多糖体外抗氧化作用及其影响因素
第46卷第4期2018年2月广 州 化 工
Guangzhou Chemical Industry
Vol.46No.4Feb.2018
多糖体外抗氧化作用及其影响因素
*
吴雅清1,2,冷小鹏1
(1华侨大学生物医学学院/分子药物研究院,福建 泉州 362021;
2华侨大学分析测试中心,福建 厦门 361021)
摘 要:多糖是一类具有抗氧化二抗病毒二抗肿瘤二降血糖二降血脂二免疫调节等广泛药理活性的天然高分子化合物,其
中抗氧化作用是其抗肿瘤二降糖降脂的作用机制之一三查阅并整理了近年来的文献,对多糖的体外抗氧化作用机理及影响因素作一综述,重点阐述多糖的组成二结构二分子量等方面对体外抗氧化活性的影响,以期为多糖的深入研究及开发利用提供一定的参考三
关键词:多糖;抗氧化;自由基
中图分类号:R961.1
文献标志码:A
文章编号:1001-9677(2018)04-0004-07
*
基金项目:福建省海洋经济创新发展区域示范项目(2014FJPT08);厦门市海洋经济发展专项资金项目(14CZP043HJ17);厦门市科技局项目
(3502Z20141015);华侨大学研究生科研创新能力培育计划资助项目三
第一作者:吴雅清(1981-),女,博士研究生,实验员,主要从事药物研发三
Antioxidant Activity and Influencing Factors of Polysaccharides in vitro *
WU Ya -qing 1,2,LENG Xiao -peng 1
(1Biomedical Sciences School &Institute of Molecular Medicine,Huaqiao University,Fujian Quanzhou 362021;
2Instrumentation Analytical Center,Huaqiao University,Fujian Xiamen 361021,China)Abstract :Polysaccharide is a kind of natural macromolecular compounds with various pharmaceutical activities,such as antioxidant,antiviral,antitumor,hypoglycemic,hypolipidemic and immune function.Among these,antioxidant activity is one of mechanisms of antitumor,hypoglycemic and hypolipidemic effects.Antioxidant activity in vitro and its influencing factors were summarized,with emphasis on the polysaccharide composition and structure.It would provide some references for the further research and development of polysaccharides.
Key words :polysaccharides;antioxidant activity;free radical
多糖(polysaccharides)是一种由10个以上单糖通过糖苷键链接的高分子聚合物,具有广泛的生物活性,例如来自海洋藻类的多糖具有抗凝血二抗血栓二免疫调节二抗肿瘤二降血脂二降血糖二抗炎抑菌抗氧化等多种重要的活性,广泛应用于生物医药材料中[1]三对多糖的活性研究表明,部分多糖能够通过清除各种活性氧自由基,提高抗氧化物酶的活性,减少脂质过氧化产物丙二醛的产生,表现出多种途径的抗氧化作用,而抗氧化作用是抗肿瘤二抗衰老二降血糖二降血脂的作用机制之一[2]三多糖作为一种来源广泛二有效低毒的自由基清除剂和抗氧化剂,在保护机体免受氧化损伤方面起着至关重要的作用三尽管多糖具有强大的抗氧化功能,但其作用机理和构效关系尚未被系统阐明三本文就多糖体外抗氧化作用机理及可能的影响因素作一综述,为多糖的构效关系研究及进一步开发利用提供前期基础三
1 多糖的体外抗氧化评价方法[3]
多糖的抗氧化活性研究,常采用体外或体内模型,体外抗氧化评价方法有各种不同的体外模型,主要有化学评价方法和生物活性评价方法三其中化学评价方法包括氧自由基吸收能力
法(ORAC)二总自由基捕获抗氧化参数法(TRAP)二总氧自由基清除能力检测法(TOSC)二Trolox 等效抗氧化剂能力检测法(TEAC)二铁离子还原/抗氧化能力检测法(FRAP)二DPPH 自由基清除法二羟自由基清除法二超氧阴离子自由基清除法二过氧化氢清除法二单线态氧淬灭法;生物活性评价方法包括DNA 氧化损伤二脂质过氧化二红细胞溶血二线粒体肿胀等三基于不同评价方法的原理不同,同一种物质用不同的抗氧化方法来评价,其结果往往存在较大差异,故要评价一种物质的抗氧化性,必须采用两种以上的抗氧化评价方法三
2 多糖的体外抗氧化作用机理[4]
目前,对多糖的体外抗氧化作用研究表明,其可能的作用机理主要分为两类:
(1)直接清除活性氧自由基三活性氧是指化学性质活泼的氧代谢产物,包括超氧阴离子自由基二羟自由基二单线态氧和过氧化氢三过量的活性氧会对人体产生氧化损伤,导致细胞死亡,因此清除人体中过量的活性氧显得尤为重要三多糖分子上具有还原性的半缩醛羟基,可与活性氧发生氧化还原反应,因而具有清除活性氧的活性三对于羟自由基,多糖碳氢链上的氢
对天然多糖的抗氧化活性研究
学院代号 10716 学号110050801108 专业代码 081302 密级公开 陕西中医学院 Shaanxi University of Chinese Medicine 学士学位论文 对天然多糖的抗氧化活性研究 学位申请人曹柯 专业名称制药工程 申请学位类型工学学士学位 指导教师姓名王露老师 论文提交日期2013年6月
对天然多糖的抗氧化活性研究 姓名：曹柯指导老师：王露老师 【摘要】：多糖是一大类广泛存在于动植物和微生物体内的生物高分子物质，许多天然多糖具有增强免疫、抗氧化、降血糖、抗病毒等生物活性，天然多糖还具有毒副作用小、疗效好等优点，现在多糖已成为天然药物及保健品研发中的重要组成部分。本文从实验原理、实验方法等方面对天然多糖抗氧化活性的常见评价方法进行综述，详细介绍了化学分析法中的自由基（ABTS自由基阳离子、DPPH自由基、超氧自由基、羟自由基）清除实验、脂质过氧化抑制实验等评价方法；描述了以生物细胞为模型的CAA抗氧评价方法；概述了在动物体内进行的抗氧化活性评价方法及指标，为相关领域中抗氧化天然多糖的研究和开发提供实验理论基础。 【关键词】：天然多糖；抗氧化活性；评价方法； The antioxidant activity of natural polysaccharide research Name: Cao Ke Teacher:Wang Lu 【abstract】:Polysaccharide is a broad categories in a wide variety of plants and microorganisms in vivo biological macromolecule material, many natural polysaccharides have enhanced immune, antioxidant, fall blood sugar, anti-viral biological activity, such as natural polysaccharide has poison The advantages of small side effects, good curative effect, polysaccharide has now become an important part of natural medicines and health products research and development.This article from the experiment principle and experiment method of natural polysaccharide antioxidant activity of the common evaluation methods were reviewed, detailed introduces the chemical analysis of free radicals (ABTS radical cation, DPPH free radical, superoxide free radical, hydroxyl free radicals) removal experiment, lipid peroxidation inhibition experiment evaluation methods, such as;Describes the biological cells as the model of CAA antioxidant evaluation method;Outlined in animals on antioxidant activity evaluation methods and indicators, for oxidation of natural polysaccharides in related areas to provide theoretical basis for research and development. 【key words 】: Natural polysaccharides；antioxidant activity；evaluation methodology
茶多酚的抗氧化作用及其在食品中的应用
茶多酚的抗氧化作用及其在食品中的应用 摘要:茶多酚是一种天然的食品添加剂,本文介绍了茶多酚的成分和儿茶素的 结构,全面地综述了茶多酚的抗氧化性能茶多酚在油脂、肉制品加工和果蔬保鲜、糕点和糖果以及饮料生产等方面的发展和应用。 关键词:茶多酚;抗氧化作用;食品 Abstract: Tea polyphenols is a natural food additives, ingredients of tea polyphenols and catechin structure, a comprehensive overview of the antioxidant properties of tea polyphenols in tea polyphenols grease, meat processing, and aquatic preservation,the development and application of pastries and candy and beverage production. Key word: tea polyphenols;antioxidation;food 茶多酚是从茶叶中提取的纯天然多酚类物质,又叫茶单宁,茶鞣质,是茶叶中多酚类物质的总称。茶多酚主体成分是儿茶素,占茶叶干物量的20 %一30 % [1]。茶多酚分子结构中具有活泼的羟基氢能终止自由基的连锁反应,捕获过量的自由基,因此是一类理想的天然抗氧化剂。 1 茶多酚的性质和结构 茶多酚在碱性介质中极不稳定,在酸性中则稳定、耐热、与柠檬酸、苹果酸、酒石酸都有较好的协同作用。在潮湿的空气中能被氧化成棕色物,遇铁变成绿黑色络合物,与重金属盐溶液作用生成灰黄色沉淀,也能被高锰酸钾、硫酸铈等氧化剂氧化,与酒石酸铁生成红紫色络合物[2]。 茶多酚的主要成分按其化学结构可分为: 黄烷酮类、花色素类、黄酮醇类、 花白素类、酚酸及缩酚酸类等6类化合物。其中以黄烷酮类(主要是儿茶素类化合物)最为重要,占茶多酚总量的60% ~80% 。其次是黄酮类,其他酚类物质含量比较
地铁车站施工变更影响因素及其作用路径研究
地铁车站施工变更影响因素及其作用路径研究 发表时间：2017-09-28T10:42:41.887Z 来源：《基层建设》2017年第14期作者：张博施海英 [导读] 摘要：近年来随着我国经济科技的快速发展，人口的增多，交通面临越来越大的压力。 中交一公局厦门工程有限公司福建省福州市 350108 摘要：近年来随着我国经济科技的快速发展，人口的增多，交通面临越来越大的压力。人们的生活和经济的发展都对交通的需求提出了更多的要求。为了满足人们生活的需求，同时也为了为经济的发展进一步增加活力，各地都在加大对城市轨道交通的建设。地铁这一出行方式在交通运输中扮演着不可或缺的重要角色。但是地铁作为一个浩大的工程，在建设当中会面临着各种各样的问题和困难，比如地铁的建设时间长，建设成本高，地铁的建设容易受自然因素和社会因素等不确定因素的影响，地铁的建设需要专业的技能和人才等等。这些问题迫切地需要我们去探索，去解决。本文针对地铁在施工建设中可能遇到的问题以及对这些问题的解决方法和预防措施做了分析和探讨。对引起地铁施工变更影响的因素逐一的进行讨论。希望我国的地铁建设能够发挥最大的作用，更好的为社会和人民生活带来便利。关键词：地铁施工变更影响因素作用路径 引言 地铁有其自身的特点和作用，它节省了我们交通运输的时间。它的使用区别于其他交通工具受路面交通状况和天气的影响。在环境污染方面，能够减少废气的排放，有利于环境净化。在地铁车站施工变更影响因素方面。很多的交通运输业的工作者和一些专家学者也都进行过分析和研究。本文的目的在于讲这些分析系统的整理，从一个全面宏观的角度分析这些因素，将各个因素用联系的方式让它们形成一个思路清晰的系统，以此来推进我国地铁建设技术的发展。减少在施工中的变更带来的经济损失和资源浪费。 一、地铁站施工变更所受到影响的因素分析 （1）受地理环境社会因素的影响 地铁作为一种高投入的工程，它的建设离不开国家的经济的发展，离不开政府的财政支持。政府一项旧政策的废除，一项新政策的发布，都与地铁的建设息息相关。地铁建设工程的顺利进行需要紧跟国家政策的发展和变化。因此，政策成了硬性地铁车站施工变更影响的因素。其次，从宏观的角度上来说，不只是政府政策，市场也是影响变更的宏观因素之一。众所周知，地铁的建设需要有大量的原材料作为基础，建筑市场的变动，会导致材料价格的浮动，使地铁在建造时的成本和预算有着较大的差距，不得不对地铁的施工计划进行变更。从微观的角度来看，地铁的建设主要是沟通不同地区之间的联系，但是不同的地区的地质地貌在实际建设时会和最初的预设有差距，地理环境也成了影响施工变工影响的因素。其次，地铁的建设还可以拉动地区经济的增长，在建设时需要考虑建设地区周边的交通状况，和经济社会的发展形势，容易受不可预见因素的影响。 （2）受勘测技术的客观环境的影响 地铁的建设是一个庞大的工程，这个庞大工的顺利完成需要不同的部门共同参与，共同设计。因此，在工程建设前的勘测对整个工程来说异常重要。当前我国地铁建设在前期的调研活动时期准备不充分，不具体，可操作性的难度大。前期的勘测直接影响到后期的建设环节，由于我国目前的地铁建造技术还有很大的进步空间，在建造时，大多数都是对最初的设计进行一个扩大式的建造。不能提供一个深度的设计方案，以至于在最后的建造时出现的诸多问题不能得到准确数据的支持，也没有应急转化方案的帮助，不能够灵活快速的适应实际的工程操作。为了地铁建设工程的顺利进行，出现这种由于勘测技术客观环境影响的情况时，一般都会采用对施工变更的方法。前期的勘测技术和深度计划的设计是否合理和科学，是否灵活和准确，是影响地铁建设是否变更的根本原因。总而言之，这些因素是影响是否变更的直接因素。 （3）受施工环境的间接影响 众所周知，一项工程的进行，过程都不是完全一帆风顺的。地铁的建设更是如此。在进行了前期计划准备和勘测准备之后，地铁的建设算是正式开始。但是，在具体的施工中会遇到各种不可预料的因素。地铁的建设首先必要要保证它的安全性能，如果在建设中，安全这一关出现了问题，就必须立刻对该工程进行调整和变更。为了保障人们能在短时间内享受到地铁带来的便利，对施工的过程就有着极其高的标准，既要保证工程的安全，又要注重工期的长短，既要考虑地铁建设对周边人文环境的影响，又要兼顾地理环境的因素。 由此看来，地铁的施工环境其实是处在一种高度紧张高度认真的环境之中。在这种施工环境中如果出现了其中一个环节的矛盾，需要相关人员和部门在最快的时间内解决，直接快速有效的解决矛盾。当有关部门和有关人员无法解决出现的矛盾和问题，找不到最佳解决问题和协商问题的方法，这时，这种高度紧张高效的施工环境就会间接要求人们对地铁的施工及时的做出变更，以此来保证工程的顺利进行。由以上可看出。施工的变更还会在施工过程的环境中产生。 二、研究地铁车站施工变更作用路径的方法 （1）搜集丰富具有权威性的资料 真实的案列及其它的解决方法有助我们在解决新问题时的举一反三，推陈出新。案列研究这一方法近几年来发展迅速，被很多人采用，随着时代的发展，现在已经成了理论研究的基础方法。 通过真实的案列，能让我们迅速的了解各个要素之间存在的联系以及他们的相互作用。能够在宏观的角度系统的认识到地铁工程在建造时如何减少变更带来的损耗。其次，要注意搜集大量的资料和材料，这些资料可以是自己实地的勘测，测量，可以是以往工程建设留下来的资料和数据，可以是企业的档案，也可以是在地铁建造方面有着研究的专家学者的书籍和报刊等等。 不同的资料之间可以进行补充说明，也可以让读者有更多的选择途径，多方面的考虑和思考地铁车站施工变更问题的解决办法。本文提出了研究的方法，现在用这些方法来分析某地铁车站变更建设的案例，让我们更深沉的学会并理解这些方法，能把理论真正的应用到地铁车站施工变更因素的研究当中。 （2）具体的地铁车站施工影响因素案例分析 在某地地铁车站的建设当中。原方案是用主体机构采用明暗挖结合施工，但是正如我们本文中提到的地铁车站的变更，最终在实际的建造中采取的却是浅埋暗挖法。探究其中的原因，外部环境在于该地铁线的位置周围有着大量的文物，古建筑较多，地铁的建造不应以破坏文化遗址为代价。该地的经济收入主要是旅游业，且地铁站周围有较多旅游景点，因此，不得不改变施工方案。 从内部条件来看，前期的勘测准备工作不充分，在后期建造过程中，发现存在着安全隐患问题，不确定的危险源会使该地铁站的安全
抗氧化实验方法
1还原力的测定 样品2ml加到2ml 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.6）和2ml 1%的铁氰化钾溶液的混合液中。混合物在50℃保温20min，然后在反应混合物中加入2ml 10%的TCA，混合后以3000rpm 离心10min，取上清液2ml与2ml蒸馏水以及0.4ml 0.1%氯化铁在反应试管中反应，10min 后测定其在700nm处的吸光值。吸光值越大表明还原力越强。 注意：建议蛋白浓度以5mg/ml左右变化，例如2.5，5之类变化。但具体情况应根据吸光值大小而定。 0.2mol/L pH6.6的磷酸盐缓冲液的配制见附表。 铁氰化钾溶液应盛装在棕色瓶中。 比色皿的用法：可见光(>400nm)用玻璃比色皿（即没有标字母或者标G的比色皿），紫外光时（<400nm）用石英比色皿（即标Q字比色皿）。 2 DPPH自由基清除活性的测定 将1.5ml样品液添加到1.5ml含0.1 mmol/L DPPH的95％乙醇中，混合，振荡，在 室温下放置30min，然后在波长517nm处检测（Ai）。清除率计算公式为： 空白为1.5 ml 95%的乙醇加入1.5 ml蒸馏水调零。 式中：Ac——对照为1.5 ml DPPH溶液加上1.5 ml蒸馏水在517nm处的吸光值；Aj——1.5ml样品液加上1.5 ml 95%的乙醇在517nm处的吸光值； Ai——1.5ml样品液加上1.5 ml DPPH溶液在517nm处的吸光值； 注意：建议酶解液蛋白浓度以2mg/ml 左右变化，如0.5,1,2,2.5之类变化，但是具体情况应视清除率而定，最终结果应有清除率大于50%和小于50%的情况。 DPPH样品有毒，需戴口罩和手套进行操作。而且DPPH试剂很昂贵，用时注意节约。0.1m mol/L DPPH 乙醇溶液的配制：准确称取0.00395gDPPH，用95%的乙醇溶液溶解并定容到100ml。 3 在卵黄磷脂体系中抗氧化能力的测定 以卵黄脂蛋白为底物的LPO模型反应体系包括:体积比为1:25稀释的卵黄悬液(卵黄用等体积的pH7.45，0.lmol/LPBS配成，使用前磁力搅拌10min)0.2 mL、一定浓度的样品溶液0.lmL、25m moll/LFeSO4溶液0.2mL，用PBS缓冲液补足至2.0mL。对照管除不加样液外其他试剂同前。将上述2种试管同时置37℃恒温水浴锅中保温培养1h。取出后，加入20%TCA0.5mL，静置10 min后，与对照管于3500r/min离心10min，取2.0mL上清液，分别加入质量分数为0.8%硫代巴比妥酸(TBA)溶液1.0mL，加塞于100℃水浴15min，取出冷却。空白管以2.0mLPBS溶液代替，在532nm下测定吸光度，样品对卵黄脂蛋白LPO的抑制率表示为: SA(%)=(Ac一AS)/A C×100 式中:Ac一不加样品的吸光度 As一加入样品的吸光度 注意：卵黄溶液不用时应放置冰箱保存。 酶解液蛋白浓度以5mg/ml左右调整，但具体应视清除率大小而定，对酶解液蛋白浓度
光合作用的影响因素和原理的应用(含答案) (1)
第23课时 光合作用的影响因素和原理的应用 [目标导读] 1.通过探究光照强弱对光合作用强度的影响实验，学会研究光合作用影响因素的方法。2.联系日常生活实际，思考影响光合作用的环境因素以及光合作用原理的实践应用。 3.阅读教材，了解化能合成作用。 [重难点击] 影响光合作用的环境因素以及光合作用原理的实践应用。 一 探究光照强弱对光合作用强度的影响 多种环境因素对光合作用有着重要的影响，其中光照的影响最为重要。 1.光合作用强度的表示方法 ????? 单位时间内光合作用产生的有机物的量单位时间内光合作用吸收CO 2的量单位时间内光合作用放出O 2的量 2.探究光照强弱对光合作用强度的影响 (1)实验原理：抽去小圆形叶片中的气体后，叶片在水中下沉，光照下叶片进行光合作用产生氧气，充满细胞间隙，叶片又会上浮。光合作用越强，单位时间内小圆形叶片上浮的数量越多。 (2)实验流程 打出小圆形叶片(30片)：用打孔器在生长旺盛的绿叶上打出(直径＝1cm) ↓ 抽出叶片内气体：用注射器(内有清水、小圆形叶片)抽出叶片内气体(O 2)等 ↓ 小圆形叶片沉水底：将抽出内部气体的小圆形叶片放入黑暗处盛有清水 ↓的烧杯中，小圆形叶片全部沉到水底 强、中、弱三种光照处理：取3只小烧杯，分别倒入20mL 富含CO 2的清水，各放入 10片小圆形叶片，用强、中、弱三种光照分别照射 ↓ 观察并记录同一时间段内各实验装置中小圆形叶片浮起的数量 (3)实验现象与结果分析：光照越强，烧杯内小圆形叶片浮起的数量越多，说明在一定范围内，随着光照强度的不断增强，光合作用强度不断增强。 3.结合细胞呼吸，人们用下面的曲线来表示光照强度和光合作用强度之间的关系，请分析：
丹参多糖体外抗氧化抗肿瘤研究
丹参多糖体外抗氧化与抗肿瘤研究 焦亚东1杨兴斌2* ? （1?陕西师范大学教育部药用资源与天然药物化学重点实验室，陕西西安710062; 2.陕西师范大学食品工程与营养科学学院，陕西西安710062） 摘要：采用水提醇沉法制备丹参多糖（SMP）。通过1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP ）柱前衍生化HPLC-UV法表征SMP的单糖组成。通过DPPH ?自由基、超氧阴离子、羟自 由基、还原能力体系评估SMP的抗氧化能力。采用MTT法、LDH法和流式细胞术 （FCM ）评价SMP的抗肿瘤活性。结果表明，SMP主要由半乳糖醛酸（GalUA ）、葡萄糖（Glc）、半乳糖（Gla）组成，其摩尔百分含量分别为 4.36%、31.11%和65.52%。SMP 具有一定的抗氧化活性，且呈现量效关系。同时，SMP对人结肠癌细胞（LoVo ）的生长具 有显著的抑制作用，并且表现出一定的剂量依赖性，流式细胞术的分析结果表明SMP能显 著地诱导LoVo细胞凋亡并能将LoVo细胞抑制在S期。 关键词：丹参多糖；抗氧化；抗肿瘤 Antioxidant, Antineoplastic activity of Polysaccharide Extract from Salvia miltiorrhiza Bge. 1 2* JIAO Ya-dong , YANG Xing-bin （1 Key Laboratory of Mi nistry of Educatio n for Medici nal Pla nt Resource and Natural Pharmaceutical Chemistry, Shaanxi Normal University, Xi'an 710062, China; 2 College of Food Engin eeri ng and Nutriti onal Scien ce, Shaa nxi Normal Un iversity, Xi'a n 710062, Chi na ） Abstract: SMP was extracted by the method of water boiling and ethanol precipitation. The mono saccharide compositi ons of SMP was characterized by PMP precolu mn derivatizati on procedure with HPLC-U V. In additi on, the an tioxida nt pote ntial of SMP was evaluated using the method of reducing power, and scavenging DPPH? radical, superoxide radical and hydroxyl radical. Moreover, the antin eoplastic activity of SMP was evaluated by MTT assay, LDH assay and flow cytometry 1作者简介：焦亚东（1985—）,男，硕士生，主要从事天然药物化学方面的研究。 ?通讯作者：杨兴斌（1969—），男，副教授，硕士生导师，主要从事食品药品质量标准、食品分子营养学以及生化药理方面的科研工作。Email: xbyang@https://www.360docs.net/doc/6913844249.html,
体外抗氧化实验方案
体外抗氧化实验方案 一、DPPH自由基清除法 [原理] DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl radical)即1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基。分子中，由于存在多个吸电子的-NO2和苯环的大π键，所以，氮自由基能稳定存在。 ON2 NONN2 NO2 当DPPH自由基被清除，其最大吸收波长519nm处的吸光度A值随之减小。DPPH这种稳定的自由基为清除自由基活性的检测提供了一个理想而又简单的药理模型。 [实验步骤] 1.1 DPPH测试液的配制 6.25,10ˉ5M 取DPPH 0.0246g溶于约100mL溶剂甲醇中，超声5min，充分振摇，务使上下各部分均匀。取1mL 该DPPH溶液，在519nm处测A值，使A,1.2-1.3之间最佳。该DPPH溶液最好避光保存，3.5小时内用完。 1.2 样品液的配制 Vc溶液 (0.25mg/ml) 称取Vc 0.01125g 溶于45mL乙醇溶液 1.3 预试 取DPPH溶液2mL，往其中加少量样品液，加样时，先少后多渐加，边加边混合，并观察溶液的褪色m情况，当溶液颜色基本褪去时，记下样品的加样量。 此加样量即为样品的最大用量，在此最大用量的基础上，往前设置5个用量，使之成等差数列。
【如】在预试过程中，发现加样到200μL时，DPPH溶液颜色基本褪去，则200μL为该样品液的最大用量。其用量梯度宜设为40、80、 120 、160、 200μL。浓度梯度mg/ml为 0.0025、0.0050、0.0100、0.0200、0.0400 μg/ml 2.5、5、 10、20、40 1.4 测量 A0值的测量:取DPPH溶液2 mL加入到小试管(或玻璃瓶)中，加95甲醇1mL，充分混合，测A值(517nm)，此A值为A(A0多在0.7-0.9之间)。 0 A值的测量: 取DPPH溶液2mL加入到小试管(或玻璃瓶)中，加样品液xμL (x是根据1.3 预试结果确定样品液的用量)，再加(1000 -x)μL 甲醇，混合，静置30分钟后，测A值(517nm)。加样表如下: 表1 加样表 样品液甲醇总体积 DPPH测试液 30μL 970μL 2 mL 3mL 60μL 940μL 2 mL 3mL 120μL 880μL 2 mL 3mL 240μL 760μL 2 mL 3mL 480μL520μL 2 mL 3mL 1.5 正式测量 方法大致与1.4相同，只不过，每测一个用量需要测三个平行数据。而且在每测一个用量的三个平行数据后，都要重测一次A. 0 [实验结果] 清除率(抑制率)的计算公式:
影响组织承诺的影响因素及作用机制
影响组织承诺的因素及作用机制摘要：组织承诺是近年来组织行为学领域研究的热点内容之一。有关研究人员对其内涵、影响因素、作用机理、作用环境等等方面做了很多研究，研究表明，不同的工作环境、工作人群对组织承诺作用的影响都不尽相同。本文根据近十年来研究组织承诺的论文对其影响因素和作用机制进行简单的梳理和总结。 关键词：组织行为组织承诺影响因素 二十一世纪的管理所依照的思想基础应当是以人为本。换言之，处理好员工需求与企业发展的关系、提高组织承诺是企业管理的重要内容，是人力资源管理的从业人员进行实际管理工作时要考虑的核心问题之一。本文就近十年之内有关组织承诺的文献对组织承诺的影响因素及作用机制进行简单的阐述。 一、什么是组织承诺及其构成 组织承诺这一概念最早于1960年由贝克提出。他将承诺定义为由单方投产生的维持“活动一致性”的倾向。他认为组织承诺的产生是由于员工单方面投入过多而产生的，员工对工作倾注的心血越多，对工作的热情就越高。到了80年代，Porter等人对于组织承诺又进行了新的解读，他们认为，组织承诺是员工对于工作的卷入程度和认可程度。国外有关组织承诺的各类研究也激发了我国学者研究的热情，方俐落、凌文辁和张治灿在千禧年的研究发现，组织承诺是员工对现有组织在情感上的认可，以及乐于承担身为组织中的一员所要承担的责任和义务。 根据各种研究我们可以看出，我们对组织承诺这一概念和现象的认识随时间推移不断深化。目前对于组织承诺并无统一的标准定义，但综合各时期各研究我们可以看出，组织承诺包含态度和行为两方面内容。态度主要指员工对工作的忠诚、依赖和热情；行为主要指员工的外在行为，表现为对工作稳定的、相应的反应。 组织承诺的结构并不是单一的。梅尔和艾伦将组织承诺分解为三维结构：感情承诺、持续承诺与规范承诺。情感承诺是指组织成员被卷入组织的程度，包括参与组织建设运行的程度、参与组织社会交往程度等方面，它是个体对组织的情感，是一种肯定的心理倾向。持续承诺是指员工为了保有多年来在组织当中通过
楮实提取物体外抗氧化活性的研究
楮实提取物体外抗氧化活性的研究（作者： _________ 单位：___________ 邮编：___________ ） 作者：吴兰芳张振东景永帅杨娟 【摘要】目的探讨楮实提取物的体外抗氧化活性。方法先用80% 乙醇，然后用蒸馏水对楮实进行提取。其中醇提取物依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，水提部分经醇沉、干燥后得到楮实粗多糖。运用羟基（?OH）自由基体系、二苯代苦味基肼（DPPH ）?自由基体系和对 Fe3+的还原能力实验，比较楮实各提取物的抗氧化活性。结果楮实提取物对?OH自由基和DPPH ?自由基均有较好的清除作用，其中总醇提取物对? OH自由基的清除能力最强，其IC50值为0.28 mg/ml;乙酸乙酯提取物对DPPH ?自由基的清除效果最好，其IC50值达到0.08 mg/ml ;各提取物对Fe3+均有较强的还原能力，乙酸乙酯提取物还原效果最为明显。结论楮实提取物具有一定的抗氧 化活性，在抗衰老方面有广泛的应用前景。 【关键词】楮实；抗氧化活性；清除自由基；还原力 【Abstract ] Objective To study the antioxidant activities of extracts from Broussonetia papyrifera in vitro. Methods B.
papyrifera was treated with 80% etha nol and the n the residue was extracted with water. The etha nol extract were extracted respectively by petroleum ether, chloroform, ethyl acetate, n _buta nol. At the same time, crude polysaccharide was obta ined by etha nol precipitati on from water extract. The an tioxida nt activities of the above extracts in vitro were compared by the hydroxyl free radical ( OH), DPPH free radical (DPPH )and deoxidization Fe3+ reacti on system. Results The extracts from B. papyrifera had good scavenging effect on the hydroxyl free radical and DPPH free radical. Etha nol extract had the best scave nging effect on hydroxyl free radical system, which corresponding IC50 value was 0.28 mg/ml. Ethyl acetate extacts had the best scavenging effect on DPPH free radical, which corresponding IC50 value reached to 0.08 mg/ml. All of the extracts had strong deoxidization ability of Fe3+. Among of them, ethyl acetate extracts had significant deoxidizati on ability. Con clusi ons Brouss on etia papyrifera has stronger antioxidant activities and will be widely applicated on anti Jaging. 【Key words ] Broussonetia papyrifera; Antioxidant activity; Radical scave nging; Deoxidizati on 楮实子具有活血理气、补肾清肝、明目、利尿的功效，多用于腰膝酸软、虚劳骨蒸、头晕目眩、目生翳膜、水肿胀满等症〔1，2〕。 一些含楮实子的经典方药经多年临床验证具有确切的抗衰老、促智作
多酚抗氧化性的研究进展(张云丽)
植物多酚抗氧化性的研究进展及其运用 摘要：植物多酚( 植物单宁) 是一类广泛存在于植物体内的重要的天然产物，叙述了多酚的抗氧化性及多酚在国内外食品工业、医药保健、日用化学品等方面的应用现状, 展望了多酚在国际市场上的广阔前景。 关键词: 植物多酚；抗氧化性； 植物多酚（Plant polyphenol）又名植物单宁（Vegetable tannin），为植物体内的复杂酚类次生代谢物，具有多元酚结构，主要存在于植物的皮、根、叶、果中，在植物中的含量仅次于纤维素、半纤维素和木质素。植物多酚(polyphenol)是多羟基苯，如苯二酚、苯三酚等。植物多酚是在植物性食物中发现的、具有潜在促进健康作用的化合物。由于其羟基取代的高反应性和吞噬自由基的能力而具有很好的抗氧化活性【1】酚类化合物是众所周知的抗氧化剂。主要有黄酮类、多 酚类、多糖类和维生素类等。近年来研究发现，一些农业、食品工业副产品（如茶叶、花生壳、柑橘类果皮、果汁残渣等）的提取物中也含有丰富的多酚类物质，其中有些提取物中多酚含量很高。因此来自农业和食品工业副产品的植物多酚将成为保健食品、医药、化妆品等行业的重点开发研究对象【2-3】。 一、植物多酚研究利用的化学基础 人类最初对植物中所含多酚类化合物的利用, 是将其用于鞣制皮革, 并将这类化合物称为植物单宁( vegetable tannins)。按照White和Bate-Smith 的定义, 植物单宁是指分子量在500—3000 范围内的具有鞣性的多元酚。1981年,Haslam 提出了植物多酚这一术语,它包括单宁及相关化合物( 如单宁的前体化合物和单宁的聚合物)。这一名称能更全面地概括这类天然产物的特点, 也符合各学科领域的实际研究情况,因而被人们广泛采用。植物多酚的化学研究始于18世纪末。其结构复杂, 化学性质活泼,并且常以大量性质相似的同系物的混合物形式存在, 因此本世纪30 年代以前,多酚化学的进展一直非常缓慢。植物多酚的科学分类方法直到1920 年才由Freudenberg 提出,即根据化学结构不同,植物多酚分为水解单宁( 酸酯类多酚) 和缩合单宁( 黄烷醇类多酚或原花色素)。前者主要是酸及其衍生物与多元醇以酯键或甙键形成,可细分为单宁和鞣花单宁两类。后者主要是羟基黄烷醇类单体的缩合物, 单体间以C—C 键相连如图1所示。[4]
影响药物作用的因素研究
影响药物作用的因素的研究 孟刚，时晓丽 （南京农业大学动物医学院，南京210095） 摘要：药物的作用是药物与机体互相作用过程的综合表现，许多因素都可能影响或干扰这个过程，使药物的效应发生改变。本文主要探讨给药途径、动物年龄和药物的理化性质对药效的影响，以指导临床用药。关键词：药物作用；给药途径；动物年龄；理化性质 药物的作用是药物与机体互相作用过程的综合表现，许多因素都可能影响或干扰这个过程，使药物的效应发生改变。在兽医临床上，我们可以把这些因素归纳为药物方面、动物方面和环境生态方面的因素。本文将主要探讨不同的给药途径、动物年龄和药物的理化性质对药物作用的影响及其机制。 1 不同给药途径对药物作用的影响 1.1 实验用品 （1）仪器：普通天平、注射器、注射针头、灌胃针头、鼠笼;（2）药品：4%硫酸镁注射液；（3）动物：小鼠两只（体重20 克左右） 1.2 实验方法 取体重相似的两只小鼠，称好体重，一只以4%硫酸镁0.25ml/10g腹腔注射，另一只以同样剂量灌胃，观察两鼠的反应有何不同。 1.3 实验结果 表1 应用硫酸镁后小鼠的变化 鼠号体重（克）药物剂量（毫升）给药途径反应情况 甲21.61 0.54 腹腔注射四分钟后出现爬行异常，大约十分钟后开 始瘫痪 乙20.63 0.52 灌胃无异常 1.4 小结 不同的给药途径可引起不同的药物作用效果。硫酸镁注射给药主要发挥镁离子的作用。当血浆中镁离子浓度过低时，出现神经和肌肉组织过度兴奋，可致激动。当镁离子浓度升高时，可引起中枢神经系统抑制，产生镇静和抗惊厥作用。同时镁离子又引起神经肌肉传导阻断，使骨骼肌松弛，原因主要是运动神经末梢乙酰胆碱释放量减少，其次是乙酰胆碱在终板去极化减弱及肌纤维的兴奋性下降。所以，不难解释，甲鼠出现爬行异常和瘫痪的现象。另外，硫酸镁口服，由于肠道内镁离子浓度的升高，形成高渗液体能吸收大量水分，阻止肠道水分的吸收，同时水分增加可以软化粪便，而且肠容积变大，对肠粘膜产生机械性的刺激作用，解离出的镁离子及溶液的渗透压对肠粘膜也有一定的刺激作用，促进蠕动，引起排便。本实验中，硫酸镁灌胃量比较少，故没有出现下泻的现象。所以，我们必须注意根据用药目的，选择正确的给药途径。 2 动物年龄对药物的影响 2.1实验用品 （1）仪器：注射器、注射针头、鼠笼、天平；(2)药品：0.5%巴比妥溶液；（3）动物：小鼠（成年及未断奶各一只）
多糖体外抗氧化作用及其影响因素
第46卷第4期2018年2月广 州 化 工 Guangzhou Chemical Industry Vol.46No.4Feb.2018 多糖体外抗氧化作用及其影响因素 * 吴雅清1,2,冷小鹏1 (1华侨大学生物医学学院/分子药物研究院,福建 泉州 362021; 2华侨大学分析测试中心,福建 厦门 361021) 摘 要:多糖是一类具有抗氧化二抗病毒二抗肿瘤二降血糖二降血脂二免疫调节等广泛药理活性的天然高分子化合物,其 中抗氧化作用是其抗肿瘤二降糖降脂的作用机制之一三查阅并整理了近年来的文献,对多糖的体外抗氧化作用机理及影响因素作一综述,重点阐述多糖的组成二结构二分子量等方面对体外抗氧化活性的影响,以期为多糖的深入研究及开发利用提供一定的参考三 关键词:多糖;抗氧化;自由基 中图分类号:R961.1 文献标志码:A 文章编号:1001-9677(2018)04-0004-07 * 基金项目:福建省海洋经济创新发展区域示范项目(2014FJPT08);厦门市海洋经济发展专项资金项目(14CZP043HJ17);厦门市科技局项目 (3502Z20141015);华侨大学研究生科研创新能力培育计划资助项目三 第一作者:吴雅清(1981-),女,博士研究生,实验员,主要从事药物研发三 Antioxidant Activity and Influencing Factors of Polysaccharides in vitro * WU Ya -qing 1,2,LENG Xiao -peng 1 (1Biomedical Sciences School &Institute of Molecular Medicine,Huaqiao University,Fujian Quanzhou 362021; 2Instrumentation Analytical Center,Huaqiao University,Fujian Xiamen 361021,China)Abstract :Polysaccharide is a kind of natural macromolecular compounds with various pharmaceutical activities,such as antioxidant,antiviral,antitumor,hypoglycemic,hypolipidemic and immune function.Among these,antioxidant activity is one of mechanisms of antitumor,hypoglycemic and hypolipidemic effects.Antioxidant activity in vitro and its influencing factors were summarized,with emphasis on the polysaccharide composition and structure.It would provide some references for the further research and development of polysaccharides. Key words :polysaccharides;antioxidant activity;free radical 多糖(polysaccharides)是一种由10个以上单糖通过糖苷键链接的高分子聚合物,具有广泛的生物活性,例如来自海洋藻类的多糖具有抗凝血二抗血栓二免疫调节二抗肿瘤二降血脂二降血糖二抗炎抑菌抗氧化等多种重要的活性,广泛应用于生物医药材料中[1]三对多糖的活性研究表明,部分多糖能够通过清除各种活性氧自由基,提高抗氧化物酶的活性,减少脂质过氧化产物丙二醛的产生,表现出多种途径的抗氧化作用,而抗氧化作用是抗肿瘤二抗衰老二降血糖二降血脂的作用机制之一[2]三多糖作为一种来源广泛二有效低毒的自由基清除剂和抗氧化剂,在保护机体免受氧化损伤方面起着至关重要的作用三尽管多糖具有强大的抗氧化功能,但其作用机理和构效关系尚未被系统阐明三本文就多糖体外抗氧化作用机理及可能的影响因素作一综述,为多糖的构效关系研究及进一步开发利用提供前期基础三 1 多糖的体外抗氧化评价方法[3] 多糖的抗氧化活性研究,常采用体外或体内模型,体外抗氧化评价方法有各种不同的体外模型,主要有化学评价方法和生物活性评价方法三其中化学评价方法包括氧自由基吸收能力 法(ORAC)二总自由基捕获抗氧化参数法(TRAP)二总氧自由基清除能力检测法(TOSC)二Trolox 等效抗氧化剂能力检测法(TEAC)二铁离子还原/抗氧化能力检测法(FRAP)二DPPH 自由基清除法二羟自由基清除法二超氧阴离子自由基清除法二过氧化氢清除法二单线态氧淬灭法;生物活性评价方法包括DNA 氧化损伤二脂质过氧化二红细胞溶血二线粒体肿胀等三基于不同评价方法的原理不同,同一种物质用不同的抗氧化方法来评价,其结果往往存在较大差异,故要评价一种物质的抗氧化性,必须采用两种以上的抗氧化评价方法三 2 多糖的体外抗氧化作用机理[4] 目前,对多糖的体外抗氧化作用研究表明,其可能的作用机理主要分为两类: (1)直接清除活性氧自由基三活性氧是指化学性质活泼的氧代谢产物,包括超氧阴离子自由基二羟自由基二单线态氧和过氧化氢三过量的活性氧会对人体产生氧化损伤,导致细胞死亡,因此清除人体中过量的活性氧显得尤为重要三多糖分子上具有还原性的半缩醛羟基,可与活性氧发生氧化还原反应,因而具有清除活性氧的活性三对于羟自由基,多糖碳氢链上的氢
体外抗氧化实验操作步骤,包括配制试剂(完整资料).doc
【最新整理，下载后即可编辑】 3.2.5 体外抗氧化实验 发酵液的预处理：将摇瓶结束的发酵液装入无菌的10ml 离心管里，在天平上仔细平衡到10g ，在4℃，10000rpm ，离心10min ，小心转移上清液到新管子里标记备用。 （1）对超氧阴离子的清除作用 利用邻苯三酚自氧化体系测定样品对超氧阴离子的清除作用。取50 mmol·L -1的Tris-HCI 缓冲液3 mL (pH=8.2，含有2 mmol·L -1的Na 2EDTA)，加入l mL 待检样品，于25℃保温10 min ，然后加入25 ℃预温的5 mmol·L -1的邻苯三酚0.3 mL(预先用10 mmol·L -1的盐酸配制)，精确反应4 min ，用0.5 mL 浓盐酸终止反应，测定其在320 nm 下的吸光度。以10 mmol·L -1的盐酸作为空白调零，按如下公式计算清除率： () %100A A A -A ?-=对照样品空白样品对照清除率 (1) 式中A 对照为未加待检样品的邻苯三酚反应体系的吸光度（用1mL 10 mmol·L -1的盐酸替代样品）；A 样品为加入待检样品后的邻苯三酚反应体系的吸光度；A 样品空白为加入待检样品后的无邻苯三酚的反应体系的吸光度（用0.3mL 10 mmol·L -1的盐酸替代邻苯三酚溶液）。 注意事项： 1、 所用的两个比色皿杯子必须是石英的，上面会写着“Q ”,
或“S ”，不得使用玻璃的，玻璃比色皿要么什么都不 写，要么写着 “G ”。 2、 测定前要用100g 砝码和天平标定所用的移液枪插上枪 头后是否精准，要求误差不超过5‰，不是5％。 3、 测定大量数据前，使用者先配制10g/L 的Vc ，做三个 平行测定，精准度达到5%以内再开始正确的测定。 4、 测定时由于每个人有使用习惯和误差，中间不得换人 换枪。 （2）对DPPH ·的清除作用 DPPH·溶液的配制：准确称取47 mg DPPH·，用无水乙醇溶解并定容至100 mL ，避光保存(0～4℃)，使用时稀释至120 μmol·L -1。 取待检样品l mL 与120μmol·L -1的DPPH·溶液3 mL 加入同一试管中，摇匀，在黑暗中放置30 min ，以无水乙醇为空白，在517 nm 下测定其吸光度，并按下式计算清除率： () %100A A A -A ?-=对照样品空白样品对照清除率 (2) 式中A 对照为未加待检样品的DPPH·反应体系的吸光度(用1mL 无水乙醇补充体积)；A 样品为加入待检样品后的DPPH·反应体系的吸光度；A 样品空白为加入待检样品后的无DPPH·的反