什么是军团菌
什么是军团菌
一、什么是军团菌二、军团菌病的临床表现三、军团菌病怎么治疗好
什么是军团菌1、什么是军团菌
军团杆菌,系需氧革兰氏阴性杆菌,以嗜肺军团菌最易致病。现已提出了超过30种军团杆菌,至少19种是人类肺炎的病原。其中最常见病原体为嗜肺军团菌(占病例的85%~90%),其次是L.micdadei(占5%~10%),再次是L.bozemanii和L.dumoffii.此类细菌形态相似,具有共同的生化特征,引起类似疾病。
军团菌病是由军团菌属细菌引起的临床综合征。1976年美国费城召开退伍军人大会时暴发流行而得名。病原菌主要来自土壤和污水,由空气传播,自呼吸道侵入。临床表现类似肺炎。
2、军团菌的存在环境
军团菌是隐藏在空调制冷装置中的致病菌,随冷风吹出浮游在空气中,吸入人体后会出现上呼吸道感染及发热的症状,严重者可导致呼吸衰竭和肾衰竭。军团菌最早是由于部队室内密闭作业,导致群体发生上呼吸道感染而得名。军团病是一种非常严重的、有时可以致命的肺炎。军团病是由军团杆菌引起,这种细菌产生在自然环境中,在温水里及潮热的地方蔓延。人工供水系统有时也能为军团杆菌的大量繁殖提供生存环境。这些系统包括淋浴器、矿泉池、喷泉以及空调设备的冷却水塔。人们通常是由于呼吸了被军团杆菌污染的水源散发的水雾而传染上军团病的。
3、怎样预防感染军团菌
军团菌肺炎的预防:医院、旅馆、建筑工地的获得性军团菌肺炎是防
军团菌
军团菌：空调和热水系统中隐藏的危机 Marco & Mario Doninelli---Caleffi S.p.A 1．1军团菌的历史起源 军团菌（Legionella)一词来源于1976年7月发生在美国费城的一次越战退役军人聚会：参加聚会的约2000名士兵中221人感染了肺炎，其中34人死亡。经过调查发现了病源的起因为空调系统中滋生的一种前所未有的细菌。1978年国际上正式将这种病命名为军团菌病（Legionaire’s Disease）(注:Legionaire 为‘军团’的俚称)。 研究表明，军团菌的病原有近40种：其中的嗜肺军团杆菌（legionella pneumophilia）是最危险的一种，它会引起以肺炎为主的全身性疾病。 图1 水系统中存在的军团菌 1.2 军团菌的临床表现 军团菌从临床表现上分为以下两种：
?庞提亚克热（Pontiac Fever） 通常潜伏期在1-2天，临床表现为高烧、肌痛、头痛和肠胃不适（不经常）。 没有肺炎。这类军团菌的感染通常转化为普通感冒，可用抗生素药治疗，不用住院即可。 ?军团菌病 通常潜伏期在5-6天，临床表现为高烧、肌痛、头痛、胸痛、腹泻、干咳、肾衰竭、感觉迟钝、精神混乱、休克等。 这类感染与其它细菌性的或非典型的肺炎很难区别。 这种疾病如果发现太晚或治疗不及时，病死率高达45%。 1.3 军团菌的感染方式、发病机率等特征 军团菌通过呼吸道雾化吸入细菌水颗粒感染。饮用细菌感染的水或者人与人之间的接触不会感染。 中老年人以及有慢性心、肾、肺、血液病、吸烟、酗酒者易受感染，同样年龄和性别也是一大因素，图2为法国1998年调查的数据，表明男性年长者发病率更高。
军团菌防治管理规定
编制：日期：审核：日期：批准：日期：
1.程序目的 为防止军团菌在工厂繁衍并导致法雷奥温岭工厂及邻近工厂的员工因军团菌患病，特制定本规定； 2. 适用范围 工厂区域内 3. 参考文件 无 4. 相关定义： 4.1 军团菌：一种致病细菌，易导致军团菌肺炎及其他多种疾病。在25℃到45℃的淡水中生长良好，可能在空调水、冷却塔水等不流动且长期未进行消毒处理的水体中生长； 4.2 受污染水体：指含有军团菌的水体； 4.3 军团菌病：由军团菌引起的疾病，不具备传染性，其得病原因主要是吸入含有军团菌的水或水蒸气； 4.4菌落数：每升水中含有的菌群数量； 5. 职责 5.1 EHS部负责安排军团杆菌的检测，在出现异常情况时及时组织体检和异常处理； 5.2 厂务负责冷却塔的日常维护和清洗 6. 内容： 6.1源头风险控制 6.1.1与冷却塔（包括塔体本身）相关的冷却系统都要受到风险分析以便确保不会有军团菌生长; 6.1.2 当工厂新建提供热水的热水槽和换热器时，需要尽量放在离使用点近的地方，以方便于： a ）使系统间的距离降至最短 b ) 阻止储存死水的风险 c ）便于维修 6.2预防操作 6.2.1 工厂应建立清单，统计所有可能产生军团菌的区域，并每年进行一次更新； 6.2.2 对于所有可能产生军团菌的区域，工厂应每年进行定期的水质检测；
6.2.3 对于所有可能产生军团菌的区域，不论检测结果如何，在可以的情况下，工厂应每季度投放一次杀菌药物，确保没有军团菌的产生； 6.3 应急处理 6.2.1 当水质检测结果表明该区域可能存在军团杆菌时，工厂应立即采取措施进行杀菌，并对可能受感染的员工安排体检； 6.2.2 当员工出现疑似肺炎的病例时，工厂应立即反应，及时和医院取得联系，以确定是否属军团菌肺炎,如果是，则应立即采取措施进行杀菌，并对可能受感染的员工安排体检； 6.4 定期检修 最长每12个月，每个设备都必须停用以便检查维护。 6.5 信号 下面的标志必须张贴在可能存在军团杆菌的设备上以作警告； 在设备及其附近工作的人员必须了解军团菌的危害并能看懂信号 6.6 警告 如果维护过程中有发现军团杆菌超标，相关信息必须报告给分公司、集团RIE 部门和EHS工程师。 7．资料存档 7.1 所有检测报告应保留三年； 7.2 所有监测数据和维护保养记录应保留五年； 8.记录（附件） 无
再谈热水系统军团菌灭菌方式
热水系统军团菌的灭菌新型方案 意大利卡莱菲公司办事处 舒雪松 在前几期的‘卡莱菲专题’里，我们就军团菌的形成，存在形式及清除军团菌的各种方法进行过探讨。在这一期里我们将更为深入地分析如何在热水系统中清除热水管道的军团菌，尤其是对于供水和循环水系统的温度及流量的平衡我们将提出多种解决方案。 首先，我们再次回顾一下Hodgson-Casey 图示，这是有关水温和军团菌存活关系的经典图表。从图1中可以看出，水温在70℃时军团菌立即死亡，在50℃以上时90%的军团菌在2小时死亡。在生活热水系统中，对军团菌进行热力杀菌的方式比化学杀菌更为合理。因为它不会造成水质的污染，而且热力杀菌更容易实施。 生活热水的热源部分，比如热水锅炉，换热水箱等，由于其自身特点及储存热量的需求，水温通常都在70℃以上，因此在水箱部不可能存在军团菌。而管道输送的热水在经过锅炉出水与冷水混合后往往都在50-55℃左右（根据欧洲的节能及安全标准，过高的水温直接输送到用户端容易造成烫伤及增大能耗）。由于管道保温及长度分布不一，所以很难保证 军团菌立即死亡 90%的军团菌2分钟内死亡 90%的军团菌2小时内死亡 军团菌滋生的理想温度 军团菌存活但不活跃 图1 Hodgson-Casey 图表 供水温度>50℃的管道 供水温度<50℃的管道 图2 热水供水系统中温度的变化示意图
在供水的最远端或循环回水管道的水温不低于50℃，而低于50℃的水温则为军团菌的滋生提供了条件。 如图2所示，假定热水以55℃供出，由于管道的热量损失等因素，在供水末端及循环水管道均出现低于50℃的区域，也就是容易产生军团菌的区域。因此，需要对热水的供水温度及循环回水温度进行控制。 接下来，我们将介绍一些新型的设备，它运用于热水系统中，使系统更易操控运行更加可靠。我们会从以下几个方面进行探讨： 1、热源部分热水的产生和调节 2、循环水系统的设计和平衡 3、防烫措施 4、热水系统的设计和改造建议 一、热水的产生和调节 以下我们将以3个系统图示说明热水的调节方式，三个系统均采用双重温度调节：第一个温度调节是将热水的温度控制在70-75℃左右，这样可以实现热量的贮存，用于热水供应和定期的高温消毒； 第二个温度调节则是管道供水温度的调节。 3 止回球阀 图3 储热式热水箱供水，循环水至水箱底部的系统
军团菌肺炎诊断标准
军团菌肺炎诊断标准 军团菌肺炎是一种革兰阴性菌所致的、以肺炎为主要表现并涉及全身多种器官受损的疾病，它在非典型肺炎中是病情最重的一种，未经有效治疗者的病死率高达45%。如此之高的病死率确实让人害怕，所以在发现有这个病的“苗头”时要及时医治才行。那么，军团菌肺炎有哪些诊断标准呢？ 1、可有爆发性流行病史，也可散发 症状有乏力、头痛、肌痛，24~48小时后可出现高热(呈稽留热型)、寒战，咳嗽，咳脓性痰或血痰，并有胸痛，部分患者早期可有腹泻症状。严重病例有嗜睡、谵妄、昏迷和精神错乱，甚至呼吸衰竭、肾功衰竭或休克。 2、体征 呼吸增快、相对缓脉，肺部有湿啰音，病情进展后可有肺部实变体征。 3、胸部X线检查 多为单侧下叶斑片状阴影，逐渐发展为肺叶实变，偶有肺内空洞，可有胸腔积液征象。4、呼吸道分泌物、痰、血或胸水 经活性碳酵母浸液琼脂培养基(BCYE)或其他特殊培养基培养有嗜肺性军团杆菌生长。 5、呼吸道分泌物用直接免疫荧光法(DFA)检测 军团菌抗原阳性(用高度敏感的荧光抗血清或抗嗜肺军团杆菌单克隆抗体直接染色镜检，可见有25条以上发强烈荧光的细菌)。 6、血清抗体滴定度测定 （1）间接免疫荧光法(IFA)，如恢复期比急性期血清标本滴定度上升4倍并达l:128或滴定度在l:128以上； （2）试管凝集试验(TAT)，两份血清标本前后抗体滴定度上升4倍并达1:160或滴定度在1:160以上； （3）微量凝集试验，两份标本前后抗体滴定度上升4倍并达1:64或滴定度在l:64以上。凡具备以上1、2这两项，同时又具有4、5项，达到6项中任何一种血清抗体滴定度者，可确定诊断。 另外，要注意的是对IFA、TAT效价仅一次增高(IFA＞1:256，TAT＞1:300)，同时有临床及胸部X线炎症表现的病例，可考虑为可疑军团菌肺炎。
水中军团菌检测(ISO11731-1998)
1.适用范围 本方法适用于各种环境中的样品包括饮用水、工业用水和自然界中的水及沉淀物和污泥中的军团菌测定。 2.培养基与试剂 2.1 GVPC： 2.1.1基础琼脂：军团菌CYE琼脂基础Oxoid (CM0655B)。 2.1.2添加剂：军团菌BCYE添加剂Oxoid (SR0110A)和军团菌GVPC选择性添加剂Oxoid (SR0152E)。 2.1.3制备：2.5g CYE溶解在90ml蒸馏水中, 121oC/15分钟灭菌, 冷却到50oC, 将 SR110A用10mL 50oC无菌蒸馏水溶解后无菌加入到以上的培养基中, 混合均匀, 再无菌吸取2mL SR0152E（用10mL无菌蒸馏水溶解）加入到上述培养基中，混匀后，倾倒平板。 2.2 BCYE： 2.2.1 基础琼脂：军团菌CYE琼脂基础Oxoid (CM0655B)。 2.2.2 添加剂：军团菌BCYE添加剂Oxoid (SR0110A)。 2.2.3 制备：2.5g CYE溶解在90ml蒸馏水中, 121oC/15分钟灭菌, 冷却到50oC, 将 SR110A用10mL 50oC无菌蒸馏水溶解后无菌加入到以上的培养基中, 混合均匀,倾倒平板。 2.3 BCYE-Cys： 2.3.1 基础琼脂：军团菌CYE琼脂基础Oxoid (CM0655B)。 2.3.2 添加剂：不含L-半胱氨酸的军团菌BCYE添加剂Oxoid (SR0175A)。 2.3.3 制备：2.5g CYE溶解在90ml蒸馏水中, 121oC/15分钟灭菌, 冷却到50oC, 将 SR175A用10mL 50oC无菌蒸馏水溶解后无菌加入到以上的培养基中, 混合均匀,倾倒平板。 2.4 酸缓冲液配制： A液 0.2M HCl（10mL 1M的HCl加入到40mL的蒸馏水中） 39ml B液 0.2M KCl (14.9gKCL溶解在1L无菌蒸馏水中) 250ml A, B液混合后用1M 的KOH调节pH至2.2±0.2,室温下的保质期一个月. 2.5血平板(BA) 2.6革兰氏染色液
群体遗传与进化.doc
群体遗传与进化 (总分：1086.48，做题时间：90分钟) 一、填空题(总题数：15，分数：73.50) 1.达尔文自然选择学说的主要内容有：______、______、______、______。 （分数：6.00） 填空项1:__________________ 2.达尔文的自然选择学说认为，生物的变异一般是______，而自然选择是______。 （分数：3.00） 填空项1:__________________ 3.按照达尔文的自然选择学说，生物的______为进化提供原始材料，______是生物进化的动力，______决定生物进化的方向。 （分数：4.50） 填空项1:__________________ 4.生存斗争是指______之间的相互斗争，以及______与______之间的斗争。 （分数：4.50） 填空项1:__________________ 5.某地区在建立工业区前后，灰色尺蛾与黑色尺蛾的比由95:5发展到5:95，产生这种现象的原因是 1。 （分数：1.50） 填空项1:__________________ 6.某农药是对付蚜虫的有力武器，连续使用了十几年后，人们发现杀虫效果下降，蚜虫______的增强可用达尔文的______进行解释。 （分数：3.00） 填空项1:__________________ 用达尔文自然选择学说分析解释狼的进化过程。 （分数：12.00） (1).狼群中存在不同类型的个体，如有跑得快的，有跑得慢的。它说明生物具有______的特性，而这种特性一般是______的。______和______是生物进化的内在因素。（分数：4.00） 填空项1:__________________ (2).随着环境的改变，食物稀少，跑得快、凶猛的狼才能获得食物生存下去。这样，食物、环境对狼起了______作用，而这种作用是______的，它决定着生物进化的______。（分数：4.00） 填空项1:__________________ (3).狼的进化过程是通过______实现的。（分数：4.00） 填空项1:__________________ 7.三界理论认为______、______和______是进化中的三个平行分支。 （分数：4.50） 填空项1:__________________ 8.物种的定义是指个体间能相互交配或可能相互交配而产生可育后代的______。不同物种的成员在______上是彼此隔离的，而同一物种的个体享有一个共同的______。
军团菌病应急处置程序参考方案
军团菌病应急处置技术方案 1 总则 1.1 背景 军团菌病（Legionnaires's disease）是由军团病杆菌引起的以肺部感染为主，可合并肺外多个系统损害的一种呼吸道传染病。受感染的人和动物排出的军团杆菌污染环境、土壤和水源,成为本病的传染源,其中军团菌污染的各种水源为主要传染源。传染的主要途径是:经呼吸道传染，含军团杆菌的气溶胶通过空气由人直接吸入肺泡（空气传播），气溶胶是军团菌传播、传染的重要载体, 军团菌的另一个传播载体是原虫，它可在阿米巴原虫细胞内寄生、繁殖。各年龄段的人群普遍易感, 特别是患有慢性病的或有免疫功能低下的,以及长期吸烟者都是易感人群。军团菌病全年均可发生,而以6至10月份发病最多。流行主要因素：水温适当，静止的水源如大容积贮水器，空气水混合部分的水龙头及淋浴喷头处，温水游泳池，空调冷疑水，超声湿润器，呼吸医疗器械等，尤其空调的冷疑水中本菌的检出率最高, 空调系统的带菌是本病流行的主要原因。 该病首发于1976年美国的一次退伍军人聚会。此后，欧洲、澳洲等不同国家和地区相继发现军团菌病例。目前，多个国家已将军团菌肺炎为法定传染病，WHO也将其列入传染病报告范围。全球每年都有数起军团菌病暴发流行，其发病率约为12/10万，病死率约为20%。我国于1982年发现首例病人以来，在北京、天津、福建、、四川、广东、山东、哈尔滨、山西、河北、辽宁、新疆、上海等地都有病例发生的报告。作为全球国际化休闲城，目前，随着百姓生活水平的逐步提高，城中高层建筑的日益增多，空调广泛使用，热水管、喷水池、淋浴及加湿器等设备的普及，这些都有可能增加军团菌病的危险性。因而，军团菌病已作为一种“现代生活文明病”在不断威胁着人们的健康。 1.2 编制目的 通过实施本技术方案，构建预防为主、防治结合的军团菌病的应急处理机制，提高快速反应和应急处理能力，做到“早发现、早报告、早采样、早隔离、早治疗”，有效地控制疫情蔓延扩散，保障人民群众的身体健康和生命安全，确保社会稳定和经济发展。 1.3 编制依据 根据《中华人民共和国传染病防治法》、《突发公共卫生事件应急条例》、《省军团菌病应急处置技术方案》等法律法规，制定本方案。 1.4 适用范围 本方案适用于应对军团菌病暴发疫情的前期准备工作及暴发发生后的应急处理工作。 2 疫情分级标准及应急响应 2.1 疫情分级标准 根据军团菌病疫情波及的范围、危害程度、以及对社会、经济的影响，将疫情分为四级：Ⅰ级疫情（红色预警）、Ⅱ级疫情（橙色预警）、Ⅲ级疫情（黄色预警）、Ⅳ级疫情（蓝色预警），具体分级标准如下： Ⅰ级疫情（红色预警）：2周以内，一个社区、建筑工地、学校，商场，医院，宾馆等集体单位发生10例及以上军团菌病病例或死亡1 例及以上或多点同时暴发。 Ⅱ级疫情（橙色预警）：一个社区、建筑工地、学校，商场，医院，宾馆等集体单位发生5 例及以上军团菌病病例，无死亡病例。 Ⅲ级疫情（黄色预警）：一个社区、建筑工地、学校，商场，医院，宾馆等集体单位发生1例及以上军团菌病病例。 Ⅳ级疫情（蓝色预警）：省内其他城出现军团菌病病例。 2.2 分级应急响应 （1）依照疫情分类标准，确定疫情预警级别，采取不同的响应措施：
公共场所水系统军团菌风险防控
◎智慧水务◎ 公共场所水系统军团菌风险防控 The Risk Control and Prevention of Legionella in the Public Area 叶文瑾 YE Wen-jin (中交上海航道勘察设计研究院有限公司) (Zhongjiao Shanghai Waterway Survey and Design Research Institute Co., Ltd.) 【摘要】军团菌病是一种细菌性的呼吸道疾病，是以公共水系统为媒介进行传播的疾病。随着我国城市化的发展，军团病成为城市 发展和公共设施管理中面临的一个重要的卫生公共问题，文章分析了国内外军团菌病的流行状况、主要的风险控制环节，比较了 国内外军团菌风险控制的相关法规、技术规范，并且对当前军团菌检测方法的研究进展进行了综述。 【Abstract 】Legionellosis disease is a bacterial respiratory disease, which is spread by the public water system. With the development of urbanization in China, Legionellosis disease becomes an important public hygiene issue in the city development and public facility management. This article analyzed the Legionellosis^ disease epidemics and the major risk control point. It also compared the domestic and foreign regulations and standards of Legionella risk control, and reviewed the research progress of test method on Legionella. 【关键字】军团菌病；风险防控;公共场所；水系统 [Keywords 1 legionellosis disease; risk control : public area; water system 1引言军团菌病(legionellosis disease) 是一种细菌性的呼吸道疾病，发现于 1976年美国退伍军人会议后，其中有 34人死亡。1977年，美国疾病预防控 制中心(CDC)分离得到该病的病原菌， 并命名为军团菌(Legionella)［匕由军 团菌引起的发病症状有两种，分别为庞 蒂亚克热和军团病。庞蒂亚克热是一种 急性自限性的流感样疾病，表现为发热 乏力；而军团病主要症状为肺炎，并伴 随着多系统损害，病死率在5%~30%之 间军团菌属于革兰性阴性菌，广泛 存在于自然环境和人工水体中，并可以 长期存活。目前已经确认的军团属有50 个种70个血清型，与人类疾病关系最 为密切的是嗜肺军团菌种(Legionella pneumoph 订a, Lp),现已发现其有16 个血清型［3］o 军团菌广泛存在于水和土壤中，适 宜的温度和环境使其容易大量滋生繁 殖。其最常见的传播方式是人体吸入受 到污染的水喷雾、喷气产生的气溶胶， 主要来源于空调系统的冷凝水、冷却水， 淋浴喷头水，加湿器等［現 随着我国城 市现代化的发展，大型建筑的兴建、复 杂公共供水系统、以及广泛安装的中央 空调系统，以水系统为传播媒介的军团 菌病，成为城市发展和公共设施管理中 面临的一个重要的卫生安全问题。2军团菌感染流行病学自美国首次爆发军团病以来，世界 每年都有军团菌病大爆发事件的报道， 并且在经济发达的国家较普遍。1995 年-2005年期间，美国病预防控制中 心(CDC)共报告了 23076例军团病⑷， 2011年-2015期间，欧洲疾病预防和 控制中心(European Centre for Disease Prevention and Control, ECDC)报告 了欧洲共发生30532例军团病，并且发 病率逐步上升，每10万人口的发病率 从2011年0. 97例上升到2015年的1. 30 例⑸。2005年，西班牙卫生部发布消息， 萨拉戈萨市爆发军团病，21人感染，2 人死亡。2012年7-8月芝加哥酒店，发 现10例军团病,3人死亡。2013年6月， 澳大利亚昆士兰Brisbane^ Wesley 医 院，数人感染军团病，1人死亡。2013 年9月，德国发生大规模军团病事件， 发现165例，3人死亡。2014年美国阿 拉巴马州医院，发现8例军团病，其中 2人死亡。2015年7-8月，美国纽约市 区发生严重的军团病事件，导致12人 77 智能建筑与智慧城市2019-8期.indd 772019/8/20 14:42:31
公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法
公共场所环境样品中嗜肺军团菌定量检验方法 1 范围 本标准规定了公共场所空气、水、土等不同类别环境样品中嗜肺军团菌的定量检测方法。 本标准适用于公共场所环境样品中嗜肺军团菌的定量检测，其他环境样品中嗜肺军团菌的定量检测可参照执行。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 GB/T 18204.3 公共场所卫生检验方法第3部分：空气微生物 GB/T 18204.5 公共场所卫生检验方法第5部分：集中空调通风系统 3 空气中嗜肺军团菌定量检测 3.1 原理 采用液体冲击法采样、叠氮溴乙锭（EMA）前处理结合定量聚合酶链反应(qPCR)方法定量检测室内空气和集中空调送风中存活的嗜肺军团菌。 3.2 仪器和设备 3.2.1 微生物气溶胶浓缩器：采样流量≥100L/min，3.0μm以上粒子的捕集效率≥80%（或浓缩比≥8）。 3.2.2 液体冲击式微生物气溶胶采样器：采样流量7L/min～15L/min，0.5μm以上粒子的捕集效率≥90%。 3.2.3 便携式冷藏箱。 3.2.4 冷冻离心机：温度4?C。 3.2.5 恒温水浴锅或金属浴：温度范围50?C～99?C。 3.2.6 荧光定量PCR仪：非耦合6色激发光片和6色检测滤光片通道，4°C–100°C温度范围。 3.2.7 卤素灯：500W。 3.2.8 涡旋震荡器：调速范围0~3000 rpm。 3.3 材料和试剂 3.3.1 酵母浸出粉。
3.3.2 蒸馏水。 3.3.3 EMA固体粉：5mg/管。 3.3.4 无核酸酶去离子水。 3.3.5 矿物油，用于减少气溶胶采样时的吸收液蒸发。 3.3.6 核酸提取试剂盒：DNA产量15～30μg，A260/A280在1.7～1.9之间。 3.3.7 引物：上游引物5’-GAAAATAAAGTAAAAGGGGAAGCC-3’； 下游引物5’-ATCAATCAGACGACCAGTGTATTC-3’。 3.3.8 探针：5’-FAM-AGGCGTTGTTGTATTGCCAAGTGGTT-TAMRA-3’。 3.3.9 标准品质粒。 3.3.10 荧光定量PCR反应体系。 3.3.11 离心管：1.5mL透明离心管和1.5mL棕色离心管。 3.3.12 离心管：15mL，50mL。 3.4 样品的采集 3.4.1 采样吸收液成分： 酵母浸出粉12 g 蒸馏水1000 mL 3.4.2 采样吸收液制法：将酵母浸出粉（3.3.1）12g加蒸馏水至1000mL，121 ℃下高压灭菌15 min，每20mL采样吸收液分装于灭菌后的50mL离心管（3.3.12）中备用。 3.4.3 采样点：室内空气按GB/T18204.3中6.4.1规定，集中空调送风按GB/T18204.5 中9.5.1规定。 3.4.4 将装有采样吸收液的离心管置于便携式冷藏箱（3.2.3）中送到现场，开始采样前将采样吸收液（3.4.2）20mL倒入微生物气溶胶采样器（3.2.2）中，然后用吸管加入矿物油（3.3.5）1滴~2滴。 3.4.5 将微生物气溶胶浓缩器（3.2.1）与微生物气溶胶采样器（3.2.2）连接，按照微生物气溶胶浓缩器和微生物气溶胶采样器的流量要求调整主流量和浓缩流量。 3.4.6 按浓缩器和采样器说明书操作，每个气溶胶样品采集空气量1m3~2m3；并记录环境温度、大气压力和总采气体积或采样流量、采样时间。 3.4.7 采集的样品倒入离心管置于便携式冷藏箱中避光保存，4h内送实验室检验。 3.5 样品处理方法与条件 3.5.1 样品的离心浓缩：将采集的气溶胶样品（3. 4.7）于4℃下8000×g离心20min（3.2.4），小心吸取弃去上清，剩余1mL左右沉淀全部转移至1.5mL的透明离心管中，再次4℃下8000×g离心20min，弃去上清，剩余0.5mL沉淀。
医院热水系统中的军团菌及其感染控制
医院热水系统中的军团菌及其感染控制 医院是军团病高发区，而热水系统是军团病的主要菌源，为此，从设计和维护管理的角度，对其感染控制进行了初步地分析与探讨。 关键词：热水系统军团控制 谢思桃1 王冠军1 吴金城2 （1总后勤部建筑设计研究院，北京100036；2北京洁利尼水处理工程有限公司，北 京100016） 摘要: 医院是军团病高发区，而热水系统是军团病的主要菌源，为此，从设计和维护管理的角度，对其感染控制进行了初步地分析与探讨。 关键词: 医院热水系统军团菌感染控制军团病 热水供应为现代化医院所必备，而热水供应设备和供水系统因存在死区、滞留时间及设备管道的腐蚀造成细菌繁殖，调查和化验结果表明，水中细菌开始繁殖，其中主要是产生了对人体极有危害的“军团菌”[1]。国内外相关的一些研究表明军团菌能长期混入医院管道工程系统，侵袭力很强，我们缺乏有效的预防措施，军团病传染的危险性正在加剧，特别是较老的大医院保持较低水温的热水容器军团菌混入率较高。 1 军团菌（病）简介[2] 1976年10月在美国费城召开了一次退伍军人会议，参会者有221人感染了一种当时被媒体称作神秘的病菌，症状为高烧、发冷、头痛、恶心，半数人神志不清及精神错乱。三分之二的感染者住院治疗，大部分获得痊愈，有34人死亡。对此可怕的疾病，美国疾病防治中心（CDC）组织了一批专家，经半年时间研究，耗资200多万美元，发现了致病的杆状嗜肺菌。1977年元月公开了这一重要研究，并定名这种致病菌为“军团菌”，由此引起的疾病叫“军团病”。 军团病是由存在于自然界水及土壤中的军团菌侵入人体所致的疾病。军团菌是常见的细菌，但军团菌的营养要求比较特殊，因而，在水温较低、营养较贫乏的环境水体中，军团菌一般不易繁殖，浓度较低，没有致病危险。虽然军团菌生活在水中，但是人们不会由于饮用了含有军团菌的水而感染。军团菌感染的主要途径是经呼吸道感染。军团菌的菌体微小，人在正常呼吸时，会将空气中含有军团菌的气溶胶同时吸入呼吸道内，致使军团菌有机会侵染肺泡组织和巨噬细胞，引发炎症，导致军团病。气溶胶是军团菌传播、传染的重要载体。供水系统可通过水龙头、淋浴、涡流浴、泡泡浴、人工喷泉等方式形成气溶胶。水龙头和淋浴是医院内军团菌感染的主要气溶胶形成动因。 军团病已成为危害人群健康的一种重要疾病，其对人类健康的威胁已经达到不容忽视的程度，研究报道，其暴发流行期病死率高达30%(15.4%～30.0%)，散发病例病死率最高可达69%；世界范围内
嗜肺军团菌的检测
深圳市空调冷却塔水军团菌污染状况调查 摘要:目的了解深圳市宾馆、大型写字楼、地铁等各类建筑物的空调冷却塔水军团菌污染状况。方法随机采集中央空调冷却塔水样品并进行细菌培养和鉴定，再以聚合酶链式反应（PCR）等方法加以验证。结果共采集水样28件，分离到1株军团菌，经鉴定为嗜肺军团菌Lp1型。结论深圳市中央空调冷却塔存在军团菌的污染，需引起重视，防止军团菌病发生。 关键词:军团菌;嗜肺军团菌;冷却塔;污染状况 Detection of Legionella pneumophila in cooling tower water of central air conditioning system in Shenzhen City.ZHANG Ran，CHEN Gui-bing，SHI Xiao-lu，et al.（Shenzhen Municipal Center for Disease Control and Prevention，Shenzhen518020，Guangdong，P.R.China） Abstract:Objective To investigate the contamination status of cooling water of central air conditioning syatem with Legionella pneumophila in in hotels，buildings and subways in Shenzhen City. Methods Cooling tower water samples from central air condi-tioning system were randomly taken，cultured and then Legionella pneumophilia was isolated.Pobymerase chain reaction（PCR）was used for confirmation of the differentiation. Results Twenty-eight cooling water samples were collected and a strain of Legionella pneumophilia serovar Lp1was isolated. Conclusion The water in cooling tower of central air conditioning system in Shenzhen City has been contaminated with Legionella pneumophilia and measures be taken for preventing infection with Legionella pneumophilia. Key words:Logionella;Leginella pneumophilia;Cooling tower;Contamination status 军团菌是引起军团菌病的一种急性呼吸道传染病的病原体，于1977年在美国首次发现并证实。现已分离到军团菌属（Legionella）共有42个种，64个血清型，其中与人类关系最为密切的是嗜肺军团菌，由它引起的肺炎，如未及时治疗，病死率很高［1］。空调机的冷却塔水、喷水池水、淋浴池和宾馆的养鱼池水，甚至游泳池水均是军团菌其生存定居的小环境，如果该小环境中的微型生物群落结构能与其构成共生关系，军团菌就可以大量繁殖，
军团病的发生和预防
军团病的发生和预防军团病是什么？ 军团病（Legion Fever）听起来有点像电子游戏中的名字，却是现实生活中真实存在的疾病。它是由军团菌引起的一种以肺炎为主要表现的全身性疾病，经空气传播，由呼吸道进入人体后会出现上呼吸道感染及发热的症状，严重者可导致呼吸衰竭和肾衰竭。在1976年8月在美国费城召开的有5000多人参加的军团退伍军人会议上，与会者中突然流行起一种疾病，当时有221人发病，造成34人死亡，该疾病因而被命名为军团病，相应的病原菌也被称为军团菌。 尽管名字并不那么如雷贯耳，但军团病确实算得上是一种常见病，美国发现的病例最多，平均每年有逾2万例，我国于1982年在南京首次报告了军团病病例，随后各省市陆续有报告。目前全球五大洲数十个国家均有散发病例及暴发流行报告，许多国家已经把军团病列为国家法定传染病，制订了一系列相应的规定措施，我国将其列入14种新发传染病之一，世界卫生组织也已将其列入传染病报告范围。 军团菌是一类需氧革兰氏阴性杆菌，和沙门氏菌、志贺氏杆菌、致病大肠杆菌、金黄葡萄球菌等一样，是生活中较为常见的致病菌。军团菌广泛存在与天然淡水环境和人工水体中，目前人们已经发现了超过50种，3个亚群，70个血清型。其中会引起人类肺炎的约有20种，而最常见的一种是嗜肺军团菌（约占全部病例的80%）。
军团菌主要侵犯肺泡和细支气管。当其侵入体内后，首先与中性粒细胞和巨噬细胞黏附，并被吞噬。然而，进入胞质内的军团菌不仅不能被杀灭，反而增生繁殖，导致细胞破裂，细胞内的酶类及细胞毒因子被释放出来，损害肺组织。此外，军团菌还能产生和释放多种毒素引起肺的持续性损伤，并进入血流引起肺外器官和组织的病变。 军团病的症状主要分为三类：肺炎型军团菌病是以肺炎为主要临床表现的军团菌感染，大多数病患都是这一类，肺外综合征即感染从肺部播散至肺外其他系统，还有一种主要表现为急性发热的庞蒂亚克热。其中庞蒂亚克热通常症状较轻，在发展到一定程度后能自动停止、逐渐痊愈，无需特殊治疗。 虽然致死率不算低，但军团病并非无法治疗。治疗军团菌病首选大环内酯类或氟喹诺酮类，四环素类、利福平等也有效，青霉素类、氨基糖甙类、头孢菌素类对本病无明显疗效。同时，维持水和电解质的平衡、呼吸衰竭时人工呼吸器的应用、休克时血管活性药物和其他抗休克措施、急性肾功能衰竭时的透析疗法均为重要治疗措施。 而且军团菌通常不会在人与人之间传播，这对人类而言当然是一个好消息。军团菌通常是存在于空调冷却水等淡水中，以水雾、气溶胶的形式传播，人们是由于呼吸了被军团菌污染的水源散发的水雾而患病。只要做好环境卫生管理，就不必过度担心军团病的威胁。 如何控制军团病流行？
军团菌——潜伏在中央热水系统里的健康杀手
军团菌——潜伏在中央热水系统里的健康杀手！ 为什么说军团菌是中央热水系统中的健康杀手呢？其实军团菌是常见的细菌，它的营养要求比较特殊，在水温较低，营养较贫乏的环境水体中，军团菌一般不易繁殖。因为在这种环境下的军团菌，浓度较低，因此没有致病危险。即使人们饮用了含有军团菌的水也不会被感染。其实军团菌感染的主要途径是经呼吸道感染。而含有军团菌的气溶胶，就是军团菌的传播途径。气溶胶是由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系。在供水系统可通过水龙头，淋浴，涡流浴，泡泡浴，人工喷泉等方式形成气溶胶。因此存在于中央热水系统中的军团菌不容忽视！ 通过相关军团菌的知识我们了解到，军团菌在接近人体温的 35～36℃时最易繁殖，20℃以下不能繁殖，45～50℃以上不繁殖或死亡，70℃则迅速死亡。所以我们可以基本理解为，能够对我们的健康造成危害的军团菌主要来自热水系统。当前感染军团菌的地点分为两大类：一种称为社团军团病，一种称为医院军团病。社团军团病主要的传播途径是冷却塔和空调两种系统，而医院型的传播途径就是供水和热水两种系统。并且自1995年以后，后者的重视程度逐渐超过了前者，换句话说就是，后者对我们的健康造成的威胁远远超过了前者，尤其是在医院热水系统中！ 为什么说医院的热水系统中军团菌的致病率会更高呢？不知道你是否知道这样一个定论：医院是军团病高发区！不管你听说与否，这个定论在国际上都是公认的。通过小编下面的分析你就可以很轻松地明白这一道理了。首先居住在医院里的病人，大多数免疫力比较低，被感染的几率大。其次医院里的供水系统管道垢渣是生物粘膜以及各种细菌，对军团菌的生长提供了极其有利的环境。如果没有相关杀菌消毒设备干预的情况下，综合卫生，安全和经济等因素，医院热水供水温度应控制在 60℃为宜，同时保证系统中锅炉或水加热器的出水温度与配水点的最低水温的温度差，不得大于 10℃。 国外对医院军团病问题较为重视，并进行了大量的调查和研究工作，国内也发现了由于军团菌感染肺炎死亡的实例，但还未引起重视。可喜的是,相关规范已提到了这一问题,并鼓励设计人员积极采取相关措施进行预防和控制。希望在不久的将来，能够有一种水体净化设备，让我们的水环境更加清洁！
军团菌病该如何治疗呢
军团菌病该如何治疗呢 军团杆菌可能大家都不太了解，它是需氧革兰氏阴性杆菌,以嗜肺军团菌最易致病，一旦感染军团菌，将会严重威胁身体健康或者性命。因此一旦感染要注意及时治疗，那么军团菌病怎么治疗呢?一起来了解一下吧。 军团菌病怎样治疗 1、抗菌素治疗 红霉素首选,轻症0.5g1次/6h口服,重症1.5～2g/d静滴。或用新型青霉素0.5g4次/d,连服4天;多黏菌素0.25g1次/12h,以后0.2g1次/日,或0.1g2次/d。疗程7~14天,免疫抑制或病情严重者,氧氟沙星0.4g1次/12h,环丙沙星0.5g1次/12h口服或0.4g1次/12h静滴。抗生素应用,免疫功能低下者应不少于3周,有肺脓肿者应延长至3～4周。 2、利福平 最初3-5天0.6g,2次/d,或连用红霉素有良好疗效。 3、对症治疗 可给予止咳,化痰等药物,有低血压、呼吸衰竭应吸氧并给予呼吸支持,原应用免疫抑制剂者应停用或减量,有肾上腺功能减退,必要时应用激素。 如何预防感染军团菌
军团菌肺炎的预防:医院、旅馆、建筑工地的获得性军团菌肺炎是防治工作中一个重要环节。环境及水源的监控是控制本病发生流行性的关键。要注意定时开窗通风,保持室内空气新鲜,通风时注意病人的保暖,避免冷空气直吹或对流;进入房间或车内打开空调后,最好过一刻钟以后再关闭门窗,这样可以有利于空调中的各种有害物质散发,减少对健康的危害。 军团菌病有哪些临床表现 1、肺炎型 潜伏期一般为2～10天,前驱症状为乏力、头痛、全身肌肉酸痛,于1～2天内突然发热,可达40℃以上,多呈稽留热。病程早期即可出现多系统受累症状。绝大多数患者有咳嗽,起初为干咳,半数患者转成非脓性黏稠痰或略带脓性痰,痰中常含少量血丝,个别可咯血。 少数患者有胸痛,呼吸困难较为多见。肺部可闻及细湿啰音。继之可出现明显肺实变体征。约25%有恶心、呕吐及腹泻等消化道症状,有的腹泻为惟一首发症状。神经症状多见于急性期,包括不同程度意识障碍、肌张力增强或阵颤、步态不稳等,可有暂时性肢体软瘫,无神经系统定位体征。多数病例体温于8～10天下降,肺炎等全身症状随之好转。但重症病例可发生心、肝、肾功能损害,甚至功能衰竭致死,亦可迁延并发肺脓肿等。 2、非肺炎型(庞蒂亚克热) 此型为该病菌感染的轻型,潜伏期为5～66小时,半数为36小时左右。发冷、发热起病,体温一般不超过39.5℃,伴头痛、肌痛等。呼
公共场所嗜肺军团菌污染状况调查分析
公共场所嗜肺军团菌污染状况调查分析 ［摘要］目的应用PCR技术对奉贤地区部分公共场所空调冷却塔水及其他环境（淋浴设施等）进行军团菌污染状况调查。方法于2010年5月和10月，分别采集中央空调冷却塔水样品及环境样品用聚合酶链（PCR）对其进行嗜肺军团菌检测，同时用常规法进行分型鉴定。结果采集的125份样品中，PCR法检出嗜肺军团菌45份，阳性检出率为36%，水样检出率远高于环境（分别为67.19%和3.28%）。在检出的59株军团菌中共鉴定出6种不同菌型，其中LP1为重点菌型，占50.85%。且在同一样品中检出不同菌型有2株以上的占35.29%。结论奉贤地区中央空调冷却塔及环境中存在军团菌污染，需引起重视，以防止军团菌所致的疾病暴发或流行。 军团菌是一种革兰阴性杆菌，能引起急性呼吸道传染病[1]，军团菌已被发现存在40个种，60多个血清型。经流行病学调查研究，这种细菌存在于各种自然界水源以及空调水管道，供水系统等人工水源中，在引进空调冷却塔做冷却水时，随空调器把细菌散布于室内空气中，被人吸入而引发肺炎。 我国自1982年南京首次证实军团菌病例以来已有多起军团菌爆发流行［2］，上海在近几年内也从患者和环境中分离到军团菌［3］。而上海地区健康人血清抗体水平调查也证明军团菌早已存在，并对人群构成潜在威胁［4］。近年来从军团菌的流行可以看出军团菌对人类健康的威胁已达到不容忽视的程度，因此对该病的研究也越来越受到人们的重视。 目前用于军团菌检测的常规培养约7～10d，不仅花费大量时间和精力，还具有敏感性、特异性差的缺点，且操作复杂，易造成漏检和误检。分子生物学技术的发展为军团菌检测提供了新的契机，该课题应用聚合酶链（PCR）技术，检测环境中的军团菌，以分析奉贤地区军团菌的污染状况。 1．材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验菌株大肠埃希菌（A TCC25922）、肠炎沙门菌（ATCC13076）均购于美国典型微生物菌种中心保藏中心提供标准菌株。米克达德军团菌、杜莫夫军团菌由市疾控中心提供。 1.1.2 样品来源2010年分别在5月和10月以单纯随机抽样方式选取奉贤地区具有集中式中央空调设备的各大型超市，酒店共10家。以无菌方式采集空调冷却塔水于无菌广口瓶中，每件约200 ml（根据《公共场所集中空调通风系统卫生规范》），共采集64件。以沾湿生理盐水的棉签反复涂抹空调出风口以及酒店浴室莲蓬头出水口表面，剪去棉签接触手部位，将棉签置5 ml生理盐水中，共采集61件，采样后即送实验室检验。 1.1.3 培养基GVPC平板由柯玛嘉公司提供，血琼脂平板，各反应试剂由上海市疾病预防控制中心提供，均在有效期内使用。 1.1.4 诊断血清军团菌诊断血清由上海市疾病预防控制中心提供,均在有效期内使用。1.1.5 PCR扩增仪Techne Flexigene；全自动数码凝胶成像系统Tanon GIS-2010。 1.1.6 PCR试剂盒嗜肺军团菌（LP）PCR检测试剂由上海健益生物科技有限公司提供。 1.2 方法 1.2.1 分离培养鉴定样品经负压过滤后,剪碎放入蒸馏水中,混合振荡后吸取1毫升进行酸处理,静置5分钟后同时接种GVPC平板和血平板.36℃，5%CO2培养72 h后进行鉴定[5]。 1.2.2 PCR检测方法样品经负压过滤后,剪碎放入5 ml蒸馏水中，混合后取500 μl,12 000 rpm/min离心5 min,弃上清液，加100 μl DNA提取液入沉淀中，振荡混匀，置100℃水浴加热10 min,12 000 rpm/min离心5 min，保留上清液待用。取4 μl上清液加入26 μl PCR反应液中,同时做阳性对照。振荡混匀，将PCR反应管放入PCR扩增仪中。首先预变性94℃5 m
军团菌检测
军团菌检测方法 一、军团菌简介 军团菌是一种环境感染性致病菌，可引起急性呼吸道传染病，即军团菌病。军团菌分布极其广泛，医院、酒店等的供水系统、空调的冷却系统等各种水源均易于滋生、污染军团菌，并造成军团菌病传染的风险。即与水有关的地方均可能存在军团菌。军团菌传播、感染有以下特点： 1、透过空气、水份感染，传播带季节性，超过50％病例在夏季发生。 2、滋生在医院、酒店的供水系统，通过过水龙头、浴室传播。 3、可通过空调的冷却系统，由通风口传播并感染对象。 军团菌属革兰氏阴性杆菌，专性需氧，无芽孢，无荚膜，军团菌需要半胱氨酸和铁，无半胱氨酸时，军团菌无法生长。生化特征还有不发酵也不氧化糖类，不还原硝酸盐，氧化酶实验阴性或弱阳性，尿素酶阴性，军团菌生长的最适pH为6.9-7.0，2％－5％CO2能促进部分菌株的生长。军团菌生长缓慢，易于被其它菌落覆盖。军团菌的菌落颜色多样，通常呈白色、灰色、蓝色或紫色，也能显深褐色、灰绿色、深红色。菌落整齐，表面光滑，在紫外灯下，有荧光。军团菌属有41个种，61个血清型。侵肺军团菌（Legionella pneumophila, LP）有15个血清型，是引起军团菌病的主要菌型（占80%以上）。军团菌病是一种急性呼吸道传染病，临床类型目前至少有肺炎型与庞蒂阿克热型。本病主要为呼吸道飞沫(气溶胶)传播。目前尚无证据表明感染者、病人或感染动物作为本病的传染源，通常把传染本菌的水源(天然水、人工管道水源、冷却塔、冷热管道系统水等)作为传染源。 二、军团菌的检测方法——ISO11731:1998 1．范围 本标准描述了一种用于军团菌分离和估计环境样品中军团菌数量的培养方法。 该方法适用于所有环境样本，包括饮用水、工业用水和天然水以及沉淀物、沉积物和粘土/软泥等相关样本。 2．培养基和试剂 2.1 BCYE培养基(也可用硝酸铁琼脂代替) 2.2 BCYE-Cys(不含L-半胱氨酸) 2.3 GVPC培养基 2.4酸处理缓冲液 3．取样 3.1取样容器 水样可采用玻璃、聚乙烯或类似容器。以前用过的容器应该清洗干净、扣干水分，121℃高压灭菌15min。如果容器不能经受高压灭菌，应在高于70℃的流动热水或流动蒸汽中处理至少5min。 3.2含生物防腐剂的样品 如果水样中含有或被认为含有氧化型生物防腐剂，应在取样时或取样前加入非活性试剂加以中和。如果水样中含有消毒剂，需在采样前或采样后加入中和剂，含氯或氧化型消毒剂可用硫代硫酸钠或硫代硫酸钾作中和剂。 原则上讲，实验室接到水样后应尽快进行微生物学分析，最好是取样当天，尤其对于已知含生物防腐剂的样品。因此，建议从样品采集到制备好浓缩样的间隔最好为2d，不应超过5d，最长不超过14d。 3.3样品运输 样品应在6-18℃条件下被运输，应避免热和光照，最好在1d内，不超过2d将样品送到指定实验室。