问题专家解答 近年来，随着恶性肿瘤的高发、艾滋病的流行、化疗药物、广谱抗生素、糖皮质激素和免疫抑制剂等药物的广泛使用，以及人工导管等侵入性操作、器官移植等有创诊疗技术的应用，由真菌所引起的感染日益成为临床各科室面临的巨大挑战。为了提高临床诊断水平，加强真菌的检验能力显得至关重要，现在临床微生物实验室有关真菌检验的常见问题汇总如下，供大家学习参考。1、为什么培养要设定 35 C? 实验室通常将孵箱温度设定为 35 C,是为了防止温度的波动对细菌或真菌生长的影响。临床常见细菌的最适生长温度为33?37 C （嗜热，嗜中温菌除外，占少数），设定为35C时上下波动2C对培养无影响，如设定为37C C显然就不合适了。至于真菌培养 ,要视标本来源而定。一般怀疑浅部真菌感染的标本如皮屑、甲屑、头屑及毛发等分离培养于26?28 C。来源于人体深部组织的标本如痰、胸腹水、血及骨髓深部脓肿等建议放35 C培养，是刚离体的标本在 35 C更接近于人体温度，其次临床最常见的白念珠菌在35 C能形成更为典型的伪 足样菌落，这与血清出芽试验在 35 C做是同样的道理。同时’ 来源于35 C初分离的光滑念珠菌具有更高的酶活性。怀疑温 度型双相真菌感染或个别真菌需要较高温度生长时则需要两种温度同时培养。还要注意培养环境的湿度 ,一般要求大于 60%,如果培养箱的湿度不够 ,最好在平板附近放置盛有无菌水的容器以保证湿
度。 2、CO2 对真菌生长影响大吗 ?真菌属于异养型微生物，主要从有机化合物中获得碳源 ,而自养型微生物才需要从 CO2 中获得碳源，所以真菌一般不需要在二氧化碳环境中培养，而且CO2 对真菌的生长和繁殖均不利 ,但一定浓度可刺激孢子形成。 3、在血培养中培养出真菌 2 次，但是患儿没有临床表现，而且临床也没用抗真菌药患儿就好了，是考虑污染吗 ? 这种情况要判断是否为污染菌，调查采血过程是否规范、血瓶转运过程是否符合要求、针孔是否适当封口、转运箱是否受到污染等众多因素，最关键的还是患者的临床表现，如没有真菌感染的症状，要么考虑污染，要么考虑定植（可能性不大）。 4、我们基层医院实际工作中做阴道分泌物真菌培养，生化鉴定几乎做不了，很多直接报白念珠菌，这样合适吗？这样做不合适。目前有些检验科甚至分不清酵母菌和霉菌，在阴道白带、尿液和粪便中镜检发现念珠菌后报告为“找到霉菌”。霉菌是指丝状多细胞真菌；酵母菌是指单细胞形态的真菌，二者不可混为一谈。阴道中感染的酵母菌大多是白念珠菌，但不排除其他酵母菌。克柔念珠菌对氟康唑和5- 氟胞嘧啶天然耐药，如果遇到类似存在天然耐药的菌株，会影响后续的治疗。 5、痰标本中少量念珠菌需要在报告中体现吗?还是不报告 ? 标本要求和检验程序用要体现，临床医生会综合考虑。虽然 白色念珠菌导致肺部真菌感染的概率很小，遇到痰标本真菌培养中分离出该真菌，还是建议报告，临床医生结合影像学结果综合考虑。
临床医学检验技师初级(师)微生物学及检验(立克次体、真菌学、浅部真菌感染、深部真菌感染)-试卷1
临床医学检验技师初级（师）微生物学及检验（立克次体、真菌学、浅部真菌感染、深部真菌感染）-试卷1 (总分：104.00，做题时间：90分钟) 一、 A2型题(总题数：1，分数：4.00) 某患者，腿部皮肤被叮咬，局部出现溃疡，伴高热，皮疹，淋巴结肿大，肝脾肿大。外斐反应：抗体效价1：320。（分数：4.00） (1).根据以上描述，该患者可能感染的微生物或疾病是（分数：2.00） A.沙门菌属 B.恙虫病√ C.流行性斑疹伤寒 D.结核分枝杆菌 E.伤寒沙门菌 解析： (2).该病的传播媒介可能是（分数：2.00） A.人虱 B.鼠虱 C.恙螨√ D.蜱 E.蚊子 解析：解析：恙虫病临床症状有发热、虫咬处溃疡、皮疹，淋巴结肿大等特征。恙虫病的传播媒介是恙螨。 二、 B1型题(总题数：1，分数：8.00) A．人虱B．鼠虱、鼠蚤C．恙螨D．蝉E．蚊（分数：8.00） (1).地方性斑疹伤寒的传播媒介是（分数：2.00） A. B. √ C. D. E. 解析： (2).流行性斑疹伤寒的传播媒介是（分数：2.00） A. √ B. C. D. E. 解析： (3).Q热的传播媒介是（分数：2.00） A. B. C. D. √ E. 解析： (4).恙虫病的传播媒介是（分数：2.00）
B. C. √ D. E. 解析：解析：流行性斑疹伤寒的病原体为普氏立克次体，其传播媒介是人虱；地方性斑疹伤寒的病原体为莫氏立克次体(又称斑疹伤寒立克次体)，其传播媒介是鼠虱、鼠蚤；恙虫病的病原体为恙虫病立克次体，其传播媒介是恙螨；Q热的病原体为Q热柯克斯体，其传播媒介是蝉。 三、 A1型题(总题数：35，分数：70.00) 1.关于立克次体说法错误的是 （分数：2.00） A.革兰染色阴性 B.均为专性寄生在宿主细胞内繁殖√ C.大多为人畜共患病原体 D.对抗生素敏感 E.以二分裂方式繁殖 解析：解析：本题主要考查立克次体的共性。立克次体除极少数外均专性寄生在宿主细胞内繁殖。 2.地方性斑疹伤寒是由以下哪种微生物感染引起的 （分数：2.00） A.普氏立克次体 B.莫氏立克次体√ C.恙虫病东方体 D.螺旋体 E.肺炎支原体 解析：解析：地方性斑疹伤寒的病原体为莫氏立克次体，流行性斑疹伤寒的病原体为普氏立克次体。 3.普氏立克次体感染导致的疾病是 （分数：2.00） A.Q热 B.恙虫病 C.流行性斑疹伤寒√ D.结核 E.伤寒 解析：解析：流行性斑疹伤寒的病原体是普氏立克次体。 4.易使外-斐反应呈现假阳性的疾病是 （分数：2.00） A.流感 B.变形杆菌感染√ C.肺炎 D.痢疾 E.沙眼 解析：解析：外斐反应是用变形杆菌OX 19、OX 2和OX k 3种抗原在玻片上做凝集试验。缺乏敏感性和特异性，假阳性反应还发生在变形杆菌尿路感染、伤寒、钩端螺旋体病、回归热、疟疾及各种原因引起的严重的肝病的患者血清检查，孕妇也往往呈假阳性反应。 5.既是恙虫病东方体的寄生宿主、储存宿主，又是传播媒介的是 （分数：2.00） A.恙螨√ B.鼠类 C.牛 D.马
医学检验-微生物-真菌
第二篇 真菌测试题 一、名词解释 1.真菌(fungus)：是一种无根、茎、叶的分化，不含叶绿素的真核细胞型微生物。少数为单细胞，大多数为多细胞。 2.菌丝体（mycelium）：孢子长出芽管，逐渐延长形成菌丝。菌丝又可长出许多分支，交织成团，称为菌丝体。由可按功能分为营养菌丝体和气中菌丝体。 3.真菌中毒症（mycotoxicosis）：有些真菌在粮食或饲料上生长，人、畜食后可导致急性或慢性中毒，成为真菌中毒症。引起中毒的可以是本身有毒真菌，也可以是真菌在代谢中产生的毒素。 4.孢子（spore）：是真菌的繁殖器官，一条菌丝上可长出多个孢子。在环境条件适宜时，孢子又可发育形成菌丝，并发育为菌丝体。 二、填空题
1.根据细胞核的融合与否，真菌的孢子分为 和 两大类. 2.无性孢子根据形态的不同,可分为分生孢子、 和 三种. 3.菌丝体按功能可分为 和 两种. 4.皮肤癣菌除多侵犯角化的表皮外,还主要侵犯 和 . 5.新型隐球菌最易侵犯 系统,引起 . 1.有性孢子和无性孢子. 2.叶状孢子,孢子囊孢子. 3.营养菌丝体和气中菌丝体. 4.毛发和指甲等. 5.中枢神经，慢性脑膜炎.
三、单选题 1.真菌细胞不具有的结构或成分是 A.细胞壁; B.细胞核; C.线粒体; D.内质网; E.叶绿素; 2.二相性真菌在培养基上形成酵母型菌落的培养温度是 A.25℃ B.28℃ C.35℃ D.37℃ E.41℃ 3.关于真菌孢子的描述 ,错误的是 A.是真菌的休眠状态； B.抵抗力不如细菌芽胞强; C.一条菌丝上可 长出多个孢子; D.大部分真菌既能形成有性孢子,又能形成无性孢子 ; E.大分生孢子是鉴定半知菌类的重要依据; 4.真菌孢子的主要作用是 A.抵抗不良环境的影响; B.抗吞噬; C.进行繁殖; D.引起炎症反 应; E.引起变态反应; 5.不属于条件致病性真菌的是 A.白色念珠菌; B.曲霉菌; C.毛霉菌; D.皮肤癣菌; E.新型 隐球菌; 6.关于真菌的抵抗力,错误的一项是 A.对干燥、阳光和紫外线有较强的抵抗力; B.对一般消毒剂有较强的 抵抗力; C.耐热,60℃1小时不能被杀死; D.对抗细菌的抗生素均不 敏感; E.灰黄霉素、制霉菌素B可抑制真菌生长 7.鉴定多细胞真菌主要应用的检查方法是 A.革兰染色后镜检; B.墨汁负染色后镜检; C.血清学检查; D.生化反应 检查; E.小培养检查菌丝和孢子 8.不是易引起念珠菌感染的主要原因 A.与念珠菌病人接触; B.菌群失调; C.长期使用激素或免疫抑制剂; D. 内分泌功能失调; E.机体屏障功能遭破坏; 9.白色念珠菌常引起 A.癣病; B.皮下组织感染; C.皮肤粘膜、内脏感染; D毒血症; E.真菌 中毒症 10.关于新型隐球菌致病性的描述,错误的是 A.是隐球菌属中唯一致病的真菌; B.主要经胃肠道进入机体; C.在体质 极度衰弱者引起内源性感染; D.主要致病因素是荚膜； E.易侵犯中枢神经系统引起脑膜炎 11.一女性患阴道炎，曾因治疗其他疾病长期使用过激素类药物。微生 物学检查：泌尿生殖道分泌物标本镜检可见有假菌丝的酵母型菌。你 认为引起阴道炎的病原体是 A.无芽胞厌氧菌 B.衣原体 C.解脲脲原体 D.白色念珠菌 E.梅毒螺旋体 12.关于皮肤癣菌下述哪项是错误的
微生物检验第二十八章 真菌检验讲义
第二十八章真菌检验 本章内容 真菌的基本特性 真菌的基本微生物检验方法 病原性真菌 一、真菌的基本特性 真菌是真核细胞型微生物，属于真菌界。 具有典型细胞核，有完整细胞器，不含叶绿素；寄生或腐生方式生存，由单细胞或多细胞组成；细胞壁含几丁质和（或）纤维素；能进行有性生殖和（或）无性生殖。 分类 绝大多数对人类有益，如食用真菌及能产生抗生素的真菌等。能引起人类和动物疾病的真菌仅150余种。 分为黏菌、真菌两个门。其中与医学有关的真菌主要属于接合菌亚门、子囊菌亚门、担子菌亚门和半知菌亚门，鞭毛菌门中仅腐霉属在医学上有重要性。绝大部分致病性真菌属于半知菌亚门。
结构基本结构为菌丝和孢子。 菌丝：真菌在适宜环境中，由孢子生出芽管逐渐延长或呈丝状，称为菌丝。菌丝继续生长并向两侧分支，交织成团，称为丝状体。 营养菌丝：伸入到培养基内的菌丝。 气中菌丝：露出培养基表面的（部分气中菌丝可产生有性或无性孢子的称为生殖菌丝）。 孢子 有性孢子：同一个菌体或不同菌体上的两个细胞融合形成。 无性孢子：菌丝直接生成，并不发生细胞融合。致病性真菌多为无性孢子。 真菌孢子与细菌芽孢区别 真菌与细菌区别
培养与繁殖 气体环境：需要较高的湿度和氧气。 温度酸碱：22～28℃，某些深部病原性真菌在37℃生长良好，pH 5.0～6.0。 培养特点：最常用沙保弱培养基，生长缓慢。 多数真菌是以出芽、形成菌丝、产生孢子以及菌丝分枝与断裂等方式进行繁殖。 抵抗力 对热的抵抗力不强，一般60℃1h即被杀死。 对干燥、日光、紫外线及多数化学药品的耐受性较强；对1%～3%苯酚、2.5%碘酒、0.1%的升汞及10%甲醛比较敏感； 对常用抗生素均不敏感，灰黄霉素、制霉菌素、两性霉素等对某些真菌有抑制作用。 致病性 真菌性变态反应：真菌过敏。 真菌毒素中毒：真菌中毒、真菌毒素致癌。
第二章 真菌检验基本技术
第二章真菌检验基本技术 一、形态学检查 意义：1、有诊断意义；2、代表组织相；3、判断某些真菌的致病性。取材：皮屑：75%酒精消毒皮损选皮损边缘、疤壁、脓液处刮取皮屑 10%KOH涂片+沙保弱琼脂培养两周 甲屑：取病甲于正常甲交界处，贴近甲床部甲屑 10%~20%KOH溶液溶解标本，镜检75%酒精浸泡干燥后，沙保弱琼脂（加放线菌酮及氯霉素）培养四周染色方法: 1、革兰染色：各种真菌均为革兰阳性，深紫色 2、乳酸酚棉蓝染色：适用于各种真菌的直接检查、培养物涂片检查及小培养标本保存等。 3、墨汁染色：用于检查有荚膜的真菌，如新生隐球菌。 4、荧光染色:通常有三种染色方法：直接涂片染色、培养物涂片染色及组织切片染色。 常见深部真菌的荧光反应
5、糖原染色：原理是真菌细胞壁由纤维素和几丁质组成，含有多糖。染色后真菌及组织内的多糖成分均为红色，核为蓝色，背景为淡绿色。 6、其他:瑞氏染色法，常用于组织或骨髓标本中组织胞浆菌和马尔尼菲青霉菌等真菌的检查。嗜银染色法（GMS法）。黏蛋白-卡红（MCS）染色法用于新生隐球菌的鉴别。 二、培养与鉴定技术 常用真菌培养基及用途 培养方法： 1、试管培养法：一般用于菌种穿戴接种于保存。不易污染。
2、大培养法：易污染，对球孢子菌、组织胞浆菌等传染性强的真菌培养不合适。 3、小培养法：是观察真菌结构及生长发育的有效方法。分为玻片培养、小型盖片直接培养法及琼脂方块培养法。 生长现象：生长速度、菌落大小、表面形态、菌落性质、菌落颜色、菌落边缘、菌落底部。 鉴定试验 1、毛发穿孔试验：石膏样小孢子菌穿孔试验阳性，红色毛癣菌穿孔试验阴性。 2、明胶液化试验 3、芽管形成试验：试验要设阳性（白假丝酵母菌）和阴性对照（热带假丝酵母菌），并注意控制培养时间。 4、厚膜孢子形成试验：白假丝酵母菌在Tween-80培养基上能产生厚膜孢子。 5、酚氧化酶试验：此酶为新生隐球菌所特有。用已知新生隐球菌和浅白隐球菌分别做阳性和阴性对照。 6、脲酶试验：石膏样癣菌、狗小孢子菌、新生隐球菌产生脲酶。 7、糖同化或发酵试验：发酵试验是检测真菌最常用的生化试验。同化试验原理是某些真菌在不含碳源而仅含氮源的合成固体培养基上不生长。 药物敏感试验: 目的：1、提供两种以上有相当活性的、敏感的抗真菌药物；2、检测