仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
仔猪致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验
程子兵1 董春霞2石国界3沙里塔那4 马长丽1
（1. 塔城地区动物疾控与诊断中心新疆塔城834700；2. 重庆市武隆县畜牧兽医局重庆市武隆县408500；3. 塔城市畜牧兽医工作站新疆塔城834700；4. 额敏县兽医工作站新疆额敏县834600）
摘要:对塔城地区一农户饲养猪群中仔猪发生的临床症状以水肿病、白痢、黄痢为特征的病例进行了样品采集，后经麦康凯、伊红美蓝分离培养，糖发酵生化试验、动物试验等结果显示均为大肠杆菌，同时通过药敏试验筛选出敏感抗生素。
关键词：仔猪；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验
Abstract：Specimens with dropsy and dysentery clinical symptoms were isolated from one household raises pig group in Tacheng area. By bacteria culture, biochemical test and animal test, the results indicate the bacterium is pathogenic Escherichia Coli. Meanwhile, we ascertain sensitive antibiotics to this E coli by medicine test.
Key words:pig; Escherichia Coli; isolate indentify; medicine test
仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的肠道传染病，主要表现为仔猪白痢、黄痢和水肿病，其中黄痢多发生于1周内哺乳仔猪，病猪主要表现为排黄色糊状粪便；白痢多发于10～30日龄，病猪主要表现为排乳白色或灰白色腥臭糊状粪便；水肿病多发于断奶仔猪，主要有神经症状、胃壁、肠黏膜等组织水肿，四季均可发生，发病率和致死率
高低不等，严重者同窝仔猪中发病率可达90％以上，致死率可达100％，幸存者则影响生长，甚至成为僵猪【l】。由于致病性大肠杆菌的血清型复杂，在不同猪场、不同季节、不同批次，不同年龄流行菌株均可能不相同，造成规模化猪场的防控困难，引起较大的经济损失[2]。笔者对塔城地区农户散养猪群中采集的仔猪白痢、黄痢和仔猪水肿病的病料进行了细菌分离培养、鉴定及药敏试验。现将结果报告如下：
1 材料与方法
1．1 材料
1.1.1 采取农民散养户中临床症状较为典型的5份仔猪白痢、黄痢肛门拭子及仔猪水肿病的小肠黏膜2份。
1.1.2 培养剂、普通肉汤、血清琼脂平板由本实验室自行配制，麦康凯琼脂（MCK）、伊红美蓝琼脂（EMB）按参考文献[3]制备；三糖铁琼脂培养基、三糖铁琼脂斜面、MR、V—P、Idole、H2S、枸橼酸盐琼脂斜面、葡萄糖微量生化反应管、乳糖微量生化反应管、麦芽糖微量生化反应管、甘露醇微量生化反应管购自杭州微生物试剂有限公司，10种药敏试纸购自北京天坛生物技术有限公司。
1.1.3 实验动物 12只小白鼠。
1.1.4 药敏试验抗生素药敏纸片青霉素（PG）、丁胺卡那霉素（AKN）、头孢噻肟（CTX）、复合磺胺（SXT）、庆大霉素（GEN）、妥布霉（TOB）、苯唑青霉素（OXA）、头孢唑啉（CFZ）、头孢三嗪（CRO）、氟派酸（NOR）。
1.2 方法
1.2.1 细菌分离培养与镜检
将待检样品接种于普通肉汤进行细菌培养，置37℃温箱培养12～16h观察结果；然后将培养物分别划线接种于麦康凯琼脂平板和伊红美蓝琼脂平板进行细菌培养，37℃温箱培养20-24h后挑取平板上可疑菌落抹片革兰氏染色镜检。
1.2.2 生化试验
生化鉴定挑取经纯培养的菌落分别接种于三糖铁琼脂斜面、MR、V—P、Idole、H2S、枸橼酸盐琼脂斜面和葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇等发酵管，37℃培养24 h。
1.2.3 致病性试验
将分离菌的肉汤纯培养物对10只健康小白鼠分别腹腔注射0.4～0.5 mL，另2只小白鼠腹腔注射0.4～0.5 mL无菌肉汤培养液作为对照，24～48 h 死亡或发病者取肝脏抹片革兰氏染色镜检。
1.2.4 药敏试验
采用药敏纸片扩散法[4],37 ℃培养18～24 h 后观察结果并测量抑菌圈。
2 结果
2.1 分离培养疑似培养物在麦康凯琼脂培养20h后均为红色菌落，在伊红美蓝琼脂上培养20h后为中心暗蓝黑色并有绿色金属闪光的菌落；革兰氏染色镜检均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
2.2 生化反应从7份样品中分离的细菌经生化鉴定后，确定均为大
肠埃希氏菌，具体结果见表1：
表1：大肠杆菌生化鉴定结果
2.3 致病性结果将分离菌的肉汤纯培养物对12只健康小白鼠分别
腹腔注射0.4～0.5 mL，另2只小白鼠为对照，24～36 h内死亡6只,48 h后死亡2只,另2只发病, 对照鼠不发病。取发病者肝脏抹片革兰氏染色镜检，结果均为革兰氏阴性中等大小杆菌。
2.4 药敏试验
药敏试验结果见表2。
表2 大肠杆菌抑菌圈直径测量结果
3 小结与讨论
3.1 鉴定结果
根据培养特性、形态、生化试验、致病性试验鉴定结果表明此细菌分离株为致病性大肠杆菌。
3.2 动物试验结果
根据动物试验结果，显示分离株毒力较强，为致病性大肠杆菌，可使小鼠发病率达100%，致死率达80%。
3. 3 治疗药敏试验结果
当前大多猪场致病性大肠杆菌对许多药物具有不同程度的耐药性，这可能与猪饲料中长期使用某些抗菌药物及滥用抗生素有关，因
此，使用药物治疗大肠杆菌病时，应根据药敏试验结果，选择敏感药物，且应注意交替使用。从本次药敏试验结果可以看出，分离的大肠杆菌对青霉素（PG）、头孢噻肟（CTX）、复合磺胺（SXT ）、苯唑青霉素（OXA）等不敏感；对庆大霉素（GEN）、妥布霉（TOB）、头孢唑啉（CFZ）等中敏；而对头孢三嗪（CRO）、丁胺卡那霉素（AKN）、氟派酸（NOR）高敏。因此，应该避免盲目使用抗生素,在治疗时采用广谱抗菌药与特效抗生素结合对症治疗，才能使病情得以控制，防止产生耐药性和错过治疗时机。
3.4 防治
大肠杆菌分布广泛，也是动物肠道内的正常寄居菌，当肠道内环境发生变化时,附着在肠黏膜上并大量繁殖,产生许多对宿主有害的
毒性物质，如肠毒素、内毒素及其他有害产物引起动物发病。特别是初生仔猪十分易感，常发生严重腹泻和败血症，严重影响生长和造成死亡，给养猪业带来严重的损失。而防控仔猪大肠杆菌病方面，结合多年的临床工作经验，笔者认为应该重点考虑以下三点：（1）加强饲养管理应从疫苗、药物预防、温度、湿度、饲料配方、环境卫生、消毒、饮水、饲养密度等方面采取综合的生物安全措施，做到预防为主。
（2）从源头上采取措施坚持自繁自养的原则，不从疫情不明的猪场引进种猪；做好母猪分娩前后的环境清扫和消毒工作，尽快让仔猪吸吮到初乳，使仔猪迅速获得初乳抗体，以增强抵抗力。
（3）药物防治需慎重不要盲目的长期大剂量使用某种药物，
以免造成耐药菌株的出现。且由于大肠杆菌易产生耐药性，临床用药时建议以药敏试验结果为依据，有指导性的、科学的使用抗生素。这样不但能够克服了用药的盲目性，而且可大大缩短疫病治愈的时间，节约生产成本。
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社,1992:25- 26.
仔猪大肠杆菌病的诊断与防治
仔猪大肠杆菌病是由大肠杆菌引起的一种急性高度致死性传染病.本病最常发生于初生7日龄以内的哺乳仔猪,因哺乳仔猪下痢,机体迅速脱水,导致全身衰弱而死亡.另外,本病还见于断乳仔猪,使断乳仔猪拉白痢.现将本病的诊治情况报道如下。 1发病情况 2003年3月西藏林芝地区八一镇某养猪场发现有1头6日龄哺乳仔猪拉黄痢，1头断乳仔猪拉白痢。随后又相继有3窝哺乳仔猪拉黄痢和2窝断乳仔猪拉白痢,在2d时间里，哺乳仔猪因黄痢先后死亡5头,断乳仔猪因白痢死亡1头。 2临床症状 哺乳仔猪出现腹泻症状,初期拉黄色糊状粪便,其中混有乳凝块,并沾污尾、后肢等处,后期水样腹泻.病畜表现为精神沉郁、不愿行走、不合群、吃乳减退或停止,消瘦、脱水、衰竭、昏迷而死亡。断乳仔猪拉灰白色糊状粪便,表现为精神沉郁、被毛粗糙无光、拱背、不愿行走、消瘦而死亡。 3病理变化 剖检自然病死哺乳仔猪,可见肠道臌气、充满黄色液状内容物，肠粘膜有充血、出血，肠壁变薄、松弛,肠系膜淋巴结充血、并有弥漫性的小出血点、切面多汁；胃粘膜红肿，肝、肾有小点坏死。断乳仔猪肠系膜毛细血管瘀血,肠道内充满灰白色糊状内容物。 4实验室检查 4.1触片镜检取自然病死的哺乳仔猪和断乳仔猪的心血、肺、肝、脾、肾分别涂片或触片,革兰氏染色，镜检均发现有革兰氏阴性无芽胞的卵圆形的短小杆菌，用显微镜测微尺测其大小为(1μm～3μm)×(0.4μm～0.7μm）。 4.2分离培养取自然病死的哺乳仔猪和断乳仔猪的心血、肺、肝、脾、肾分别接种普通营养琼脂培养基,37℃培养24h,形成圆形、隆起、光滑、湿润、无色的菌落,直径约为2～3mm。取菌落涂片、革兰氏染色，镜检其形态与病料中一致。 4.3生化试验取分离菌株的纯培养物接种生化培养基（半固体为穿刺接种）,每种生化培养基接种3支，另设有对照管，将试验管与对照管同时放入37℃培养，每日观察至14d.可见分离菌株发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露糖、果糖、木糖、树胶醛糖、山梨醇、甘露醇、蕈糖产酸,三糖铁琼脂斜面变黄；不发酵蔗糖和肌醇；赖氨酸脱羧酶和苯丙氨酸脱氨酶试验阴性；甲基红、硝酸盐、吲哚试验为阳性；H2S、V-P、柠檬酸盐和尿素酶试验为阴性。 4.4动物接种试验选健康仔兔5只,随机分成2组。第1组3只仔兔为试验组，每只仔兔臀部肌肉接种分离菌株18h的肉汤纯培养物1mL.第2组2只仔兔作对照,每只臀部肌肉注射肉汤1mL。第1组3只仔兔于接种后18～24h死亡,剖检3只病死仔兔均有相同的病理变化.取其心血、肝、脾、肾、肺做涂片、触片和分离培养，均能回收到与自然死亡仔猪相同的细菌。第2组2只仔兔观察至24d仍然健活。 4.5血清学试验从自然病死哺乳仔猪和断乳仔猪中分离菌株的纯培养物,送中国兽医药品监察所鉴定,其大肠杆菌的血清型为09、078。 4.6药敏试验将分离菌株的纯培养物接种肉汤,培养18～20h取出,镜检无杂菌，在每个琼脂平板上放入菌液0.2mL,用灭菌“L”棒将菌液均匀涂抹在乎板上，待30min后,放入“套装新药敏纸片”（上海伊华医学科技有限生产),每种药敏片重复1次,置37℃培养24h。其抑菌结果（测量抑菌圈直径,取平均值,单位mm）:复方磺胺(SXT）35有反弹现象,头孢哌酮(CPP）29、妥布霉素（TOB）28.5、头孢唑啉（CPZ）27.5、庆大霉素（GEN）26、羧苄青霉素(CAR)24、头孢噻肟（CTX）23.5、链霉素（STR）23、丁胺卡那霉素（AKN）21.5、卡那霉素（KAN）21.2、利福平（RIP）20、四环素(TET)20有反弹现象、万古霉素(VAN)20、氨苄青霉素(AMP)19.9、
药理学设计性实验
药理学设计性实验 药理学实验设计 1( 实验项目名称:奥美拉唑对抗利血平引起的胃溃疡作用 2.国外研究现状:胃溃疡是临床常见病，为研究其发病和治疗机制，国内外业已建立起多种胃溃疡小鼠动物模型，有的模型在中医药研究中亦被广泛引用。但研究中存在的突出。奥美拉唑对小鼠水浸应激性溃疡的形成具有很强的抑制作用，表现为溃疡数和溃疡发生率下降，且呈量效关系。 国外临床研究表明，奥美拉唑钠对胃溃疡的疗效明显优于H+受体拮抗剂，表现为起效快，症状消失迅速，用H+受体拮抗剂无效的患者改用本药可得到满意的疗效。 3.实验原理 :利血平是肾上腺素能神经元阻断性抗高血压药。用药后交感神经系统的功能受到遏制，副交感神经系统的功能相对占优势，结果出现利血平的副作用，引发溃疡，因此在本实验中引用利血平制作小白鼠的胃溃疡模型。 奥美拉唑选择性性地作用于胃粘膜壁细胞，抑制处于胃壁细胞顶端膜构成的分泌性微管和胞浆内的管状泡上的H+-K+-ATP酶的活性，从而有效地抑制胃酸的分泌，起效迅速，适用于胃及十二指肠溃疡，返流性食管炎和胃泌素瘤。由于H+、K+-ATP酶是壁细胞泌酸的最后一个过程，故本品抑酸能力强大，有强而持久的抑制基础胃酸及食物、五肽胃酸泌素所致的胃酸分泌的作用。它不仅能非竞争性抑制促胃液素、组胺、胆碱及食物、刺激迷走神经等引起的胃酸分泌，而且能抑制不受胆碱或H2受体阻断剂影响的部分基础胃酸分泌，对H2受体拮抗剂不能抑制的由二丁基环腺苷酸(DcAMP)刺激引起的胃酸分泌也有强而持久的抑制作用。显效快，可逆，且无H2受体拮抗剂诱发精神方面的副作用。本品对胃蛋白酶分泌也有抑制作用，对胃黏膜血流量改变不明显，也不影响体温、胃腔温度、动脉血压、静脉血
药理学综合设计性实验汇编
药理学综合设计性实验 实验一氯丙嗪的降温作用（设计性实验，4学时） 实验简介：本实验使学生掌握实验设计的基础理论和方法（包括动物选择、实验分组、对照原则、处理因素的标准化等多方面知识），并通过观察氯丙嗪的降温作用，掌握其降温特点，联系临床应用。 实验辅导：至少双人辅导 【实验目的】掌握实验设计的基础理论，通过观察氯丙嗪的降温作用，掌握其降温特点，联系临床应用。 【实验器材】小鼠、注射器、体温计、冰箱、氯丙嗪等。 【实验过程】 一、首先介绍实验设计的基础理论 （一）实验设计是科学研究计划中关于研究方法与步骤的一项内容，是实验研究所涉及的各项基本问题的合理安排。严密合理的实验设计是顺利进行研究工作的保证，同时也能最大限度地减少实验误差以获得精确可靠的实验结论，甚至可以使研究工作事半功倍。 药理学实验设计的三大要素，即处理因素、实验对象与实验效应。 1.处理因素 (1)处理因素实验中根据研究目的确定的由实验者人为施加给受试对象的因素称为处理因素，如药物、某种手术等。 一次实验涉及的因素不宜过多，否则会使分组增多，受试对象的例数增多，在实际工作中难以控制。但处理因素过少，又难以提高实验的广度和深度。 (2)明确非处理因素：非处理因素虽然不是我们的研究因素，但其中有些因素可能会影响实验结果，产生混杂效应，所以这些非处理因素又称混杂因素。设计时明确了这些非处理因素，才能设法消除它们的干扰作用。 (3)处理因素的标准化：处理因素在整个实验过程中应做到标准化，即保持不变，否则会影响实验结果的评价。如实验设计中处理因素是药物时，则药物的剂型、给药途径、质量(成分、出厂批号等)必须保持不变。 2.实验对象 实验对象的选择十分重要，对实验结果有着极为重要的影响。药理学实验主要实验对象包括整体动物(正常动物、麻醉动物和病理模型)、离体器官、组织及细胞等。 3.实验效应 实验效应是指受试对象在处理因素作用后呈现的反应或受到的影响，其具体表现形式是指标。这些指标包括计数指标(或定性指标)和计量指标(或定量指标)等。指标的选定需符合特异性、客观性、重复性、灵敏性、精确性、可行性等原则。 (二)药理学实验设计的基本原则 为了提高研究效率，控制误差和偏倚，药理学实验设计同其它科学研究一样必须遵循三大基本原则，即对照、随机和重复原则。 1.对照原则 对照是比较的前提。在生物学实验中存在许多影响因素，为消除无关因素对实验结果的
大肠杆菌分离鉴定及药敏实验方案
鸡致病性大肠杆菌的分离培养及药敏实验 实验基本步骤：样品→肝、脾触片革兰氏染色镜检→普通琼脂平板、麦康凯琼脂平板分离培养→革兰氏染色镜检、生化实验鉴定→普通肉汤培养基增殖培养→药敏实验。 1 病料采集 1.1 准备材料：试管、载玻片、手术刀、手术剪、结扎绳、记号笔、冰块、泡沫箱、口罩、手套（该灭菌的都进行高压蒸汽灭菌）、冰箱。 1.2 取材部位：血液、肝脏、脾脏、肠内容物，若有鸡胚感染则去鸡胚及卵黄物。 1.3 操作方法：将病死鸡浸泡在消毒剂溶液中，打开腹腔，无菌采集肝脏、脾脏放于事先准备好的灭菌试管内，将带有肠内容物的肠管两端结扎放于灭菌是试管内。将有明显病变的脏器入肝、脾进行触片，做好标记。都贴上标签，标示采集样品，来源地，采集时间，采集人。将装有病料的试管放在放有冰袋的泡沫箱中，及时返回实验室，置于4℃冰箱待检。 2 菌的分离培养及鉴定 2.1 准备材料：光学显微镜、革兰氏染色液、载玻片、手术刀、接种环、平皿、恒温箱、高压锅、摇床、酒精灯、葡萄糖、甘露醇、乳糖、蔗糖等微量生化发酵管，蛋白胨水（蛋白胨(或胰蛋白胨)20g、氯化钠5g、蒸馏水1000mL pH7.4），葡萄糖蛋白胨水溶液（每100 mL蛋白胨水中加入葡萄糖1g）、甲基红试剂、吲哚试剂、乙醚、VP指示剂、超净台。 培养基： A. 普通琼脂培养基（牛肉粉 3g、蛋白胨 10g、氯化钠 5g、琼脂 20g、蒸馏水1000ml，ph7.3±0.1）， B. 麦康凯琼脂培养基（蛋白胨20g、牛胆盐5g、氯化钠5g、琼脂15g，乳糖10g、结晶紫0.001g、中性红0.025g，ph7.2±0.2。）， C. 营养肉汤培养基（牛肉粉 3g、蛋白胨 10g、氯化钠 5g、蒸馏水1000ml，ph7.2±0.2）。 2．2 样品触片镜检 涂片镜检：取触片,进行革兰氏染色镜检。 2.2.1在玻片上滴加草酸铵结晶紫染色液，作用1min，水洗。 2.2.2 加革兰氏碘液于玻片上媒染，作用1min，水洗。
大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案
大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案 实验原理： 1、大肠杆菌的性质： 大肠杆菌是G--无芽孢直杆菌，在大多数培养基上表现出不同的特性。在麦康凯琼脂平板上是凸起光滑湿润的粉红菌落，革兰氏染色镜检为红色短杆菌。三糖铁琼脂上的反应为斜面和底部都变黄，产气，不产生硫化氢。生化特性为发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖。MR试验，吲哚试验为阳性，VP试验为阴性，不产生H2S，不能利用枸椽酸盐。半固体中沿穿刺线向四周生长。 2、沙门氏杆菌的性质： 沙门氏杆菌是G-直杆菌。在麦康凯平板上为细小半透明、圆形、无色小菌落，三糖铁斜面下层变黄色，上层仍为红色，穿刺处为变黑产生H2S。能发酵葡萄糖产酸产气，能利用枸椽酸盐，不发酵乳糖不利用蔗糖肌醇，MR阳性，VP阴性，不产吲哚，不分解尿素。 实验材料： 含有大肠杆菌和沙门氏菌的猪肝脏、培养基（琼脂平板培养基、三糖铁琼脂斜面培养基、麦康凯琼脂、生化培养基、SC）、器械（剪刀、记号笔、接种环、酒精灯、显微镜、试管、玻片、培养皿）、药品（消毒酒精、结晶紫、碘液、酸酒精、品红、松柏油） 实验内容及操作程序： 一、培养基制备： 制备普通琼脂培养基、麦康凯平板、SC增菌培养基、生化培养基，制备方法见附1.二、标本制备： （1）取新鲜猪肝脏一小块，火焰表面消毒。 （2）用浸过消毒液的剪刀剪开一个小口于消过毒的猪肝脏。 （3）用接种环在剪开的肝脏小口沾取肝脏液，分别画线于麦康凯培养基和接种于SC中，37°C恒温培养24小时。 三、细菌分离培养： （1）取出培养了24小时的麦康凯平板。挑选麦康凯平板上的凸起光滑湿润的粉红菌落染色镜检，看是否为红色短杆菌，若是，即疑似为大肠杆菌，则取其接种于另一麦康凯平板，37°C 恒温培养24小时。 （2）取出培养了24小时的SC增菌培养基，染色镜检，看是否有疑似沙门氏菌，有则取其中细菌画线接种于麦康凯平板上，37°C恒温培养24小时。 四、细菌的鉴定纯化： （1）检查疑似大肠杆菌的培养基是否长满了粉红色菌落，染色镜检。并取其分别接种于生化培养基上（葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、肌醇、枸椽酸盐、尿素、MR、VP、H2S），并做穿刺实验于三糖铁上。37°C恒温培养24小时后观察结果。若实验结果满足预期效果，则可判定为大肠杆菌，则将其接种于普通琼脂培养基上传代培养。 （2）检查疑似沙门氏菌的平板上是否长满细菌，染色镜检，看是否满足于沙门氏菌的染色特性。并取其接种于生化培养基上，并作穿刺实验于三糖铁上，37°C恒温培养24小时后观察结果，若结果满足于沙门氏菌的生化特性，则可判定为沙门氏菌，则将其接种于普通琼脂培养基上传代培养。
药理学设计性实验
药理学设计性实验 实验一、石菖蒲的镇静作用 【目的】 1、应用小动物自主活动学习镇静药物的实验方法。 2、应用小动物自主活动仪，研究地西泮、石菖蒲对小鼠自发活动的影响。 【原理】小动物自主活动仪的原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生改变，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动，通过记录器记录动物活动次数。 地西泮是镇静催眠的代表药。石菖蒲具有宁心安神作用，其挥发油对中枢有广泛的抑制作用。本实验以小鼠自发活动次数为指标，观察药物的镇静作用。 【动物】小鼠6只，实验前禁食12h。 【药品】0.05%地西泮溶液，石菖蒲水煎液，生理盐水 【主要器材】动物自主活动仪1台，电子称1台，1ml注射器2支，烧杯2杯。 【方法】将6只动物随机分为甲乙丙组，甲组灌胃生理盐水，乙组灌胃石菖蒲水煎液（连续两天），丙组灌胃地西泮1次，0.2ml/10。给药后1小时各组动物放入小动物自主仪，先适应2分钟，再记录5分钟内小鼠自主活动次数。 【结果】地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响。（结果见表1） 表1 地西泮、石菖蒲对小鼠自主活动的影响 组别动物数自主活动次数 生理盐水组 地西泮组 石菖蒲组 【注意事项】1、实验室要尽量保持安静，以免惊动动物使自主活动次数增多。 2、实验室温度应在20-25℃之间。 参考文献： [1] 胡锦官，顾健，王志旺.石菖蒲及其有效成分对神经系统作用的药理研究[J].中药药药理与临床.1999.15（30：19 [2] 刘新民.石菖蒲的研究现状[J].中医药研究.1992.（4）：57 [3] 吴启端，吴清和，石菖蒲的药理学研究进展[J].2006,17（6）:477-480 实验二、石菖蒲对记忆障碍小鼠模型的改善作用 【目的】 1、学习小鼠跳台原理和操作，正确运用跳台实验仪器对小鼠进行学习记忆能力行为学测试。 2、观察石菖蒲对小鼠记忆获得障碍的疗效作用。 【原理】鼠跳台实验装置由DT-200小鼠跳台测试箱和DT-200小鼠跳台测试仪组成。测试箱由6个小房间构成，一次可同时试验6只动物，每个小房间有一橡皮台，箱底是可通电的铜栅，在训练期通电小鼠跳下平台在箱底不断被电击，这个过程中小鼠获得记忆，24 h后测试时观察小鼠第一次跳下平台的时间和5 min内跳下平台的次数，比较各组老鼠记忆保持的能力。 戊巴比妥钠能造成小鼠学习记忆障碍。石菖蒲具有开窍醒神，宁心安神的作用，能够促进学习记忆。本实验以小鼠跳下潜伏期及5min内错误次数作为指标，观察药物对小鼠学习
仔猪大肠杆菌病的病因及防治
2019年第3期 吉林畜牧兽医23 ·养猪专栏· YangZhu ZhuanLan 仔猪大肠杆菌病的病因及防治 桂 淦 安徽省合肥市畜牧水产技术推广中心，安徽合肥 230601 摘 要：仔猪大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌引起的一种仔猪肠道传染病，猪肠道菌群失调、大肠杆菌过量繁殖是本病的重要病因。春夏之交，气候多变的季节，疾病多发。仔猪最常见的大肠杆菌病包括仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病三种。在防治上要加强饲养管理，多观察检查猪群状况，发现病猪，及早采取隔离治疗等综合措施。关键词：仔猪；大肠杆菌病；病因；防治 猪大肠杆菌病是一种由致病性大肠杆菌所引起的导致仔猪患肠道疾病的传染病，大肠杆菌病主要包括猪黄痢病、仔猪的白痢病以及仔猪的水肿病等三种，这三种疾病在临床上的表现形式主要是肠炎和肠毒血症，猪的大肠杆菌病是一种在全世界范围内都普遍存在的疾病，也是在仔猪中最为常见的一种传染病，对于养殖用户来说其带来的经济损失是难以估量的。1 病原大肠杆菌在人以及动物的肠道内是一种普遍存在的常驻菌，大多数的大肠杆菌对于人体或者动物来说并不具备致病性，但是其中有一部分血清型的大肠杆菌为病原菌，大多数大肠杆菌为条件致病菌，能产生和携带肠毒素（LT.ST、SLT)、定居因子（CFA-I、CFA-Ⅱ）、K 抗原或类似物质以及带有性菌毛和分泌内毒素。对于这些致病性的大肠杆菌来说是一种非常容易引发仔猪消化道疾病的，并且在动物体内大多数会产生毒素，从而导致仔猪患病。通常这类大肠杆菌会产生比较多种类的毒素，比如说内毒素、肠毒素和水肿毒素以及神经性毒素。其中肠毒素是引发腹泻的主要原因，大肠杆菌产生两种肠毒素，一种是热敏性肠毒素，另一种是热稳定性肠毒素，其他的毒素，水肿毒素以及神经毒素则会引发仔猪的水肿病。2 流行特点以及病因分析大肠杆菌病的病原体是患病的猪以及细菌的携带猪，可以通过粪便的排出，污染猪舍喂食的水以及饲料，甚至是母猪的乳头以及皮肤等，当母猪哺乳、仔猪进行舔舐或者是在饮食过程中病菌会进入到仔猪体内。因为大肠杆菌在家畜的肠道中是一种常驻菌，所以在被污染的地面、饮水、饲料中会广泛的存在，仔猪通过饮食、吃奶等导致消化道感染[1]。 仔猪的黄痢病以及白痢病并没有很明显的季节性，一旦猪场中发生过黄痢病，就会出现经久不断的情况。比较容易发病的时间是在产仔比 较多的时候，炎热的夏天以及寒冷的冬天发病的概率也会增加，同时在雨水比较多的天气，由于天气潮湿通常会导致该疾病的病情严重，仔猪采用分散饲养时该病发病的可能性比较小。一般在每年的四月份和九月份，仔猪的水肿病比较常见。对于幼龄的仔猪来说其身体机能还没有发育完全，本身对于病毒的免疫能力就比较弱，尤其是在出生阶段到断乳的时候，如黄痢病在新生猪24 h 内最容易感染，白痢病一般发生在10～30日龄的仔猪上，而水肿病一般发生在刚断奶的1～2周之内。 引发疾病发生的原因是复杂的，通常和饲料以及猪舍的卫生管理等方面有很大的关系。比如在每年的冬春季节，气温的变化比较明显，并且有时雨水比较多，导致生活环境比较潮湿，如果在这个时候没有做好及时的保温处理，会导致母 乳缺失现象，仔猪发病的概率比较大。如果在一 窝中有一只猪患病，则其它的猪发病的概率会大 大增加。猪圈被污染，没有进行良好的消毒，饲料的质量不达标等都会导致该病的发生。 (下转第25页）
大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定方案
实验原理： 1、大肠杆菌的性质: 大肠杆菌是G无芽抱直杆菌，在大多数培养基上表现出不同的特性。在麦康凯琼脂平板上是凸起光滑湿润的粉红菌落，革兰氏染色镜检为红色短杆菌。三糖铁琼脂上的反应为斜面和底部都变黄，产气，不产生硫化氢。生化特性为发酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麦芽糖，不发酵蔗糖。MR试验，口引噪试验为阳性，VP试验为阴性，不产生H 2S,不能利用xx酸盐。 半固体中沿穿刺线向四周生长。 2、沙门氏杆菌的性质： -沙门氏杆菌是G直杆菌。在麦康凯平板上为细小半透明、圆形、无色小菌落，三糖铁斜面下层变黄色，上层仍为红色，穿刺处为变黑产生H 2S。能发酵葡萄糖产酸产气，能利用枸椽酸盐，不发酵乳糖不利用蔗糖肌 醇，MR阳性，VP阴性，不产呵噪，不分解尿素。 实验材料： 含有大肠杆菌和沙门氏菌的猪肝脏、培养基（琼脂平板培养基、三糖铁琼脂斜面培养基、麦康凯琼脂、生化培养基、SQ、器械（剪刀、记号笔、接种环、酒精灯、显微镜、试管、玻片、培养皿）、药品（消毒酒精、结晶紫、碘液、酸酒精、品红、松柏油） 实验内容及操作程序： 一、培养基制备： 制备普通琼脂培养基、麦康凯平板、SC增菌培养基、生化培养基，制备方法
见附 1. 二、标本制备： (1) 取新鲜猪肝脏一小块，火焰表面消毒。 (2) 用浸过消毒液的剪刀剪开一个小口于消过毒的猪肝脏。 (3) 用接种环在剪开的肝脏小口沾取肝脏液，分别画线于麦康凯培养基和接种于SC中，37 C恒温培养24小时。 三、细菌分离培养： (1) 取出培养了24小时的麦康凯平板。挑选麦康凯平板上的凸起光滑湿润的粉红菌落染色镜检，看是否为红色短杆菌，若是，即疑似为大肠杆菌，则取其接种于另一麦康凯平板，37 C恒温培养24小时。 (2) 取出培养了24小时的SC增菌培养基，染色镜检，看是否有疑似沙门 氏菌，有则取其中细菌画线接种于麦康凯平板上，37 C恒温培养24小时。 四、细菌的鉴定纯化： (1) 检查疑似大肠杆菌的培养基是否长满了粉红色菌落，染色镜检。并取其分别接种于生化培养基上(葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖、肌醇、枸椽酸盐、尿素、MR、VP、H 2S),并做穿刺实验于三糖铁上。37 C恒温培养24小时后观察结果。若实验结果满足预期效果，则可判定为大肠杆菌，则将其接种于普通琼脂培养基上传代培养。 (2) 检查疑似沙门氏菌的平板上是否长满细菌，染色镜检，看是否满足于沙门氏菌的染色特性。并取其接种于生化培养基上，并作穿刺实验于三糖铁 上，37 C恒温培养24小时后观察结果，若结果满足于沙门氏菌的生化特性，则可判定为沙门氏菌，则将其接种于普通琼脂培养基上传代培养。
大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验
河南农业大学 本科生毕业论文(设计) 题目鸡大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验学院牧医工程学院 专业班级2011届动物医学专升本3班学生姓名王张凡 指导教师许兰菊(教授) 撰写日期：2011年5月10 日
鸡大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验 王张凡 （2011届动物医学专升本3班） 摘要：为了对巩义某鸡场疑似鸡大肠杆菌病的鸡群进行确诊，并为有效防治提供依据，本研究利用细菌学检验方法对采集的典型病料进行细菌分离鉴定和细菌药敏试验。通过细菌分离培养、形态学观察、生化试验、动物试验和血清学试验。结果表明：该鸡群中分离到的病原菌为鸡大肠杆菌。动物攻毒试验结果表明：分离的鸡大肠杆菌具有明显的致病作用，雏鸡发病率为100%(5/5)，死亡率达60%(3/5)。血清学鉴定结果显示，该分离菌血清型为O1。药敏试验结果表明：该细菌对头孢曲松、头孢唑林、阿米卡星、复方新诺明（磺胺甲恶唑）、环丙沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、氨苄西林、米诺环素和庆大霉素均敏感，对阿莫西林和阿奇霉素为中度敏感;但对罗红霉素和四环素耐药。本研究结果对准确诊断和有效防治该病提供了依据和条件。 关键词：鸡；大肠杆菌；分离鉴定；药敏试验 Isolation, Identification and Antibiotic Sensitivity Test of Chicken Escherichia Coli wang zhangfan (Class 3 of Veterinary Medicine, Graduated in 2011) Abstract:In order to make a definite diagnosis for the suspend Chicken Escherichia Coli about chicken house from Gongyi and provide a reference for effective prevention and treatment. The bacteria was isolated and identified from typical samples and antibiotic sensitivity test was also adopted. By bacterial separate cultures, morphological observation, biochemical tests, animal experiment and serological tests, the pathogen of this chickens is pathogenic E.coli bacteria. The result of animal experiment showed: this Escherichia coli had obviously pathogenic; the morbidity of chicklings was 100%(5/5) and the mortality was 60%(3/5).Serological testing results indicated: the serotype of this strain was O1. The antibiotic sensitivity test results illuminated: the sensitivity of the strain to ceftriaxone、cefazolin and other 8 kinds of drug were sensitive; and the drug sensitivity to amoxicillin and azithromycin are intermediate;but the strain were drug resistant to roxithromycin and acheomycin. This research provided a scientific basis and qualification for exact diagnosis and effective prevention and treatment to Escherichia coli. Key word:Chicken,Escherichia Coli, Isolation and Identification, Antibiotic Sensitivity Test 鸡大肠杆菌病是由禽致病性大肠杆菌(avian pathgenicity E．coli，APEC)引起的急性或慢性细菌性传染病，各种日龄的鸡均可发病，但雏鸡和产蛋鸡更易发病，其常与其他疾病混合
材料化学设计性实验报告—
南昌航空大学实验报告 2014年12月10日 课程名称：材料化学综合实验实验性质: 设计性实验 实验名称：草酸盐重量法测定稀土总量及草酸加入量对沉淀的影响 班级学号：11级姓名：材料化学同组人： 指导老师评定（总评）：签名： 一、实验预习 1、前言 随着稀土应用的不断发展, 稀土铁合金材料品种日益增多, 其用量也越来越大。然而, 产品中的稀土总量及铁的含量都有赖于检测部门的分析结果。分析结果的准确与否、分析速度的快与慢都直接影响着稀土产品生产部门及销售部门的工作效率和经济效益，因此，测定稀土总量是非常重要的[1]。 稀土元素由于具有独特的核外电子排布，在冶金、材料领域有着独特的作用[2]，且稀土元素对于冶金和一些特殊工艺生产来说，是一种很重要的物质，怎样测定地质样品、各种工艺物料中的稀土总量是很重要的[3]。 稀土元素总量的测定，常采用重量法、滴定法和吸光光度法。其中，滴定法测定稀土元素时干扰较多，需多次分离，而光度法适合低含量的稀土测定[4]。重量法测定稀土总量是使稀土形成难溶化合物从共存元素中分离出来，灼烧成氧化物后称重：已知稀土可呈氢氧化物、氟化物、草酸盐等多种形成沉淀，目前测定稀土精矿等稀土矿样中的稀土总量,主要采用国家标准碱熔法—草酸盐重量法, 其操作复杂、繁琐费时, 但此方法准确度高、稳定性好[5]，已被列为矿石及稀土产品中稀土总量测定的行业标准方法，在许多仲裁分析中广泛采用。 本实验主要研究稀土总量的测定，实验采用草酸作为沉淀剂，用草酸盐重量法测定稀土的总量，并研究草酸的加入量对沉淀的影响。 2、实验方案设计 （1）实验目的 ①了解稀土总量的测定方法，并学会使用草酸盐重量法测定稀土的总量； ②掌握草酸盐重量法测定稀土总量的原理； ③研究草酸加入量对稀土总量测定的影响；
春季猪的常见疾病和预防
春季猪的常见疾病防治 春季气温变化大，易滋生致病性细菌、病毒、支原体。以而论，常发疾病有猪瘟、副伤寒、仔猪水肿病、黄痢、白痢、传染性胃肠炎、喘气病、副猪嗜血杆菌病、感冒、仔猪低血糖症和疥癣等病。 1 猪瘟 贯彻免疫程序，常发地区仔猪可进行超前免疫（出生后肌肉注射1~2头份/头，1~2 h 后再喂初乳），35日龄进行二次免疫（4头份/头），65日龄进行第三次免疫（6头份/头）。安全区35日龄首免（4头份/头），65日龄二免（6头份/头）。 种母猪春、秋季各免疫一次；后备母猪配种前20 d免疫一次；种公猪每年春、秋两季各免疫一次。发生猪瘟的猪场应紧急“超”剂量接种猪瘟疫苗。 早期发病猪只根据临床症状应用抗病毒药品和抗菌素类药物标本同治，主要措施是用相应的抗病毒药品增强猪只机体免疫系统功能，抑制和杀灭病毒，同时用抗菌素类药物控制继发感染。具体处方如下：增强机体抵抗力，用抗病毒中药复方制剂，同时用氨苄西林钠配合长维舒和维生素C肌肉注射，每天2次，连用3~5 d。重症病例肌肉注射维生素B12、维生素C，将氨苄西林、5%葡萄糖、0．9%氯化钠溶液稀释后静脉注射，每天2次，连用3 d。如果病猪开始吃食，每头猪可喂1~2个生鸡蛋和适量奶粉，以增加机体能量，增强抵抗力。假定健康猪防控措施：饲料中添加相应抗病毒药品增强机体免疫力，抑制和杀灭病毒，降低应激反应。同时用抗菌素类药物控制继发感染。推荐处方：清瘟败毒散1 000 g、奇毒康颗粒500 g、可立克500 g，拌料1 000 kg，连喂5~7 d。饮水中添加电解多维、阿莫西林可溶性粉。 2 仔猪大肠杆菌病假定健康猪防控措施：饲料中添加相应抗病毒药品增强机体免疫力，抑制和杀灭病毒，降低应激反应。同时用抗菌素类药物控制继发感染。推荐处方：清瘟败毒散1 000 g、奇毒康颗粒500 g、可立克500 g，拌料1 000 kg，连喂5~7 d。饮水中添加电解多维、阿莫西林可溶性粉。
猪大肠杆菌病的诊断及防治措施
班级牧医062班 学号200601013206 毕业论文（设计） 题目猪大肠杆菌病的诊断与防治 姓名石培宇 系部畜牧系 专业畜牧兽医 指导教师吉俊玲职称副教授 日期2009-6-10
猪大肠杆菌病的诊断与防治措施 石培宇 【摘要】猪大肠杆菌病是有致病性大肠杆菌引起的猪的一种急性传染病。临床上主要表现为肠炎、肠毒症等多种症状。由于猪的生长日龄以及病原菌的血清型的差异，引起的疾病可分为仔猪黄痢、仔猪白痢和仔猪水肿病三种。本文从流行病学特点、临床症状、病理变化和防治措施，具肠杆菌做分析。目的是为今后在养猪生产中防治该病提供参考依据。 【关键词】大肠杆菌；猪；诊断；预防 前言 近年来，随着畜牧业的发展猪大肠杆菌病的发生日益增多，在各地呈上升趋势，以成为猪的常见病和多发病，并成为仔猪存活的主要原因。给养猪业造成了重大的经济损失。因此，及早确诊本病采取针对性的有效的综合性防治措施，对保证养猪业的发展具有非常重要的现实意义。 1、病原 大肠杆菌是由大肠埃希氏菌的某些治病性菌株引起的疾病的总称。本菌为革兰氏染色阴性，无芽胞，一般有数根鞭毛，常为无荚膜的、两端钝圆的短猪的侵害较严重，常引起严重的腹泻与败血症，是致初生仔猪和断奶仔猪腹泻的最常见和最重要的病原菌杆菌。对仔。按发病日龄和临床特征分为仔猪黄痢、仔猪白痢、仔猪水肿病。本菌对外界因素抵抗力不强，60℃15min即可死亡，一般消毒药均易将其杀死。 2、流行病学特点 2.1仔猪黄痢 仔猪黄痢无明显季节性，主要发生于1周龄以内的仔猪，以1～3日龄多见，随日龄的增长而逐渐减少，7日龄以上很少发生。同窝仔猪发病率常在90%以上，病死率几乎100%。头胎母猪所产仔猪发病最为严重，随着胎次的增加，仔猪发病逐渐减轻。这是由于母猪长期感染大肠杆菌而逐渐产生了对该菌的免疫力。在新建的猪场，本病的危害严重，之后发病逐渐减轻也就是这个原因。新生24h内仔猪最易感染发病。一般在生后3天左右发病，最迟不超过7天。在梅雨季节也有生后12h发病的。头胎母猪产的仔猪最易发生本病，随着日龄的增长，发病率和致死率逐渐减少。传染源主要是带菌母猪，
仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定
仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定 仔猪黄痢病是出生仔猪常发的急性、致死性肠道传染病，多在仔猪出生后几天内发病，发病率高、死亡率高。临床症状主要以腹泻、排黄色稀粪、急性死亡为主要特征，剖检有肠炎和败血症变化，是危害哺乳仔猪的重要传染病之一，严重影响仔猪的生长发育，对养猪业危害极大。2015年3月，北京顺义某猪场突发仔猪腹泻，排黄白色或黄色水样稀便，根据流行病学、临床症状和病理剖检，并结合细菌病原分离、生化鉴定，致病性试验，药敏试验，确诊为仔猪黄痢大肠杆菌病。对分离的菌株进行了药敏试验，筛选出了3种敏感药物，根据诊断及药敏试验结果采取了相应的控制措施，效果显著经治疗，病情得到了有效控制。现报告如下。 1 发病情况北京顺义某猪场于2015年3月，5日龄仔猪突然发病，仔猪腹泻不止，患猪粪便呈黄白色或黄色水样，仔猪迅速消瘦、全身衰弱，很快死亡。 2 临诊症状患猪腹泻黄色水样、顺肛门流下。精神沉郁，停止吃乳，脱水，迅速消瘦。 3 病理变化心包增厚，心包膜外面覆盖纤维素性渗出物，心外膜小点出血。肝表面覆盖一层灰黄色纤维素膜，肝肿大呈土黄色，表面有细小的灰白色坏死点。脾肿大出血。十二指肠出血。 4 实验室诊断 4.1 细菌分离培养将采集的2份肝脏组织分别接种马丁琼脂培养基和麦康凯琼脂培养基，37℃培养18～24h，观察菌落形态。挑取可疑菌落涂片、革兰氏染色、镜检、纯培养。 4.2 生化试验参照BioMerieux VITEK32全自动细菌鉴定及药敏仪鉴定操作说明进行。取纯化的单菌落接于0.45% NaCL基物安培管，用比浊仪制备混浊度相当于1个麦氏单位的菌悬液，接种于VITEK革兰氏阴性菌鉴定卡（GNI+），放入读数器中鉴定读取结果。 4.3致病性试验 将上述生化试验鉴定为大肠杆菌阳性的菌株，分别取纯化的单菌落接种普通营养肉汤，37℃培养24h，将每个菌株的营养肉汤培养物分别经腹腔接种小白鼠
高中生物《大肠杆菌的培养和分离》学案1 浙教版选修1
高中生物《大肠杆菌的培养和分离》学案1 浙 教版选修1 一、大肠杆菌细菌是单细胞的原核生物。细菌细胞的结构有细胞壁、细胞膜、细胞质等。细菌无成型的细胞核，细胞壁由肽聚糖组成。由于细菌细胞壁结构不同，细菌可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两类。革兰氏阳性菌细胞壁厚，无荚膜，多产生外毒素；革兰氏阴性菌细胞壁薄，有荚膜，多产生内毒素。革兰氏阳性菌对青霉素更为敏感。大肠杆菌是革兰氏阴性、异养兼性厌氧型肠道杆菌。在肠道中一般对人无害，但任何大肠杆菌进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。大肠杆菌在基因工程技术中被广泛的应用，它的质粒是最常用的运载体，它也是基因工程中常用的受体细胞。 二、培养基配置微生物生命活动过程中需要的化合物有碳源、氮源、生长因子、无机盐和水。有的化合物既是碳源又是氮源、能源。生长因子是微生物生长不可缺少的微量有机物，但不一定需要外界补充，有的微生物可以自身合成。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。我们一般用LB液体培养基来扩大培养大肠杆菌，培养后可在LB固体培养基上划线分离。以下为本实验中培养基配置步骤：
1、称量：准确称取各成分。蛋白胨0、5g，酵母提取物0、25g，氯化钠0、5g，加水50ml。配置LB固体培养基时还需加1g 琼脂。 2、溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到50mL。配置LB固体培养基时还需加琼脂，整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。 3、调pH：用1mol/L NaOH溶液调节pH至偏碱性。 4、灭菌：在两个250ml的三角瓶中分别装入50ml LB液体培养基和50ml LB固体培养基，加上棉塞。将培养皿用牛皮纸包好，放入灭菌锅内，1kg压力灭菌15min。 5、倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至60℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。否则，空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。 三、灭菌和消毒
药理学综合设计性试验
药理学综合设计性实验 各位领导与老师: 根据药理学的实验特点及现有的实验条件，初步拟定了４个具有可行性的综合设计性实验，开设对象主要为护理本科生，也适用于专科生。但具体开设的内容还需各位领导与老师的商榷。 由于实验项目比较复杂，每次实验所需课时均比较多，且单一教师辅导困难比较大，至少需要双教师辅导（比如采血、插管、实验准备等），请各位领导与老师理解。 课程设计：王鹏 基础教研室 2005年1月9日
实验一氯丙嗪的降温作用（设计性实验，4学时） 实验简介：本实验使学生掌握实验设计的基础理论和方法（包括动物选择、实验分组、对照原则、处理因素的标准化等多方面知识），并通过观察氯丙嗪的降温作用，掌握其降温特点，联系临床应用。 实验辅导：至少双人辅导 【实验目的】掌握实验设计的基础理论，通过观察氯丙嗪的降温作用，掌握其降温特点，联系临床应用。 【实验器材】小鼠、注射器、体温计、冰箱、氯丙嗪等。 【实验过程】 一、首先介绍实验设计的基础理论 （一）实验设计是科学研究计划中关于研究方法与步骤的一项内容，是实验研究所涉及的各项基本问题的合理安排。严密合理的实验设计是顺利进行研究工作的保证，同时也能最大限度地减少实验误差以获得精确可靠的实验结论，甚至可以使研究工作事半功倍。 药理学实验设计的三大要素，即处理因素、实验对象与实验效应。 1.处理因素 (1)处理因素实验中根据研究目的确定的由实验者人为施加给受试对象的因素称为处理因素，如药物、某种手术等。 一次实验涉及的因素不宜过多，否则会使分组增多，受试对象的例数增多，在实际工作中难以控制。但处理因素过少，又难以提高实验的广度和深度。 (2)明确非处理因素：非处理因素虽然不是我们的研究因素，但其中有些因素可能会影响实验结果，产生混杂效应，所以这些非处理因素又称混杂因素。设计时明确了这些非处理因素，才能设法消除它们的干扰作用。 (3)处理因素的标准化：处理因素在整个实验过程中应做到标准化，即保持不变，否则会影响实验结果的评价。如实验设计中处理因素是药物时，则药物的剂型、给药途径、质量(成分、出厂批号等)必须保持不变。 2.实验对象 实验对象的选择十分重要，对实验结果有着极为重要的影响。药理学实验主要实验对象包括整体动物(正常动物、麻醉动物和病理模型)、离体器官、组织及细胞等。 3.实验效应 实验效应是指受试对象在处理因素作用后呈现的反应或受到的影响，其具体表现形式是指标。这些指标包括计数指标(或定性指标)和计量指标(或定量指标)等。指标的选定需符合特异性、客观性、重复性、灵敏性、精确性、可行性等原则。 (二)药理学实验设计的基本原则 为了提高研究效率，控制误差和偏倚，药理学实验设计同其它科学研究一样必须遵循三大基本原则，即对照、随机和重复原则。 1.对照原则 对照是比较的前提。在生物学实验中存在许多影响因素，为消除无关因素对实验结果的影响，实验中必须设立对照组。对照应符合齐同可比的原则，除处理因素不同外，其他非处
大肠杆菌分离鉴定论文
河南科技学院2010届本科毕业论文（设计） 一起猪源性大肠杆菌病的诊治 学生姓名：汤鹏 所在院（系）：动物科学学院 所学专业：动植物检疫 导师姓名：王宪文 完成时间：2014年5月
一起猪源性大肠杆菌病的诊治 摘要 大肠杆菌病是由病原大肠埃希氏菌所引起的一种急性、多型性、肠道型传染病，严重影响仔猪的存活率。主要临床表现有仔猪黄痢、仔猪白痢、猪水肿病。为了弄清养猪场大肠杆菌病的主要血清型、抗药性等特点，以便采取合理的防治措施，采集病料60份，进行大肠杆菌病的分离培养鉴定、生化试验、耐药性试验等，大肠杆菌的分离鉴定包括病原菌的分离培养、生化试验、毒理试验，在伊红美蓝上挑出略带金属光泽、紫黑色的菌落接种在麦康凯上经过培养后，轻摇显云雾状的菌环，在营养琼脂上培养形成菌落，进行试验找出菌落的特性，以及致病力。耐药性实验结果表明（），治疗试验中------，试验结论--。（方法为培养基的制备、琼脂纸片扩散法，氟哌酸、磺胺、四环素对大肠杆菌不太有效，大肠杆菌对头孢类药物较为敏感，对卡那霉素、庆大霉素不敏感）（删除） 关键词：仔猪、大肠杆菌、分离鉴定、药敏试验、中草药制剂
Abstract Escherichia coli disease is an acute, polymorphism, intestinal infectious diseasescaused by pathogenic Escherichia coli, seriously affect the survival rate of piglets. The main clinical manifestations of yellow scour of newborn piglets, white scour of piglets, edema disease of swine. In order to understand the swinecolibacillosis serotype, drug resistance, in order to take reasonable measures of prevention and cure disease, collecting material is 60, separation of Escherichia coli culture identification, biochemical test, resistance test, isolation, isolation and identification of pathogenic bacteria Escherichia coli include biochemical test,toxicity test, in eosin methylene blue was inoculated with metallic luster, pick out the purple black at mark Kang Kai. After training, annulus rocked the explicitcloud like, culture form colonies on nutrient agar, find out the characteristics ofcolony, and pathogenicity. Methods drug sensitivity test for the preparation of culture medium, agar disk diffusion method, norfloxacin, tetracycline andsulfonamide, less effective against Escherichia coli, E. coli sensitive tocephalosporins, not sensitive to kanamycin, gentamicin, Key words: Piglet, Escherichia coli, isolation and identification, drug sensitive test, micro ecological preparation