大鼠取材方案

大鼠取材方案
大鼠取材方案

实验大鼠取材方案

[取材内容]

1. 取大鼠静脉血分离血浆、血清-80℃保存。

2. 取大鼠门静脉血分离血清-80℃保存。

3. 取大鼠甲状腺组织制备甲状腺电镜观察标本其余组织液氮冰冻保存备用。

4. 取大鼠胸腺组织制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻

保存备用。

5. 取大鼠肺组织制备肺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻

保存备用。

6. 取大鼠肝脏组织制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮

冰冻保存备用。

7. 取大鼠胰腺组织制备胰腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮

冰冻保存备用。

8. 取大鼠肠系膜淋巴结组织制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保

存。

9. 取大鼠胃部组织制备胃粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分

装液

氮冰冻保存备用。

10. 取大鼠空肠组织制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装

液氮冰冻保存备用。

11. 取大鼠回肠组织制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装

液氮冰冻保存备用。

12. 取大鼠肾组织制备左肾组织电镜观察标本、免疫组化观察标本右肾组织液氮冰冻保

存备用。

13. 取大鼠肾上腺组织左侧制备肾上腺组织免疫组化观察标本右侧肾上腺液氮冰冻保存

备用。

14. 取大鼠睾丸组织左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本右侧睾丸液氮冰冻保存

备有。

[试剂及药品]

戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸

盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液

[器材]

备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、

眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、

2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐

[取材动物]

Wistar大鼠

[取材步骤]

1. 取材大鼠前夜禁食自由饮水。

2. 腹腔注射戊巴比妥钠(45mg/kg) 或10%水合氯醛(300mg/kg)将动物麻醉。用5ml的注射

器配合5.57号针头。

腹腔注射时右手持注射器左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴另外三个手指抓住大鼠的颈部使大鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作轻柔防止刺伤腹部器官。尤其是对于体重较小的大鼠腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离最好是从腹部一侧进针穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔注射完药物后缓缓拔出针头并轻微旋转针头防止漏液。待动物麻醉成功后仰卧位固定于解剖台。

3. 修剪去颈部及腹部毛发75%酒精消毒。

4. 沿腹侧正中线自阴茎上缘由下而上剪开腹部皮肤直至剑突向两侧钝性剥开皮肤与皮下

组织暴露腹壁浅肌层。沿白线钝性分离腹壁肌肉剪开腹膜暴露腹腔将肝脏向上

翻起显露门并游离静脉将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉抽取

门静脉血2ml无创血管夹夹闭门静脉止血。将抽取门静脉血加入一次性离心管低温

静置过夜4℃离心3000-3500/min10分钟吸出上清液分装-80摄氏度保存备

用。

5. 把胃与脾之间的薄膜除去可见到在其下方有如树枝状的肉色组织分为左、右两叶

钝锐结合整体取下胰腺组织及脾脏组织结扎止血。胰腺放置于盛有无菌生理盐水的培

养皿中涮洗去血迹。①切取胰腺体部约1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲

液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②胰腺体部相邻部位组织浸入多聚甲醛或

福尔马林液中固定③其余组织全部液氮冰冻保存备用。生理盐水冲洗操作器械。

6. 剔除脾周组织放置脾脏于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。①从脾脏一端切

取5×5mm脾组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定②继续切取脾约1mm×1mm ×1mm组

织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定③其余组织

液氮冰冻保存备用。

7. 从剑突继续向上剪开皮肤自颌下向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织暴露胸廓及颈浅肌

层。沿正中剪开胸廓、胸膜避免损伤胸腺的胸腔脏器。暴露心脏找到上下腔静脉后

确认右心房5ml注射器直接穿刺右心房最大量抽取外周回心静脉血。加4ml静脉血入肝

素锂真空采血管摇匀室温静置10分钟4℃离心3000-3500/min5分钟吸出上

清液分装-80摄氏度保存备用。2ml加入普通真空采血管低温静置过夜4℃离心

3000-3500/min5分钟吸出上清液分装-80摄氏度保存备用。

8. 展开肠系膜于肠系膜根部寻找淡蓝色结节样淋巴结组织剔取肠系膜淋巴结数枚放

置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。①取部分淋巴结组织浸入多聚甲醛或福

尔马林液中固定②其余组织放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。心管5ml、

9. 上端于贲门上端结扎食管下端于直肠远端结扎直肠末端钝锐结合完整取下胃肠道。

10. 离断胃放置于无菌培养皿残端结扎。①沿胃大弯剖开生理盐水洗涤切取约1mm

×1mm×1mm胃窦和胃体黏膜组织各3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)

或4戊二醛固定②剪取宽约0.5-1.0cm包含胃窦、胃体组织1条浸入多聚甲醛或福

尔马林液中固定③其余胃组织放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

11. ①距treitz韧带10cm处切取空肠10cm距回盲部10cm处切取回肠10cm 生理盐水洗涤

切取约1mm×1mm×1mm空肠和回肠黏膜组织各3块3戊二醛磷酸盐缓冲液

(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②剪取宽约0.5-1.0cm包含全层的空肠和回

肠组织各1条做标记浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③其余空肠和回肠组织

全部放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

12. 结扎剪断肝门管道系统钝锐结合完整取出大鼠肝脏放置于无菌培养皿生理盐水冲

洗称重并记录。①切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液

(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②左叶肝组织浸入多聚甲醛或福尔马林液中

固定③右叶肝组织称重记录分装后全部放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

13. 于腹膜外腰部脊柱两侧寻找到肾脏表面光滑、背腹略扁呈蚕豆形。在肾脏的前方内侧

和腰下肌的腹面相接处寻找到肾上腺。右侧肾上腺呈豆状长轴指向后内侧左侧呈卵

圆形长轴指向腹外侧。钝锐结合摘取两侧肾上腺。①左侧肾上腺浸入多聚甲醛或福尔

马林液中固定②右叶肾上腺放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

14. 剪开后腹膜结扎剪断双侧肾门钝锐结合取下双侧肾脏剔除肾周筋膜组织放置

于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。①于中间肾门部横行切开左侧肾脏切取

上端肾脏1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或

4戊二醛固定②下端脾脏浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定③右侧肾脏放置于

菌冻存管液氮冰冻保存备用。

15. 大鼠的阴囊是由肛门腹侧会阴部皮肤下垂所形成的囊袋。性成熟的大鼠睾丸和附睾下降

入阴囊使表面凸出并突向后方。小心剪开双侧阴囊可见椭圆形睾丸钝锐结合摘

取双侧睾丸、附睾放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血迹。

16. 颈白线钝锐结合分离颈前肌群直至气管向上显露甲状腺。仔细操作切取包括甲状

软骨在内的甲状腺。①切取约1mm×1mm×1mm组织各3块3戊二醛磷酸盐缓冲液

(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②其余组织全部浸入多聚甲醛或福尔马林液

中固定。切取左侧睾丸下端1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②余左侧睾丸组织浸入多聚甲醛或福尔马林

液中固定③右侧睾丸组织放置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

17. 大鼠胸腺由两叶组成似等边三角形。大部分位于胸腔前纵膈顶端近喉部基底部附

着于心包腹面的前上方。钝锐结合完整取下胸腺放置于盛有无菌生理盐水的培养皿中

涮洗去血迹。①切取胸腺1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛固定②切取胸腺5mm×5mm×5mm组织1块浸入多聚

甲醛或福尔马林液中固定③其余组织置于无菌冻存管液氮冰冻保存备用。

18. 整体取下大鼠心肺组织剪开分离双侧肺脏置于盛有无菌生理盐水的培养皿中涮洗去血

迹。①切取左肺1mm×1mm×1mm组织3块3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)

或4戊二醛固定②余左肺浸入多聚甲醛或福尔马林液中固定冻存管液氮冰冻保存备用。

19. 各取样标本细致编号登记。

20. 大鼠废弃尸体处理。

[注意事项

1. 戊巴比妥钠配成1%生理盐水溶液平均每只大鼠用量1

2.6mg 1.2ml左右。

2. 大鼠腹腔注射可以大鼠腹腔注射的给药容积一般为510ml/kg。

3. 完整取下胃肠道后已将肠系膜撕碎不易寻找肠系膜淋巴结所以先取淋巴结。取下胃

肠道由专人操作取胃肠道及胃肠道取下后取材的操作器械单用一套。

4.取材时三人同时操作取一只大鼠结合取材方案多脏器并行取材缩短取材时间。

③右肺组织置于无菌

1、解剖后应迅速将脏器称重,以免水分蒸发造成差异,特别是肾上腺等小器官的称重。

2、脏器称重前应尽量将周围脂肪组织和结缔组织剔除,并用滤纸吸去脏器表面血液及体液,特别是肾上腺、甲状腺、前列腺等较小的器官,更要新鲜称重,防止器官干燥失水而重量减轻。

3、空腔器官称重前,应清除其腔内液体,如心脏应除去血块。

大鼠肝脏组织病理切片的制作和 HE 染色

大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色步骤如下: (一)固定与修块 取组织块放入Bouin氏液中,组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面 刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。 (二)脱水与透明 1.75%乙醇50分钟 2.85%乙醇50分钟 3.95%乙醇(I)30分钟 4.95%乙醇(II)30分钟 5.100%乙醇(I)30分钟 6.100%乙醇(II)30分钟 7 1/2二甲苯(乙醇与二甲苯等体积)20分钟 8.二甲苯(I)20分钟 9.二甲苯(II)10分钟(可依据透明效果而定) 若脱水不好,二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后,要充分滤干组织 块,一般用筒纸吸干组织块上的液体,以免影响其他液体的浓度,但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。 (三)浸蜡、包埋与修蜡块 1.浸蜡:

将60℃恒温箱打开,使石蜡充分溶解,待脱水与透明结束后,将 组织块转入石蜡里,放置于60℃恒温箱120分钟。 2.包埋: 将60℃的石蜡倒入纸盒内,然后用小镊子将各组织块按一定的顺 序排列好,使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中,以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固,可将纸盒置于一玻璃板上(或大培养皿内),然后将玻璃板置于80-90℃左右热水上,包埋时蜡盒底部 要放平,做蜡块的蜡要反复冻融较好。 3.修蜡块: 待纸盒内蜡凝固后,用刀片将其修成梯形,组织块与蜡块边缘 之间的距离不得小于2mm。 (四)切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上,用手指充分抹 匀,呈半干状为佳。切片厚约4-8μm,将切片在55℃左右水浴中展开,展开程度以带黄颜色的组织完全摊平为准。用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片,放入37℃烘箱中过夜。每个组织块捞片2张。过夜后,将载玻片置于玻片架上,进行下面的实验。 (五)脱蜡、染色与脱水 倾斜玻片架,将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干,减轻对其他试剂浓 度的影响。全过程约需要60分钟。

实验报告-大鼠

姓名:薛桂凤学号:132015200300 实验报告(二) 一、实验目的: 1.掌握大鼠的抓取和固定。 2.掌握大鼠的编号与标记方法。 3.掌握大鼠的常用实验方法。 4.掌握大鼠的常用麻醉方法。 5.掌握大鼠的安死术。 6.掌握大鼠的釆血方法。 7.了解小鼠的采尿、粪的方法。 8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。 二、实验器材:SD大鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、烧杯、注射器(3支)、 剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水 三、实验内容 1.抓取:两种方法。第一种方法:右手食指和中指夹住大鼠颈部,使其头部固定,右 手拇指及无名指分别在大鼠前爪下抓住大鼠身体。第二种方法类似单手抓取小鼠的 方法,用右手拇指及其余四指并捏住大鼠颈部背部皮肤。 2.称重:小鼠放在烧杯中称重(去除烧杯重量),记录小鼠体重210g。 3.鉴别大鼠性别:观察生殖器雄性大鼠的阴囊非常明显。 4.编号:染色法:逆毛方向涂上有色斑点,顺序由左到右,由上向下,用两种颜色 可标记99只动物。 5.给药: (1)皮下注射小于1ml/100g(俯卧固定,左手拇指和食指捏住皮肤提起,右手持针沿纵轴方向刺入皮肤,阻力消失后回抽无血注入药物,拔针)(2)皮内注射小于0.1ml (麻醉后进行,先备皮)(俯卧固定,与皮肤平行刺入捏起的皮肤,阻力大,注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针)(3)腹腔注射0.01-0.02ml/g(仰面固定,在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针,挑起皮肤和肌肉,回抽无血,注药) (4)灌胃1-2ml/100g (大鼠固定身体呈一条直线,灌胃针头顺着上颚插入咽部,先少量注药证明未入气管后继续给药) 6.釆血:尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法(麻醉后) 。 7.大鼠的采尿、粪的方法 (1)少量采集:在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便 (2)长期大量采集:使用代谢笼 8.麻醉:根据大鼠体重计算麻醉药物用量5%水合氯醛按300mg/kg,给药,计算药 量为 1.26ml,ip 麻醉小鼠,观察小鼠麻醉期。 (1)全身麻醉的第一期(随意兴奋期):出现运动和运动失调;35秒 (2)全身麻醉的第二期(不随意兴奋期):是由意识完全丧失至深而规则的自动 呼吸开始时止;2分30秒 (3)全身麻醉的第三期:角膜反射由迟钝渐趋消失,翻正反射消失,疼痛反射 消失; 9.安死术:颈椎脱臼法:用左手按住动物的头部于实验台上,右手抓住尾根部,快速、 不间断地向后、略向上使劲拉,以致脊椎脱臼,脊髓与脑干断离而死亡。 10.解剖:观察大鼠的脏器解剖结构

实验大鼠取材方案

实验大鼠取材方案 [取材内容] 1.取大鼠静脉血,分离血浆、血清,-80℃保存。 2.取大鼠门静脉血,分离血清,-80℃保存。 3.取大鼠甲状腺组织,制备甲状腺电镜观察标本,其余组织液氮冰冻保存备用。 4.取大鼠胸腺组织,制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织液氮冰冻 保存备用。 5.取大鼠肺组织,制备肺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液氮冰冻 保存备用。 6.取大鼠肝脏组织,制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液氮 冰冻保存备用。 7.取大鼠胰腺组织,制备胰腺组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液氮 冰冻保存备用。 8.取大鼠肠系膜淋巴结组织,制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本,其余组织液氮冰冻保 存。 9.取大鼠胃部组织,制备胃粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装液 氮冰冻保存备用。 10.取大鼠空肠组织,制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装 液氮冰冻保存备用。 11.取大鼠回肠组织,制备肠道粘膜组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,其余组织分装 液氮冰冻保存备用。 12.取大鼠肾组织,制备左肾组织电镜观察标本、免疫组化观察标本,右肾组织液氮冰冻保 存备用。 13.取大鼠肾上腺组织,左侧制备肾上腺组织免疫组化观察标本,右侧肾上腺液氮冰冻保存 备用。 14.取大鼠睾丸组织,左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本,右侧睾丸液氮冰冻保存 备有。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3%戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4%戊二醛、肝素钠、器械液(器械清洗消毒液) [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离心管(5ml、

实验报告-大鼠

姓名:薛桂凤学号: 实验报告(二) 一、实验目的: 1.掌握大鼠的抓取和固定。 2.掌握大鼠的编号与标记方法。 3.掌握大鼠的常用实验方法。 4.掌握大鼠的常用麻醉方法。 5.掌握大鼠的安死术。 6.掌握大鼠的釆血方法。 7.了解小鼠的采尿、粪的方法。 8.了解小鼠各种脏器标本的采集方法。 二、实验器材:SD大鼠、电子称、手套、实验托盘、固定板、烧杯、注射器(3支)、 剪刀、镊子、灌胃针头、毛细管、酒精棉球、5%水合氯醛、生理盐水 三、实验内容 1.抓取:两种方法。第一种方法:右手食指和中指夹住大鼠颈部,使其头部固定,右 手拇指及无名指分别在大鼠前爪下抓住大鼠身体。第二种方法类似单手抓取小鼠的 方法,用右手拇指及其余四指并捏住大鼠颈部背部皮肤。 2.称重:小鼠放在烧杯中称重(去除烧杯重量),记录小鼠体重210g。 3.鉴别大鼠性别:观察生殖器雄性大鼠的阴囊非常明显。 4.编号:染色法:逆毛方向涂上有色斑点,顺序由左到右,由上向下,用两种颜色 可标记99只动物。 5.给药: (1)皮下注射小于1ml/100g(俯卧固定,左手拇指和食指捏住皮肤提起,右手持针沿纵轴方向刺入皮肤,阻力消失后回抽无血注入药物,拔针)(2)皮内注射小于(麻醉后进行,先备皮)(俯卧固定,与皮肤平行刺入捏起的皮肤,阻力大,注射药物局部有皮丘后停留片刻后拔针) (3)腹腔注射(仰面固定,在腹正中线两侧腹股沟平行的位置30-45°进针,挑起皮肤和肌肉,回抽无血,注药) (4)灌胃1-2ml/100g (大鼠固定身体呈一条直线,灌胃针头顺着上颚插入咽部,先少量注药证明未入气管后继续给药) 6.釆血:尾尖釆血法、眼眶静脉丛釆血法、心脏釆血法(麻醉后) 。 7.大鼠的采尿、粪的方法 (1)少量采集:在抓取固定时受到刺激排出少量尿液和粪便 (2)长期大量采集:使用代谢笼 8.麻醉:根据大鼠体重计算麻醉药物用量5%水合氯醛按300mg/kg,给药,计算药 量为,ip 麻醉小鼠,观察小鼠麻醉期。 (1)全身麻醉的第一期(随意兴奋期):出现运动和运动失调;35秒 (2)全身麻醉的第二期(不随意兴奋期):是由意识完全丧失至深而规则的自动 呼吸开始时止;2分30秒 (3)全身麻醉的第三期:角膜反射由迟钝渐趋消失,翻正反射消失,疼痛反射 消失; 9.安死术:颈椎脱臼法:用左手按住动物的头部于实验台上,右手抓住尾根部,快速、 不间断地向后、略向上使劲拉,以致脊椎脱臼,脊髓与脑干断离而死亡。 10.解剖:观察大鼠的脏器解剖结构

大鼠取材方案

实验大鼠取材方案 [取材内容] 1. 取大歸脉血分离血衆血清-80 C保存。 2. 取大鼠门静脉血分离血清-80 C保存。 3. 取大鼠甲状腺组织.制备甲状腺电镜观察标本其余组织液氮冰冻保存备用〃 4. 取大鼠胸腺组织制备胸腺组织电镜观察标本、免疫组化孵标本其余组织液氮冰冻保存备用。 5. 取大鼠肺组织制备肺组织电镜观察标本,免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰搽 保存备用。 6. 取大鼠肝脏组级制备肝脏组织电镜观察标本、免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。 7. 取大鼠觴组级制备康腺组织电镜观察标芯免疫组化观察标本其余组织分装液氮 冰冻保存备用。 8. 取大鼠肠系膜淋巴结组织制备肠系膜淋巴结免疫组化观察标本其余组织液氮冰冻保存。 9. 取鳩胃部组级制备胃粘膜组织电飙察标本免疫组化观察标本其余组织分装液氮冰冻保存备用。 10. 取大鼠空肠组级制备肠道粘膜组级电镜观察标本■免疫组化观集标本其余组级分装

液氮冰冻保存备用。 11. 取大鼠回肠组织制备肠道粘膜组织电镜观舉标技免疫组化观察标本其余组 织分装 液氮冰冻保存备用。 12. 取大關组织制备左肾组级电镜观察标本、免疫组化观察标本右肾组织液氮 冰探保 存备用。 13. 取大嵐肾上腺组织左侧制备肾上腺组级免疫组化观察标本右侧肾上腺液氮冰冻保 存 备用。 14. 取大鼠睾丸组级左侧制备电镜观察标本、免疫组化观察标本右侧睾丸液氮冰冻保存 备有。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、 3 应二醛 磷酸 盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或 4 戍二肚肝素撤m器械清洗消毒液 [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、 眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存氤肝麹真空采血管、微量移液議高速敲杠注射器10ml、5ml、

病理生理实验报告

实验一组织晶体渗透压改变在水肿发 生中的作用(水肿) 实验目的:通过实验了解组织晶体渗透压的改变在水肿发生中的意义,加深对水肿发生机理的理解。 实验动物:蟾蜍2只,要求体重、大小相仿。 器材与药品: 200克电子天平1台,盛水玻璃缸2个,2m1注射器连4号针头2支,脱脂棉球、纱布块适量。0.65%氯化钠液和20%氯化钠液各10ml。实验方法: 1. 取蟾蜍2只分别称重,注意观察背部外形。 2. 向一只蟾蜍背部淋巴囊内注入0.65%氯化钠液(即蛙生理盐水)2 m1,向另一只蟾蜍背部淋巴囊内注入20%氯化钠液2ml(蟾蜍皮下淋巴囊分布见图2-1),然后分别放入装有水的玻璃缸内。 3.1小时后由水中取出蟾蜍,擦掉体表浮水后分别称重,同时仔细观察背部外形改变。 4. 解剖蟾蜍:由椎骨孔破坏神经系统。重点观察背部淋巴囊的变化。解剖观察其它脏器和解剖结构。 实验结果:将观测到的各种实验结果记入下表内 注前体重注前背部外 形注后体重注后背部外 形 注0.65%氯 化钠 141.2g 正常平坦146.3g 正常平坦

注20%氯化 141.8g 正常平坦169.5g 变肥 钠 结果分析:实验中这两只蟾蜍分别注射了不同浓度的氯化钠溶液,组织晶体渗透压升高,两只都有一定的吸水能力,注射低浓度氯化钠溶液的青蛙吸水较少,体重只有轻微的增长,体型无明显变化;注射高浓度氯化钠溶液的青蛙吸水较多,体重有大幅度的增长,体型出现明显变化。结果表明晶体在体内的浓度越高,吸水性越强。 心得:

实验二缺氧 实验目的:通过复制外呼吸性缺氧、血液性缺氧及组织中毒性缺氧的动物模型。 实验动物:成年小白鼠4只. 器材与药品: 1.外呼吸性缺氧:带有橡皮塞的250毫升广口瓶1只(见图3—1),搪瓷盘1只、镊子、剪子各2把,100g电子天平1台。钠石灰(NaOH.CaO)10g,凡士林1瓶。 2.血液性缺氧:带有管道瓶塞的250m1广口瓶和三角烧瓶各2只,酒精灯1盏,三角架3个,充满一氧化碳的皮球胆1只,弹簧夹4个,lml注射器1支。甲酸、浓硫酸各300ml,2%亚硝酸钠溶液10ml 3.组织中毒性缺氧:1 m1注射器1支。0.04%氰化钾溶液。 实验方法: 一、外呼吸性缺氧 1.取小白鼠重只称重后放入广口瓶内,瓶内预先加入钠石灰5g。观察动物一般状况,如呼吸频率、呼吸状态,皮肤、粘膜色彩、精神状态等。 2.旋紧瓶塞,用弹簧夹夹闭通气胶管,防止漏气。记录时间,观察上述各项指标的变化,直至动物死亡。待本次实验内容全部完成之后,一起剖检动物,对比观察血液颜色的改变和其它变化(以下皆同)。 二、血液性缺氧 (一)一氧化碳中毒

病理生理实验报告

实验一组织晶体渗透压改变在水肿发生中 的作用(水肿) 实验目的:通过实验了解组织晶体渗透压的改变在水肿发生中的意义,加深对水肿发生机理的理解。 实验动物:蟾蜍2只,要求体重、大小相仿。 器材与药品: 200克电子天平1台,盛水玻璃缸2个,2m1注射器连4号针头2支,脱脂棉球、纱布块适量。0.65%氯化钠液和20%氯化钠液各10ml。 实验方法: 1. 取蟾蜍2只分别称重,注意观察背部外形。 2. 向一只蟾蜍背部淋巴囊内注入0.65%氯化钠液(即蛙生理盐水)2 m1,向另一只蟾蜍背部淋巴囊内注入20%氯化钠液2ml(蟾蜍皮下淋巴囊分布见图2-1),然后分别放入装有水的玻璃缸内。 3.1小时后由水中取出蟾蜍,擦掉体表浮水后分别称重,同时仔细观察背部外形改变。 4. 解剖蟾蜍:由椎骨孔破坏神经系统。重点观察背部淋巴囊的变化。解剖观察其它脏器和解剖结构。 实验结果:将观测到的各种实验结果记入下表内 注前体重注前背部外 形注后体重注后背部外 形 注0.65%氯 化钠 141.2g 正常平坦146.3g 正常平坦

注20%氯化 141.8g 正常平坦169.5g 变肥 钠 结果分析:实验中这两只蟾蜍分别注射了不同浓度的氯化钠溶液,组织晶体渗透压升高,两只都有一定的吸水能力,注射低浓度氯化钠溶液的青蛙吸水较少,体重只有轻微的增长,体型无明显变化;注射高浓度氯化钠溶液的青蛙吸水较多,体重有大幅度的增长,体型出现明显变化。结果表明晶体在体内的浓度越高,吸水性越强。 心得:

实验二缺氧 实验目的:通过复制外呼吸性缺氧、血液性缺氧及组织中毒性缺氧的动物模型。 实验动物:成年小白鼠4只. 器材与药品: 1.外呼吸性缺氧:带有橡皮塞的250毫升广口瓶1只(见图3—1),搪瓷盘1只、镊子、剪子各2把,100g电子天平1台。钠石灰(NaOH.CaO)10g,凡士林1瓶。 2.血液性缺氧:带有管道瓶塞的250m1广口瓶和三角烧瓶各2只,酒精灯1盏,三角架3个,充满一氧化碳的皮球胆1只,弹簧夹4个,lml注射器1支。甲酸、浓硫酸各300ml,2%亚硝酸钠溶液10ml 3.组织中毒性缺氧:1 m1注射器1支。0.04%氰化钾溶液。 实验方法: 一、外呼吸性缺氧 1.取小白鼠重只称重后放入广口瓶内,瓶内预先加入钠石灰5g。观察动物一般状况,如呼吸频率、呼吸状态,皮肤、粘膜色彩、精神状态等。 2.旋紧瓶塞,用弹簧夹夹闭通气胶管,防止漏气。记录时间,观察上述各项指标的变化,直至动物死亡。待本次实验内容全部完成之后,一起剖检动物,对比观察血液颜色的改变和其它变化(以下皆同)。 二、血液性缺氧 (一)一氧化碳中毒

大鼠系统解剖简述

大鼠系统解剖简述

第一章皮肤 一、皮肤由表皮、真皮和皮下组织构成。 二、皮肤腺有皮脂腺、汗腺和乳腺。 1、皮脂腺分布在毛囊周围。口角部、肛门、包皮 和乳头周围有特化的皮脂腺。 2、汗腺,大鼠的汗腺只局限于足垫的皮肤。 3、乳腺 数量大鼠的乳腺共有6对,胸部3对,腹部1对,鼠蹊部2对。个别的大 鼠有5对或者7对。 大小和形态随大鼠的年龄和性周期有明显的变化。 部位包埋在皮下组织中,由结缔组织隔与胸壁和腹壁松松地相连。 第 二章骨 一.脊柱大鼠的脊柱由57-61块脊椎骨组成,包括颈椎7、胸椎13、腰椎6、荐锥4、 尾锥27-31块。锥式C7T13L6S4Cy27 -31。骨性标志为第二胸椎,其棘突最 高,超过其它脊椎骨。 1、颈椎和其它哺乳动物一样,恒为7块,全无 肋骨相连,横突上具有横突孔,供锥动 脉通过。 2、胸椎13块,椎骨的长度由前向后逐渐增加(由 2毫米增加到4毫米),锥管的直径平 均为3.3毫米,较颈部的锥管为狭窄。 3、腰椎6块,每块锥体的长度比较一致,约6

-7毫米。锥管直径由前面的4毫米向 后逐渐缩小至2毫米。 二、胸骨 共分为6节,最前一节为胸骨柄,第二到第五 节称为胸骨体,最后一节为剑突,棒状 的剑突后面接一盘状的剑状软骨。胸骨 柄长约10毫米。 第三章肌 肉系统(省略) 第四章消 化系统 消化系统包括消化管及附属消化器官。消化管可 分为口腔、食管、胃、小肠和大肠等部。 附属消化器官有齿、舌、唾液腺、肝和 胰。 第一节消化管 一、口腔 1、舌全长约30毫米,不具有正中系带, 但是有两条侧系带。 一、食管 分为颈、胸、腹三部。成年大鼠食管的颈-胸段长度约75毫米,腹段通过膈的食管裂孔在膈后的长度约15毫米,食管外径约2毫米。 位置:食管主要是沿气管背侧走行,仅在颈部稍偏左侧。 一、胃 位置:横位于腹腔的左前部,其壁 面几乎完全为肝的左叶所覆盖。 大小:胃重为体重的0.5%,属单室 胃。

动物实验报告

动物实验报告 This model paper was revised by the Standardization Office on December 10, 2020

实验动物学实验报告 学院: 学号: 姓名 时间: 实验一:小鼠实验 一、实验目的 1、掌握小鼠抓取、固定的基本方法; 2、掌握小鼠的雌雄鉴别方法; 3、掌握小鼠的标记方法; 4、掌握小鼠的基本采血技术; 5、掌握小鼠的常用给药方法; 6、掌握小鼠的解剖方法,熟悉内部脏器的自然位置; 二、实验材料 1、实验动物:每组两只雌鼠,两只雄鼠; 2、实验器械及试剂:鼠笼;小鼠固定器和小鼠固定板;眼科剪;眼科镊;解剖刀;1ml 注射器;毛细玻璃管;灌胃针;苦味酸染料;葡萄糖液;2%水合氯醛;

三、实验内容及方法 1、小鼠的抓取和固定 抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。 2、小鼠的雌雄鉴别 雄鼠的阴囊明显,雄鼠可见阴道开口和五对乳头。幼鼠或仔鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定,近者为雌,远者为雄。另外,雌鼠肛门和生殖器之间有一无毛小沟,而雄鼠则在肛门和生殖器之间长毛。 3、小鼠的标记方法 1)耳孔法 用耳号钳在耳上打洞或者用剪刀在耳边缘剪缺口,左耳为十位,右耳为个位。 2)剪趾法 适用于出生一周以内新生仔鼠; 3)染色法

用毛笔将苦味酸涂在动物的不同部位,注意逆着毛发生长方向刷。 4、小鼠的基本采血 1)剪尾采血 当所需血量很少时采用本法。固定动物并历出鼠尾,将鼠尾在45℃温水中浸泡数分钟,也可用酒精棉球涂擦,使局新血管扩张。将鼠尾擦干,再用刀片剪去1-2mm,让血液滴入盛器或直接用吸取,同时自尾根部向尾尖按摩。取血后,先用棉球压迫止血并立即用6%液体火棉胶涂于尾巴伤口处,使伤口外结一层火棉胶薄膜,保护伤口。也可采用切割尾静脉的方法采血,三根尾势脉可交替切割,并自尾尖向尾根方向切割,每次可取~血,切割后用棉球压迫止血。这种采血方法在大鼠进行较好,可以较长的间隔时间连续取血,进行血常规检查。 2)眼眶后静脉丛取血 当需中等量的血液,而又需避免动物死亡时采用此法。用左手固定鼠,尽量捏紧头部皮肤,使头固定,并轻轻向下压迫颈部两侧,引起头部静脉血液回流困难,使眼球充分外突(示眼眶后静脉丛充血),右手持毛细玻璃管,沿内眦眼眶后壁向喉头方向旋转刺入。刺

动物实验报告

动物实验(小鼠)的一般操作技术 实习日期:2007—11—13 一目的和要求: 通过实际操作,使学生掌握实验的一般操作方法,包括动物的抓去和固定、编号被毛的去除给药途径麻醉采血和处死等方法。 二实习内容: 1 实验动物的抓取 2 实验动物性别的鉴定 3 实验动物编号的标记方法 4实验动物被毛的去除 5 实验动物的给药途径和方法 6 实验动物的麻醉 7实验动物的采血 8 实验动物的处死方法 9 解剖 三实验的方法 1 小鼠的抓取:抓取时先用手将鼠尾提起,放在实验台上,轻轻拉尾,用左手拇指和食指抓住小鼠两耳和头颈部皮肤,将鼠置于左手中心,用左手无名指和小指按住尾巴和后肢,即可做其他实验操作作用。 2 小鼠性别的鉴定:抓取小鼠后,观察动物肛门与生殖器之间的距离。距离远的为雄性,距离近的为雌性。成熟的雄性小鼠可看到小鼠睾丸的轮廓。 3 小鼠编号的标记方法:用被毛染色法做小鼠编号。用苦味酸(黄色),一般左前肢为1,左侧腹部为2,左后肢为3,头颈部为4,背部为5,尾根部为6,右前肢为7,右腹部为8,右后肢为9。用两种颜色可以染到99。 4 小鼠被毛去除:有剪毛法,拔毛法,剃毛法,用硫化钠脱毛法。 5 给药途径和方法:给药途径有经口灌胃法,经呼吸道吸入,经皮肤吸入和注射给药法。用一支特制的灌胃针进行灌胃,小鼠一般给1.5ml以下。用注射器抽好液体,然后抓取小鼠,针头延侧角通过食管进入胃内,然后将液体注入。 6 小鼠的麻醉:麻药有挥发性的和非挥发性两种。给药途径有吸入性麻醉,注射给药。小鼠一般用腹部麻醉的方法。用水合氯醛300ml/kg,根据小鼠的体重给药0.25ml。抓取小鼠后,使针头和腹部成30度的角,刺入腹腔,回抽若无回血或者肠内容物可以注入。注入麻药5分钟后,小鼠失去知觉。 7 小鼠的采血的方法:有静脉采血法,尾部采血法,眼眶静脉采血法和心脏采血法。将小鼠装入固定盒中,露出尾部,用二甲苯图擦,使尾静脉充盈。用锋利的刀片切断一根尾静脉即可用毛细管采血,也可用细注射器从尾静脉采血。 8 小鼠的处死方法:用颈椎脱臼的方法或者注射过量的麻药使小鼠死亡。 9 解剖:从腹部开始,查看腹部脏器,以肝脏胃脾肾输尿管姨小肠大肠膀胱前列腺性腺顺序。然后再看胸部,看到肺脏心脏胸腺等器官,并在直视的情况下进行了心脏的采血。然后再看颈部的解剖。最后解剖头部。 四讨论和结论: 通过此次实验,我们学到了实验动物的一般操作技术,如抓取和固定、编号被毛的去除给药途径麻醉采血和处死等方法。为以后进入临床进行实验研究做好了初步的准备。

大鼠的区别

SD大鼠: 生长快,繁育性能好,大多用于安全性试验及营养与生长发育有关的研究。该品系对性激素敏感,对呼吸道疾病有较强的抵抗力。广泛用于药理、毒理、药效及GLP实验。 一般生物学特性 繁殖性能:产仔率:92~95%;平均窝产仔数:9.96~12.07只;胎间隔:28~52天;离乳存活率:95~98%。 Wistar大鼠:Wistar大鼠由美国费城Wistar研究所育成。常用的既有近交系,也有远交群。其被毛呈白色,特征为头部较宽、耳朵较长、尾的长度小于身长。Wistar大鼠性情温顺,性周期稳定,早熟多产,平均每窝产仔10只左右,生长发育快,乳腺癌发病率很低,对传染病抵抗力强。 近交系动物:近交系是指近交程度相当于20代以上连续全同胞或亲子交配,近交系数达98.6%以上、群体基因达到高度纯合和稳定的动物群。近交系动物的育成是实验动物科学的一大进步,近交系动物的应用大大推动了遗传学、肿瘤学、免疫学等学科的发展。 远交群:一般情况下,远交系和封闭群作为和近交系相对的概念出现时,我们认为是一回事,但我们一般不用远交系这个概念而采用相对正式不会引起误解的封闭群这个概念,因为封闭群是指动物的一个种群在五年以上不从外部引进新种,仅在固定场所的一定群体中保持繁殖的动物群,其个体之间会存在一定的亲缘关系,而“远交系”只是通常供应使用的、保持于各种饲养系统(可能来源于不同的种群)的非近交群体而已,其个体之间可能不存在一点亲缘关系,所以封闭群和远交系从严格意义上讲并不是一回事,说到底其实是对一个种群培育过程的定义问题,封闭群这个概念更能定义这个过程而不会引起误解。 为什么白化? 实验动物Wistar大鼠毛色:白化。 实验动物Wistar大鼠主要特性: ①头部较宽、耳朵较长、尾的长度小于身长。 ②性周朝稳定,繁殖力强,产仔多,平均每胎产仔在10只左右,生长发育快。10周龄时雄鼠体重可达280~300g,雌鼠达170-260g。 ③性情温顺。

大鼠肝组织RNA提取策略与注意事项

第一部分RNA 提取策略 1、RNA降解的原因内源性RNAase是造成RNA降解的最重要原因,因为人体细胞自身就是几十分钟(20min?)mRNA被降解一轮,所以不管是组织还是细胞还是液体状样本在离开其中细胞的最佳生活状态后都应该尽快的被妥善的方法保存起来。外源性RNA酶也是一个需要注意的因素,最常见的就是毛发尤其头发,灰尘,唾液,塑料手套这四个兄弟。针对它们我们应该戴帽子,口罩,橡胶无菌手套,在清洁灰尘少的地方提取RNA。我上面说了内源性RNAase污染才是关键,所以有些同志没有注意这些对外源性RNAase的防护RNA也提取的很出色。但是如果你运气不太好的话外源性RNAase污染影响很大的。 2、样品的取材我们抽提RNA往往都是需要其mRNA,而mRNA的表达量和细胞或者组织的生长状态息息相关,我们取组织块应该避免取到坏死组织,而细胞我们应该在其处于生长旺盛的时期收集(贴壁细胞消化要迅速,离心要稍为快些,甚至可以不消化下来直接进入裂解步骤;此外还可以采取先震荡敲击培养瓶的方法使细胞和培养瓶的结合下降,然后用吸管吹打培养基地方法把细胞吹打下来,这样细胞的代谢不会明显的受到抑制。注意在平时传代的时候就要注意观察细胞除了用胰酶消化下来以外是否还有其他比较简单的方法)(此外还可以把培养液倒掉后迅速的加入裂解试剂开始抽提RNA)。 3、待提取样品保存方法这些保存方法温度从4度到零下196度不等,选择哪一种保存方法关键是要对这些保存方法的优缺点有清醒的认识。根据你需要的RNA种类可以做简单的分类。包括RNA病毒RNA ,mRNA(各种),rRNA 等其中最容易降解或者破坏的就是mRNA,最不容易损失的就是RNA病毒RNA (因为有蛋白壳保护)。超低温保存:特指液氮保存不管组织还是细胞如果需要其中的mRNA必须在液氮中保存,-70度等方法都是错误的方法,在很短的时间内或许可以,但是长期是不可能的。-20~~~-70摄氏度保存:RNA病毒的RNA 可以在这个温度段安全的保存。但是其产生的mRNA还是必须超低温保存。 4度保存:有特殊的保护试剂存在地情况下组织的保存:应该是离体后在1min 内就放入液氮或者保护试剂中。由于提取RNA对组织块有一定量的要求,大约100mg居多(脂肪细胞需要的量多的多,因为细胞是大大膨胀的),所以在取材前就需要明确到底你需要的组织大概多大是100mg,令少勿多。如果是取临床的标本,就应该带上液氮罐子,DEPC处理的器械,锡箔纸,线等在手术室外等候,标本一切下就尽快进行切割(大概100mg一块),包装(锡箔纸内),捆扎(方便在液氮罐子中寻找),迅速丢入液氮罐子中,最好是1min内完成(所以大家取材前一定要好好联系一下,不要到时候手忙脚乱的^_^)细胞的保存:比较麻烦些,所以大多都是直接提取RNA再保存。建议离心收集后用特殊保护试剂重悬后保存。 4、RNA提取提取RNA可以分为总RNA,mRNA,Virus RNA(RNA病毒)几类Trizol即异硫氰酸胍-苯酚法,这种方法的原理是:首先用强变性剂异硫氰酸胍裂解细胞,同时使核蛋白复合体中的蛋白变性,释放出核酸。释放出来的DNA 和RNA由于在特定pH时溶解度不同,分别位于整个体系中的中间相和水相,

实验动物学实验报告大鼠,小鼠,小鼠的基本实验操作,大鼠的基本实验操作

实验一小鼠的基本实验操作 一、实验目的:通过实际操作,掌握小鼠的一般操作方法,包括小鼠的抓拿、标记、给药(灌 胃、腹腔注射、皮下、肌肉、尾静脉注射)、取血(眶后静脉丛,摘眼球)、脊椎脱臼法处死、大体解剖。 二、实验动物:昆明小鼠2只(1雌1雄) 三、实验步骤 1、抓取与固定,标记 2、去毛 3、给药:消化道、腹腔注射、尾静脉注射 4、取血:眼眶后静脉丛、尾静脉、眼球摘除法、断头法 5、麻醉:氯胺酮腹腔麻醉 6、处死:脊椎脱臼法 7、解剖: 雄性:睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺(在膀胱下方,胶质状,透明) 雌性:双角子宫、卵巢 肾上腺、胆囊、甲状腺、胃、肝脏、脾、肺、肾、心脏、甲状腺 四、实验结果 1、抓取与固定标记: 抓取:抓小鼠的尾根部 固定:抓住小鼠的尾根部,让小鼠在粗糙平面上爬行,后拉尾跟部,右手的拇 指与食指抓住小鼠两耳及其间的颈部皮肤,小指与无名指将尾巴固定在手掌面。并标记: 2、灌胃法:左手抓取小鼠固定后,右手持特制灌胃针,沿一侧口角进针,紧贴咽后壁,头后仰以便伸直消化道,进针2/3后灌生理盐水0、5ml 3、注射给药: 腹腔注射: 从下腹部的两侧进针 ,进针时针与腹部成45°。进针后稍微晃动针,如无粘滞感则可注射药物 尾静脉注射:一人固定小鼠,另一人用左手中指与拇指将尾拉直,食指托住尾部,在尾动脉位置进针注射0、5ml生理盐水。注射完毕拔出针头,用无菌棉球压迫止血。 4、采血 从眼角内侧0、5cm处进针 眼球摘除法:左手抓取用固定小鼠,右手持弯头镊在眼球根部将眼球摘除,头朝下,眼眶内血迅速流出。 5、麻醉: 0、5%氯胺酮腹腔麻醉:本小鼠重22g,按100mg/kg的药量给药,2分钟麻醉成功 6、处死: 脊椎脱臼法:按住头部,将尾根部向后上方以短促的力量拉即可致死 7、解剖: 雄性:寻找到睾丸、附睾、输精管、鼠蹊腺 雌性:双角子宫、卵巢 3、7、2 肾上腺:米粒大小 胰腺:位于胃下方,类似于脂肪组织,浑浊状 3、7、4 ,胆囊:芝麻大小,浅绿色,半透明,

呋塞米对大鼠的利尿作用(实验报告)【定稿材料】

呋塞米对大鼠的利尿作用 目的:利尿药是一种直接作用于肾脏,增加电解质和水的排出从而使尿量增加的药。其中呋塞米是这种药代表,也是一种强效的利尿药。在学习了利尿药的利尿机制之后,以本实验来验证性的观察呋塞米对麻醉大鼠以及清醒大鼠的利尿作用,从而加深对利尿药及其机制的理解,并掌握麻醉和清醒动物的利尿方法。 原理:呋塞米是一种高效的利尿药,其作用机制为:与肾小管髓袢升支粗短上皮上的Na+——K+——2Cl-同向转运体选择性的结合,从而抑制了其转运能力,因此,Na和Cl在肾小管处的重吸收就受到抑制,因此尿浓缩功能受到影响,从而排出大量几乎等渗的尿液。 同时,预先用1%NaCl对实验大鼠进行水负荷可以使实验现象更加明显。对清醒大鼠的利尿实验应采取代谢笼法。 一呋塞米对麻醉小鼠的利尿作用 1 材料与方法 1.1 实验动物:雄性大鼠 1.2 实验药品:乌拉坦麻醉药,1%呋塞米,生理盐水 1.3 实验器材:手术剪,止血钳,眼科剪,烧杯,刻度试管,导尿管,丝线,缝针,试验台,灌胃针。 2 实验方法: 1)取一只正常大白鼠,称重,然后用生理盐水按照20ml/kg

的比例进行灌胃处理。 2)腹腔注射乌拉坦1.2g/kg进行麻醉。麻醉好后将大鼠固定在大白鼠台上,取仰卧位,然后从颈部作一纵切口,分离出一侧颈外静脉,并做好静脉插管。 3)做腹部切口,暴露膀胱,并以荷包蛋缝合的方式对膀胱进行插管,并排空膀胱。 4)于颈静脉插管处注射生理盐水1ml/kg,并收集20分钟尿液流出量作为正常值。 5)同样方法注射呋塞米1ml/kg,并收集20分钟尿液。比较尿量的变化。 3 实验结果:如下。 分别注射生理盐水和呋塞米20分钟收集到的尿量 组号生理盐水呋塞米 1 0.45 2.5 2 0 1 3 0 0.28 4 0 2.1 5 1 3 均数0.29 1.776 标准差0.442 1.114 p值0.0151

试验用大鼠TheLaboratoryRAT

實驗用大鼠The Laboratory RAT 一、分類(Taxonomy ) (一)舊世界大鼠(Old World Rats) 1. 挪威種大鼠(Rattus norveaicus)-常見的實驗大鼠,實驗用大鼠之始祖,也就是常見之 大棕色鼠,可能發源自亞洲。 2. 大鼠(Rattus rattus)-常見之黑大鼠,即所稱的屋頂大鼠或閣樓大鼠。 3. 玻里尼西亞大鼠(Rattus exulans)-玻里尼西亞大鼠 4. Thamnomys srudaster-樹大鼠;為Plasmodium berghei的天然宿主,可作為瘧原蟲 研究。 5. Mastomys natalensis-具有一些特異的特徵 (1)其具有多對乳頭(8至12對) (2)為小型的大鼠;成熟時體重在40-80克 (3)雌鼠有發育良好之前列腺 (4)目前已知是引起拉薩熱之arena病毒唯一天然的宿主 (二) 新世界大鼠(New world Rats) 1. 棉花大鼠(cotton rats)

2. 木頭大鼠[wood rats ( pack trade rats )(貨櫃大鼠)] 3. 棍棒大鼠( cane rats) 4. 稻米大鼠(rice rats) 5. 攀爬大鼠(climbing rats) 6. 沙鼠(sand rats) 7. 袋鼠大鼠(kangaroo rats) 二、歷史背景 大鼠可能是經由跟隨人類從亞洲旅行到歐洲及美洲。幾乎全世界研究所使用之所有品系皆來自美國。大鼠是第一種為研究所馴養之哺乳動物。費城威斯達(Wistar Institute)研究所是全世界最大的實驗用大鼠種原庫。Henry Herbert Donaldson是第一個將實驗用大鼠標準化的人。Helen Dean King為第一個在1909年進行實驗用大鼠近親繁殖的人。 三、大鼠的優點 1. 容易取得 2. 遺傳穩定 3. 價錢便宜不貴 4. 處理容易 5. 聰明,適應能力強 6. 生理學上已知道的部分很多 7. 菌株已知 8. 對其所罹患疾病相當了解 9. 可作為許多疾病的動物模式 四、利用實驗大鼠進行的研究

狗的解剖实验报告

狗的解剖实验报告 篇一:解剖母鸡实验报告 实验报告--母鸡的解剖 试验时间:XX年12月7日 一、解剖程序 把鸡处死,方法:在鸡的颈部靠近头处开口放血致死,然后进行解剖观察 二、观察内容 (一)消化系统 1. 口腔:无软腭,无唇齿,有上下喙,舌形态与喙相似。 2.嗉囊:食管的膨大部,位于叉骨之前,直接在皮下,偏右 2. 腺胃:纺锤形,粘膜层有胃腺 3. 肌胃:紧接腺胃,近圆形,呈暗红色,粘膜面被覆的角质膜又称鸡内金 4. 十二指肠:位于腹腔右侧,前端与肌胃相接,灰白色,管状

5. 空肠:前接十二指肠,后接回肠,灰白色,管状 6. 回肠:前接空肠,后接结直肠,夹在两条盲肠之间,灰白色,管状 7. 直肠:管腔较大,自回盲口直达泄殖腔 8.盲肠:一对相对很长的盲肠,壁内有丰富的淋巴组织,基部处集成盲肠扁桃体 9.泄殖腔:是消化泌尿生殖系统后端共同通道,由前向后分为粪道泄殖道肛道 10.胰腺:夹在十二指肠肠袢之间,淡黄色,长条形 11. 肝:位于腹腔前下部,暗褐色,分左右两叶,右叶内侧有一绿色胆囊 (二)呼吸系统 1.气管:较长而粗,半透明管状,位于皮下,偏右,进入胸腔在心基上方分为两个支气管 2. 鸣管:位于气管与支气管交叉处,分鸣骨和内外鸣膜,是发声器官 3. 肺:鲜红色,位于胸腔背侧,有很深的肋压迹。 4.气囊:肺内支气管粘膜突出形成,外被浆膜。

(三)心血管系统 心脏:位于胸腔前下方,心基朝向前方,椎体形 (四)生殖系统 1. 卵巢:位于左侧前半部的腹侧,上有大小不一的卵泡。 2. 输卵管:分为:漏斗部,壶腹部,峡部,子宫,阴道五部分 壶腹部:受精部位 壶腹部:卵白分泌部位 峡部:形成卵壳膜 子宫部:形成卵壳 阴道部:在蛋壳外面形成一层角质薄膜 (五)淋巴系统 1.腔上囊(法氏囊):位于鸡的泄殖腔的背侧,是泄殖腔的一个盲囊 2.脾:位于腺胃和肌胃交界处背侧,深红色 (六)泌尿系统

实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项

实验大鼠常见脏器形态学取材方法和注意事项 [取材内容] 大鼠肺组织、大鼠肝脏组织、大鼠胰腺组织、大鼠胃部组织、大鼠空场回肠组织、大鼠肾组织、门静脉血、淋巴组织、大鼠心脏。 [试剂及药品] 戊巴比妥钠或10%水合氯醛、75%酒精、生理盐水、多聚甲醛或福尔马林液、3戊二醛磷酸盐缓冲液(PBS0.01mol/LP pH7.4)或4戊二醛、肝素钠、器械液器械清洗消毒液 [器材] 备皮刀、解剖台、弯盘、组织剪、眼科剪、手术刀柄、刀片、小号弯式血管钳、蚊式血管钳、眼科镊、无损伤血管夹、聚乙烯管、三通管、丝线、培养皿、天平、一次性离2ml、1.5ml 、冻存管、肝素锂真空采血管、微量移液器、高速离心机、注射器10ml、5ml、 2ml、无菌手套、冰箱、冰盒、液氮罐 [取材动物] 大鼠 [取材步骤] 1. 取材前夜禁食,自由饮水。 2. 小鼠称重,按照50mg/kg的比例用5ml的注射器配合针头抽取戊巴比妥钠备用。 3. 正左手的小指和无名指抓住大鼠的尾巴,另外三个手指抓住大鼠的颈部,使大鼠头部向向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部,防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。右手持注射器,从腹部近腿根处刺入后再腹部皮下穿行深入,动作轻柔,缓慢注射。注射完药物后,缓缓拔出针头,手指按住针口对小鼠腹部轻柔按摩,促进麻醉药物的吸收,掐小鼠尾部检测小鼠麻醉程度。 4.将小鼠四肢固定于解剖台上,暴露小鼠整个胸部和腹部,修剪去腹部毛发,75%酒精消毒。 5.沿腹侧正中线自阴茎上源由下而上剪开腹部皮肤直至剑突,向两侧钝性剥开皮肤与皮下组织,暴露腹壁浅肌层。沿白线钝性分离腹壁肌肉,剪开腹膜,暴露腹腔,将肝脏向上翻起,显露肝门。 6.门静脉血采集:将剪成斜口的聚乙烯管尖端背向肝门方向插入门静脉,抽取门静脉血2ml,无创血管夹夹闭门静脉止血。将抽取门静脉血加入一次性离心管低温静置过夜,4℃离心,3000-3500/min,10分钟,吸出上清液,分装,-80摄氏度保存备用。 7.肝脏取材:结扎剪断肝门管道系统,钝锐结合完整取出大鼠肝脏,放置于无菌培养皿,生理盐水冲洗,称重并记录。①切取肝左叶约1mm×1mm×1mm组织3

大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色

大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色 步骤如下: (一)固定与修块 取组织块放入Bouin氏液中,组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面 刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。 (二)脱水与透明 1. 75%乙醇50分钟 2. 85%乙醇50分钟 3. 95%乙醇(I) 30分钟 4. 95%乙醇(II) 30分钟 5. 100%乙醇(I) 30分钟 6. 100%乙醇(II) 30分钟 7 1/2二甲苯(乙醇与二甲苯等体积)20分钟 &二甲苯(I)20分钟 9 .二甲苯(II)10分钟(可依据透明效果而定) 若脱水不好,二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后,要充分滤干组织块,一般用筒纸吸干组织块上的液体,以免影响其他液体的浓度,但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。(三)浸蜡、包埋与修蜡块 1.浸蜡:将60C恒温箱打开,使石蜡充分溶解,待脱水与透明结束后,将组织块转入石蜡里,放置于60 C恒温箱120分钟。 2 .包埋:将60 C的石蜡倒入纸盒内,然后用小镊子将各组织块按一定的顺序排列好,使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中,以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固,可将纸盒置于一玻璃板 上(或大培养皿内),然后将玻璃板置于80-90 C左右热水上,包埋时蜡盒底部要放平,做蜡块的蜡要反复冻融较好。 3 .修蜡块:待纸盒内蜡凝固后,用刀片将其修成梯形,组织块与蜡块边缘之间的距离不得小于2mm。 (四)切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上,用手指充分抹 匀,呈半干状为佳。切片厚约4-8卩m,将切片在55C左右水浴中展开,展开程度 以带黄颜色的组织完全摊平为准。用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片,放入37C烘箱中过夜。每个组织块捞片2张。过夜后,将载玻片置于玻片架上, 进行下面的实验。 (五)脱蜡、染色与脱水 倾斜玻片架,将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干,减轻对其他试剂浓 度的影响。全过程约需要60分钟。 1.脱蜡 (1)二甲苯(I)15分钟 (2)二甲苯(II)15分钟 (3)100%乙醇2分钟 (4)95%乙醇(I)1分钟 (5)95%乙醇(II)1分钟 (6)蒸馏水浸洗1分钟 2 .染色

肝切片的实验报告doc

肝切片的实验报告 篇一:肝切片实验报告? 实验九显微摄影一一小鼠肝脏结构年级专业*班* 组学号姓名 Cl B 500 um 1 m 2 IOOum i IOOum 4 50 μm图版说明: 图1:小鼠肝脏横切部分结构,示肝小叶(a),静脉血管(b)o图厶图1 ( α部位)的放大,示肝小叶(C)O 图 3:示肝小叶(Cl)O图4:示静脉血管(e)o 图5:示肝细胞(f),肝细胞细胞核(g)。图6:图2 (B部位)的放大,示上皮细胞(h),上皮细胞细胞核(i), 肝血窦(j),中 央静脉(k),肝动脉(1),血细胞(Dl)o结构说明: 肝脏是脊椎动物身体内以代谢功能为主的一个器官,并在身体里面扮演着氧化,储存肝 糖,解读等功能。肝脏由肝小叶组 成,肝小叶是肝脏的基本组成成分,它来执行肝脏的基本职能。而肝小叶又是由肝细胞组成,当肝细胞大量损坏时,肝小叶不能正常工作,影响肝脏 正常生理功能,而出现各种各样的症状。肝小叶成棱柱状,中央有一条中央静脉穿过,肝细 胞围绕中央静脉成放射状排列。肝细胞是一种高度分化并具有多种功能的细胞,胞质内各种细胞器丰富而发达,并

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含有 糖原,脂滴等内涵物。细胞器和内涵物的含量与分布常因细胞的功能状况或饮食变化而变动。 一般肝细胞里线粒体含量都比较多,遍布于胞质内,为肝细胞的功能活动不断提供能量。肝细胞核大而圆,居中央,染色质丰富色浅,核膜清楚,核仁1至数个。部分肝细胞(约25%)有双核,有的肝细胞的核体积较大,为多倍体核。 肝血窦位于肝板之间,互相吻合成网状管道。血窦腔大而不规则,血液从肝小叶的周边 经肝血窦流向中央,汇聚到中央静脉。5 50 Um篇二: 实验报告(一)实验名称:实验性空气栓塞实验时间:成绩:实验目的:了解空气栓塞对机体的影响实验材料:家兔,20ml 注射器及针头,解剖刀,剪,银子,面盒,浸有二甲苯的棉球若 干 等实验方法(简要说明): 1.先观察家兔的一般状况:活动状态、呼吸频率、嘴唇颜色及瞳孔大小等。 2.用浸有二甲苯的棉球涂擦一侧耳廓,使局部血管扩张,便于穿刺注射。 3.用注射器经耳缘静脉注入空气10?15πιl,记录时间,

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