奶粉中蛋白质的测定
双缩脲法测定奶粉中蛋白质的含量
摘要
测定奶粉中蛋白质含量可用双缩脲法，蛋白质含有两个以上的肽键，在强碱条件下，肽键（—CO—NH—）的质子被解离，二价的铜离子和失去质子的多肽链的氮原子相结合产生稳定的紫色络合物，在540~560nm处测定其光吸收值，此值与蛋白质的含量在一定范围内呈线性关系。可用来定量测定蛋白质含量，测定范围1~10mg蛋白质。二价的铜离子与除精氨酸以外的所有氨基酸和二肽均不发生反应，仅和1-亚氨基缩脲、2—亚氨基缩脲、丙二酰胺等少数几种物质有颜色反应，所以基本上可以认为这是蛋白质的特有反应。
②双缩脲法常用于需要快速但并不需要十分精确的测定。
关键词：双缩脲蛋白质含量奶粉
1.前言
近年来奶粉质量问题在社会上掀起了很大的风浪，作为一名普通的消费者，我们可学习一些实用的方法去了解判断奶粉的质量问题，所以本实验会详细介绍了一种简单快速的测定奶粉中蛋白质含量的方法。蛋白质的含量测定是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。测定蛋白质总量的常用方法有4种：凯氏定氮法、双缩脲法、folin-酚试剂法（lowry）、紫外吸收法。双缩脲法是最简单快速的方法，且不同的蛋白质产生颜色的深浅相近，以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速，但并不需要十分精确的蛋白质测定，该方法在一定程度上还是具有很大的实用意义的。本实验用分光光度计能测定范围内减少样品中蛋白质含量的梯度，增加实验组以提高实验的灵敏度差，同时也用离心机和半透膜等技术减少在操作过程中蛋白质的损失和金属离子的影响。
2.实验目的
学习和掌握双缩脲法测定蛋白质含量的原理和方法，熟悉分光光度计和离心机的使用和操作。
3.实验原理
双缩脲（NH3CONHCONH3)是个两分子脲径180（左右加热），放出一个分子氨后得到产物。在强碱性溶液中双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基
或两个直接连接的肽键或能过一个中间碳原子相连的肽键这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg，干扰这一测定的物质主要有硫酸铵，Tris缓冲液和某些氨基酸等。（注意样品浓度不要超过10mg/ml）
4.实验设备：紫外分光计，试管数支（7支）。移液管，吸气球，玻璃棒烧杯，电炉
实验材料及试剂：试剂：双缩脲试剂：0.9%生理盐水：固体（NH3）2SO4：饱和溶液（NH4）2SO4：标准蛋白质溶液：奶粉每100g含蛋白质（18.0-24.0g），蒸馏水：氨水：电子天平：滤纸：量筒：
5.试剂的配制
5.1双缩脲试剂.5gCuSO4-5H2O（硫酸铜）和
6.0g酒石酸钾钠（KNaC4H4O-4H2O）用500ml 水溶解，在搅拌下加入300,ml10%NaOH溶液，用水稀释到1000ml，储存于塑料瓶，此试剂可长期保存，若储存瓶中有黑色沉淀出现则需要重新配制，
5.2标准蛋白质溶液称取血清蛋白质（BSA）2.25g溶于0.9%（g/l）Nacl溶液100ml 即为配制22.5mg/ml标准蛋白质溶液。
6.材料的处理半透膜的制备：取数个鸡蛋开一小孔取出蛋清与蛋黄，将空壳置于醋酸中侵泡数天即可。
7.实验操作步骤
7.1标准曲线的测定试管标上编号，分别加入0, 0.1, 0.2 0.3, 0.4, 0.5的标准蛋白质溶液，用生理盐水加至0.5ml。然后加入4ml双缩脲试剂，充分摇匀后，在室温（20-25度）下放置30min。于540nm处进行比色。用未加蛋白溶液的第一支试管做空白对照夜，取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横坐标，光吸收值为纵坐标绘制标准曲线
7.2待测奶粉中蛋白质的提取
7.2.1 准确称取100mg奶粉，置于离心管中，加6-7ml温水溶解，振荡，摇匀，直至奶粉全部溶解
7.2.2 离心管放于冰水混合物中冷却2-3min后，取出，往离心管内加入3-4滴氨水，然后加入（NH4）2SO4固体，直至不溶（或者加（NH4）2SO4溶液）。
7.2.3 于冰水中冷却1-2min再放到离心机中离心（4000r/min）离心15min
7.2.4 上清液，取沉淀物，将沉淀物转移到半透膜中用绳子一头扎紧半透膜开口，另一
头握在手上另一头固定在木板上，将木板侧放，打开自来水开关，让自来水缓慢地流过半透膜，持续10min放入或者在盛有蒸馏水烧杯中，上下移动半透膜约5min一次换一次水，重复一次即可。
7.2.5得到的初产品置于试管中，加入生理盐水至5ml(即稀释5倍)取0.5ml于待测试管中
管号
试剂 1 2 3 4 5 6
标准蛋白
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
质溶液/ml
0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0
0.9%NaCl
溶液/ml
4.0
双缩脲试
剂/ml
蛋白质含
0 0.5（略） 1.0 1.5 2.0 2.5
量/mg/ml
A540nm
8.结果及计算
根据所测样品提取液的吸光度，在标准曲线上查的相应的蛋白质含量（ug/ml），按下式计算：
样品蛋白质含量（ug/g）=（mo*V）/(m*Vo) 式中，mo为根据待测样品吸光度从标准曲线上查得的蛋白质的质量（ug）：V为提取液总体积（ml）：m为称取样品质量（g）：Vo为测定所用提取液的体积（ml）
该实验所需要的时间约2h,产品的回收率约为99%。
9. 注意事项
1.润洗比色皿时尽量用少点样品，因为配制的样品不多，以免之外分光检测时样品不够
2.用半透膜提纯蛋白质时应多加小心，以防半透膜破裂，蛋白质漏出
3.在加入（NH4）2SO4固体时尽量在冰水中操作，减少实验误差
4.准确量取各药品的含量和控制好操作时间
5.标准曲线制定必须在完成配制后1h内完成，延长时间该溶液的吸光值会变大
6.温水的温度不能高于60度，最好在40度左右。
7.注意转移产品时防止残留产品需加适量生理盐水洗涤后再合并
8.第二组标准蛋白质的吸光度可以忽略，不加入标准曲线的制定。
参考文献：
①李盛贤刘松梅赵丹丹编著生物化学哈尔滨工业大学出版社 2005年
②王廷华邹晓莉蛋白质理论与技术科学出版社 2005
③主编：张龙翔张庭芳李玲媛生化实验方法和技术（第二版）高等教育出版社2003
④徐小静张少斌王俊丽生物技术原理与实验（第一版）大学出版社2006
⑤欧阳平凯胡永红姚忠生物分离原理及技术（第二版）化工工业出版社 2010
⑥王延华邢如新游潮蛋白质理论与技术（第二版）科学出版社2009
⑦陆建蛋白质纯化技术及应用（第一版）2005
⑧J.A.托马斯 R.L.富克斯生物技术与安全性评估（第三版）科学出版社2007
⑨张龙翔张庭芳李玲媛生化试验方法和技术（第二版）高等教育出版社2003
⑩曾富华生物化学实验技术教程（第一版）2011
奶粉中蛋白质含量测定方法的改进
Q u a l i t y C o n t r o l□质量安全 使用说明。该文件是针对作用对象、适应症和剂量的。必须小心地按照剂量、治疗频率、治疗期和治疗途径使用。只要有一个参数被改变，如果没有预先咨询兽医的话，就不可能正确地应用停药期。兽医可以根据“层叠”法则，在标准停药期的基础上，重新固定一个新的停药期（对于重复用药的情况），并能够科学地维持这个新选择，以保证动物源食品不含有抗生素残留。在任何情况下，兽医都得负起责任。遵守治疗途径对于保证抗生素的良好扩散和控制残留风险是十分重要的。 抗生素标签外的使用（也就是说修改了权威机构提供的使用条件）只有在例外的情况下才能发生。实际上，例外的情况应该仅限于所谓的“罕见“微生物（这表示市场有限，实验室不会去为此开发一个专门的方 案）和零星的使用说明（因为有些感 染的发生几率很小，所以不是整个范 围的抗菌谱都被测试过，这造成了相 关的官方使用说明的缺失）。在任何 情况下，标签外的使用都必须符合 “层叠”决策树，使用决策树时要按 照时间顺序排列所描述的步骤。在欧 洲，使用的物质必须是记载在2377/90 （MRL）法规的附录I、II、III中的，并 且必须遵守标准的停药期（对牛奶和 鸡蛋至少7天，对肉而言至少28天）。 在这方面尤其要注意不要偏离规定的 停药期，否则对于风险预防可能是有 害的。 处方单会列出相关药品并告知农 场主施用方法，而且会修改停药期， 在修正过的停药期内，动物源的食品 都不能上市。处方以处方单的形式开 出，必须要跟养殖人员解释清楚，以 保证遵守治疗方法和停药期。另外， 可追踪性也是一个关键因素，很多国 家规定农场主必须保留处方，如在法 国，养殖户需保留处方5年，兽医需保 留处方10年。 6.3 农场记录：监控药物使用的关键 要素 在大多数国家，农场主和兽医都 必须在农场记录簿上记录他们对动物 的处置。起初这一要求被看作是一种 束缚，但现在正逐渐成为许多农场主 和兽医们的一个不可替代的牧群健康 指标。符合法规要求的记录要包含农 场主的预先评估和兽医的医学评估。 治疗方案的实施、警示限值的定义和 必要的跟踪查访都要基于上述记录。 显然数据的电脑化可以使分析变得更 简单，相关性和精确性也会更好。■ 蛋白质是乳及乳制品中的主要成分，它对乳制品的理化特性有着重要的影响。测定蛋白质的方法很多，目前最基本和最常用的方法是先测定总氮量，再乘以不同食品的蛋白质系数，即为食品中蛋白质的含量。目前，国家标准的测定总氮量的方法仍采用凯氏定氮法。该方法数值准确性和重现性较好，但检验步骤繁琐，费 时较长，不适合企业现场实时监测。 因此，一些仪器公司开发出凯氏定氮 仪测定蛋白质含量，由于仪器测定时 称样量少，消化速度较传统方法大大 提高，特别是仪器蒸馏时产生的蒸汽 量大，蒸馏速度也较传统方法快很 多，并且仪器检测得出的数据和传统 方法偏差不大。因此，很多企业，甚 至是一些检验监督机构也都采用凯氏 定氮仪测定蛋白质含量。但由于定氮 仪比较昂贵（进口设备大约需要16 万～20万元），一般小企业无法承 受，而传统方法又由于费时较长，不 利于生产过程的监控。因此，如何找 到一种既省时又经济适用，且数据准 奶粉中蛋白质含量测定方法的改进 ■ 徐亚麦 刘鑫 黑龙江龙丹乳业科技股份有限公司 【摘要】在蛋白质含量的测定中，通过将传统方法与现代仪器方法有效结合，大大节省了检测时间，节约了检验试剂。该方法和传统方法相比，测定结果的精确性和重现性较好，实验结果比较稳定，适用于乳品企业快速监控产品蛋白质指标。 关键词：蛋白质；测定原理；测定方法 59 2010.1
食品中蛋白质的测定实验报告
1.目的 掌握凯氏定氮法测蛋白质的原理、操作、条件、注意事项。 2.原理 蛋白质是含氮有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解。分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后在以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量计算含氮量再乘以换算系数，即为蛋白质含量。 3.试剂 3.1浓硫酸、硫酸铜、硫酸钾，所有试剂均用不含氮的蒸馏水配制 3.2混合指示液 1份（1g/L）甲基红乙醇溶液与5份1g/L溴甲酚氯乙醇溶液临用时混合。 也可用2份甲基红乙醇溶液与1份1g/L次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.3氢氧化钠溶液（400g/L） 3.4标准滴定溶液 硫酸标准溶液［c（1/2H2SO4）=0.0500mol/L］或盐酸标准溶液［c（HCl） 0.0500mol/L］ 3.5硼酸溶液（20g/L） 4.仪器 定氮蒸馏装置 5.样品 全蛋（2.47g） 6.操作 6.1样品处理 准确称取2—5g半固体样品，小心移入干燥洁净的500mL凯氏烧瓶中，然后加入研细的硫酸铜0.5g，硫酸钾10g和浓硫酸20mL，轻轻摇匀后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜放于加有石棉网的电炉上，小火加热，待内容物全部炭化后，泡沫完全消失后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色呈请透明后，再继续加热0.5h，取下放冷，慢慢加入20mL水。 放冷后，移入100mL容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白试验。 6.2连接装置 装好定氮装置，于水蒸气发生器内装水至2/3处，加甲基红指示剂数滴及少量硫酸，以保持水呈酸性，加入数滴玻璃珠以防暴沸，用调压器控制，
奶粉中的主要成分讲解
1.母乳与牛奶中乳清蛋白的比例？ 奶类中的蛋白质主要是由乳清蛋白和酪蛋白组成，乳清较容易被消化，母乳中的70%乳清蛋白，30%酪蛋白；牛奶中含20%乳清蛋白，80%酪蛋白。 2.a-乳清蛋白的作用？ （1）提高蛋白质的生物利用度，从而降低蛋白质的总量，有效降低宝宝肾脏的负担。更容易让宝宝消化吸收。 （2）抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化，有免疫刺激作用从而提高免疫力。（3）含有丰富的色氨酸（快乐因子），有助于促进宝宝的神经发育，调节睡眠情绪，增进食欲。 （4）可以在宝宝体内转化成牛磺酸，保证视力、心脏、大脑的正常发育，并有抗疲劳作用。 （5）是唯一能结合钙的乳蛋白成分，可紧密结合2个ca2＋,有利于骨骼发育和维持骨骼健康。 （6）婴儿期重要的器官及神经系统的发育都是在高质量的睡眠中完成的。缺少α-乳清蛋白的摄入可能影响宝宝的睡眠质量，宝宝睡眠不好可能会使宝宝烦躁哭闹、消化吸收减弱奶量降低、生长发育迟缓。 3.牛磺酸 牛磺酸又称牛胆酸最初是从雄牛的胆汁中发现的，是一种非蛋白质氨基酸是婴幼儿生长发育的必需氨基酸。牛磺酸对促进大脑生长发育,增强机体免疫能力；对心血管系统有较强的保护作用，有增强心肌细胞功能等作用；可以促进脂肪乳化和视网膜的发育，帮助神经传导和视觉机能的完善。成人可以通过肝合成牛磺酸，由于婴幼儿的身体内酶类的合成的系统还没有完全发育好，还不能通过自身合成，婴幼儿体内所需要的牛磺酸只能依靠食物来提供。各种食物中包含的牛磺酸的数量也是不一样的，一般说来，植物性的食物中是不会包含牛磺酸的，动物性的食物中含有的牛磺酸却是相当的丰富，比如平均每一百克的食物中含有的牛磺酸的数量是这样的：牛奶四毫克，人初乳七十毫克，人成熟乳五十四毫克，猪肉五十毫克，牛肉三十六毫克，羊肉四十七毫克以及鸡肉三十四毫克等。母乳中含有的牛磺酸要比牛奶中多十几倍，人的初乳中的牛磺酸的含量要比成熟乳来的更加的多，母乳是婴儿体内牛磺酸的主要来源，牛乳、鸡蛋等食品中几乎不含牛磺酸。 所以喂养的时候建议尽量母乳喂养，在母乳不足的情况下，要给宝宝适量添加婴幼儿配方奶粉。以保证体内各种营养素的供给。 4.OPO结构脂 OPO目前是一种比较珍贵的成份，它的结构与母乳中脂肪非常相近，因此放在奶粉里更亲和人体，促进宝宝营养的吸收。 （1）帮助DHA、AA的有效利用，促进智力发育，使宝宝头脑更聪明； （2）与可溶性膳食纤维组合，帮助增加肠道双歧杆菌的数量，改善胃肠道，激活免疫细胞，降低胃肠道疾病发生率；
食品中蛋白质含量的测定
食品中蛋白质含量的测定 院系：机械工程学院；专业：食品科学与工程；年级10级；班级：一班；姓名：姜海洋；学号：201044035 摘要 随着食品工业的快速发展，人们对食品中营养元素的要求越来越严格。蛋白质是人体生命的物质基础，是人体重要的营养元素,测定蛋白质的含量有利评价食品的营养价值，合理开发利用食品资源。同时对提高产品质量，优化食品配方有重要意义。 关键字：食品蛋白质含量测定 前言 化学分析是一门以实验动手为基础的理论课程。其主要以化学分析为基础，根据物质分子的一些理化特征：酸碱特性，氧化还原特性等用一些化学试剂、仪器设备等对一些物质成分进行定性定量的分析。当代的化学分析其主要应用于食品行业。通过一些理化特性对食品中的营养素、添加剂、有害物质进行测定，对现在食品的检测、研发等具有重要意义。 蛋白质的组成： 蛋白质是复杂的含氮有机化合物，分子质量很大，主要化学元素为C、H、O、N，在莫些蛋白质中还含有P、S、C u、F e、Ⅰ等元素。这些元素在蛋白质中的含量如下表：
从表中可以看出，蛋白质的平均含氮量为16%，这也是蛋白质元素组成的一个特点，也是凯氏（kjedahl）定氮法测定蛋白质含量的一个计算基础： 蛋白质含量（%）=蛋白质含氮量（%）*6.25 式中6.25即16%的倒数为1g氮含量。由于食物中另外两种重要的营养元素——碳水化合物、脂肪中含有C、H、O，不含N，所以含氮是区别于其他有机物的主要标志。 蛋白质在人体中的重要性及其测定意义： 蛋白质是生命存在的物质基础，是构成生物体细胞组织的重要成分，一切有生命的活体均含有不同类型的蛋白质。蛋白质又是食品的重要组成成分之一，也是食品中重要营养元素指标。蛋白质主要为人体提供必需的氨基酸，在构成蛋白质的20中主要氨基酸中亮氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸和缬氨酸8中氨基酸在人体中不能合成，必须依靠食品提供，在正常情况下，视频提供的总热量中蛋白质提供11%--13%。部分蛋白质是生物催化剂如：酶和激素，以控制机体的生长、消化、代谢、分泌和能量转意等变化，蛋白质还是人体免疫作用所必需的物质，可以形成抗体以预防疾病的感染。因此，蛋白质是人体重要的营养物质也是食品中重要的营养成分，此外，在食品加工过程中，蛋白质及其分解产物对食品色、香、味和产品质量都有一定的影响，。测定食品中蛋白质的含量，对于评价食品的营养价值，合理开发利用食品资源，提高食品加工质量，优化食品配方，核算经济成本和控制生产过程均具有重要意义。
蛋白质的测定方法
蛋白质的测定方法 测定食物中的蛋白质含量有二种方法，一是凯氏微量法，二是自动定氮分析法。 一．凯氏微量法 有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮，实验者可根据经济条件设备而定。 1.原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。 2NH2（CH2）2COOH+13H2SO4 （NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O （NH4）2SO4+2NaOH 2NH3+2H2O+Na2SO4 2.方法 本法参照GB 5009.5 -85 适用于各类食品及饲料中蛋白质的测定 3.试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 3.1硫酸铜 3.2硫酸钾 3.3浓硫酸 3.4 2%硼酸溶液（或1%的硼酸） 3.5 混合指示剂：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.6饱和氢氧化钠：500g氢氧化钠加入500ml水中，搅拌溶解，冷却后放置数日，澄清后使用。 3.7 0.01mol/L或0.05mol/L盐酸标准溶液：需标定后使用(配制及标定方法见附录) 4.仪器 消化炉凯氏定氮蒸馏装置万分之一电子天平 凯氏定氮蒸馏装置：如图所示 5. 操作步骤 5.1样品处理：精密称取0.1~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取液体样品5~20ml，放入100ml或500ml凯氏烧瓶中，加入0.2g硫酸铜，0.3g硫酸钾及3~20ml浓硫酸，放置过夜后小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，取下放冷后用约2～10ml蒸馏水冲洗瓶壁，混匀后继续加热至液体呈蓝绿透明，取下放冷，小心加10~20ml水混匀，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白实验。 5.2按图装好定氮装置，于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处，加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入数粒玻璃珠以防暴沸，加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 5.3向接收瓶内加入10ml ,1~2%硼酸溶液及混合指示液1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10ml样品消化稀释液由小玻璃杯流入反应室，并以10ml水洗涤小烧杯使之流入反应室内，塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将3~10ml饱和氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯中，提起玻璃塞使其缓缓流入反应室，立即将玻璃塞盖紧，并加水于小玻璃杯中以防漏气。加紧螺旋夹，开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内，蒸馏2min，移动接收瓶，使冷凝管下端离开液面，然后用少量中性水冲洗冷凝管下端外部，再蒸馏1min取下接收瓶，以0.01或0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。 同时吸取10ml试剂空白消化液按5.3操作。 6. 计算
食品中蛋白质的测定方法
食品中蛋白质的测定方法 蛋白质的测定方法分为两大类：一类是利用蛋白质的共性，即含氮量，肽链和折射率测定蛋白质含量，另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定蛋白质含量。但是食品种类很多，食品中蛋白质含量又不同，特别是其他成分，如碳水化合物，脂肪和维生素的干扰成分很多，因此蛋白质的测定通常利用经典的剀氏定氮法是由样品消化成铵盐蒸馏，用标准酸 液吸收，用标准酸或碱液滴定，由样品中含氮量计算出蛋白质的含量。由于食品中蛋白质含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微量法，但它们的基本原理都是一样的。 一凯氏定氮法 我们在检验食品中蛋白质时，往往只限于测定总氮量，然后乘以蛋白质核算系数，得到蛋白质含量，实际上包括核酸、生物碱、含氮类脂、叶啉和含氮色素等非蛋白质氮化合物，故称为粗蛋白质。 (一) 、常量凯氏定氮法 衡量食品的营养成分时，要测定蛋白质含量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂性，在食品分析中，通常用食品的总氮量表示，蛋白质是食品含氮物质的主要形式，每一蛋白质都有其恒定的含氮量，用实验方法求得某样品中的含氮量后，通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。 一般食品蛋白质含氮量为l6 ％，即1份氮素相当于6.25 分蛋白质,以此为换算系数6.25 ，不同类的食物其蛋白质的换算系数不同. 如玉米、高梁、荞麦, 肉与肉制品取6.25 ，大米取 5.95 、小麦粉取 5.7, 乳制品取 6.38 、大豆及其制品取5.17 ，动物胶 5.55 。 测定原理： 食品经加硫酸消化使蛋白质分解，其中氮素以氨的形式与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收形成硼酸铵，再用盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定，根据盐酸消耗量计算出总氮量，再乘以一定的数值即为蛋白质含量，其化学反应式如下。 ⑴消化反应：有机物(含C、N、H、0、P、S等元素)+H2S04 -T(NH4)2SO4+CO0 +S02f +S03+H3PO4+C02 (2) 蒸馏反应：(NH4)2SO4+2NAOH—2NH3T +2H2O+NA2SO4 2NH3+4H3B04 (NH4)2B4O7+5H2O (3) 滴定反应：(NH4)2B4O7+2HCH+5H2O T2NH4CH+4H3BC或(NH4)2B407+H2S04+5H20- (NH4)9SO4+4H2BO2 试剂与仪器： 1、硫酸钾； 2、硫酸铜；
奶粉中蛋白质含量实验方法
【摘要】目的尝试建立一种快速准确地测定奶粉中蛋白质含量的方法。方法使用三氯乙酸沉淀蛋白质后，运用BCA（二喹啉甲酸）法，在570 nm波长处，分不测定标准蛋白质应用液与样品稀释液的吸光度值，基于测定液中蛋白质含量与其吸光度值呈正比关系，计算出样品中蛋白质的含量。结果待测溶液中蛋白质浓度在0～250 μg/ml 范围内标准曲线呈线性关系，其回归方程为：Y=301.12X-73.42，相关系数r=0.998，平均回收率为100.2%。结论结合三氯乙酸沉淀的BCA法适用于奶粉中蛋白质的快速检验和掺伪检验。
【关键词】奶粉；蛋白质；BCA法；三氯乙酸；三聚氰胺 A rapid and simple method of protein determination in powdered milk Zhang Zhiqiao, Shen Guodong, Wang Gang First Middle School of Hefei, Anhui Provincial Hospital Affiliated to Anhui Medical University, Hefei 230001 ［Abstract］Objective To explore a rapid and simple method of protein determination in powdered milk without other nitrogen-containing compound disturbance in Kjeldahl determination.Methods Conjugated with protein precipitation with trichloroacetic acid, BCA (bicinchoninic acid) method was used. According to the positive relationship of protein content with the 570 nm absorbance, protein content was calculated in powdered milk.Results Protein content in milk solution showed a good linear relationship at the detection ranges of 0-250 μg/ml, with regression equation: Y=301.12X-73.42 and related coefficient: 0.998, and the average recovery rate was 100.2%.Conclusion BCA method conjugated with trichloroacetic acid is adaptable to the rapid and
食物中蛋白质含量的测定
一、实验摘要： 蛋白质是含一定量氮的有机化合物。其测定方法也有很多种。不同的方法都有其优点和缺点，以及它们的适用范围不同。 紫外吸收法（方便快捷，0.2-2mg/ml） 凯氏定氮法（粗蛋白测定，0.2 – 2.0mg /ml) 双缩脲法（1-10mg /ml) 福林酚法（0.005-0.10mg /ml) G250 （0.025-0.20mg /ml) （考马氏亮蓝法） BCA法（0.010-1.2mg/ml；0.0005-0.001mg/ml） 此次实验采用牛奶样品在凯氏烧瓶中经浓硫酸和催化剂消化后，使蛋白质分解，产成的氨与硫酸结合生成硫酸铵，再在强碱条件下蒸馏出氨，并用硼酸吸收，以标准盐酸滴定，根据标准酸消耗的量，乘以一定系数，即可计算样品中蛋白质的含量。此次实验中使用的是乳制品，系数F=6.38.这种测定方法即为凯氏定氮法。因为食品中除蛋白质外，还含有其他含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白质。此次实验后，我们组的最终得率为2.77%。 二、实验目的： 1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理 2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理，蒸馏、滴定及蛋白 质含量计算等 3、侧面了解测定食品中蛋白质含量的多种方法和优劣 三、基本原理： 利用浓硫酸及催化剂与食品试样一同加热消化，使蛋白质分解，其中C、H 形成CO 2、H 2 O逸出，而氮以氨的形式与硫酸作用，形成硫酸铵留在酸液中。然后 将消化液用NaOH碱化，蒸馏，使氨游离，用水蒸气蒸出，被硼酸吸收。用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵，从消耗的盐酸标准液计算出总氮量，再折算为粗蛋白含量。 1.有机物中的氮在强热和CuSO4，浓H2SO4作用下，消化生成（NH4）2SO4 反应式为：H2SO4==SO2↑+ H2O +[O] R-CH2-COOH+[O]==R-CO-COOH+ NH3↑
食品中蛋白质的含量测定
蛋白质的测定方法 测定食品中的蛋白质含量有二种方法，一是凯氏微量法，二是自动定氮分析法。 一．凯氏微量法 有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮，实验者可根据经济条件设备而定。 1.原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离，用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量乘以换算系数，即为蛋白质含量。 2NH2（CH2）2COOH+13H2SO4 （NH4）2SO4+6CO2+12SO2+16H2O （NH4）2SO4+2NaOH 2NH3+2H2O+Na2SO4 2.方法 本法参照GB 5009.5 -85 适用于各类食品及饲料中蛋白质的测定 3.试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 3.1硫酸铜 3.2硫酸钾 3.3浓硫酸 3.4 2%硼酸溶液（或1%的硼酸） 3.5 混合指示剂：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2 份0.1%甲基红乙醇溶与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.6饱和氢氧化钠：500g氢氧化钠加入500ml水中，搅拌溶解，冷却后放置数日，澄清后使用。 3.7 0.01mol/L或0.05mol/L盐酸标准溶液：需标定后使用(配制及标定方法见附录) 4.仪器 消化炉凯氏定氮蒸馏装置万分之一电子天平 凯氏定氮蒸馏装置：如图所示 5. 操作步骤 5.1样品处理：精密称取0.1~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取液体样品5~20ml，放入100ml 或500ml凯氏烧瓶中，加入0.2g硫酸铜，0.3g硫酸钾及3~20ml浓硫酸，放置过夜后小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色澄清透明后，取下放冷后用约2～10ml蒸馏水冲洗瓶壁，混匀后继续加热至液体呈蓝绿透明，取下放冷，小心加10~20ml水混匀，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白实验。
测定奶粉中蛋白质的真实含量
凯氏定氮法测奶粉中真实蛋白质的含量 摘要 实验用凯氏定氮法测定奶粉中的蛋白质含量，将硫酸及催化剂与奶粉一同加热消化，使蛋白质分解，其中C、H形成CO2、H2O逸出，而氮以氨的形式与硫酸作用，形成硫酸铵留在酸液中。然后将消化液碱化，蒸馏，使氨游离，用水蒸气蒸出，被硼酸吸收。用标准盐酸溶液滴定所生成的硼酸铵，消耗的盐酸标准液计算出总氮量，再折算为粗蛋白含量。 关键词: 凯氏定氮法蛋白质消化蒸馏 1前言：劣质奶粉的出现严重地损害了人民群众的健康,劣质奶粉的主要特点是蛋白质含量远低于正常值。正是利用氮与蛋白质含量间的关系，实验室测定蛋白质的非直接性，一些不法人士钻了蛋白质中氮的含量。他们利用三聚氰胺含有很高的氮，将三聚氰胺残掺杂近奶粉中以提高奶粉的蛋白质含量。而长期饮用这些蛋白质含量极低的奶粉，首先会导致婴儿严重营养不良，随后会引起各种并发症，在外来细菌的侵袭之下，婴儿几乎完全丧失了自身的免疫能力，病情发展十分迅速，最后婴儿头部严重水肿，几乎看不清五官，全身皮肤也出现了大面积的高度溃烂，伤口长时间无法愈合，最后导致呼吸衰竭而死亡。因此，测定奶粉中蛋白质含量，对掌握其营养价值和品质的变化，保障人体的健康，合理配料，为乳制品深加工提供数据十分重要，此外，蛋白质分解产物对乳制品的色、香、味都有一定的作用，所以测定具有深远意义。 2实验目的 （1）学习凯氏定氮法的测定蛋白质的原理； （2）掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量的计算等。 3实验原理 各种天然有机物的含氮量通常用微量凯氏定氮法（micro-Kjeldahl method）来测定。当有机含氮化合物与浓硫酸共热消化，氮转化为氨，氨与硫酸结合成硫酸铵。消化产生
实验八 食品蛋白质含量测定
实验八食品中蛋白质含量测定 1.实验目的 （1）学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。 （2）掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。 2.实验原理 2.1消解 蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸在催化剂作用下共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵而留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。因为食品中除蛋白质外，还含有其它含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白。 NH 2(CH2) 2 COOH+13H 2 SO 4 =(NH 4 ) 2 SO 4 +6CO 2 +12SO 2 +16H 2 O 浓硫酸将有机物炭化后为碳、氢与氮，将形成的碳氧化： 2H 2SO 4 +C（Δ）=CO 2 +2H 2 O+2SO 2 ↑ 生成的二氧化硫将氧化态的氮还原为氨而自身被氧化为三氧化硫，氨随之与硫酸反应生成硫酸铵， H 2SO 4 +2NH 3 =(NH 4 ) 2 SO 4 在消解试验中，为了加速蛋白质的分解，缩短消解时间，常常加入下列物质： （1）硫酸钾：一般浓硫酸的沸点为340℃，但加入硫酸钾后，硫酸不断分解，水不断溢出引起硫酸钾浓度不断增加，沸点因此而增加。 K 2SO 4 +H 2 SO 4 =KHSO 4 KHSO 4（Δ）=K 2 SO 4 +H 2 O↑+SO 3 但硫酸钾浓度不能太大，否则消化温度过高会引起铵盐的热分解而释放出氨， （NH 4） 2 SO 4 （Δ）=（NH 4 ） 2 SO 4 +NH 3 ↑ 2KSO 4（Δ）=2H 2 O+2NH 3 ↑+2SO 3 ↑ 除了可以添加硫酸钾之外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等以提高溶液温度，但效果要差于硫酸钾。 （2）硫酸铜：硫酸铜可以催化反应。可以采用的催化剂除了硫酸铜外，还可以加入氧化汞、汞、硒粉以及二氧化钛等，但考虑效果、价格以及污染等原因外，最常用的还是硫酸铜，同时可以加入少量的过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物的氧化，反应机理为： 2CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +O 2 ↑+SO 2 ↑ C+CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +CO 2 ↑+SO 2 ↑ H 2SO 4 +Cu 2 SO 4 （Δ）= 2CuSO 4 +2H 2 O↑+SO 2 ↑ 此反应不断进行，如溶液没有褐色生成（Cu 2SO 4 颜色）而呈现清澈的蓝绿色，说明有机 物已经全部被消解完毕。因此，在试验过程中，硫酸铜不但能够催化反应，而且能够指示反应的进行程度。 2.2碱化蒸馏 在消解完全的样品溶液中加入过量的浓的氢氧化钠溶液使溶液呈现碱性，加热蒸馏而放出氨气： 2NaOH+（NH 4） 2 SO 4 （Δ）= Na 2 SO 4 +2H 2 O+2NH 3 ↑ 2.3吸收与滴定 将加热蒸馏释放出来的氨利用硼酸溶液进行吸收，因硼酸属于弱酸，其后再用盐酸进行滴定： 2NH 3+ 4 H 3 BO 3 =(NH 4 ) 2 B 4 O 7 +5H 2 O (NH 4) 2 B 4 O 7 +5H 2 O+2HCl=2NH 4 Cl+4H 3 BO 3 除此之外，也可以用过量的盐酸或者硫酸吸收整流而出的氨气，然后再用氢氧化钠进行回滴。 3. 仪器及材料 3.1仪器
蛋白质含量的测定
蛋白质含量的测定 实验三蛋白质含量的测定 衡量食品的营养成分时，要测定蛋白质含量，但由于蛋白质组成及其性质的复杂性，在食品分析中，通常用食品的总氮量表示，蛋白质是食品含氮物质的主要形式，每一蛋白质都有其恒定的含氮量，用实验方法求得某样品中的含氮量后，通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。 一般食品蛋白质含氮量为l0,如肉、蛋、豌豆、玉米等，其换算系数为6.25，小麦取5.70，大米5.95、乳制品6.38、大豆5.17，动物胶5.55。 一、目的与要求: 掌握微量凯氏法测定蛋白质总氮量的原理及操作技术。包括样品的消化，蒸馏吸收及滴定与含氮量的计算。 二、原理: 凯氏定氮法:食品经加硫酸消化使蛋白质分解，其中氮素与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸液吸收后，再用盐酸或硫酸滴定根据盐酸消耗量，再乘以一定的数值即为蛋白含量，其化学反应式如下。 ( 1 ) 2NH(CH)COOH+13HS0 (NH)2S0+6C0+12S0+ 16H 2222444222 (2)(NH)SO+2NAOH-----2NH+2HO+NASO 4242224 (3)2NH+4HBO----(NH)BO+5HO 33342472 (4) (NH)B0+HS0+5H0-(NH)SO+4HBO 424724249422 三、试剂与仪器: 1、硫酸钾 2、硫酸铜 3、硫酸
4、2,硼酸溶液 5、40,氢氧化钠溶液 6、混合指示剂:把溶解于95,乙醇的0.l,溴甲酚绿溶液10毫升和溶于95,乙醇的0.l,甲基红溶液2毫升混合而成( 7、0.OINHCL标准溶液或0(01N硫酸标准溶液( 8、凯氏微量定氮仪一套。 9、定氮瓶100m1或50ml一只。 10、三角瓶150ml 3只。 11、量筒50ml、lOml、lOOml。 12、吸量管10ml只。 13、酸式滴定管1支。 14、容量瓶100毫升1只。 15、小漏斗1只。 四、操作方法: 1、样品处理:精密称取0.2-2.0g固体样品或2-5g半固体样品或吸取10-20ml 液体样品(约相当氮30-40mg)，移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g
食品中蛋白质含量测定
实验一食品中蛋白质含量测定（凯氏定氮法） 一、目的与要求 1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。 2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。 二、实验原理 1、消解：蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸在催化剂作用下共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵而留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。因为食品中除蛋白质外，还含有其它含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白。 NH 2(CH2) 2 COOH+13H 2 SO 4 =(NH 4 ) 2 SO 4 +6CO 2 +12SO 2 +16H 2 O 浓硫酸将有机物炭化后为碳、氢与氮，将形成的碳氧化： 2H 2SO 4 +C（Δ）=CO 2 +2H 2 O+2SO 2 ↑ 生成的二氧化硫将氧化态的氮还原为氨而自身被氧化为三氧化硫，氨随之与硫酸反应生成硫酸铵， H 2SO 4 +2NH 3 =(NH 4 ) 2 SO 4 在消解试验中，为了加速蛋白质的分解，缩短消解时间，常常加入下列物质： （1）硫酸钾：一般浓硫酸的沸点为340℃，但加入硫酸钾后，硫酸不断分解，水不断溢出引起硫酸钾浓度不断增加，沸点因此而增加。 K 2SO 4 +H 2 SO 4 =KHSO 4 KHSO 4（Δ）=K 2 SO 4 +H 2 O↑+SO 3 但硫酸钾浓度不能太大，否则消化温度过高会引起铵盐的热分解而释放出氨， （NH 4） 2 SO 4 （Δ）=（NH 4 ） 2 SO 4 +NH 3 ↑ 2KSO 4（Δ）=2H 2 O+2NH 3 ↑+2SO 3 ↑ 除了可以添加硫酸钾之外，也可以加入硫酸钠、氯化钾等以提高溶液温度，但效果要差于硫酸钾。 （2）硫酸铜：硫酸铜可以催化反应。可以采用的催化剂除了硫酸铜外，还可以加入氧化汞、汞、硒粉以及二氧化钛等，但考虑效果、价格以及污染等原因外，最常用的还是硫酸铜，同时可以加入少量的过氧化氢、次氯酸钾等作为氧化剂以加速有机物的氧化，反应机理为： 2CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +O 2 ↑+SO 2 ↑ C+CuSO 4（Δ）= Cu 2 SO 4 +CO 2 ↑+SO 2 ↑ H 2SO 4 +Cu 2 SO 4 （Δ）= 2CuSO 4 +2H 2 O↑+SO 2 ↑ 此反应不断进行，如溶液没有褐色生成（Cu 2 SO 4 颜色）而呈现清澈的蓝绿色，说明有机 物已经全部被消解完毕。因此，在试验过程中，硫酸铜不但能够催化反应，而且能够指示反
食品中蛋白质的测定
任务： 1、请设计检验样品抽样单，并抽样，填写相关记录； 2、食品中蛋白质种类及含量是标志食品营养价值的重要指标，查阅资料，了解并下载国家标准测定蛋白质的方法。 3、凯氏定氮法测定食品中蛋白质方法原理是什么？ 凯氏定氮法测定食品中蛋白质的原理是样品与浓硫酸、硫酸钾、硫酸铜一同加热消化, 使蛋白质分解, 其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出, 而样品中的有机氮转化为氨和硫酸结合成硫酸铵, 然后加碱蒸馏, 使氨蒸出,用硼酸吸收后再以标准盐酸溶液滴定, 根据标准酸消耗量可计算出蛋白质的含量。 4、对照国家标准，列出实验所需仪器与试剂 所有试剂均为分析纯，水为蒸馏水或同等纯度的水。 硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸；40％氢氧化钠溶液：称取40g 氢氧化钠溶于60ml 蒸馏水中；4％硼酸溶液：称取4g 硼酸溶于蒸馏水中稀释至100ml；0.050mol/l 盐酸标准滴定溶液；甲基红次甲基蓝混合指示液：将次甲基蓝乙醇溶液（1g/l）与甲基红乙醇溶液（1g/l）按1∶2 体积比混合。 实验室常规仪器及下列各项： 凯氏烧瓶：500ml；可调式电炉；蒸汽蒸馏装置；绞肉机：篦孔径不超过4nm；组织捣碎机；粉碎机；研钵：玻璃或瓷质；化学消化器；凯氏定氮仪；空气滤过器 5.样品在消化过程中，应加入浓硫酸、硫酸钾及硫酸铜，试分别说清他们各自的作用。 加硫酸作用：硫酸及催化剂与样品加热消化, 使蛋白质分解, 其中C、H 形 成CO 2和H 2 O 逸出, 而蛋白质中的氮则转化成( NH4 ) 2 SO4 加硫酸钾作用：在消化过程中添加硫酸钾可以提高温度加快有机物分解,它与硫酸反应生成硫酸氢钾,可提高反应温度,一般纯硫酸加热沸点330 ℃,而添加硫酸钾后,温度可达400 ℃,加速了整个反应过程。此外,也可以加入硫酸钠,氢化钾盐类来提高沸点。其理由随着消化过程硫酸的不断地被分解,水分的逸出而使硫酸钾的浓度增大,沸点增加。加速了有机的分解。但硫酸钾加入量不能太大,否则温度太高,生成的硫酸氢铵也会分解,放出氨而造成损失。 加硫酸铜作用：为了加速反应过程,还加入硫酸铜,氧化汞或硒粉作为催化剂以及加入少量过氧化氢,次氯酸钾作为氧化剂。但为了防止污染通常使用硫酸铜。所以有机物全部消化后,出现硫酸铜的兰绿色,它具有催化功能,还可以作为碱性反应指示剂。 6、消化过程中应注意哪些问题？如何判断样品消化达到终点。 （1）消化过程中不要用强火,特别是样品脂肪或糖含量较高时,消化过程中易产生大量泡沫,强火会使样品溢出瓶外或溅起粘附在凯氏烧瓶壁上无法消化完全而造成氮损失,因此应在开始消化时用小火加热,保持和缓沸腾,使火力集中在凯氏烧瓶底部。 （2）消化过程中要不时转动凯氏烧瓶,以便利用冷凝酸液将附在瓶壁上的固体残渣洗下并促进其消化完全。 （3）样品中脂肪含量过高时,要增加硫酸的量,因消化时脂肪消耗硫酸量大,使硫酸缺少不能生成硫酸铵造成氮损失。
婴幼儿配方奶粉中的蛋白质
婴幼儿配方奶粉中的蛋白质 蛋白质是由氨基酸以“脱水缩合”的方法组成的多肽链通过盘曲折叠构成的具有必定空间结构的物质。蛋白质是悉数细胞组织的物质基础。没有蛋白质就没有生命。由此能够看出，蛋白质关于人体的重要。 氨基酸是由氨基和羧基组成的酸，所以叫氨基酸。食物中的氨基酸有20种，其间一部分在体内不能组成或组成速度不够快，不能满意机体需求，而有必要由食物蛋白质进犯，成为有必要氨基酸；另一部分能够在体内组成，称为非必需氨基酸。有必要氨基酸包含异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、苏氨酸、缬氨酸；非必需氨基酸包含甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、酪氨酸、胱氨酸、半胱氨酸、丝氨酸、羧脯氨酸、天冬氨酸、精氨酸、谷氨酸及组氨酸，其间组氨酸为儿童所必需，是婴儿的必需氨基酸，婴儿缺少时易患湿疹。在养分学上，常常根据食物蛋白质所含的氨基酸品种是否完全及份额是否合理，而将蛋白质分为完全性蛋白质和不完全性蛋白质。完全性蛋白质是指蛋白质在所含的氨基酸品种和份额方面，能契合人体需求。也就是说，这些氨基酸在从头拼装成人体所需求的蛋白质时，大部分能“各
得其所”取得充分使用。如：鸡蛋、肉类、奶类、大豆所含蛋白质也为完全性蛋白质。不完全性蛋白质是指组成蛋白质的氨基酸在品种和数量方面，与人体需求的不太一起，所以在人体内从头拼装时，却这少那，剩余的又没法使用，是蛋白质的养分价值下降，这类蛋白质被称为不完全性蛋白质。如：米、面等植物性食物中的蛋白质多属此类。 蛋白质摄入过多。蛋白质，尤其是动物性蛋白摄入过多，对人体相同有害。首要过多的动物蛋白质的摄入，就必定摄入较多的动物脂肪和胆固醇。其次蛋白质过多自身也会发作有害影响。正常情况下，人体不贮存蛋白质，所以有必要将过多的蛋白质脱氨分化，氮则由尿排出体外，这加剧了代谢担负，并且，这一进程需求很多水分，然后加剧了肾脏的负荷，若肾功能原本欠好，则危害就更大。过多的动物蛋白摄入，也形成含硫氨基酸摄入过多，这样可加快骨骼中钙质的丢掉，易发作骨质疏松。 蛋白质摄入缺少。蛋白质缺少在成人和儿童中都有发作，但处于成长阶段的儿童更为灵敏。蛋白质的缺少常见症状是代谢率下降，对疾病抵抗力减退，易患病，远期作用是器官的危害，常见的是儿童的成长发育缓慢、体质量下降、冷漠、易激怒、贫血以及衰弱或水肿，并由于易感染而继发其他疾
蛋白质含量测定(凯氏定氮法)
食品中蛋白质含量测定（凯氏定氮法） 一、目的与要求 1、学习凯氏定氮法测定蛋白质的原理。 2、掌握凯氏定氮法的操作技术，包括样品的消化处理、蒸馏、滴定及蛋白质含量计算等。 二、实验原理 蛋白质是含氮的化合物。食品与浓硫酸和催化剂共同加热消化，使蛋白质分解，产生的氨与硫酸结合生成硫酸铵，留在消化液中，然后加碱蒸馏使氨游离，用硼酸吸收后，再用盐酸标准溶液滴定，根据酸的消耗量来乘以蛋白质换算系数，即得蛋白质含量。 因为食品中除蛋白质外，还含有其它含氮物质，所以此蛋白质称为粗蛋白。 三、仪器与试剂 硫酸铜（CuSO4·5H20）硫酸钾硫酸（密度为1.8419g/L）硼酸溶液（20g/L） 氢氧化钠溶液（400g/L）0.01mol/L盐酸标准滴定溶液。 混合指示试剂：0.1%甲基红乙溶液液1份，与0.1%溴甲酚绿乙醇溶液5份临用时混合。 微量定氮蒸馏装置：如图3- 所示。 图3- 微量凯氏定氮装置 1、电炉； 2、水蒸气发生器（2L平底烧瓶）； 3、螺旋夹a； 4、小漏斗及棒状玻璃塞（样品入口处）； 5、反应室； 6、反应室外层； 7、橡皮管及螺旋夹b；8、冷凝管；9、蒸馏液接收瓶。 四、实验步骤 1、样品消化 称取样品约2.00g（±0.001g），移入干燥的100mL凯氏烧瓶中，加入0.2g硫酸铜和6g 硫酸钾，稍摇匀后瓶口放一小漏斗，加入20mL浓硫酸，将瓶以450角斜支于有小孔的石棉网上，使用万用电炉，在通风橱中加热消化，开始时用低温加热，待内容物全部炭化，泡沫停止后，再升高温度保持微沸，消化至液体呈蓝绿色澄清透明后，继续加热0.5h，取下放冷，小心加20mL水，放冷后，无损地转移到100mL容量瓶中，加水定容至刻度，混匀备用，即为消化液。 试剂空白实验：取与样品消化相同的硫酸铜、硫酸钾、浓硫酸，按以上同样方法进行
奶粉中蛋白质含量测定
奶粉中蛋白质含量测定报告 朱文轩B09070116 前言：在许多蛋白质研究的领域中，用一种快速准确的方法来检测蛋白浓度是必不可少的。一种新建立的考马斯亮蓝法在许多实验中已成为首选方法用来定量的检测蛋白浓度。与传统的Lowry法相比，该法更易操作，更快，更灵敏，此外，它受其他一些试剂和非蛋白成分干扰也较小。该考马斯亮蓝法其检测原理是基于染料考马斯蓝G250和蛋白质之间形成的特异性结合。详细的研究表明[1]，该染料可以自由存在于四种不同的离子形式中。相比之下，染料更多的阴离子形式与蛋白质结合且结合后显蓝色，在590 nm左右具有最大吸收。因此通过定量测定染料的蓝色离子的量就可以算出蛋白质的量，这通常可以在595 nm处测定吸光度获得。 实验部分： 实验流程图： 前期原料配备 标准曲线绘制 样品测定
实验过程：1、称取奶粉样品，配制成5mg/ml的溶液。取0.3ml 该溶液于试管，再加入0.7ml去离子水，9ml考马斯亮蓝G-250，配制成奶粉含量为150μg/ml的样品溶液。 2、配制的标准牛血清蛋白（BSA）溶液为0.4mg/ml,选用五个点绘制标准曲线，五点BSA溶液体积分别为0.1，0.2，0.4，0.6，0.8ml，相应的加入9ml考马斯亮蓝G-250，和水，每份配制成体积为10ml 的溶液，即每份含BSA量为40，80，160，240，320μg。浓度为4，8，16，24，32μg/ml。配制两组相同的分别为A1组和A2组。表格如下： 0 1 2 3 4 5 0 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 标准牛血清蛋白 （BSA）/ml 去离子水/ml 1 0.9 0.8 0.6 0.4 0.2 考马斯亮蓝 9 9 9 9 9 9 G-250/ml 3、做紫外分光光度测试，得每份试剂蛋白质-色素结合物在595nm波长下的最大光吸收A。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。 4、根据所测数据通过作图得直线A=aC+d(A为蛋白质-色素结合物在595nm波长下的最大光吸收,C为溶液浓度)。再对样品做紫外分光光度测试，得其最大光吸收A'，则样品中蛋白质浓度为C'=（A'－d）/a。固样品蛋白质含量计算公式为10C'/1500×100%。
解读奶粉营养成分表(详解)
解读奶粉营养成分表（详解） 很多年轻的家长都可能有这样的经验：想给宝宝买最好的奶粉，但是走到琳琅满目的奶粉货架前，却不知道该如何挑选。对比奶粉罐上的营养成分，似乎每一类奶粉的营养含量都很接近，拿着婴幼儿配方奶粉在手上，一看全蒙圈了。 根据食品安全国家标准，婴幼儿配方奶粉必须含有蛋白质、脂肪、碳水化合物、维生素和矿物质。除了这些必须成分，食品安全国家标准中还规定了婴幼儿奶粉中部分可添加成分，包括DHA、ARA、牛磺酸、肌醇、左旋肉碱、叶酸、胆碱、哂、锰、亚油酸、亚麻酸等等。 今天中国孕婴小编就给各位宝妈宝爸说一说婴幼儿配方羊奶粉的几种主要的奶粉营养。 蛋白质
蛋白质是生命物质的基础，所有的奶粉中都含有蛋白质。根据国家标准，0-6个月婴幼儿奶粉的蛋白质含量必须达到12-18g/100g，6-36个月婴幼儿奶粉的蛋白质含量必须达到15-25g/100g。 羊乳清蛋白 蛋白质是生命的物质基础，是人体细胞的重要组成部分，如果蛋白质含量过低，会造成宝宝生长发育迟缓，身体器官发育不完善。乳清蛋白被称为“蛋白之王”，能提供最接近母乳的氨基酸组合，提高蛋白质的生物利用度，降低蛋白质总量，从而有效减轻肾脏负担。羊乳与人乳蛋白结构类似，含有极少过敏因子α-s1-酪蛋白，能有效降低牛奶引起的宝宝过敏反应，且分子细小，易于消化吸收。 DHA和ARA 俗称“脑黄金”， DHA 和ARA都是一种长链多元不饱和脂肪酸，天然存在于母乳中，ARA有助于DHA的吸收，对促进婴幼儿智力及视力发育有重要作用，能提升婴儿智力发育指数、提升视力敏锐度。它们是人体必需的脂肪酸，但人体自身不能合成。所以在婴幼儿奶粉中必须添加DHA和ARA，才能补充婴幼儿的生长发育。婴幼儿配方奶粉DHA和ARA母乳配比(1:2)，科学权威，喂养效果接近母乳，其生理接受度以及生长发育指标可以达到较佳水平。 亚油酸、亚麻酸 人体本身不能合成，只能从食物中摄取。亚油酸、亚麻酸是人体必需的脂肪酸，它在人体内可以转化为DHA和ARA，对人大脑的发育和视觉健康有重要意义。婴幼儿配方羊奶粉中含有充足的亚油酸和亚麻酸，根据临床配比研制，可在宝宝体内根据需要自然合成DHA和ARA让宝宝脑部发育更好。 低聚半乳糖 低聚半乳糖(GOS)是一种具有天然属性的功能性低聚糖，在自然界中，动物的乳汁中存在微量的GOS，而人母乳中含量较多，是人体肠道中双歧杆菌、嗜酸乳酸杆菌等有益菌极好的营养源和有效的增殖因子，可以改善人体肠道的消化吸收功能。新生儿的消化功能比较薄弱，婴幼儿配方羊奶粉中添加了低聚半乳糖的营养成分，可改善宝宝的消化功能，抑制有害菌，增强宝宝的免疫力。益生元 理论上来讲，任何能够减少有害菌种，而有益于促进安康的菌种或活动的抗生素都可以称为益生元。最根本的益生元为碳水化合物，但定义并不排除被用作益生元地非碳水化合物物质。奶粉中的FOS+GOS＋Polyfructose益生元组合，属于复合益生元，复合益生元能促进肠道内有益菌群增殖，抑制有害菌生