【武大】混合溶液中磷酸二氢钠与磷酸氢二钠浓度的测定
混合溶液中磷酸二氢钠与磷酸氢二钠
浓度的测定
孙阳勇
武汉大学化学与分子科学学院
摘要：酸碱滴定法是容量滴定分析法中最重要的方法之一，也是其它三种滴定分析的基础。酸碱滴定法是以质子传递反应为基础的滴定分析方法。这种方法的特征是：滴定过程中溶液的酸度呈现规律性变化。
关键词：磷酸二氢钠磷酸氢二钠差减法指示剂
引言：酸碱指示剂可以指示溶液中H+浓度的变化，是一种有机弱酸或有机弱碱，其酸性和碱性具有不同的颜色。指示剂酸HIn在溶液中的离解常数Ka=[H+][In-]/[HIn]，即溶液的颜色决定于[In-]/[HIn]，而[In-]/[HIn]又决定于[H+]。以甲基橙（Ka=10-3.4）为例，溶液的pH<3.1时，呈酸性，具红色；pH>4.4时，呈碱性，具黄色；而在pH=3.1～4.4，则出现红黄的混合色橙色，称之为指示剂的变色范围。不同的酸碱指示剂有不同的变色范围。
试剂及仪器：NaOH固体，浓HCl溶液，甲基橙溶液（1g/L），酚酞溶液（2g/L，乙醇溶液），邻苯二甲酸氢钾基准试剂，无水碳酸钠固体，溴甲酚绿溶液，待测混合液，蒸馏水量筒，烧杯，称量瓶，烧杯，锥形瓶，50mL酸式滴定管，50mL碱式滴定管，25mL移液管，分析天平，洗耳球，玻璃棒，试剂瓶
，
实验原理：上图表示H3PO4
的分布分数图，在pH 为2.16-7.21间以磷酸二氢根为主，在pH 为7.21-12.32间，以磷酸一氢根为主。对于浓度约为0.1mol/L 的磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的混合液，起始，有pH=pKa+lg[HPO 42-]/[H 2PO 4-
]=7.2，用氢氧化钠将磷酸二氢钠滴定成磷酸氢二钠，当完全变成磷酸氢二钠时，此时混合溶液中c （Na 2HPO 4）=0.1mol/L,那么在此时，溶液中氢离子浓度
，此时的pH=9.74，选用酚酞作指示剂。之后用盐酸将混合液中磷酸氢二钠滴定成磷酸二氢钠，此时混合液中c （NaH 2PO 4）=0.1 mol/L ，那么溶液中氢离子浓度:［H+］= ，此时的pH=4.68，选用溴甲酚绿作指示剂，其中溴甲酚绿在pH=3.8时显黄色，在pH=5.4是呈蓝绿色，在pH=4.5时开始有颜色明显变化。
实验操作过程：
（1）配制NaOH 溶液：称取约2.0g 固体NaOH 于烧杯中，加入100mL 水使之全部溶解，并转入试剂瓶中，配制成500mL 溶液，摇匀。
（2）配制HCl 溶液：用量筒量取约4.2mL 浓盐酸于试剂瓶中，加水约至500mL ，摇匀。 （3）标定NaOH 溶液：准确称取基准邻苯二甲酸氢钾0.4~0.5g 于锥形瓶中，溶于50mL 水后，加2~3滴酚酞指示剂。用NaOH 溶液滴定至微红色，半分钟不褪色即为终点。平行测定2~3次，计算NaOH 溶液的准确浓度。
编号 1 2 3 m(KHC 8H 4O 4)/g 0.4899 0.6640 0.4711 V （NaOH ）/ mL 26.45 35.81 25.68 c （NaOH ）/ mol/L 0.09079
0.09089 0.08993
c （NaOH ）平均值
0.09054
（4）标定HCl 溶液：准确称取0.1~0.16基准无水碳酸钠 ，溶于30mL 蒸馏水中，加甲基橙1滴，用HCl 溶液滴定至溶液由黄色变为橙色，即为终点。计算HCl 溶液的准确浓度。
编号 1 2 3 m(Na 2CO 3)/g 0.1069 0.1273 0.1293 V(HCl)/mL 21.00 25.05 25.50 C(HCl)/ mol/L 0.09605
0.09588 0.09567
C(HCl) 平均值
0.09587
(5)将磷酸二氢钠滴定成磷酸氢二钠：准确移取25.00mL 混合溶液3份于3个锥形瓶中，各
c
K )
K (cK K ][H 2
32a w a a ++=
+1
21a w a a K c )
K (cK K ++
滴加1~2滴酚酞指示剂，用NaOH 标准溶液滴定至溶液由无色变为微红且半分钟不褪色，即为滴定终点。据此计算混合溶液中NaH 2PO 4的浓度。
编号 1 2 3 V （NaOH ）/ mL 26.41 26.23 26.25 c （NaH 2PO 4）/ mol/L 0.1014
0.1007 0.1008
c （NaH 2PO 4）平均值
0.1009
（6）将磷酸氢二钠滴定成磷酸二氢钠:
准确移取25.00mL 混合液3份于3个250mL 锥形瓶中，加入40mL 水稀释。滴加1~2滴溴甲酚绿指示剂，用上述盐酸溶液滴定使之从蓝色突变为黄色且半分钟不变色，即达到滴定终点，记下滴定消耗体积为 V （mL ）。可算出NaH 2PO 4的准确浓度。
编号 1 2
3 V(HCl)/mL 26.39 26.35 26.45 c （Na 2HPO 4）/ mol/L 0.1013
0.1012 0.1016
c （Na 2HPO 4）平均值
0.1014
实验结论：实验测得磷酸氢二钠的浓度约为0.1014mol/L ，磷酸二氢钠的浓度约为
0.1009mol/L
实验讨论：
（1）用氢氧化钠将磷酸二氢钠滴定成磷酸氢二钠，滴定终点时pHep=9.1，化学计量点时有pHsp=9.74，那么有
由电荷守恒，有[H +]+[Na +]=[OH -]+[ H 2PO 4-]+2[HPO 42-]+3[PO 43-
],那么有，终点时：[Na +]-[ H 2PO 4-]= [OH -]+2[HPO 42-]+ 3[PO 43-]- [H -
]，同时由分布分数，有
因此可得终点误差约为-1%，，同理用百里酚酞作指示剂，则可算得终点误差只有-0.3%，但
[][][]
a3
a2a1a2a1
2a1
3
a3
a2a1PO K K K H K K
H K H K K K δ34+++=
+++-[]
[][][]a3
a2a1
a2
a1
2a1
3
a2a1HPO K K K
H K K
H K H H K K δ24+++=
+
+++
-
实验时考虑灵敏度，综合考虑应用酚酞。实验中可将酚酞滴入0.1 mol/L的磷酸氢二钠中观察颜色，在实验时以此为基准。
（2）用盐酸将磷酸氢二钠滴定成磷酸二氢钠，滴定终点pHep=4.69，化学计量点时有pHsp=4.90，那么有终点误差约为-0.29%。
（3）用盐酸将磷酸氢二钠滴定成磷酸二氢钠，由于1mol Na2HPO4~1molHCl，计算磷酸氢
二钠的浓度时，有，同时标定盐酸时，有
，称取碳酸钠时用分析天平称取，天平读数标准偏差为S1=0.10mg，由于计算碳酸钠质量时用了一次减法，故S m2=S12+S12,将盐酸装入酸式滴定管中滴碳酸钠，那么滴定管体积V的标准偏差为S V2=S22+S22,其中S2=0.01mL，量取混合液时体积标准偏差为Sv=0.02mL，则根据上述两式，有
根据随机误差的传递公式，有,根据上述数据，取m=0.1069g，V2=26.39mL，V=25.00mL，V1=21.00mL，那么可以算的磷酸氢二钠的浓度范围为（0.1014-9.85*10-5）mol/L~（0.1014+9.85*10-5）mol/L
参考文献：
[1]武汉大学主编《分析化学》（第五版上册）46~47,147~151
【武大】混合溶液中磷酸二氢钠与磷酸氢二钠浓度的测定
混合溶液中磷酸二氢钠与磷酸氢二钠 浓度的测定 孙阳勇 武汉大学化学与分子科学学院 摘要：酸碱滴定法是容量滴定分析法中最重要的方法之一，也是其它三种滴定分析的基础。酸碱滴定法是以质子传递反应为基础的滴定分析方法。这种方法的特征是：滴定过程中溶液的酸度呈现规律性变化。 关键词：磷酸二氢钠磷酸氢二钠差减法指示剂 引言：酸碱指示剂可以指示溶液中H+浓度的变化，是一种有机弱酸或有机弱碱，其酸性和碱性具有不同的颜色。指示剂酸HIn在溶液中的离解常数Ka=[H+][In-]/[HIn]，即溶液的颜色决定于[In-]/[HIn]，而[In-]/[HIn]又决定于[H+]。以甲基橙（Ka=10-3.4）为例，溶液的pH<3.1时，呈酸性，具红色；pH>4.4时，呈碱性，具黄色；而在pH=3.1～4.4，则出现红黄的混合色橙色，称之为指示剂的变色范围。不同的酸碱指示剂有不同的变色范围。 试剂及仪器：NaOH固体，浓HCl溶液，甲基橙溶液（1g/L），酚酞溶液（2g/L，乙醇溶液），邻苯二甲酸氢钾基准试剂，无水碳酸钠固体，溴甲酚绿溶液，待测混合液，蒸馏水量筒，烧杯，称量瓶，烧杯，锥形瓶，50mL酸式滴定管，50mL碱式滴定管，25mL移液管，分析天平，洗耳球，玻璃棒，试剂瓶 ， 实验原理：上图表示H3PO4
的分布分数图，在pH 为2.16-7.21间以磷酸二氢根为主，在pH 为7.21-12.32间，以磷酸一氢根为主。对于浓度约为0.1mol/L 的磷酸氢二钠和磷酸二氢钠的混合液，起始，有pH=pKa+lg[HPO 42-]/[H 2PO 4- ]=7.2，用氢氧化钠将磷酸二氢钠滴定成磷酸氢二钠，当完全变成磷酸氢二钠时，此时混合溶液中c （Na 2HPO 4）=0.1mol/L,那么在此时，溶液中氢离子浓度 ，此时的pH=9.74，选用酚酞作指示剂。之后用盐酸将混合液中磷酸氢二钠滴定成磷酸二氢钠，此时混合液中c （NaH 2PO 4）=0.1 mol/L ，那么溶液中氢离子浓度:［H+］= ，此时的pH=4.68，选用溴甲酚绿作指示剂，其中溴甲酚绿在pH=3.8时显黄色，在pH=5.4是呈蓝绿色，在pH=4.5时开始有颜色明显变化。 实验操作过程： （1）配制NaOH 溶液：称取约2.0g 固体NaOH 于烧杯中，加入100mL 水使之全部溶解，并转入试剂瓶中，配制成500mL 溶液，摇匀。 （2）配制HCl 溶液：用量筒量取约4.2mL 浓盐酸于试剂瓶中，加水约至500mL ，摇匀。 （3）标定NaOH 溶液：准确称取基准邻苯二甲酸氢钾0.4~0.5g 于锥形瓶中，溶于50mL 水后，加2~3滴酚酞指示剂。用NaOH 溶液滴定至微红色，半分钟不褪色即为终点。平行测定2~3次，计算NaOH 溶液的准确浓度。 编号 1 2 3 m(KHC 8H 4O 4)/g 0.4899 0.6640 0.4711 V （NaOH ）/ mL 26.45 35.81 25.68 c （NaOH ）/ mol/L 0.09079 0.09089 0.08993 c （NaOH ）平均值 0.09054 （4）标定HCl 溶液：准确称取0.1~0.16基准无水碳酸钠 ，溶于30mL 蒸馏水中，加甲基橙1滴，用HCl 溶液滴定至溶液由黄色变为橙色，即为终点。计算HCl 溶液的准确浓度。 编号 1 2 3 m(Na 2CO 3)/g 0.1069 0.1273 0.1293 V(HCl)/mL 21.00 25.05 25.50 C(HCl)/ mol/L 0.09605 0.09588 0.09567 C(HCl) 平均值 0.09587 (5)将磷酸二氢钠滴定成磷酸氢二钠：准确移取25.00mL 混合溶液3份于3个锥形瓶中，各 c K ) K (cK K ][H 2 32a w a a ++= +1 21a w a a K c ) K (cK K ++
磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2molL,pH5.8-8.0)
北京雷根生物技术有限公司 https://www.360docs.net/doc/0319491584.html, 磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L,pH5.8-8.0) 简介： 平衡盐溶液(Balanced Salt Solution ，BSS)与细胞生长状态下的pH 值、渗透压等环境状态一致，具有维持渗透压、控制酸碱平衡、供给细胞生存代谢所必需的能量和无机盐成分等作用，可满足体外实验中细胞生存并维持一定的代谢的基本需要。 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L,pH5.8-8.0)由磷酸氢二钠和磷酸二氢钠按不同比例混合而得，磷酸根浓度为0.2mol/L ，客户根据需要可选pH 5.8、5.9、6.0、6.1、 6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、 7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、 7.9、8.0。 组成： 操作步骤（仅供参考）： 1、根据实验具体要求操作。 注意事项： 1、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 12个月有效。 相关： 编号 名称 R00407 Storage 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2mol/L,pH5.8-8.0) 500ml RT 使用说明书 1份 编号 名称 CC0005 磷酸缓冲盐溶液(1×PBS,无钙镁) DH0006 苏木素伊红(HE)染色液 DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA) NA0030 Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE) NR0003 Lezol(总RNA 提取试剂) TC1243 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂比色法)
磷酸氢二钠检验
编号：ZL-SOP-QC-014-00 目的：建立磷酸氢二钠检验操作规程 范围：本规程适用于磷酸氢二钠的检验 责任人：质检科原辅料检定人员 内容： 1.器具：分析天平、PH计、量筒、烧杯、玻璃棒、刻度吸管、纳氏比色管、移液管、电热恒温干燥箱、电位滴定仪、电炉、4号垂熔坩埚、水浴箱、砷盐检查反应装置 2.试剂：15%碳酸钾溶液、焦锑酸钾试液、氯化铵镁试液、硼砂标准缓冲液、磷酸盐标准缓冲液、硝酸、稀硝酸、标准氯化钠溶液、硝酸银试液、盐酸、标准硫酸钾溶液、25%氯化钡溶液、稀硫酸、高锰酸钾滴定液（0.02mol/L）、标准铁溶液、盐酸溶液、10%磺基水杨酸溶液、氨试液、醋酸盐缓冲液（PH 3.5）、标准铅溶液、硫代乙酰铵试液、标准砷溶液、盐酸、碘化钾试液、酸性氯化亚锡试液、锌粒、醋酸铅棉花、溴化汞试纸、硫酸滴定液（0.5mol/L）
Na2HPPO4·12H2O 358.14 [10039-32-4] 本品按干燥品计算，含Na2HPPO4不得少于99.0%。 3.性状：本品为无色或白色结晶或块状物，无臭；常温置空气中易风化。本品在水中易溶，在乙醇中几乎不溶。 4.鉴别 （1）钠盐：取供试品约100mg，置10ml试管中，加水2ml溶解，加15%碳酸钾溶液2ml，加热至沸；应不得有沉淀生成；加焦锑酸钾试液4ml，加热沸腾；置冰水中冷却，必要时，用玻棒摩擦试管内壁，应有致密的沉淀生成。 （2）磷酸盐：取供试品溶液，加氯化铵镁试液，即生成白色结晶性沉淀。 4.检查 4.1碱度 4.1.1操作步骤 4.1.1.1称取样品1.0g，置于烧杯中。 4.1.1.2量取20ml水，倒入烧杯中，用玻璃棒搅拌，使完全溶解。 4.1.1.3以硼砂标准缓冲液校正仪器，以磷酸盐标准缓冲液核对，按《PH 计使用SOP》测定样品的pH值，读取并记录测定结果。 4.1.2.结果判定
食品中糖精钠的测定方法
食品中糖精钠的测定方法 1主题内容与适用范围 本标准规定了食品中糖精钠的测定方法。 本标准适用于食品中糖精钠的测定。 最低检出量：高效液相色谱法取样量为10g，进样量为IOUL时，最低检出量为1.5ng0 第一篇高效液相色谱法（第一法） 2原理 样品加温除去二氧化碳和乙醇，调PH至近中性，过滤后进高效液相色谱仪，经反相色谱分离后，根据保留时间和峰面积进行定性和定量。取样量为10g,进样量为IOUL时最低检出量为1.5ng0 3试剂 3.1 甲醇：经滤膜（0.5μm）过滤。 3.2 氨水（1+1）：氨水加等体积水混合。 3.3 乙酸铉溶液（0.02mol∕L）：称取L54g乙酸铁，加水至IoOOmL溶解，经滤膜（0.45Pm）过滤。 3.4 糖精钠标准储备溶液：准确称取0.0851g经120C烘干4h后的糖精钠（C6H4C0NNaS02∙2H20）,加水溶解定容至100.OmL0糖精钠含量LonIg∕mL,作为储备溶液。 3.5 糖精钠标准使用溶液：吸取糖精钠标准储备液10.OnlL放入IOOmL容量瓶中，加水至刻度。经滤膜（0.45μm）过滤。该溶液每亳升相当于0.1Omg的糖精钠。 4仪器 高效液相色谱仪，紫外检测器。 5分析步骤 5.1 样品处理 5.1.1 汽水：称取5.00〜10.00g,放入小烧杯中，微温搅拌除去二氧化碳，用氨水（1+1）调PH约7。加水定容至适当的体积，经滤膜（0.45μm）过滤。 5.1.2 果汁类：称取5.00〜10.00g,用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至适当的体积，离心沉淀，上清液经滤膜（0.45μm）过滤。 5.1.3 配制酒类：称取10.0g,放小烧杯中，水浴加热除去乙醇，用氨水（1+1）调PH约7,加水定容至20ml,经滤膜（0.45μm）过滤。 5.2 高效液相色谱参考条件 5. 2.1色谱柱：YwG-CI84.6mmX250mml0um不锈钢柱。 6. 2.2流动相：甲醇：乙酸铉溶液（0.02mol∕L）（5+95）° 7. 2.3流速：lmL∕minβ 5. 2.4检测器：紫外检测器，波长230nm,灵敏度0.2AUFS。 5.3 测定 取样品处理液和标准使用液各10□L（或相同体积）注入高效液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间为依据进行定性，以其峰面积求出样液中被测物质的含量，供计算。 5.4 计算 式中：Xl——样品中糖精钠含量，g/kg：
磷酸氢二钠含量测定和三乙醇胺含量测定
磷酸氢二钠含量测定和 三乙醇胺含量测定 一、实验原理及方法 根据《中国药典》磷酸二氢钠含量测定：取本品约6.3g，精密称定，加新沸过的冷水100ml溶解后，照电位滴定法，用硫酸滴定液（0.5mol/L）滴定。每1ml 硫酸滴定液（0.5mol/L）相当于142.0mg的磷酸氢二钠。 磷酸氢二钠含量：药典2010版二部1256页 二、实验仪器及推荐配置 雷磁自动电位滴定仪 231-01 pH玻璃电极232饱和甘汞参比电极 三、实验试剂 1、滴定液：0.5mol/L硫酸溶液配制 取硫酸30ml，缓缓注入适量去离子水中，冷却至室温，移入1000ml容量瓶中，并用水稀释至刻度。 2、基准纯无水碳酸钠：在270-300℃干燥至恒重 3、样品 四、样品分析及结果计算 1、标定 取在270-300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约1.5g，精密称定，加水50ml使溶解。在自动电位滴定仪上滴定至终点，每1ml硫酸滴定液（0.5mol/L）相当于53.00mg的无水碳酸钠。 按下列公式计算 C H2SO4=0.5(m Na2CO3/0.053)/V H2SO4 0.5 - 硫酸标准溶液理论浓度（mol/L） C H2SO4 –硫酸标准溶液浓度（mol/L） V H2SO4 - 滴定至终点时消耗硫酸的体积（ml） m Na2CO3 - 称取的无水碳酸钠质量（g） 0. 053 - 与1.00ml硫酸标准溶液[c(H2SO4) 0.500mol/L]相当的无水碳酸钠的质量（g） 2、样品分析 取样品约6.3克，精密称定，加新沸过的冷水100ml溶解后，在雷磁自动电位滴定仪上，用硫酸滴定液（0.5mol/L）滴定。 按下列公式计算：
磷酸二氢钠磷酸氢二钠混合物各组份含量测定
磷酸二氢钠磷酸氢二钠混合物各组份含量测定 磷酸二氢钠（NaH2PO4）与磷酸氢二钠（Na2HPO4）是一种常用的磷酸盐混合物，常作 为化学试剂使用。本文将介绍一种测量磷酸二氢钠磷酸氢二钠混合物各组份含量的方法。 一、实验原理 磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的化学式分别为NaH2PO4和Na2HPO4。它们具有不同的溶解度、酸碱性和化学性质。在水中，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠可以发生酸碱反应，生成磷酸 三钠（Na3PO4）： NaH2PO4 + Na2HPO4 → Na3PO4 + H2O 在此反应中，两种磷酸盐的摩尔比为1:1，因此，可以通过测定磷酸三钠的含量来确 定磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的含量。具体方法如下： 二、实验步骤 1. 溶液的制备 取一定量的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合物，将其溶解在去离子水中，得到一定浓度 的磷酸盐混合溶液。 b. 取适量的磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合物溶液，加入适量的氢氧化钠（NaOH）溶液，使溶液pH值在10~11之间； c. 加入适量的碘酸钾（KIO3）溶液，使其充分反应； d. 加入适量的苯甲酸二乙酯（isoamyl acetate），摇晃离心分离，得到含碘离子的 有机相； e. 将有机相移至另一个试管中，待其分离后，加入适量氢氧化钠溶液，使萃取的碘 酸钾消失，然后将其移至适量的 Na3AsO3 溶液中； h. 再加入适量氢氯酸溶液（HCl），通过酸碱反应得到碘酸二钠（NaIO3），可以测定其光密度，从而计算出磷酸盐混合溶液中磷酸二氢钠和磷酸氢二钠的含量。 三、实验条件 1. 实验室应具备较好的空气卫生状况和实验安全条件，对于有毒、易燃、易爆等物 质要采取相应的防护措施； 2. 实验室应安装空气净化设备以保证室内环境的洁净度；
测定磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合液各组分的浓度
测定磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合液各 组分的浓度 姓名：曾剑仑 学号：2014301040176 学院：化学与分子科学学院 专业：化学基地班 班级：六班 日期：2015/5/10 摘要：本实验意在通过多次滴定掌握酸碱滴定原理和方法，了解准确分别滴定的条件。本实验中通过先用 邻苯二甲酸氢钾来滴定标定配置的氢氧化钠溶液，酚酞用做指示剂，再用已经标定的氢氧化钠溶液来滴定 磷酸二氢根。再用碳酸钠标准溶液标定配制的盐酸溶液，用甲基橙做指示剂。最后用标定好的氢氧化钠溶 液滴定磷酸二氢根，百里酚蓝做指示剂。用标定好的盐酸滴定磷酸一氢根，甲基红做指示剂。两者分别滴定。 引言 样品来源及其分布：作为食品大国，我国的磷酸盐用量位于世界前列。我国的磷酸盐储量丰富，沿海主要分布在东海等海滨区域，内陆主要分布在云贵高原及新疆一带。磷酸盐自1910年首次在德国勇于食品加工以来，已成为世界各国应用广泛的食品添加剂，对于食品品质的提高和改善起着重要作用。我国添加剂使用卫生标准GB2760-1996及其增幅本，对部分食品中允许使用的磷酸盐的种类和限量做出了明确规定，允许使用的主要为十种磷酸盐，作为磷酸盐的代表，磷酸二氢钠和磷酸氢二钠是常用的食品添加剂。我们从实验室制取一磷酸二氢钠与磷酸氢二钠的混合液，模拟食品添加剂，对各组分的浓度进行测定。 测定的意义：帮助我们掌握酸碱滴定原理和方法，了解准确分别滴定的条件；掌握化学分析法的基本操作技能和初步运用的能力；掌握滴定分析法的基本原理，方法和数据处理；掌握分析化学实验的基本知识和基本操作技能，提高观察，分析和解决问题的能力。 结果：混合磷酸盐样品中，磷酸一氢根的浓度的浓度为0.0818摩尔每升，磷酸二氢根的 浓度为0.0912摩尔每升。 1 实验部分 1.1仪器与试剂 仪器：酸式滴定管、碱式滴定管、分析天平、称量瓶、烧杯等。 试剂：混合液、氢氧化钠固体、浓盐酸。邻苯二甲酸氢钾、碳酸钠。 1.2实验过程 （1）0.1mol/LNaOH溶液的配制及标定 在电子天平上称取2gNaOH于小烧杯中，溶解后，置于500mL的试剂瓶中稀释到 刻度均匀。在分析天平上准确称取0.4~0.6g无水邻苯二甲酸氢钾试样三份分别加 入250mL锥形瓶中，加入40~50mL蒸馏水，溶解后，加入2~3滴酚酞指示剂。 用待标定的0.1mol/LNaOH滴定到溶液呈微红色并保持半分钟内不褪色为终点。 计算NaOH溶液的溶度，给出平均值，其相对偏差不应大于0.2%。 （2）0.1mol/LHCl溶液的配制及标定 用小量筒量取约4.5mL浓盐酸，转移至500mL试剂瓶中加适量水稀释至刻度摇匀。 用称量瓶准确称取0.15~0.20g无水碳酸钠3份。分别倒入250mL锥形瓶中，称量
设计实验磷酸二氢钠与磷酸氢二钠混合液中各组分含量的测定
设计实验磷酸二氢钠与磷酸氢二钠混合液中各组分含量的测定 SANY 标准化小组#QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8-HHMHGN#
设计实验：磷酸二氢钠(NaH2P04)与磷酸氢二钠(Na2HP04)混合液中各组分含量的测定 实验者：XXX⑴指导老师：XXX⑵ ([I]武汉大学化学与分子科学学院20XX级XXX班学号：XXXX [2]武汉大学化学与分子科学学院分析实验指导老师) 摘要：以酚駄为指示剂，氢氧化钠(NaOH)滴定磷酸二氢钠(NaH：POJ至磷酸氢二钠(Na=HPO；):以浪酚蓝或浪甲酚绿为指示剂，盐酸(HC1)滴左磷酸氢二钠(NazHPO；)至磷酸二氢钠(NaH：POJ ,分别确定其含量。 关键词：酸碱滴泄混合液含量测左 一、实验目的 实验测立混合液中NaH：PO°与NazHPO,的含量。 二、实验基本原理 磷酸(比POJ的解离常数 Kai 二*1(T Ka2 二*1(T Ka3 二*10卞 NaH：PO.中[H] = (Kal*Ka2)1==*10-5, pH 二 Na：HPO.中[rf] = (Ka2*Ka3)1 s=*10_1°, PH二 PH变色范用，酚ST,浪酚蓝浪甲酚绿~ 所以可以以酚駄为指示剂，氢氧化钠(NaOH)滴赵磷酸二氢钠(NaHBh)至磷酸氢二钠(NazHPO.):以浪酚蓝为指示剂，盐酸(HC1)滴泄磷酸氢二钠(Na^HPO.)至磷酸二氢钠(NaH=POJ。 三、主要实验试剂和仪器 1.浓HC1溶液 2.固体NaOH 3.甲基橙溶液(lg*L_1) 4.酚酥溶液(2g*I?,乙醇溶液) 5.两用滴泄管(50ml) 6.锥形瓶(250ml) 7.移液管(25ml)
测定磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合体系中各组分的含量
测定磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合体系中各组分的含量 2010-11-13 05:50:24|分类： 现行工作资料收集|标签： |字号大中小订阅 在实际工作中，常常会遇到混合酸（碱）体系的测定问题。如何才能设计出一个既准确又简便的分析方案来呢？ 例如，要用滴定分析的方法，测定磷酸二氢钠和磷酸氢二钠混合体系中各组分的含量，涉及分析方案时要如何入手？要考虑些什么问题呢？ 首先，必须判断各组分能否用酸（或碱）标准溶液进行滴定。根据磷酸的离解平衡，查出三级离解平衡酸（或碱）常数（pK a1=2.12，pK a2=7.20，pK a3=12.36；pK b1=1.64，pK b2=6.80，pK b3=11.88）。应用弱酸、弱碱能否被准确滴定的判式： cK≥10-8判断。显然，磷酸二氢钠可用氢氧化钠标准溶液直接滴定到HPO 42-。 而HPO 42-继续用氢氧化钠滴定则不可能，但是可用盐酸标准溶液来直接滴定它；也可以先加入适量氯化钙固体，定量置换出氢离子，再用氢氧化钠标准溶液滴定：
2HPO 4+ 3CaCl 2=== Ca 3(PO 4) 2↓+ 4NaCl + 2HCl 如果要采用直接滴定的方式，滴定的方法也不是唯一的。例如，可用上述方法，在同一份试液中分别用NaOH和HCl标准溶液进行两次滴定；也可以取两分等量的试液，分别用NaOH和HCl标准溶液进行滴定。 至于指示剂，一般是根据滴定反应达计量点时产物溶液的pH值来选择的。如果等量点时产物为HPO 42，－其溶液的pH=9.7，则可选用酚酞（变色范围为pH=8.2～10.0）或百里酚酞（变色范围为pH=9.4～10.6）为指示剂；当产物为H 2PO 4-时，其溶液的pH=4.7，则可选用甲基红（变色范围为pH=4.2～6.2）或溴甲酚绿（变色范围为pH=3.8～5.4）为指示剂。 磷酸二氢钠--磷酸氢二钠混合物各组份含量测定(Sodium Phosphate Monobasic and Sodium Phosphate Dibasic) 佑木 单位: 武汉大学化学与分子科学学院化学类专业 发布时间:2006. 10.21
磷酸二氢钠 含量测定
磷酸二氢钠含量测定 磷酸二氢钠（NaH2PO4）是一种广泛应用于化学实验室和工业领域的化合物。它具有白色结晶固体的形态，可溶于水，并呈酸性。磷酸二氢钠含量的测定在实验室中是一项常见的分析任务。本文将介绍磷酸二氢钠含量测定的原理、方法以及相关注意事项。 磷酸二氢钠含量的测定通常采用酸碱滴定法进行。该方法基于磷酸二氢钠与酸性溶液中的强碱溶液（如氢氧化钠溶液）反应的中和反应，从而确定磷酸二氢钠的含量。具体测定的步骤如下： 准备好所需的实验器材和试剂。包括磷酸二氢钠样品、酸性溶液（如稀硫酸溶液）、强碱溶液（如氢氧化钠溶液）、指示剂（如溴酚蓝指示剂）以及滴定管、容量瓶等。 接下来，准备标准溶液。将一定量的磷酸二氢钠溶解于水中，并用容量瓶定容得到已知浓度的标准溶液。 然后，取少量磷酸二氢钠样品，称重并溶解于水中。加入适量的溴酚蓝指示剂，使溶液呈现出淡蓝色。 接着，用稀硫酸溶液作为滴定剂，滴定到溶液颜色由蓝色变为黄色为止。滴定过程中要慢慢滴加滴定剂，并不断搅拌溶液，以充分反应。 当溶液颜色转变为黄色时，表示磷酸二氢钠与硫酸完全反应，滴定
结束。记录滴定剂的用量，根据滴定剂的浓度可以计算出磷酸二氢钠的含量。 需要注意的是，在进行滴定过程中，要小心控制滴定剂的加入速度，避免过量滴加导致结果不准确。此外，还应注意选择适当的指示剂，确保在滴定终点时溶液颜色的明显变化。 除了酸碱滴定法，还可以使用其他方法对磷酸二氢钠含量进行测定，如重量法和光度法等。这些方法各有优缺点，根据实际需要选择合适的方法进行分析。 磷酸二氢钠含量的测定是化学实验室中常见的分析任务之一。通过酸碱滴定法或其他方法，可以准确确定磷酸二氢钠的含量。在进行测定时，需要注意操作规范，确保实验结果的准确性和可靠性。同时，也要根据实际需要选择合适的测定方法，并遵循实验室的安全操作规程。通过这些措施，可以成功完成磷酸二氢钠含量的测定工作。
磷酸二氢铵与磷酸氢二铵混合液个组分含量测定
Na2HPO4与NaH2PO4混合液中个组分含量的测定 姓名：刘升学号：2014301040197 1 实验目的 1.1 掌握酸碱滴定的原理及方法； 1.2 了解准确分别滴定的条件，掌握酸碱滴定指示剂的选择； 1.3 理解分布分数图在酸碱滴定中的作用。 2 实验原理 2.1 磷酸的分布分数图如下： 由磷酸的分布分数图知pka1=2.12，pka2=7.20，pka3=12.36，pka3-pka2>5，且pka2<8.0，故强酸能滴定NaH2PO4，而磷酸一氢根可以由强碱滴定。 2.2 强碱滴定磷酸氢二钠：NaOH+NaH2PO4=Na2HPO4+H2O 终点用百里酚蓝作指示剂，终点时，溶液由无色变成微蓝色； 2.3 强酸滴定磷酸氢二钠：HCl+Na2HPO4=NaH2PO4+NaCl 终点用溴酚蓝作指示剂，终点时，溶液由蓝色变成蓝绿色。 3 实验操作步骤 3.1 NaOH溶液的标定 准确称取0.4～0.6g基准KHC8H4O43份，分别置于250ml的锥形瓶中，加入30～50ml 的去离子水溶解，再加入1～2滴酚酞作指示剂，用待标定的NaOH溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色即为终点。记录数据，计算出NaOH溶液的浓度。 3.2 HCl溶液的标定 用移液管准确移取25ml，0.1mol/L的HCl溶液3份于250ml的锥形瓶中，各加入2～3滴酚酞作指示剂，用上述已标定的NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色即为终点。记录数据，计算出HCl溶液的浓度。 3.3混合液中NaH2PO4含量的测定
用移液管准确移取25ml混合待测液于250ml锥形瓶中，各加入1～2滴百里酚蓝作指示剂，用上述已标定的NaOH标准溶液滴定至溶液呈微红色，30秒不褪色即为终点，记录数据，计算出NaH2PO4的含量。 3.4混合液中Na2HPO4含量的测定 用移液管准确移取25ml混合待测液于250ml锥形瓶中，各加入1～2滴溴酚蓝作指示剂，用上述已标定的HCl标准溶液滴定至溶液呈蓝绿色，30秒不褪色即为终点。记录数据，计算出Na2HPO4的含量。 4实验数据记录，数据处理过程及结果 表格1 NaOH的标定 表格2 HCl的标定 表格3 NaH2PO4的测定
各种PH值的磷酸盐缓冲液配制
各种PH值的磷酸盐缓冲液配制 PH=PKa+lg([a]/[b]) K1=7.52X10-3, K2=6.23X10-8, K3=2.20X10-13. ? 设磷酸磷酸二氢钾浓度为C1 磷酸氢二钾浓度为C2 pH=pK-lg（C1/C2）=7 这里的pK是7.2（这个值只适用于磷酸二氢根/磷酸氢根缓冲对，公式是通用的） 解得C1：C2=1.585（mol比）磷酸的二级电离常数）Ka，求出PKa，然后根据公式可以算出磷酸二氢钾与磷酸氢二钾的浓度比C1：C2。 这时混合物中P的质量分数为（31/136×1.585+31/174×1）/（1.585+1）=20.87% 混合盐的质量比136×1.585：174×1=215.56：174 10mg/20.87%=47.916mg （47.916/（215.56+174））×215.56=26.51mg （47.916/2.575）×174=21.40mg 应取磷酸二氢钾26.51mg 磷酸氢二钾21.40mg 用蒸馏水稀释至1L 磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。 磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。 磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。 磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。 磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
清风灵2号胶囊的质量标准研究
清风灵2号胶囊的质量标准研究 向延付;唐勇;刘译 【摘要】目的建立清风灵2号胶囊的质量控制方法. 方法采用薄层色谱法对处方中的青风藤、制何首乌、威灵仙和羌活进行定性鉴别;用HPLC法对制剂中的青风藤所含成分青藤碱进行了含量测定.色谱柱:C18柱(250 mm×4.6 mm,5 μm );流动相:甲醇-磷酸盐缓冲液(0.005 mol·L-1磷酸氢二钠溶液,以0.005 mol·L-1磷酸二氢钠溶液调节pH至8.0,再以10 mL·L-1三乙胺调节pH至9.0)(55:45);检测波长:262 nm;柱温:室温;流速:1.0 mL·min-1. 结果在薄层色谱中均能检出青风藤、制何首乌、威灵仙和羌活;青藤碱进样量在0.996 4～12.455 μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为98.65%(n=9),RSD为0.69%. 结论该方法简便,结果准确、可靠,重复性好,可用于清风灵2号胶囊的质量控制. 【期刊名称】《西北药学杂志》 【年(卷),期】2011(026)001 【总页数】3页(P27-29) 【关键词】清风灵2号胶囊;薄层鉴别;青藤碱;HPLC 【作者】向延付;唐勇;刘译 【作者单位】湖南省溆浦县中医院,湖南,溆浦,419300;湖南省怀化市药品检验所,湖南,怀化,418000;湖南省怀化市药品检验所,湖南,怀化,418000 【正文语种】中文 【中图分类】R927
清风灵2号胶囊是由青风藤、制何首乌、威灵仙和羌活等中药加工制成的内服胶囊剂,处方源于临床经验方,具有驱风散寒、除湿通痹、补肝肾、强筋骨的功效,用于类风湿性关节炎属风寒湿痹症。为保证该制剂的内在质量,笔者采用薄层色谱法对其中的青风藤、制何首乌、威灵仙和羌活进行了定性鉴别,并采用HPLC法对青风藤中青藤碱进行含量测定［1-3］,为控制制剂质量提供实验依据。 1 仪器与试药 1.1 仪器岛津高效液相色谱仪,包括LC-20AT输液泵;SPD-M 20AVP检测器(日本);LC solution工作站。 1.2 试药青藤碱对照品(批号110774-200206,供含量测定用),制何首乌对照药材(批号121454-200703),威灵仙对照药材(批号121189-200101),羌活对照药材(批号121404-200401),均来源于中国生物制品检定所;清风灵2号胶囊(湖南溆浦县中医院,批准文号湘药剂字Z-20080689;批号20080903,20081214,20090801);甲醇为色谱纯;水为超纯水;其他试剂均为分析纯;硅胶G(青岛海洋化工厂)。 2 方法与结果 2.1 薄层色谱鉴别 2.1.1 青风藤取1粒本品的内容物,加乙醇10 m L,置水浴上加热回流30 m in,滤过,滤液蒸干;残渣加乙醇1 m L使溶解,作为供试品溶液。另取青藤碱对照品,加乙醇制成每1 m L含1m g的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录Ⅵ B)实验,吸取上述2种溶液各5μL,分别点于同一用20 g◦L-1氢氧化钠溶液制备的硅胶G 薄层板上,以甲苯-醋酸乙酯-甲醇-水(2∶4∶2∶1)10℃以下放置后的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,依次喷以碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液显色［1］。在供试品溶液色谱中,在与对照品溶液色谱相应的位置上显相同颜色的斑点。
(最全)常见缓冲溶液配制方法
常见缓冲溶液配制方法 乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)：取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml，用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)：取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)：?取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)：?取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g，氯化钠5.8g，乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0。 乌洛托品缓冲液：取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4)：取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6)：取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml。 巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)：取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)：取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用
2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)：?取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至 5.6，加水稀释至1000ml，混匀。 枸橼酸盐缓冲液：取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)：取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。 枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0)：甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。?取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合，摇匀。 氨－氯化铵缓冲液(pH8.0)：取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0。 氨－氯化铵缓冲液(pH10.0)：取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml。 硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0)：取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml 溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml。 硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2)：取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml，混匀。 硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0)：取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml
葡萄糖氯化钠注射液的质量分析
葡萄糖氯化钠注射液的质量分析 本品为葡萄糖或无水葡萄糖与氯化钠的灭菌水溶液。(45g:4.5g:500ml) [实验操作流程] 一：查资料，设计方案 本内容在《中国药典》2010版二部正文929页、《药物检验技术》、Baidu中查找到 二：性状及鉴别 性状：本品为无色的澄明液体。 鉴别：（1）葡萄糖葡萄糖是还原性糖 操作步骤取本品2ml,缓缓滴入微温的碱性酒石酸铜试液中，即生成氧化亚铜的红色沉（2）氯化物本品显氯化物的鉴别反应。 操作步骤取供试品溶液1ml，加稀硝酸使成酸性后，滴加硝酸银试液，即生成白色凝乳状沉淀，分离沉淀加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化后，沉淀复生成。 （3）钠盐本品显钠盐的鉴别反应。 操作步骤取铂丝，用盐酸湿润后，蘸取供试品，在无色火焰中燃烧，火焰即成鲜黄色。三：制剂常规检查 （一）pH值 原理酸度采用PH计法测定（PH值为3.5～5.5） 步骤 1.标准缓冲液的配制精密称取在115±5℃干燥2-3小时的邻苯二甲酸氢钾0.506g, 加水使溶解并稀释至50ml; 精密称取在115℃±5℃干燥2-3个小时的无水磷酸氢二钠0.355g与磷酸二氢钾0.340g,
加水使溶解并稀释至100ml。 2.依准确PH值对仪器进行校正采用标准缓冲液校正仪器 3. 用纯化水冲洗电极，用滤纸吸干，将电极插入被测溶液中，待电极反应平衡，即为供试 液的pH值，反复测两次，取均值。 （二）5-羟甲基糠醛 原理葡萄糖在高温加热灭菌时，易分解产生5-羟甲基糠醛，属于葡萄糖的杂质。5-羟甲基糠醛分子具共轭双烯结构，在284nm波长处有紫外吸收。 操作步骤精密量取本品适量〈约相当于葡萄糖0.1g),置50ml量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法,在284nm的波长处测定,吸光度不得大于0.25。 （三）细菌内毒素 原理本品利用鳌试剂检测或量化革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定。 操作步骤 1、根据鰲试剂灵敏度的标示值（λ），将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在漩涡混合器上混匀15分钟，然后制成2λ、λ、0.5λ和0.25λ四个浓度的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在漩涡混合器上混匀30分钟。 2、取分装有0.1ml鰲试剂溶液的10mm×75mm试管或复溶后的0.1ml∕支规格的鰲试剂原安瓿18支，其中16管分别加入0.1ml不同浓度的内毒素标准溶液，每一个内毒素浓度平行做4管；另2管加入0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。 3、将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37±1℃的恒温器中，保温60±2分钟，如果凝胶不变形、不从管壁滑脱者为阳性；为形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性。 1、 （四）可见异物 原理目视法 操作步骤除另有规定外，置供试品于遮光板边缘处，在黑色背景下，用目检视，再在白色背景下检视一次。均不得检出可见异物。 四：含量测定 1.葡萄糖 1．原理：葡萄糖分子结构中的五个碳都是手性碳原子，具有旋光性，可采用旋光法测定含量。 2．操作方法：取出旋光计的测定管，先用蒸馏水为空白对仪器进行校正。用供试液体冲洗数次，缓缓注入供试液体适量（注意勿使发生气泡）。置于旋光计内，
【2017年整理】标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量
【2017年整理】标准曲线制作考马斯亮蓝法测蛋白质含量标准曲线制作—考马斯亮蓝法测蛋白质含量 一、标准曲线 一般用分光光度法测物质的含量，先要制作标准曲线，然后根据标准曲线查出所测物质的含量。因此，制作标准曲线是生物检测分析的一项基本技术。 二、蛋白质含量测定方法 1、凯氏定氮法 2、双缩脲法 3、Folin-酚试剂法 4、紫外吸收法 5、考马斯亮蓝法 三、考马斯亮蓝法测定蛋白质含量—标准曲线制作 (一)、试剂: 1、考马斯亮蓝试剂: 考马斯亮蓝G—250 100mg溶于50ml 95%乙醇，加入100ml 85% HPO，34 加蒸馏水稀释至1000ml,滤纸过滤。最终试剂中含0.01%(W/V)考马斯亮蓝 乙醇，8.5%(W/V)HPO。 G—250,4.7%(W/V)34 2、标准蛋白质溶液: 纯的牛血清血蛋白，预先经微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量，根据其纯度同 0.15mol/LNaCl配制成100ug/ml蛋白溶液。 (二)、器材: 1、722S型分光光度计使用及原理 2、移液管使用
(三)、标准曲线制作: 1、 试管编号 0 1 2 3 4 5 6 100ug/ml标准蛋白(ml) 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.15mol/L NaCl (ml) 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 考马斯亮蓝试剂 (ml) 5 5 5 5 5 5 5 摇匀，1h内以1号管为空白对照,在595nm处比色 A595nm 2、以A为纵坐标，标准蛋白含量为横坐标(六个点为10ug、20 ug、30 ug、595nm 40 ug、50 ug、60 ug)，在坐标轴上绘制标准曲线。 1)、利用标准曲线查出回归方程。 2)、用公式计算回归方程。 3)、或用origin作图，测出回归线性方程。即A=a×X( )+6 595nm一般相关系数应过0.999以上，至少2个9以上。 4)、绘图时近两使点在一条直线上，在直线上的点应该在直线两侧。 (四)、蛋白质含量的测定: 样品即所测蛋白质含量样品(含量应处理在所测范围内)，依照操作步骤1操作，测出样品的A，然后利用标准曲线或回归方程求出样品蛋白质含量。 595nm 一般被测样品的A值在0.1—0.05之间，所以上述样品如果A值太595nm595nm 大，可以稀释后再测A值，然后再计算。 595nm (五)、注意事项: 1、玻璃仪器要洗涤干净。 2、取量要准确。