抗甲状腺过氧化物酶抗体测定操作规程
抗甲状腺过氧化物酶过氧化物酶标准操作规程
1 检验申请
单独检验项目申请：抗抗甲状腺过氧化物酶过氧化物酶测定(缩写Anti-TPO)；检验项目申请：抗甲状腺过氧化物酶组合项目测定；临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理
2.1标本采集
2.1.1常规静脉采血约2ml，不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5 下列标本为不合格标本
2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对于测定和吸样有干扰的标本：如近期使用鼠源性单克隆抗体诊断后采取。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存
2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清, 避免溶血。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定8h，普通冰箱中（2～8℃）稳定48h。需较长时间保存应将血清存放于-20℃。冰冻标本仅可冻融一次。2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置2～8℃冰箱内保存7d。
2.3标本采集的注意事项
2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动。
2.3.2采血后应使血液充分凝固，离心后的血清中不能含有颗粒物或微量纤维蛋白；可使用选用肝素、EDTA抗凝的血液标本。
3 方法原理
Anti-TPO测定采用双位点加心化学发光免疫分析法，其检测原理来如下：第一步：将标本、包被着链霉亲和素及结合了生物素化甲状腺过氧化物酶蛋白的超顺磁性磁粒（磁珠)添加到反应管中，经过孵化，样本中 Anti-TPO和磁珠上的TPO结合。反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合物质。
第二步：将蛋白A碱性磷酸酶结合物添加到反应管中，该结合物与 Anti-TPO结合。在第二次孵育完成后，磁场吸附磁珠，洗去未结合的物质。
第三步：将化学发光物添加到反应管内，发光底物（AMPPD）被碱性磷酸酶所分解，脱去一个磷酸基，生成一个不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态
量。所产生光子数与样本内的 Anti-TPO浓度成正比。样本内分析物的量油校准曲线来确定。
4 试剂及其他用品
剂盒组分试剂1（Ra）：
组分：包被着链霉亲和素及结合了生物素化TPO蛋白的超顺磁性微粒，悬浮于缓冲液，含防腐剂。
原料及含量：包被着链霉亲和素及结合了生物素化TPO蛋白的超顺磁性微粒，0.2g/l；HEPE缓冲液，50mmol/L；Proclin300,0.5g/L；叠氮钠，0.9g/L。含防腐剂。
装量:2×30人份/盒，2×2.7ml；2×50人份/盒,2×3.8ml；2×100人份/盒,2×6.6ml。
4.2.2试剂2标记物（Rb）
组分：蛋白A-碱性磷酸酶标记物稀释于缓冲液，含防腐剂。
原料及含量：蛋白A-碱性磷酸酶标记物，3mg/L；MES缓冲液，50mmol/L;Proclin300,0.5g/L;叠氮钠，0.9g/L。
装量:2×30人份/盒，2×5.0ml；2×50人份/盒,2×7.8ml；2×100人份/盒,2×14.8ml。
4.2.3试剂2缓冲液（Rc）
组分：缓冲液，含防腐剂。
原料及含量：HEPE缓冲液，50mmol/L；Proclin300,0.5g/L；叠氮钠，0.9g/L。含防腐剂。
装量:2×30人份/盒，2×2.4ml；2×50人份/盒,2×3.5ml；2×100人份/盒,2×6.3ml。
4.2.4试剂4样本处理液（Rd）
组分：样本处理液，含防腐剂。
原料及含量：Tris缓冲液，50mmol/L；Proclin300,0.5g/L;叠氮钠，0.9g/L。装量:2×30人份/盒，2×2.4ml；2×50人份/盒,2×3.5ml；2×100人份/盒,2×6.3ml。
4.2.5 试剂包即开即用，临用时轻柔颠倒混匀数次，无须特殊准备。
4.3其他试剂与用品
4.3.1 化学发光底物：发光剂底物液。
5 校准品与校准模式
5.1校准品: 深圳迈瑞公司提供的专用 Anti-TPO校准液。需贮2～8℃。
5.2校准类型和校准点数目：非线性模式，4个校准点。
5.3校准周期：在同一批号试剂的使用效期内校准曲线有效，但在间隔56d后需要重新校准。每当：①更换试剂批号或出现质控漂移时；②仪器进行全面保养后；③仪器的重要零件更换后，进行一次校准。
5.4校准液重建方法：液体试剂，直接使用。
6.1质控品：采用深圳迈瑞公司提供配套的质控品。
6.2质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。
6.3质控品测定：在每一批标本中测定质控血清一次。
6.4质控规则：采用L-J质控图，以±3s为失控限。标准差由本室实验数据得出。
6.5如出现失控情况，按室内质控标准操作程序采取各种有效的纠正措施及时纠正
并在确认重新回复到控制状态后开始标本检测。
7 适用仪器
深圳迈瑞公司CL-1200i自动发光免疫分析仪。
8 标本检测步骤
装载试剂→进行校准→进行质控→输入标本检测项目→加载标本→标本测定→结果复核→报告
9 主要分析参数
无须输入操作参数，仪器根据预设的分析项目参数和试剂条码的信息自动进行分析。标本量15μL。
10 结果计算
仪器根据校准曲线自动给出每个标本测定结果。测定结果单位以IU/mL表示。
11 检验结果的报告及范围
11.1结果的报告
11.1.1结果经审核后，确认准确无误后发出报告。
11.1.2报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。
11.1.3如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。
11.2报告范围：0.00~ 9.00 IU/mL，超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复测定的结果。
12 操作性能
12.1精密度：批内CV＜4.5％，批间CV＜5.0％。
12.2 分析范围：0.25 ~ 1000IU/mL 。
12.3灵敏度：0.25IU/mL 。
12.4方法的有限性及干扰因素：胆红素≤75mg/dL、TG≤3000m g/dL、Hb ≤1500m g/dL、总蛋白≤10g/dl，在检测结果的干扰偏差±10%范围内。
13 参考范围及医学决定水平
参考值（血清）： 0.00 ~ 9.00IU/mL ng/ml
14 临床意义
腺肿（GD）和特发性甲低阳性率可达60%～70%左右，明显高于非自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者；但结果阴性并不能排除自身免疫疾病的可能性。
2、高滴度的 Anti-TPO对桥本甲状腺炎（HT）有较高的诊断价值.
3、GD、HT等疾病关系密切，出现的自身免疫抗体常有重叠现象， Anti-TPO持续存在对GD和HT有预后的意义，提示此类HT易发生甲减；而GD在131I治疗或手术后较易出现甲减，提示GD病人在采用131I治疗时，若 Anti-TPO阳性要注意减少其用量。
4、在疾病缓解或病程迁延时，TPO抗体可能消失。AITD患者在治疗过程中，若Anti-TPO由阴转阳，提示甲状腺疾病复发。
5、产后甲状腺炎、萎缩性甲状腺炎， Anti-TPO可呈阳性。
6、部分结节性甲肿患者Anti-TPO也可呈阳性。
7、其它自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎等 Anti-TPO亦可呈阳性结果。
15 结果审核以及与相关项目的联系
15.1由资深专业人员负责检验结果的审核。
15.2审核者认真审核每一个测定结果，对发出报告结果的可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。
15.3相关项目：审核与临床用药情况是否相符，如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因
16 有关引用程序与文件
16.1 CL-1200i自动发光免疫分析仪仪器标准操作规程。
16.2免疫检验室内质控标准操作程序。
16.3检验结果审核程序。
16.4标本送检和接收程序。
17 参考文献
17.1陆永绥，张伟民主编. 临床检验管理与技术规程. 杭州:浙江大学出版社, 2004.
17.2 Anti-TPO测定试剂盒说明书。
17.3 叶应妩，王毓三，申子瑜主编. 全国临床检验操作规程 (第三版). 东南大学出版社，2006.
18 本SOP变动程序
任何一位使用本SOP的工作人员如提出对本SOP改动意见，或本测定项目的方法、试剂有变动的情况，可以对本SOP作出改动，但必须先报经专业主管和科主任批准。
19 本SOP涉及的记录与表单
19.1 剂装载记录表
19.2 质控记录
19.3 失控及失控处理记录
19.4 检验结果审校核记录
抗血清制备及抗体效价测定
摘要............................................................................. .. (4) 【实验过程】 (5) PartⅠ. NDV 抗血清制备 (5) 一、实验原理 (5) 二、实验仪器、材料和试剂 (7) 1. 仪器 (7) 2. 材料 (7) 3. 试剂 (7) 三、方法和步骤 (7) （一）NDV 兔抗血清制备 (7) 1. 家兔捉拿方法 (7) 2. 家兔固定方法 (8) 3. 初次免疫 (9) 4. 二次免疫 (10) 5. 终末免疫 (10) 6. 试血 (10) 7. 颈动脉放血 (10) 8. 血清分离 (12)
9. 抗血清保存 (12) （二）NDV 鼠抗血清制备 (12) 1. 小白鼠的捉拿和固定 (12) 2. 初次免疫 (13) 3. 二次免疫 (15) 4. 终末免疫 (15) 5. 试血 (16) 6．放血 (18) 7．血清分离 (19) 8．抗血清保存 (19) Part Ⅱ. 琼脂双扩散实验检测抗体效价 (19) 一、基本原理 (19) 二、实验仪器、材料和试剂 (20) 1. 仪器 (20) 2. 材料 (20) 3. 试剂 (20) 三、方法和步骤 (20) 1. 灭活鸡新城疫病毒 Ulster 2C 株抗原提取 . 20 2. 1%琼脂糖配制 (20) 3. 倒平板 (21) 4. 打孔 (21) 5. 稀释抗血清 (22)
6. 加样 (22) 7. 孵育 (23) 8. 结果观察 (23) Part Ⅲ. 酶联免疫吸附试验测定 NDV 抗血清效价 (23) 一、基本原理 (23) 二、实验仪器、材料和试剂 (24) 1. 仪器 (24) 2. 材料 (24) 3. 试剂 (24) 三、方法和步骤 (25) 1. 鸡新城疫病毒 Ulster 2C 株灭活抗原提取 . 25 2、抗原包被 (25) 3. 封闭 (25) 4. 洗板 (25) 5. 稀释抗血清 (25) 6. 加抗血清 (26) 7. 洗板 (26) 8. 加酶标二抗 (26) 9. 洗板 (27) 10. 显色 (27) 11. 终止 (27) 12. 读数 (27)
Q_HBY QF0001-2016抗体检验标准操作规程
Q/HBY 抗体检验标准操作规程 杭州博茵生物技术有限公司发布
前 言 本规范由杭州博茵生物技术有限公司提出。 本规范起草单位:杭州博茵生物技术有限公司。 本规范主要起草人：李因来、徐东鑫、陈浙、潘剑用。本规范于2016年7月27日首次发布
编制人陈浙日期2016.07.26部门抗体研发部审核人徐东鑫日期2016.07.27部门质量部 批准人潘剑用日期2016.07.27部门抗体研发部发放编号Q/HBY QF0001‐2016生效日期2016.07.27 抗体检验标准操作规程 1.目的 对单克隆抗体成品的检验操作做出规定，以保证成品质检结果的准确性。 2.范围 适用于下述第6条“合格标准”表格中所列抗体成品的效价测定。 3.职责 操作人员依据本规程进行抗体检验。 4.材料与设备、试剂与溶液 见下述相关文件。 5.检验方法 5.1外观 包装完好，无漏液现象，标签准确。 5.2物理性能 自然光下目测，观察产品溶液是否澄清、是否有沉淀或悬浮物。 5.3浓度 按QC-0004《抗体浓度测定（A280）标准操作规程》测定样品的浓度。 5.4纯度 将样品稀释到1mg/ml，按QC-0003《蛋白SDS-PAGE检测标准操作规程》进行检测并作记录。其中，样品缓冲液含DTT或β-巯基乙醇，样品应加热处理，浓缩胶浓度为3%，分离 胶浓度为12%，染色方法为考染。 5.5效价 按QC-0002《效价检测标准操作规程》进行。
6.合格标准 项目 产品 M010101M010102 外观包装完好，无漏液现 象，标签准确 包装完好，无漏液现 象，标签准确 物理性能无色澄清液体、无沉 淀、无悬浮物 无色澄清液体、无沉 淀、无悬浮物 浓度≥3mg/ml，且偏差± 5% ≥3mg/ml，且偏差± 5% 纯度≥95%≥95% 效价 1.28ng/ml 1.28ng/ml 7.相关文件 QC-0002《抗体效价检测标准操作规程》 QC-0003《蛋白SDS-PAGE检测标准操作规程》 QC-0004《抗体浓度测定（A280）标准操作规程》 8.相关记录 QF-0001-RE-01《抗体检验报告》 QF-0002-RE-01《抗体效价检测记录》 QC-0003-RE-01《蛋白SDS-PAGE检测记录》 QC-0004-RE-01《抗体浓度测定（A280）记录》
甲状腺自身抗体检测在甲状腺疾病诊断中的意义
甲状腺自身抗体检测在甲状腺疾病诊断中的意义 发表时间：2015-11-30T10:57:40.293Z 来源：《医药前沿》2015年第28期供稿作者：石建荣李海燕王新燕 [导读] 武警甘肃总队医院核医学科血清中的甲状腺球蛋白（TGAb）为特异性甲状腺自身抗体，被视为慢性淋巴细胞性甲状腺炎的特异性诊断指标。 石建荣李海燕王新燕 （武警甘肃总队医院核医学科甘肃兰州 730050） 【摘要】目的：探讨甲状腺自身抗体检测在甲状腺疾病诊断中的意义。方法：将我院接收的153例（将其分为Graves病组、HT组以及非自身免疫性甲状腺疾病组）经确诊的甲状腺疾病患者与来我院体检的75例健康者（设为对照组）作为研究对象，分别检测其FT3、T3、 FT4、T4、TSH、TPOAb以及TGAb的含量。结果：TPOAb、TGAb水平及阳性率甲状腺各组均比对照组高（P＜0.05），但TPOAb、TGAb水平高低不能反映病情程度。结论：血清TPOAb、TGAb水平检测在甲状腺疾病诊断中具有重要意义。 【关键词】甲状腺自身抗体；甲状腺疾病；诊断意义 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）28-0173-02 血清中的甲状腺球蛋白（TGAb）为特异性甲状腺自身抗体，被视为慢性淋巴细胞性甲状腺炎的特异性诊断指标，其在Graves病和慢性淋巴细胞性甲状腺炎患者中的含量较之于正常者高，而对TPOAb含量的测定，在Graves病与桥本氏甲状腺炎中同样可发挥至关重要的作用[1]。本文以此为出发点，对甲状腺自身抗体检测在甲状腺疾病诊断中的意义进行了研究，现报道如下。 1.资料与方法 1.1 一般资料 将我院2014年5年-2015年5月接收的153例经确诊的甲状腺疾病患者与来我院体检的75例健康者（设为对照组）作为研究对象，并将153例甲状腺疾病患者分为Graves病组、HT（桥本病）组以及非自身免疫性甲状腺疾病组。 1.2 方法 4组受试者均行FT3（游离三碘甲状腺原氨酸）、T3（三碘甲状腺原氨酸）、FT4（游离甲状腺腺素）、T4（甲状腺腺素）、TSH（促甲状腺素）、TPOAb以及TGAb的含量检测，检测设备为日本东曹AIA2000全自动免疫分析仪，正常参考值的范围：TSH为0.4- 5.29μIU/ml，T4为5-13μ2g/dl，FT4为0.88-1.85ng/dl，T3为0.8-1.9ng/ml，FT3为1.4-4.2pg/ml。阳性判定标准为TPOAb＞40IU/ml，TGAb ＞110IU/ml。 1.3 统计学方法 所有数据均使用SPSS17.0统计软件包分析处理，计量资料以（x-±s）表示，以t检验，计数资料以（%）表示，进行x2检验，以P＜0.05为差异具有统计学意义。 2.结果 4组受试者TGAb、TPOAb含量和阳性率情况比较 TPOAb、TGAb水平及阳性率甲状腺各组均比对照组高（P＜0.05），但TPOAb、TGAb水平高低不能反映病情程度，具体见表1。 3.讨论 自身免疫性甲状腺疾病为临床上较为常见的甲状腺疾病，且Graves病、桥本甲状腺炎等同样较为常见，对患者行生化检查时，上述疾病者其血清中的甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)水平较之于正常者存在较大的差异，因而在自身免疫性甲状腺疾病诊断中对上述指标进行检测，对于疾病的诊断、治疗方案的确定以及预后等可起到至关重要的作用[2]。 以往文献中的报道结果显示[3]，就自身免疫性甲状腺疾病患者而言，桥本病组患者血清中的TPOAb与TGAb水平及其阳性率，与Graves组比较，前者明显要高，且经检测后的结果表明，非自身免疫性甲状腺疾病组上述指标水平明显低于自身免疫性甲状腺疾病组，同样，自身免疫性甲状腺疾病组患者血清中的TPOAb与TGAb水平及其阳性率较之于正常体检者明显要高；就桥本病患者而言，其血清中的TPOAb与TGAb水平及其阳性率较之于正常体检者，前者约为后者的数百倍[4]，且经临床证实的桥本病患者发病呈现u隐匿性特征，发病早期为患者行检查时，绝大多数患者的甲状腺素水平多在正常范围内波动，直到后期，患者的甲状腺功能才会出现减退现象，因而单就甲状腺素水平这个单一的指标来对甲状腺疾病进行诊断，极易出现漏诊与误诊现象，因而临床诊断难度较大，故而应将TPOAb与TGAb水平二者相联合，以提高甲状腺疾病的诊断率。另有报道称[5]，正常人群中的TPOAb与TGAb阳性率可达10%左右，随着受检者年龄的增加，TGAb阳性率与其年龄呈现出正比关系，且男性阳性率明显低于女性，当女性年龄＞40岁时，阳性率则随之上升到15%左右，当年龄＞60岁时，阳性率则随之上升到20%左右，但大部分患者多处于低浓度水平，可见TPOAb与TGAb变化广泛存在于患有甲状腺疾病的患者中，但同时也会存在于1型糖尿病、红斑狼疮以及风湿疾病中，临床上应加大注意。 本研究结果显示，血清甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)水平及阳性率甲状腺各组均比正常对照组高，但TPOAb、TGAb水平高低不能反映病情程度，故而认为，血清甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)水平检测在甲状腺疾病诊断中具有重要意义。 【参考文献】 [1]朱杰，王善菊，常青燕.HTG、A-TG、A-TPO联合检测在甲状腺疾病诊断中价值[J].中国实验诊断学，2009，10（04）：510-513. [2]刘艳菊.促甲状腺激素和甲状腺自身抗体在甲状腺疾病诊断中的临床应用[J].社区医学杂志，2015，16（06）：33-34.
抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)产品技术要求华科泰
抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中抗甲状腺过氧化物酶抗体（TPO-Ab）的含量。 1.1 包装规格 96人份/盒。 1.2 主要组成成分 主要组成成分见表1。 表1
注：校准品靶值批特异、具体浓度详见标签。 2.1物理性能 试剂盒的各液体组分应澄明，无沉淀或絮状物。 包被抗体微孔板的铝箔袋，应无破损现象。 2.2 准确度 试剂盒内校准品与相应浓度的中国食品药品检定研究院的标准品（编号150557）同时进行分析测定，用Log(X)- Log(Y)模型拟合，要求两条剂量-反应曲线不显著偏离平行（t检验）；以中国食品药品检定研究院的标准品为对照品，试剂盒内校准品的实测值与标示值的效价比应在0.900～1.100之间。 2.3 剂量-反应曲线的线性 在企业线性范围内［5，240］IU/ml，剂量-反应曲线的相关系数应（r）应不低于0.9900。 2.4 重复性 重复性（CV%）应不高于10.0%.
2.5 批间差 2.5.1 批间差 批间差（CV%）应不高于15.0%。 2.5.2 批内瓶间差 校准品各浓度点（除零外）批内瓶间差（CV%）应不高于15.0%。 2.6 空白检测限 试剂盒的空白检测限应不高于4IU/mL。 2.7 特异性 表2 交叉反应 2.8 溯源性 根据GB/T 21415-2008的有关规定，提供所用校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，溯源至中国食品药品检定研究院提供的标准品（编号：150557）。 2.9 稳定性
2℃～8℃保存，有效期12个月，效期后2个月内分别检测2.1～2.4、2.6项，其结果应符合各项要求。
血型抗体效价测定
血型抗体效价测定 目的了解血型抗体效价测定的操作方法。 原理将被检抗血清作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个（+）凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。 器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。 试剂1.标准2%A型红细胞生理盐水悬液。 2．生理盐水。 标本被检者血清。 操作以抗A效价测定为例。 1．血清倍比稀释取10支小试管，每管加入生理盐水0.1ml。在第1管中加入0.1ml被检者血清，混匀后吸取0.1ml加入第2管，依此类推，至第 10管，最后弃去0.1ml。 2．加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀。 3．温育置15~20°C室温中温育15min。 4．离心和观察结果以1000r/min离心1min，以出现1个（+）凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。 注意事项 1．倍比稀释要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。 2．离心后试管内上清液出现溶血，表明不仅有抗原抗体反应，而且有补体激活，具有重要临床意义。 血型抗体效价测定 目的了解血型抗体效价测定的操作方法。 原理将被检抗血清作倍比稀释后，加入一定量的抗原红细胞，观察凝集强度。以抗体稀释后仍能与抗原红细胞出现1个（+）凝集的试管稀释倍数之倒数定为该抗体的效价。 器材小试管、刻度吸管、37°C水浴箱。 试剂1.标准2%A型红细胞生理盐水悬液。 2．生理盐水。 标本被检者血清。 操作以抗A效价测定为例。 1．血清倍比稀释取10支小试管，每管加入生理盐水0.1ml。在第1管中加入0.1ml被检者血清，混匀后吸取0.1ml加入第2管，依此类推，至第10管，最后弃去0.1ml。 2．加入抗原红细胞于每管中加入2%A型红细胞生理盐水悬液0.1ml，混匀。 3．温育置15~20°C室温中温育15min。 4．离心和观察结果以1000r/min离心1min，以出现1个（+）凝集强度试管的血清稀释倍数的倒数定为该抗血清效价。 注意事项 1．倍比稀释要准确，避免稀释不匀出现跳管现象。
甲状腺验血各项功能检测项目临床意义--文字版
甲状腺验血各项功能检测项目临床意义 中山--0,开始转载于 2011-12-26 20:13:33 原文由上海-天天快乐发表于甲状腺交流 3群 | 查看原文 回复转载到 1、总三碘甲腺原氨酸（TT3，T3）（周一～周五检测，可当天出报告，急诊可随时检测） TT3是甲状腺激素对各种靶器官作用的主要激素。血清TT3浓度反映甲状腺对周边组织的功能优于反映甲状腺分泌状态。TT3是查明早期甲亢、监控复发性甲亢的重要指标。TT3测定也可用于T3型甲亢的查明和假性甲状腺毒症的诊断。 增高：甲亢，高TBG血症，医源性甲亢，甲亢治疗中及甲减早期TT3呈相对性增高；碘缺乏性甲状腺肿病人的TT4可降低，但TT3正常，亦呈相对性升高；T3型甲亢，部分甲亢患者TT4浓度正常，TSH降低，TT3明显增高。降低：甲减，低T3综合征（见于各种严重感染，慢性心、肾、肝、肺功能衰竭，慢性消耗性疾病等），低TBG血症等。 正常参考值：0.45～1.37 ng/ml 2．总甲状腺素（TT4，T4）（周一～周五检测，可当天出报告，急诊可随时检测） TT4是甲状腺分泌的主要产物，也是构成下丘脑-垂体
前叶-甲状腺调节系统完整性不可缺少的成份。TT4测定可用于甲亢、原发性和继发性甲减的诊断以及TSH抑制治疗的监测。 增高：甲亢，高TBG血症（妊娠，口服雌激素及口服避孕药，家族*），急性甲状腺炎，亚急性甲状腺炎，急性肝炎，肥胖症，应用甲状腺激素时，进食富含甲状腺激素的甲状腺组织等。降低：甲减，低TBG血症（肾病综合征，慢性肝病，蛋白丢失性肠病，遗传性低TBG血症等），全垂体功能减退症，下丘脑病变，剧烈活动等。 正常参考值：4.5～12 ug/dl 3．游离三碘甲腺原氨酸（FT3）/ 游离甲状腺素（FT4）（周一～周五检测，可当天出报告，急诊可随时检测） FT3、FT4是T3、T4的生理活性形式，是甲状腺代谢状态的真实反映，FT3、FT4比T3、T4更灵敏，更有意义。FT3、FT4测定的优点是不受其结合蛋白质浓度和结合特性变化的影响，因此不需要另外测定结合参数。 FT3含量对鉴别诊断甲状腺功能是否正常、亢进或低下有重要意义，对甲亢的诊断很敏感，是诊断T3型甲亢的特异性指标。 FT4测定是临床常规诊断的重要部分，可作为甲状腺抑制治疗的监测手段。当怀疑甲状腺功能紊乱时，FT4和TSH
甲状腺过氧化物酶超出1000,是什么病
甲状腺过氧化物酶超出1000，是什么病？ 甲状腺过氧化物酶（TPOA）是催化甲状腺激素的重要酶。甲状腺过氧化物酶（TPOA）由甲状腺滤泡细胞合成，它是由933个氨基酸残基组成的分子量为103kD的10%糖化的血色素样蛋白质，在滤泡腔面的微绒毛处分布最为丰富。甲状腺过氧化物酶很常见，服用某些药物也会产生甲状腺过氧化物酶升高的现象，超出三倍以上就可确诊为甲状腺炎，在三倍以下可以观察，看是否甲状腺过氧化物酶恢复正常。 甲状腺专家贾春宝博士指出：甲状腺过氧化物酶（TPOA）是主要的甲状腺组织自身抗体，是甲状腺激素合成过程的关键酶，与甲状腺组织免疫性损伤密切相关。主要包括甲状腺刺激性抗体(TS-Ab)和甲状腺刺激阻滞性抗体(TSB-Ab)。 这项化验结果高说明您患有甲状腺的炎症，一般来说甲状腺功能的检查都会查T3、T4、TSH，所以只有这一项不合格的话，就说明只是单纯的炎症，没有伴随甲亢或甲减的症状，但是并不能肯定炎症是如果引起的，因为引起炎症的因素有很多，所以还要配合其他检查来确定。建议再去做一个甲状腺彩超，看是否有可能是甲状腺的结节或肿大引起的。 对于甲状腺炎的治疗，西医是没有药物治疗的，只有当患者发展为终身性甲减或者甲亢时，医生会开一些激素药，让患者服用，长期服用激素对身体有很大的影响，而且会产生依赖性。 中医中药对于治疗桥本氏甲状腺为具有明显的优势。贾春宝博士说，所谓桥本甲状腺炎在中医里主虚证，由脾肾阳虚引起的，所以患者常常表现为乏力、倦呆，记忆下降等症状。在临床上，我们通过健脾气、温肾阳的方法，可达到扶弱固本，增强后天禀赋的效果，从而使甲状腺过氧化物酶指标恢复正常。
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病血清学检查标准操作规程 (一)检验目的 检测孕妇产前与其丈夫ABO及Rh血型相容性、孕妇IgG 抗体效价、产后新生儿体内不相容抗体存在情况、新生儿与产妇之间血型相容性，为新生儿溶血病的预防、诊断及治疗提供可靠的实验室依据。 (二)检验原理 新生儿溶血病是由母婴血型不合，母亲体内与新生儿红细胞抗原不配合的IgG性质的血型抗体进入新生儿体内，破坏新生儿或胎儿红细胞而引起，可发生在胎儿期和新生儿早期，溶血严重者可出现死胎而流产，存活者则有不同程度的新生儿黄疸。新生儿溶血病产前诊断方法主要包括检测胎儿父母的ABO及Rh血型、孕妇不规则抗体筛查、外周血抗A ／抗B或Rh抗体效价来判断新生儿溶血病发生的可能性及严重程度；新生儿溶血病产后诊断主要包括母子ABO及RhD 血型鉴定试验、新生儿标本三项试验，为临床诊断及进一步采取治疗手段提供可靠的依据。 (三)适用范围 适用于新生儿溶血病产前、产后血型血清学试验。 (四)设备性能参数 参见血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Ortho BioVue离心机及各全自动血型／配血系
统使用说明书。 (五)器材与试剂 1.器材血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、强生Or-tho BioVue离心机、塑料软试管、塑料硬质试管(75mmXl2mm)、试管架、一次性塑料滴管、记号笔、移液枪、一次性移液枪头。 2.试剂DiaMed ABO／RhD血型卡、OrthoBioVueABO ／RhD血型卡、抗A、抗B血清、Rh分，型血清、生理盐水、抗球蛋白试剂(市售单克隆)、抗体筛查试剂红细胞、抗体鉴定试剂红细胞、致敏的阳性对照细胞(自制)。 (六)标本要求 1.夫妇标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无溶血及明显乳糜。 2.患儿标本EDTA-K2或EDTA-K3抗凝全血≥3ml(手工操作时也可以使用不抗凝标本)，经B600-A型离心机在 1 760g条件下，离心5分钟，离心后无明显乳糜。 (七)校准步骤 参照血清学专用离心机、达亚美ID离心机、达亚美ID 孵育器、OrthoBioVue离心机及各全自动血型／配血系统使用说明书中的校准要求执行。 ’ (八)操作程序
甲状腺功能检测项目临床意义
甲状腺功能检测项目临床意义 1．总三碘甲腺原氨酸（TT3 ) TT3是甲状腺激素对各种靶器官作用的主要激素。血清TT3浓度反映甲状腺对周边组织的功能优于反映甲状腺分泌状态。TT3是查明早期甲亢、监控复发性甲亢的重要指标。TT3测定也可用于T3型甲亢的查明和假性甲状腺毒症的诊断。 增高：甲亢，高TBG血症，医源性甲亢，甲亢治疗中及甲减早期TT3呈相对性增高；碘缺乏性甲状腺肿病人的TT4可降低，但TT3正常，亦呈相对性升高；T3型甲亢，部分甲亢患者TT4浓度正常，TSH 降低，TT3明显增高。降低：甲减，低T3综合征（见于各种严重感染，慢性心、肾、肝、肺功能衰竭，慢性消耗性疾病等），低TBG血症等。 正常参考值：～ ng/ml 2．总甲状腺素（TT4） TT4是甲状腺分泌的主要产物，也是构成下丘脑-垂体前叶-甲状腺调节系统完整性不可缺少的成份。TT4测定可用于甲亢、原发性和继发性甲减的诊断以及TSH抑制治疗的监测。 增高：甲亢，高TBG血症（妊娠，口服雌激素及口服避孕药，家族性），急性甲状腺炎，亚急性甲状腺炎，急性肝炎，肥胖症，应用甲状腺激素时，进食富含甲状腺激素的甲状腺组织等。降低：甲减，低TBG血症（肾病综合征，慢性肝病，蛋白丢失性肠病，遗传性低TBG血症等），全垂体功能减退症，下丘脑病变，剧烈活动等。
正常参考值：～12 ug/dl 3．游离三碘甲腺原氨酸（FT3） / 游离甲状腺素（FT4） FT3、FT4是T3、T4的生理活性形式，是甲状腺代谢状态的真实反映，FT3、FT4比T3、T4更灵敏，更有意义。FT3、FT4测定的优点是不受其结合蛋白质浓度和结合特性变化的影响，因此不需要另外测定结合参数。 FT3含量对鉴别诊断甲状腺功能是否正常、亢进或低下有重要意义，对甲亢的诊断很敏感，是诊断T3型甲亢的特异性指标。 FT4测定是临床常规诊断的重要部分，可作为甲状腺抑制治疗的监测手段。当怀疑甲状腺功能紊乱时，FT4和TSH常常一起测定。 TSH、FT3和FT4三项联检，常用以确认甲亢或甲低，以及追踪疗效。 正常参考值：FT3 ～ pg/ml FT4 ～ ng /dl 5．促甲状腺激素（TSH） TSH检测是查明甲状腺功能的初筛试验。游离甲状腺浓度的微小变化就会带来TSH浓度向反方向的显著调整。因此，TSH是测试甲状腺功能的非常敏感的特异性参数，特别适合于早期检测或排除下丘脑-垂体-甲状腺中枢调节环路的功能紊乱。 分泌TSH的垂体瘤的患者血清TSH升高，TSH是甲状腺癌术后或放疗以后采用甲状腺素抑制治疗监测的重要指标。 增高：原发性甲减，异位TSH分泌综合征（异位TSH瘤），垂体TSH瘤，亚急性甲状腺炎恢复期。降低：继发性甲减，第三性（下丘
甲状腺过氧化物酶抗体高说明什么
甲状腺过氧化物酶抗体高说明什么 甲状腺过氧化物酶抗体过高，很可能是桥本氏甲状腺炎。桥本甲状腺炎又称慢性淋巴细胞性甲状腺炎，俗称桥本病。桥本病是一种自身免疫性疾病。 甲状腺呈弥漫性或局限性肿大，质地较硬，且有弹性感、边界清楚、无触痛、表面光滑，部分甲状腺可呈结节状，颈部淋巴结不肿大，部分可有四肢粘液性水肿。 是否是桥本病？ 还需要进一步做免疫学检查，当血中抗甲状腺球蛋白抗体(TGA)、抗甲状腺微粒体(过氧化物酶)抗体(TMA)滴度明显升高，二者均大于50%(放免双抗法)时有诊断意义，可持续数年或十余年。 甲状腺抗体指什么？ 甲状腺抗体是自身免疫性甲状腺疾病病人血清中的常见自身抗体，一般指血清促甲状腺素受体抗体(TRAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、血清抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)三项。是反映机体甲状腺的功能的常见指标。
抗体的意义： 血清促甲状腺素受体抗体是一组抗甲状腺细胞膜上TSH受体的自身抗体，在95%的Graves患者血清中可检出，有助于Graves病的诊断及预后评估。 抗甲状腺过氧化物酶抗体升高可见于90%的慢性桥本甲状腺炎以及70%的突眼性甲状腺肿患者。 TPOAb增高的程度与疾病的程度无关系，随着疾病的延长或是缓解，可恢复正常。 如在疾病的缓解期再度出现TPOAb的升高，即有恶化可能。血清抗甲状腺球蛋白抗体见于60-70%的桥本甲状腺炎和原发性粘液性水肿的患者，也有20%-40%的Graves病患者TGAb升高。 甲状腺抗体偏高怎么办？ 甲状腺抗体偏高是属于自身免疫性疾病问题，目前具体机制国内外尚不清楚，建议进一步检查甲状腺功能，如检查血液中的血清总三碘甲状腺原氨酸与血清总甲状腺素、血清游离三碘甲状腺原氨酸与血清游离甲状腺素、促甲状腺激素，综合分析以明确对甲状腺疾病的诊
母体IgG抗体效价检测卡操作规程
孕妇血清IgG抗体效价检测操作规程 [样本要求]：血样标本最好采用EDTA抗凝（也可以用枸橼酸钠等抗凝），用血清代替血浆进行检测时，用前离心，2000g×10min，防止纤维蛋白干扰反应结果。 [样品准备]： 试剂配制：用985ulPH7.4的PBS(或者生理盐水)溶解15ul二巯基乙醇（2-Me）,即为0.2M(2-Me)应用液,密封，避光，置2---6℃保存. 红细胞标本的制备：用生理盐水配置红细胞悬液，红细胞最终浓度为1%左右. 血清标本的制备：将被检者静脉血采入含兔脑粉或其它促凝剂的试管中,10分钟后离心取上清;或者将被检者静脉血采入无抗凝剂试管中,4℃放置12小时,或37℃ 放置2小时后离心,2000Rpm,10分钟,取上清.该上清不得有 絮状物或沉淀； [配套试剂]：孕妇IgG抗体 效价卡，标准A、B、O红细 胞（取决于父亲血型）， 0.2M(2-Me)应用液 [实验步骤] 1、试剂卡室温平衡， 离心一次，标记编 号； 2、配制中和血浆：先取待检者血浆200微升与生理盐水600微升做4倍稀释，然后取稀释后的标本和 0.2M巯基乙醇(2-Me)应用液各200ul，混匀，37℃孵育30---60分钟，（充分破坏标本中IgM类抗体） 既得到孕妇的中和血浆。 3 4、在所有孔中加入50ul健康人O型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统以外IgG血型抗体)或所有孔 中加入50ul健康人A型或B型1%红细胞悬液(测定孕妇ABO血型系统IgG血型抗体)，然后加入上述表格中稀释的中和血浆各50ul 5、把加有血浆和红细胞的微柱卡置37 ℃专用孵育器孵育15分钟； 6、用专用离心机离心5分钟（900r/min2分钟1500r/min3分钟）。判定结果。 [结果判定]效价值：产生3+凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。 [参考值] 1、RH系统抗体效价16有临床意义 2、ABO系统抗体效价64有临床意义 [注意事项] 1.据文献报道微柱凝胶法检测出的母体效价值比常规聚凝胺和抗人球蛋白试管法高出1-2个滴度 （根据P.L.Mollison所著教材《临床医学中的输血（Blood Transfusion in Clinical Medicine）》） 2. 红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不 得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本实验。
170.甲状腺过氧化物酶抗体测定作业指导书
1 目的 指导血清Anti-TPO含量的定量测定。 2 适用仪器 Roche Modular EE-170全自动免疫分析系统。 3 SOP使用和变动 该作业指导书适用于本专业人员，使用前应认真阅读该SOP，在专业组组长指导下执行。因仪器设备和测定方法或试剂性能改变，应及时修订该SOP文件，可由任一使用该SOP的工作人员提出改动，并报专业组组长审核，经技术负责人批准，签字生效。 4 方法原理 电化学发光免疫分析：采用竞争法原理，样本和钌复合物标记的Anti-TPO一起孵育。再添加生物素化的TPO和包被链霉亲和素的磁珠微粒，样本中的Anti-TPO与钌标记的Anti-TPO 竞争结合生物素化的TPO抗原。抗原抗体复合物通过生物素、链霉亲和素之间的反应结合到微粒上。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠微粒吸附在电极表面。未与磁珠微粒结合的物质通过清洗液被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器通过2点定标校正试剂条形码包含的厂商定标曲线，自动计算得到检测结果。 5 标本采集、接收与处理 5.1标本采集 5.1.1标本类型：血清 5.1.2通常用真空采血管（含分离胶黄头管）采集静脉血，采集后贴上病人唯一性的条形码。 5.2标本接收: 5.2.1标本接收操作：可参照样品处理、清退和分离，详见样品处理SOP。 5.2.2标本拒收条件：严重溶血标本、加热灭活样本和使用叠氮化物作为稳定剂的样本 5.2.3标本保存和稳定性：血标本在2小时内离心分离，3000rpm×5min。血清2~8℃下稳定3天，-20℃下稳定1个月。仅可冻融1次，并确保测定前将患者样本存储于室温（20~25℃）中。检测前离心去除样本中的沉淀。 5.2.4标本编号：将标本在标本接收程序中扫描编号，机器会自动打印样本编号，将号码贴到标本上，如遇到自动编号系统瘫痪，那么Anti-TPO编号从0301开始。
抗体效价测定操作规程
抗体效价测定操作规程 操作步骤： 一.IgG 类 I.IgG类抗体效价滴定，须取适量血清200］加等体积2—Me溶液混合，封口，置37C水浴箱作用60分钟，先稀释血清：200L病人血清 600L 生理盐水备用，排列6 支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L，在第一管和第二管中各加入稀释血清200L，第二管混匀后移出200L转至第三管，以同样操作第六管，从第六管吸出200L 暂时保留在另一试管中（可做为第七管），以备必要时作进一步稀释。这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是 1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256 。 2.加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2％相应红细胞悬液200L，混匀。（如待检血清抗体为抗A,则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B,则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B,则倍量稀释两份血清，一份加入A 型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；） 3.先直接观察离心结果，之后在每管分别加入凝聚胺试剂盒中的R1 液3d,混合30S均匀后，在各加R2液2滴，操作方法同凝聚胺交叉配血法，然后判读结果。通常以肉眼观察到的第一个“±”的凝集管作为判断的终点, 终点血清稀释度的倒数为效价（Titer ）,或称滴度。 二.IgM 1?血清连续倍量稀释法先稀释血清：100L病人血清+700L生理盐
水备用，排列6 支试管按顺序编号。第二管开始到第六管加样枪各加生理盐水200L,第一管和第二管中各加入稀释血清200L,第二管混匀后移出200L转至第三管，以同样操作第六管，从第六管吸出200L 暂时保留在另一试管中（可做为第七管），以备必要时作进一步稀释。这样从第一管到第六管的血清稀释度依次是 1:8,1:16,1:32,1:64,1:128,1:256 。 2. 加红细胞悬液（自配红细胞悬液同反定型试剂）每管各加2％相应红细胞悬液200L,混匀。（如待检血清抗体为抗A,则加入A型标准红细胞悬液；如待检血清抗体为抗B,则加入B型标准红细胞悬液；如待检血清中既有抗A又有抗B,则倍量稀释两份血清，一份加入A 型标准红细胞悬液，另一份加入B型标准红细胞悬液；）三．此类为IgM 类盐水抗体可立即离心后观察。 四． 五．（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）
输血相容性检测作业指导书范本
输血相容性检测作业指导书范本 目录 第一章规章制度 第一节临床输血管理委员会一、临床输血管理委员会组成 二、临床输血管理委员会工作职责三、临床输血管理委员会工作计划第二节临床用血申请与审批管理一、临床用血计划的拟定 二、临床用血申请和审批制度 三、临床退血管理 第三节临床输血操作步骤及岗位职责 一、临床输血操作步骤 二、各岗位职责流程图 第四节输血科管理制度 一、科室工作守则 二、临床用血有控制感染的方案及管理制度三、输血反应及输血感染疾病的登记报告与调查处理制度 四、消毒隔离及污物处理制度 五、工作人员健康体检制度 六、考勤制度 七、请假制度 八、人事考核制度 九、奖惩制度 十、计算机使用管理制度 十一、仪器设备管理制度
十二、值班工作制度 十三、临床用血计划申报登记制度十四、配输血查对制度 1 十五、血型鉴定与交叉配血的复查与核对制度十六、血液储存、发放、临床输血和血液报废制度 十七、血液质量监测制度 十八、仪器设备认购、验收、使用管理、保养、维修及报废制度 十九、试剂的认购与入库、领用制度二十、计量管理制度 二十一、差错事故登记、报告制度二十二、方便病人配合临床制度二十三、科学合理用血制度 二十四、紧急用血制度 二十五、输血治疗知情同意制度二十六、各种登记记录管理和保存制度二十七、库房管理制度 二十八、档案保管制度 二十九、输血不良反应处理和回报制度三十、交接班制度 三十一、血液标本的留取接收保存制度三十二、实验室管理制度 第五节、岗位职责 一、输血科主任岗位职责 二、主任、副主任技师岗位职责三、主管技师职责 四、输血科技师岗位职责 五、输血科技士岗位职责 六、临床医师在用血时的职责 七、临床护士在用血时的职责 第二章仪器、设备使用操作规程
实验一 抗体的制备及效价检测
实验一抗体的制备及效价检测 实验目的：本实验是单克隆抗体技术的免疫阶段的过程，为单克隆抗体技术提供免疫淋巴细胞。了解免疫的原理，掌握免疫方法和抗血清的制备技术，掌握双向免疫扩散法测定抗体的效价。 一．实验原理 机体的特异性免疫反应是指机体受抗原物质刺激后产生体液免疫和细胞免疫的过程。一种抗原能否引发抗体反应，一方面取决于抗原分子表面有无特异性的化学结构---抗原决定簇，另一方面取决于机体有无相应的免疫活性细胞。当上述两个条件具备时，抗原进入机体经过一定的潜伏期，抗体效价逐步上升，达到高峰后，能维持一短暂的时期，以后又逐渐下降，但当第二次接触相同的抗原时，抗体的上升较前次为快，高峰时的效价也比前次为高。抗体持续的时间也较长，此也称为再次反应。 完全福氏佐剂的使用能够延长抗原在体内的存留时间，增加可溶性抗原的免疫性。通常制备抗体时常用完全福氏佐剂加强免疫。 抗原、抗体在合适的浓度和比例条件下，抗原和其相应的抗体在有固相支持的液相环境中各自发生扩散。分子双向扩散接触时形成肉眼可见的沉淀线反应。抗体的效价即时指与固定浓度的抗原发生沉淀反应时所需的最小抗体浓度。 二．实验步骤 1．动物的选择：选择2-3个月以上的小鼠。免疫作好标号。分笼饲养。 2．抗原的选择：将抗原（纤维素酶）稀释为4 mg/ml，即可与佐剂混合制成乳剂用于动物免疫。 3．佐剂和抗原乳剂的制备 佐剂完全福氏佐剂：轻矿物油（石腊油）8.5 ml；羊毛脂1.5 ml；灭活结核杆菌10 mg。 抗原乳剂制备（1）油剂：矿物油和羊毛脂按比例混合，高压8磅20分钟灭菌后作为油剂，使用前微火融化。（2）水剂：灭活结核杆菌1 mg/ml + 抗原4 mg/ml （均为终浓度）。（3）油剂和水剂1：1混合。混合方式：研磨或者注射器混合。 4．免疫方法：小鼠背部皮下多点注射，每点0.1ml。 第1次免疫：实验组小鼠加佐剂的抗原。 A组2只（1-2号）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组4只（3-6号）：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml加佐剂的抗原乳剂。 第2次免疫：第3周实验组小鼠不加佐剂抗原。 A组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml2mg/ml抗原液。 第3次免疫：第二次免疫后1周，实验组小鼠不加佐剂抗原。 A组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml磷酸缓冲液。 B组：每只小鼠背部、腋下多点注射，共计0.4 ml2mg/ml抗原液。 5．抗血清的制备 第3次免疫一周后，眼眶取血或心脏取血。收集的血液置于室温下1h左右，凝固后，置4℃下，过夜（切勿冰冻）析出血清，离心，4000rpm,10min。在无菌条件，吸出血清，分装（0.05～0.2ml），贮于-40℃以下冰箱，或冻干后贮存于4度冰箱保存。
NDV抗血清制备及抗体效价测定
NDV抗血清制备及抗体效价测定 【实验目的】 1. 学习抗血清制备的基本原理，掌握兔和小鼠免疫注射方法、兔颈动脉放血、小鼠眼球采 血技术。 2. 学习双向琼脂扩散实验的基本原理，掌握的基本程序和结果判读方法。 3. 学习酶联免疫吸附实验（ELISA）的基本原理，掌握间接ELISA的基本程序和结果判读 方法。 4. 学习免疫印迹实验的基本原理，掌握免疫印迹记实验的的基本程序和结果判读方法。 PartⅠ. NDV抗血清制备 一、实验原理 将具有免疫原性的物质注入健康动物体内后，抗原可刺激机体相应B细胞增殖、分化形成浆细胞并分泌特异性抗体。待动物血清中存在大量抗体时，采集动物血液，分离析出血清，便得到所需的抗血清（免疫血清或抗体）。由于抗原性物质通常具有多个抗原决定簇，可以刺激机体产生多种抗体形成细胞克隆，合成和分泌各种抗原决定簇的抗体，免疫血清中实际上是含有多种抗体的混合物，所以这种免疫法获得的免疫血清又称为多克隆抗体（Polyclonal antibody，PcAb）。多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，为了获得特异性强，效价高的抗血清，除了抗原的因素外，还需注意动物品系的选择、抗原注射的浓度、剂量、次数、间隔时间及注射途径等。对于免疫原性较弱的可溶性抗原(如蛋白质类抗原)要加入佐剂，以增强免疫性。 本实验介绍新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）抗血清的制备过程。新城疫病毒（Newcastle disease virus，NDV）又称亚洲鸡瘟病毒、伪鸡瘟病毒或禽肺脑炎病毒。在病毒分类学中的位置属于副黏病毒科（Paramyxoviridae）、副黏病毒属（Paramyxovirus）中的一个种。该病毒主要危害鸡、珠鸡和火鸡，在被侵袭的鸡群中迅速传播，强毒株可使鸡群全群毁灭。以新城疫病毒灭活疫苗（Ulster 2C株）灭活油剂苗多种途径免疫兔和小白鼠，制备新城疫病毒抗血清。 二、实验仪器、材料和试剂 1. 仪器
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程
孕妇母体IgG抗体效价检测操作规程 【原理】 新生儿溶血病HDN发生的主要原因在于母子血型不合，血型系统最主要的类型为ABO血型系统，本实验采用微柱凝胶检测孕妇血清中的抗A（B）IgG抗体效价。 【试剂】 6%牛血清白蛋白；生理盐水；凝胶卡 【标本采集】 孕妇静脉血3毫升，肝素钠抗凝，孕妇爱人静脉血3毫升，肝素钠抗凝。将孕妇标本制作成血清标本，孕妇爱人标本制成0.5%红细胞标本（用生理盐水洗涤后配制）。 【操作步骤】 1．取孕妇血清标本50微升加入等体积的牛血清白蛋白，37度水浴温育30～60分钟；2．将血清倍比稀释成9管，依次为1：4、8、16、32、64、128、512、1024、2048管；3．将卡作好标记，在所有孔中加入经处理好的孕妇血清标本50ul； 4．然后在所有孔中加入50ul的孕妇爱人0.5%红细胞标本； 5．37度孵育15分钟（专用孵育箱）； 6．专用离心机离心5分钟；900rpm2分钟，1500rpm3分钟； 7．取出判定结果； 【结果判定】 阳性结果：红细胞凝集块位于凝胶表面或凝胶中； 阴性结果：红细胞完全沉降到胶底部，在凝胶管底部形成红细胞扣。 【结果报告】 产生1+阳性凝集的最高稀释度，其倒数即为效价。 【注意事项】 1．红细胞标本一定不能被细菌污染，否则出现假阳性反应，尽可能应用当日采集的新鲜血做本实验。如不得不用过夜血或陈旧血，则必须首先用该标本做阴性对照试验，以确定该标本是否可以做本试验。 2．血清标本：血清标本必须充分去除纤维蛋白，否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出，阻碍红细胞沉淀，呈假阳性反应。 3．如在微柱凝胶中出现溶血现象，强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应，也不排除其他原因所臻溶血，故对此标本一定认真分析，并向上级主管技术人员报告并讨论。 4．本凝胶卡价格不菲，成本较高，请您节约使用。 【临床意义】 有人观察1632例孕妇血清中IgG抗A（B）≥1：64者249例；ABO-HDN发生率随IgG抗A（B）效价升高而上升；HDN与妊娠史的频率有关，随着年龄上升，孕妇个体IgG抗A（B）抗体效价也随之上升。夫妇间ABO血型不合者应及时检查产前血型抗体水平，用于预防不良妊娠的发生；IgG抗A（B）效价的高低与HDN的发病率成正比；孕妇血清IgG抗A（B）效价≥1：64需定期检测抗体效价水平及时用药降低抗体效价，以预防新生儿溶血病的发生。
人甲状腺过氧化物酶抗体 (TPOAb)测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求大成
人甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）测定试剂盒（磁微粒化学发光免疫分析法）适用范围：用于体外定量测定人血清中的人甲状腺过氧化物酶抗体的含量。 1.1包装规格 规格W：W1：25人份/盒；W2：50人份/盒；W3：2×50人份/盒；W4：4×50人份/盒。 规格L：L1：25人份/盒；L2：50人份/盒；L3：100人份/盒；L4：2×100人份/盒。 1.2 产品主要组成成分
校准品和质控品浓度具有批特异性，具体浓度见标签。 2.1 外观
试剂盒中的组分应澄清，应无沉淀和絮状物。磁分离试剂摇匀后，应为均匀悬浊液，无明显凝集。校准品和质控品均为澄清无沉淀液体。 2.2空白限 应不大于5IU/mL。 2.3准确度 用国家标准品（编号：150557）进行检测，其相对偏差应在±15%范围内。 2.4 线性 在[5,500]IU/mL测量范围内，相关系数R≥0.9900。 2.5 重复性 用高低两个浓度的样本，各重复检测10次，变异系数CV应不大于10%。 2.6 批间差 用三个批号试剂盒检测同一样本，则三个批号试剂盒之间的变异系数CV应不大于15%。 2.7特异性 2.7.1含浓度不低于5000ng/mL人免疫球蛋白G（人IgG）的零浓度TPOAB样本,测值应不高于5IU/mL。 2.8稳定性 试剂盒在2℃～8℃的贮存条件下保存至有效期（12个月）后，结果应符合2.1-2.5项的要求。 2.9校准品溯源性
根据GB/T 21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供校准品的来源、赋值过程及测量不确定度等内容，该校准品可溯源至国家标准品（编号：150557）。