检验纤维素的原理方法
检验纤维素的原理方法
纤维素是一种多糖类化合物，由许多葡萄糖单元通过β-1,4-糖苷键连接而成。它是植物细胞壁的主要成分，具有结构复杂、无色、无味、不溶于水的特点。在自然界中，纤维素广泛存在于植物中，特别是植物的种子、根、茎、果实、叶、木材等部位中。
纤维素的检验可以通过一系列的原理方法来进行，下面将介绍一些常用的方法。
1. 菲涅尔显微镜法：纤维素在显微镜下呈现纤维状结构，菲涅尔显微镜可放大纤维素样本，通过观察其结构特征来判断是否为纤维素。
2. 纤维素酶解法：纤维素酶解是通过将纤维素与特定的纤维素酶反应，将其水解为可溶性产物，如葡萄糖。通过检测产生的可溶性产物，可以判断样品中是否含有纤维素。
3. 普里斯特利法：普里斯特利法是一种常用的纤维素定量方法，其基本原理是将纤维素样品与硫酸浓度为72%的硫酸反应生成溶胶态纤维素，再用硫酸稀释使其溶解，最后通过测定溶液的光密度来计算纤维素的含量。
4. 连二型纤维素酶法：连二型纤维素酶是一种能够水解纤维素β-1,4-糖苷键的酶，通过与纤维素样品反应，检测产生的可溶性产物（如还原糖）来判断样品中纤维素的含量。
5. 纤维素酮酸法：纤维素酮酸是一种化学检测试剂，与纤维素发生酮化反应，生成呈红色的产物。通过测定产物的吸光度，可以计算出纤维素的含量。
6. 纤维素的热量法：这种方法通过燃烧样品，测定其燃烧后的残余物的质量，从而计算出纤维素的含量。
总的来说，纤维素的检验方法多种多样，可以从显微镜观察纤维素的结构特征，也可以通过化学反应测定产生的可溶性产物来判断纤维素的含量。不同的方法有其各自的特点和适用范围，可以根据实际需要选择适合的方法进行纤维素的检验。
纤维素、半纤维素、木质素测定
纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%） 酸性洗涤木质素（ADL）含量的计算：ADL（%）=残渣（%）－灰分（硅酸盐,%） 酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定的优化：把酸性洗涤纤维置于50ml烧杯中，加入5ml 72%硫酸，20℃水解3h，然后加水45ml，室温过夜，次日用已称恒重的3号砂芯漏斗过滤，水洗残渣至pH6.5，于60℃烘干，称重。把剩余残渣在马福炉中550℃经2.5h灰化，测得灰分重量。洗涤优化：经过实际试验，发现中性洗涤纤维测定和酸性洗涤纤维测定中用丙酮冲洗这步效果不大，测量精度要求不高时，可省略。 方法一：化学滴定法（我们测定出来的结果较文献报道偏低） （一）纤维素含量的测定 1. 0.1N 2. K （2） （3） （4） （5） （6） （7） 定，用去 （8） （9） 1. 0.5%淀粉， 2. （1） （2）5min （3） （4） （5） （6） （7） （8） （9）移液管吸取10mL滤液，加入10mL碱性铜试剂，盖好在沸水中煮15min （10）冷却，加入5mL草酸-硫酸混合液，加入0.5mL 0.5%淀粉，用0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去b mL （11）取10mL碱性铜试剂，加5mL草酸-硫酸混合液，再加10mL滤液，加入0.5mL 0.5%的淀粉，0.01N硫代硫酸钠溶液滴定至蓝色消失，用去a mL （12）生物质中半纤维素的含量计算公式x% = 0.9×100 [ 248－（a－b）]（a－b）/10000×10×n （三）木质素含量的测定 1. 所需溶液1%醋酸，丙酮，73%硫酸，10%氯化钡溶液，0.5N重铬酸钾溶液，浓硫酸，0.1 N硫酸亚铁铵溶液，试亚铁灵指示剂。 2. 实验步骤
纤维素的鉴别 实验方案
实验学案 人们离不开纺织品，纺织品的原料是纤维，纤维柔软且有弹性，并具有一定的抗拉伸和抗摩擦等性能，经加工后可制成各种各样的织品。植物纤维、动物纤维和合成纤维是常见的三大纺织纤维，与我们的生活息息相关。植物纤维动物纤维又合称天然纤维。 如何鉴别天然纤维和合成纤维？一般的消费者会选择使用感官目测法。天然纤维属于长短不一的短纤维，而合成纤维长短则是一致的。但这种方法是准确性极低，因此，需要借助于燃烧法来鉴别。 【实验目的】 1.了解用燃烧鉴别纤维的方法，通过实验，对不同纤维的燃烧现象、燃烧后的产物有感性认识； 2.通过燃烧纤维的实验，学会观察、探究和真实记录现象、过程的方法； 3.在实验中，体现科学的实事求是的态度，具有探究的精神 【实验原理】由于各种纤维的化学组成和结构不同，因此它们在燃烧时，发生的化学反应和产生的现象，也有所不同。从织物边沿抽出几根经纱和纬纱作为试样，放在火焰上燃烧，仔细观察发生的现象，可以进行鉴别。 三大类纤维素燃烧特征 注：—表示针对不同具体材质的合成纤维，情况各不相同：离开火焰后，涤纶能继续燃烧，锦纶难以续燃，丙纶则迅速燃烧。 【实验用品】 火柴、酒精灯、镊子
三种未知纺织面料（实验员准备好三种不同的面料，要求这三种面料分别属于植物纤维、动物纤维、合成纤维） 【实验步骤】 1.点燃酒精灯，将镊子夹取一些纤维材料在火焰上使其燃烧。观察纤维材料在接近火焰时、在火焰中燃烧的情况，注意燃烧时发出的气味。 2.当纤维材料燃烧到一半时移出火焰上方。实验纤维材料离开火焰时是否还能继续燃烧。熄灭后注意燃烧灰烬的形状、颜色。 3.在实验记录单严格填写实验现象，根据“三大类纤维素燃烧特征”表，判断出三种未知面料各属于那种类型的纤维。
纤维素含量的测定
纤维素含量的测定 1. 引言 纤维素是植物细胞壁的主要组成部分，对于植物的生长和发育具有重要作用。同时，纤维素也是人类食物中的重要成分之一，对于人体健康起着重要的作用。因此，准确测定纤维素含量对于农业生产和食品工业具有重要意义。 本文将介绍纤维素含量的测定方法，包括传统的化学方法和现代的生物技术方法。同时，还将讨论不同物质中纤维素的含量测定方法的优缺点，并对纤维素含量的测定结果进行分析和解读。 2. 传统的化学方法 2.1. 酸碱法 酸碱法是最常用的纤维素含量测定方法之一。该方法基于纤维素对酸和碱的反应性，通过酸碱处理纤维素样品，进而测定纤维素含量。 具体操作步骤如下： 1.取一定质量的纤维素样品； 2.用酸处理样品，将纤维素溶解，得到纤维素溶液； 3.用碱处理纤维素溶液，得到沉淀； 4.将沉淀洗净、干燥，得到纤维素的质量。 2.2. 全纤维素测定法 全纤维素测定法是一种综合测定方法，可以同时测定纤维素的各个组分的含量，包括纤维素、半纤维素和木质素。 具体操作步骤如下： 1.取一定质量的样品； 2.用酸处理样品，将纤维素溶解，得到纤维素溶液； 3.用酶处理纤维素溶液，将半纤维素水解为单糖； 4.用酸处理水解液，将木质素溶解，得到木质素溶液； 5.将纤维素溶液、半纤维素水解液和木质素溶液分别干燥，得到各自的质量。
3. 现代的生物技术方法 3.1. 高效液相色谱法 高效液相色谱法是一种常用的纤维素含量测定方法，具有准确、快速、灵敏度高等优点。该方法利用高效液相色谱仪对纤维素样品中的纤维素进行分离和测定。 具体操作步骤如下： 1.取一定质量的纤维素样品； 2.将样品加入适量的溶剂中，使纤维素溶解； 3.使用高效液相色谱仪对纤维素溶液进行分离和测定； 4.根据峰面积和标准曲线计算纤维素的含量。 3.2. 免疫测定法 免疫测定法是一种基于抗体与纤维素结合的原理进行纤维素含量测定的方法。该方法具有高度特异性和敏感性的优点。 具体操作步骤如下： 1.取一定质量的纤维素样品； 2.用适量的溶剂将纤维素溶解； 3.将纤维素溶液与特异性抗体结合； 4.使用适当的检测方法对结合物进行测定； 5.根据测定结果计算纤维素的含量。 4. 方法比较和结果分析 传统的化学方法和现代的生物技术方法各有优缺点。传统的化学方法操作简单，但耗时且存在环境污染的问题；而现代的生物技术方法准确性高，但设备要求较高。 根据测定结果的分析和解读，可以得出纤维素含量的定量结果。同时，还可以根据纤维素含量的测定结果，对不同样品的纤维素含量进行比较和评估。 5. 结论 纤维素含量的测定是农业生产和食品工业中重要的分析工作之一。本文介绍了传统的化学方法和现代的生物技术方法两种常用的纤维素含量测定方法，并对比分析了它们的优缺点。通过对纤维素含量的测定结果的分析和解读，可以得出定量结果，并对不同样品的纤维素含量进行比较和评估。这些测定结果对于农业生产和食品工业具有重要的指导意义。 参考文献：
纤维素的测定方法
实验原理植物的主要化学成分是纤维素、半纤维素和木质素这三部分。它们是构成植物细胞壁的主要组分。其中，纤维素组成微细纤维，构成纤维细胞壁的网状骨架，而半纤维素和木质素是填充在纤维和微细纤维之间的“粘合剂”和“填充剂”。 1. 纤维素 生物制粉末在加热的情况下用醋酸和硝酸的混合液处理，在这种情况下，细胞间的物质 被溶解，纤维素也分解成单个的纤维，木质素、半纤维素和其它的物质也被除去。淀粉、多缩戊糖和其它物质受到了水解。用水洗涤除去杂质以后，纤维素在硫酸存在下被重铬酸钾氧化成二氧化碳和水。 C6H 1005 + 4K 2Cr2O7 + 16H 2SO4 = 6C0 2 + 4Cr 2（SO4）3 + 4K 2SO4 + 21H 2 0 过剩的重铬酸钾用硫酸亚铁铵溶液滴定，再用硫酸亚铁铵滴定同量的但是未与纤维 素反应的重铬酸钾，根据差值可以求得纤维素的含量。 2. 半纤维素 用沸腾的80 %硝酸钙溶液使淀粉溶解，同时将干扰测定半纤维素的溶于水的其它碳水化 合物除掉。将沉淀用蒸馏水冲洗以后，用较高浓度的盐酸，大大缩短半纤维素的水解时间， 水解得到的糖溶液，稀释到一定体积，用氢氧化钠溶液中和，其中的总糖量用铜碘法测定。 铜碘法原理：半纤维素水解后生成的糖在碱性环境和加热的情况下将二价铜还原成一价 铜，一价铜以CU2O的形式沉淀出来。用碘量法测定CU2O的量，从而计算出半纤维素的含量。
测定还原性糖的铜碱试剂中含有KI0 3和KI，它们在酸性条件下会发生反应，也不会干 扰糖和铜离子的反应。加入酸以后，会发生反应释放出碘： KI0 3 + 5KI +3H 2SO4 = 3I2 + 3K2SO4 +3H 20 加入草酸以后，碘与氧化亚铜发生反应： Cu 20 + I2 + H 2 C2O 4 = CuC 204 + Cul2 + H 20 过剩的碘用Na2S203 溶液滴定：2Na 2S2O3 + I2 = Na 2S406 + 2NaI 3. 木质素 用1%的醋酸处理以分离出糖、有机酸和其它可溶性化合物。然后用丙酮处理，分离出叶绿素、拟脂、脂肪和其它脂溶性化合物。将沉淀用蒸馏水洗涤以后，在硫酸存在下，用重铬酸钾氧化水解产物中的木质素：C11H12O4 + 8K 2Cr2O7 + 32H 2SO4 = 11C0 2 + 8K 2SO4 + 8Cr 2（SO4）3 + 32H 20 过量的重铬酸钾用硫酸亚铁铵溶液滴定。方法和测定纤维素相同。 实验所需试剂和仪器 1.实验试剂 硫酸亚铁铵分析纯，重铬酸钾分析纯，硫代硫酸钠分析纯， 硝酸钙分析纯，硫酸铜分析纯，可溶性淀粉分析纯， 碘酸钾分析纯，草酸分析纯，酒石酸分析纯，
纤维素含量的测定
纤维素含量的测定 测定原理 此法基于使用浓硝酸和乙醇溶液处理试样，试样中的木素被硝化并有部分被氧化，生成的硝化木素和氧化木素溶于乙醇溶液。与此同时，亦有大量的半纤维素被水解、氧化而溶出，所得残渣即为硝酸—乙醇纤维素。乙醇介质可以减少硝酸对纤维素的水解和氧化作用。 仪器 ① 回流冷凝装置；②真空吸滤装置；③实验室常用仪器 试剂 硝酸—乙醇混合液：量取800ml 乙醇（95%）于干的1000ml 烧杯中。徐徐分次加入200ml 硝酸（密度1.42g/cm 3）,每次加入少量（约10ml ）并用玻璃棒搅匀后始可续加。待全部硝酸加入乙醇后，再用玻璃棒充分和匀，贮于棕色试剂瓶中备用（硝酸必须慢慢加入，否则可能发生爆炸）。 硝酸乙醇混合液只宜用前临时配用，不能存放过久 测定步骤 精确称取1g （称准至0.0001g ）试样于250ml 洁净干燥的锥形瓶中（同时另外取样测定水分），加入25ml 硝酸-乙醇混合液，装上回流冷凝器，放在沸水浴上加热4h 。在加热过程中应随时摇荡瓶内容物，以防止试样跳动。 移去冷凝管，将锥形瓶自水浴上取下，静置片刻。最后将锥形瓶中内容物全部移入滤器，用10ml 硝酸乙醇混合液洗涤残渣，再用热水洗涤至洗涤液用甲基橙试之不呈酸性反应为止。最后用乙醇洗涤两次。吸干洗液。将滤器移入烘箱，于（105±2）℃烘干至恒重。 计算结果 原料纤维素含量X 1(%)按下式计算：X 1=%100) 100(m 021?--w m m 式中 ｍ１-烘干后纤维素与玻璃器皿的质量，g ｍ２－空玻璃滤器质量，ｇ ｍ０－风干试样质量，ｇ ｗ－试样水分，％ 半纤维素含量的测定 测定原理 测定方法是将试样与12%（质量分数）盐酸共沸，使试样中的聚戊糖转化为糠醛，用容量法（溴化法）定量的测定蒸馏出来的糠醛含量，然后换算成聚戊糖含量。 仪器 ①糠醛蒸馏装置：1-圆底烧瓶（容量500ml ）；2-蛇形冷凝器；3-滴液漏斗（容量60ml ）；4-接收瓶（500ml ）；②可控温电炉；③可控温多孔水浴；④容量瓶：50ml 及500ml ；⑤具塞锥形瓶：500ml 及1000ml 。 试剂 12%（质量分数）盐酸溶液，溴酸钠-溴化钠溶液，硫代硫酸钠标准溶液（0.1mol/L ） 测定步骤 精确称取试样1g ，精确至0.1mg,置入500ml 圆底烧瓶中。加入10g 氯化钠和数枚小玻璃球，再加入100mL12%的盐酸溶液。装上冷凝器和滴液漏斗，倒一定量的12%盐酸于滴液漏斗中。调节电炉温度，使圆底烧瓶内容物沸腾，并控制蒸馏速度为每10分钟蒸馏出30ml 溜出液。此后每当蒸馏出30ml
检验纤维素的原理方法
检验纤维素的原理方法 纤维素是一种多糖类化合物，由许多葡萄糖单元通过β-1,4-糖苷键连接而成。它是植物细胞壁的主要成分，具有结构复杂、无色、无味、不溶于水的特点。在自然界中，纤维素广泛存在于植物中，特别是植物的种子、根、茎、果实、叶、木材等部位中。 纤维素的检验可以通过一系列的原理方法来进行，下面将介绍一些常用的方法。 1. 菲涅尔显微镜法：纤维素在显微镜下呈现纤维状结构，菲涅尔显微镜可放大纤维素样本，通过观察其结构特征来判断是否为纤维素。 2. 纤维素酶解法：纤维素酶解是通过将纤维素与特定的纤维素酶反应，将其水解为可溶性产物，如葡萄糖。通过检测产生的可溶性产物，可以判断样品中是否含有纤维素。 3. 普里斯特利法：普里斯特利法是一种常用的纤维素定量方法，其基本原理是将纤维素样品与硫酸浓度为72%的硫酸反应生成溶胶态纤维素，再用硫酸稀释使其溶解，最后通过测定溶液的光密度来计算纤维素的含量。 4. 连二型纤维素酶法：连二型纤维素酶是一种能够水解纤维素β-1,4-糖苷键的酶，通过与纤维素样品反应，检测产生的可溶性产物（如还原糖）来判断样品中纤维素的含量。
5. 纤维素酮酸法：纤维素酮酸是一种化学检测试剂，与纤维素发生酮化反应，生成呈红色的产物。通过测定产物的吸光度，可以计算出纤维素的含量。 6. 纤维素的热量法：这种方法通过燃烧样品，测定其燃烧后的残余物的质量，从而计算出纤维素的含量。 总的来说，纤维素的检验方法多种多样，可以从显微镜观察纤维素的结构特征，也可以通过化学反应测定产生的可溶性产物来判断纤维素的含量。不同的方法有其各自的特点和适用范围，可以根据实际需要选择适合的方法进行纤维素的检验。
纤维素含量的测定
纤维素含量的测定 纤维素是一类多糖聚合物，是植物细胞壁的主要成分之一，广泛存在于植物体内。纤维素含量的测定对于食品、农业、生物资源以及环境科学等领域具有重要意义。本文将从纤维素含量的定义、测定方法以及应用领域等方面进行介绍。 一、纤维素含量的定义 纤维素是由β-葡萄糖苷键连接而成的多聚糖，在植物细胞壁中起着支撑和保护细胞的作用。纤维素含量是指在一定条件下，纤维素在样品中的质量占比。纤维素含量的高低直接影响到植物的品质和性状，也与植物的生长环境和遗传背景密切相关。 纤维素含量的测定方法多种多样，常用的方法包括酶解法、酸解法、重量法和色谱法等。其中，酶解法是目前应用最广泛的一种方法。其基本原理是利用纤维素酶将纤维素水解成单糖，再通过比色或色谱等方法测定单糖的含量来计算纤维素含量。酸解法则是通过酸的作用将纤维素溶解，再通过测定溶液中的糖含量来计算纤维素含量。重量法是直接通过称量样品和纤维素残渣的质量差来计算纤维素含量。色谱法是利用色谱技术将纤维素分离出来，并通过检测色谱图谱来计算纤维素含量。 三、纤维素含量的应用领域 纤维素含量的测定在食品、农业、生物资源以及环境科学等领域都
有广泛的应用。在食品工业中，纤维素含量可以作为评价食品品质和口感的重要指标之一。高纤维素含量的食品通常具有更好的营养价值和健康效益。在农业领域，纤维素含量的测定可以帮助农民评估作物的品质和产量，指导农业生产和育种工作。在生物资源领域，纤维素含量的测定可以用于评估植物的纤维素资源潜力，指导纤维素生产和利用。在环境科学领域，纤维素含量的测定可以用于评估土壤和水体中的纤维素含量，研究生态系统的健康状况和环境污染程度。 纤维素含量的测定是一个具有重要意义的课题。通过选择适当的测定方法，可以准确地评估样品中纤维素的含量。纤维素含量的测定在食品、农业、生物资源以及环境科学等领域有着广泛的应用前景。希望本文对读者对纤维素含量的测定有所帮助，并对相关领域的研究和应用提供参考。
木质纤维素检测方法
木质纤维素检测方法 木质纤维素是木材中的主要成分之一，是一种由纤维素分子组成的聚 合物。检测木质纤维素的含量和性质对于评估木材的质量和性能具有重要 意义。目前常用的木质纤维素检测方法主要包括化学分析、物理性能测试 和光谱分析等。 化学分析是常用的木质纤维素检测方法之一、其主要包括酸碱法、酶 解法和纤维素纤维数组。酸碱法是通过使用酸碱溶液将木材中的非纤维素 物质溶解，然后用溶液的酸度或碱度来计算木质纤维素的含量。酶解法是 利用纤维素酶将木质纤维素降解成单糖，然后通过比色法或色谱法来检测 单糖含量，从而计算木质纤维素的含量。纤维素纤维数组是利用纤维素纤 维阵列薄膜的光学性质来检测木质纤维素的含量。这些方法具有操作简单、结果准确等优点，但需要专业设备和化学试剂，操作略为复杂。 物理性能测试是另一种常用的木质纤维素检测方法。其主要包括密度 测定和强度测试。密度测定是通过比较木材的质量和体积来计算木材的密度，进而推算木质纤维素的含量。强度测试是通过对木材进行抗弯、抗压 等力学性能测试，来评估木材中的纤维素含量。这些方法操作简单、结果 直观，但需要一定的测试设备和专业技术。 光谱分析是一种新兴的木质纤维素检测方法。其主要包括红外光谱、 拉曼光谱和UV-可见光谱等。红外光谱通过监测木材在红外区域的吸收变化，来检测木质纤维素的含量。拉曼光谱则是通过测量木材中纤维素分子 特有的振动频率，来判断木质纤维素的种类和含量。UV-可见光谱则是通 过测量木材在紫外光和可见光区域的吸收变化，来推算木质纤维素的含量。这些方法无需样品预处理，快速、准确，并且能够提供纤维素的分子结构 信息。
总之，木质纤维素的检测方法多种多样，具有不同的优缺点。在实际应用中，可根据具体情况选择合适的方法进行检测，以提高检测效率和准确性。
纤维素、半纤维素、木质素测定
原理 采用范氏（Van Soest）的洗涤纤维分析法测定中性洗涤纤维（NDF）和酸性洗涤纤维（ADF）原理: 植物性饲料经中性洗涤剂煮沸处理，不溶解的残渣为中性洗涤纤维，主要为细胞壁成分，其中包括半纤维素、纤维素、木质素和硅酸盐。植物性饲料经酸性洗涤剂处理，剩余的残渣为酸性洗涤纤维，其中包括纤维素、木质素和硅酸盐。酸性洗涤纤维经72%硫酸处理后的残渣为木质素和硅酸盐，从酸性洗涤纤维值中减去72%硫酸处理后的残渣为饲料的纤维素含量。将72%硫酸处理后的残渣灰化，在 灰化过程中逸出的部分为酸性洗涤木质素（ADL）的含量。 试剂的配制 中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠）：准确称取18.6g乙二胺四乙酸二钠（EDTA，C10H14O8Na2?2H2O，分析纯）和6.8g硼酸钠（Na2B4O7?10H2O，分析纯）放入烧杯中，加入少量蒸馏水，加热溶解后， 再加入30g十二烷基硫酸钠（C12H25NaO4S，分析纯）和 10ml乙二醇乙醚（C4H10O2，分析纯）；再称取4.56 g无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，分析纯）置于另一烧杯中，加入少量蒸馏水微微加热溶解后，倒入前一个烧杯中，在容量瓶中稀释至1000ml，其中pH 值约为6.9~7.1（pH值一般勿需调整）； 1N 硫酸：量取约27.87 ml浓硫酸（分析纯，比重1.84，98%），徐徐加入已装有500ml蒸馏水的烧杯中，冷却后注入1000ml容量瓶定容，标定；酸性洗涤剂（2%十六烷三甲基溴化铵）：称取20g十六烷三甲基溴化铵（CTAB，分析纯）溶于1000ml1N硫酸，必要时过滤； 中性洗涤纤维测定 准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100ml中性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。煮沸完毕后，取下直筒烧杯，将烧杯中溶液倒入安装在抽滤瓶上的已知重量的玻璃坩埚中进行过滤，将烧杯中的残渣全部移入，并用沸水冲洗玻璃坩埚与残渣，直洗至滤液呈中性为止。用20ml丙酮冲洗二次，抽滤。将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。 酸性洗涤纤维测定 准确称取1.0000g样品（通过40目筛）置于直筒烧杯中，加入100 ml酸性洗涤剂和数滴十氢化萘及0.5g无水亚硫酸钠。将烧杯套上冷凝装置于电炉上，在5~10min内煮沸，并持续保持微沸60min。趁热用已知重量的玻璃坩埚抽滤，并用沸水反复冲洗玻璃坩埚及残渣至滤液呈中性为止。用少量丙酮冲洗残渣至抽下的丙酮液呈无色为止，并抽净丙酮。将玻璃坩埚置于105℃烘箱中烘2h后，在干燥器中冷却30 min称重，直称至恒重。 酸性洗涤木质素和酸不溶灰分（AIA）测定将酸性洗涤纤维加入72%硫酸，在20℃消化3h后过滤，并冲洗至中性。消化过程中溶解部分为纤维素，不溶解的残渣为酸性洗涤木质素和 酸不溶灰分，将残渣烘干并灼烧灰化后即可得出酸性洗涤木质素和酸不溶灰分的含量。 结果计算 中性洗涤纤维含量的计算：NDF（%）=（W1－W2）/ W×100 式中： W1—玻璃坩埚和NDF重（gW2—玻璃坩埚重（g） W—试样重（g） 酸性洗涤纤维含量的计算：ADF（%）=（G1－G2）/G×100 式中： G1—玻璃坩埚和ADF重（g） G2—玻璃坩埚重（g） W—试样重（g） 半纤维素含量的计算：半纤维素（%）=NDF（%）－ADF（%） 纤维素含量的计算：纤维素=ADF（%）－经72%硫酸处理后的残渣（%）
植物组织中纤维素含量的测定
植物组织中纤维素含量的测定 纤维素是植物细胞壁的主要成分之一，纤维素含量的多少，关系到植物细胞机械组织发达与否。因而影响作物的抗倒伏，抗病虫害能力的强弱。测定粮食、蔬菜及纤维作物产品中纤维素含量是鉴定其品质好坏的重要指标。 一、原理 纤维素（cellulose）为β－葡萄糖残基组成的多糖，在酸性条件下加热能分解成β－葡萄糖。β－葡萄糖在强酸作用下，可脱水生成β－糠醛类化合物。β－糠醛类化合物与蒽酮脱水缩合，生成黄色的糠醛衍生物。颜色的深浅可间接定量测定纤维素含量。 二．材料、仪器设备及试剂 （一）材料：烘干的米、面粉或风干的棉、麻纤维。 （二）仪器设备：1. 小试管；2. 量筒；3. 烧杯；4. 移液管；5. 容量瓶；6. 布氏漏斗；7. 分析天平；8. 水浴锅；9. 电炉；10. 分光光度计。 （三）试剂：1. 60％H2SO4溶液；2. 浓H2SO4（AR）；3. 2％蒽酮试剂：将2g蒽酮溶解于100ml乙酸乙酯中，贮放于棕色试剂瓶中；4. 纤维素标准液：准确称取100mg纯纤维素，放入100ml量瓶中，将量瓶放入冰浴中，然后加冷的60％H2SO460～70ml，在冷的条件下消化处理20～30min；然后用60％H2SO4稀释至刻度，摇匀。吸取此液5.0ml放入另一50ml 量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加蒸馏水稀释至刻度，则每ml含100μg纤维素。 三.实验步骤 （一）求测纤维素标准回归方程 1. 6支小试管，分别放入0，0.40，0.80，1.20，1.60， 2.00ml纤维素标准液，然后分别加入2.00，1.60，1.20，0.80，0.40，0ml 蒸馏水，摇匀，则每管依次含纤维素0，40，80，120，160，200μg。 2. 向每管加0.5ml 2％蒽酮，再沿管壁加5.0ml浓H2SO4，塞上塞子、摇匀，静置1min。然后在620nm下，求测不同含量纤维素溶液的吸光度。 3. 以测得的吸光度为Y值，对应的纤维素含量为X值，求得Y 随X而变的回归方程。 （二）样品纤维素含量的测定 1. 称取风干的棉花纤维0.2g于烧杯中，将烧杯置冷水浴中，加入60％H2SO460ml，并消化30min，然后将消化好的纤维素溶液转入100ml容量瓶，并用60％H2SO4定容至刻度，摇匀后用布氏漏斗过滤于另一烧杯中。 2. 取上述滤液5ml放入100ml容量瓶中，在冷水浴上加蒸馏水稀释至刻度，摇匀后用。
纤维素含量的测定
纤维素的测定比色法 纤维素由葡萄糖基组成，它是组成植物细胞壁的基本成分。其含量的多少关系到植物的机械组织是否发达，作物抗倒伏、抗病虫害的能力是否较强，并且影响到粮食作物、纤维作物和蔬菜作物等的产量和品质。 在各种粮食中纤维素的含量各不相同，与籽粒皮层厚薄成正比。同种粮食中，原粮纤维素维素含量最高，加工粗加工精度越高，纤维素含呈越少，如小麦标准粉约O．7％．稻谷约9.0 ％，糙米约 1.0 ％，白米约0 4 ％。因此，根据纤维素的含量的测定，可以判别籽粒皮层的厚薄，粮食加工精度高低和营养价值评估。 纤维素的测定方法有酸碱醇醚法、酸性洗涤剂法、碘量法及比色法。第一个是国标法，但比较繁琐，后者操作比较简单。 一、方法原理纤维素是由葡萄糖基组成的多糖，在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖。然后在浓硫酸作用下，使单糖脱水生成糠醛类化合物。利用蒽酮试剂与糠醛类化合物的蓝绿色反应即可进行比色测定。 二、仪器和试剂 1 ．主要仪器恒温水浴、冰罐、电炉、玻璃坩埚、漏斗、定时钟、分光光度计等。 2 ．试剂60 ％H 2SO4溶液、浓H2SO4。 2 ％蒽酮试剂：2g 蒽酮溶解于100rnl 乙酸乙酯中，贮置于棕色试剂瓶中。 纤维素标准液：准确称取100mg 纯纤维素，放入100Inl 量瓶中，将量瓶放入冰浴中，然后加冷的60％H2SO4 60—70ml ，在冷的条件下消化处理20 —30min，然后用60％H2SO4稀释至刻度，摇匀。吸取此液5．0ml 放入另一50ml量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加蒸馏水稀释刻度，则每毫升含100μg纤维素。 三、操作步骤 1 ．绘制纤维素标准曲线 （1）取6支小试管，分别放入0、0.40 、0.80 、 1.20 、1.60 、2.00ml 纤维素标准液。然后分别加入2.00 、1.60 、 1.20 、0.80 、0.40 、0ml蒸馏，摇匀。则每管依次含纤维素0、40、80、120、160、200μ g。 （2）向每管加0．5ml％蒽酮试剂，再沿管壁加5．0ml 浓H2SO4，塞上塞子，微微摇动，促使乙酸乙酯水解，当管内出现蒽酮絮状物时，再剧烈摇动促进蒽酮溶解，然后立即放入沸水浴中加热10min ，取出冷却。 （3）在分光光度计上620urn 波长下比色，测出各管消光值。（4）以所测得的消光值为纵坐标，以纤维素含量为横坐标，绘制纤维素标准曲线。 2. 样品的测定 （1）准确称取风干的样品100mg，放入100rnl 量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加冷的60％H2SO4。60—70ml，在冷的条件下消化处理半小时，然后用60％H2SO4。稀释至刻度，摇匀，用玻璃坩埚漏斗过
纤维素测定仪操作规程
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一、原理： 用固定数量的酸和碱在特定条件下消煮样品，可以去除样品中的淀粉、果胶、蛋白质等物质，再用乙醚去除醚溶物，此时样品中剩下粗纤维（以纤维素为主，还有半纤维素和木质素等）和灰分，然后高温灼烧可使粗纤维挥发，只剩下灰分，根据质量差可以算出粗纤维的含量。 二、操作方法： 1、样品处理： 1.1将需要测定的样品进行粉碎处理，即将样品磨至40-60目，过筛。 1.2将样品烘干至恒重。 1.3如果样品必须在新鲜状态下测量（即在含水量的情况下），则必须同条件测量一个不含水的干样，以确定里面的水含量。 1.4如果样品脂肪含量超过5-10%，则以25mL每克样品的量用石油醚（蒸发残留物不超过1g/100mL）进行脱脂处理。 2、仪器操作： 2.1先将坩埚烘干至恒重，准确称量其重量，精确到小数点后四位，记录其重量。 2.2将烘干至恒重的样品放入坩埚，准确称量其重量，精确到小数点后四位，记录其重量。 2.3计算样品重量。 2.4将仪器下方的三通阀旋至CLOSED档，即成水平状态。 2.5将手柄抬起，将装有样品的坩埚水平准确放入仪器内。 2.6缓慢按下手柄，使消解管压紧坩埚。 2.7接通电源，打开冷凝水。 2.8通过时间按钮设置酸解（或碱解）时间。 2.9将配好的酸液（或碱液）从仪器顶部加入消解管内。 2.10设定加热档位，一般选择加热至液体沸腾即可。 2.11酸解（或碱解）完成后，即时间用完后，关闭红外加热。 2.12等液体冷至不再沸腾，将三通阀旋至VACUUM档，打开蠕动泵，进行排液。 2.13如果液体排空非常缓慢，关闭蠕动泵，将三通阀旋至PRESSURE档，打开反吹泵，进行反吹，而后关闭反吹泵，打开蠕动泵，进行排液，如此反复，直至液体排空。 2.14液体排空后，将三通阀旋至CLOSED档，此时按实验方案加入已经预热好的水溶液进行清洗，而后排空，直至PH为中性。
两种常用纤维素酶活力测定方法---滤纸酶活-CMC酶活
检测纤维素酶酶活力—滤纸酶活力(FPA) 滤纸酶活力代表了纤维素酶的三种酶组分协同作用后的总酶活。 采用3，5一二硝基水杨酸法测定酶活：(简称DNS法) 1、原理：纤维素经纤维素酶水解后生成还原糖，还原糖能将3，5一二硝基水杨酸中硝基还原成氨基，溶液变为橙色的氨基化合物，即：3一氨基一5二硝基水杨酸，在一定的还原糖浓度范围内，橙色的深度与还原糖的浓度成正比，据此可以推算出纤维素酶的活力。 2、采用的滤纸酶活单位定义： 滤纸酶活反映了纤维素酶的3种水解酶，即内切型葡聚糖酶、外切型葡聚糖酶和β葡聚糖苷酶组成的诱导复合酶系的协同水解纤维素能力。是该菌株整个纤维素酶系的酶活力水平的综合体现。代表了纤维素酶的三种酶组分协同作用后的总酶活。在此滤纸酶活单位定义为：以滤纸为底物，在一定反应条件(pH4.8，50℃，恒温lh)下，以水解反应中，1ml纤维素酶液1min催化纤维素生成lug葡萄糖为1个滤纸酶活单位，以U表示。 3、滤纸酶活力(FPA)的测定： ①取0．5ml适当稀释的酶液，加入PH值为4.8，0.1mol/L的乙酸-乙酸钠缓冲液lml或柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液lml； ②再加入50±0.5mg滤纸(1cmx6cm)一条，于50℃保温酶解反应1小时，(先预热5分钟)； ③加入DNS显色液3ml(标准曲线用量是1.5ml)，放入已沸腾的水中沸水浴lOmin，流水冷却后在540nm下测吸光度； ④同时用100℃煮沸lOmin后失活的酶液做对照，扣除本底； ⑤根据吸光度从葡萄糖标准曲线中查出相应的葡萄糖含量，根据生成的葡萄糖克数计算出酶活值。 滤纸酶活按下面公式计算： X=（WxNxlOOO）／（TxM） X:为滤纸酶酶活力，单位U／mL。 W：为从葡萄糖标准曲线中查得的葡萄糖的浓度。 N：为酶液稀释总倍数。 T：为反应时间。 M：为样品的体积。 4、葡萄糖标准曲线绘制方法 标准曲线绘制：取25ml具塞刻度试管6支，加入1.0 mg /ml的葡萄糖标准溶液0.0、0.4、0.8、1.2、1.6、2.0ml,加蒸馏水2.0、1.6、1.2、0.8、0.4、0.0ml,加DNS试剂1.5 ml，混匀后在沸水浴中加热5分钟，取出立即用冷水冷却，用水定容至25 ml，摇匀，测吸光度A，以吸光度为纵坐标，葡萄糖的含量为横坐标，绘制标准曲线。 5、3，5二硝基水杨酸（DNS）试剂 称取6.3克3,5-二硝基水杨酸用水溶解，加入21.0克NaOH，182克酒石酸钾钠，加500ml 水，加热溶解后再加入5.0克重蒸酚和5.0克亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却，定容至1000ml，存于棕色瓶中，放置7天后使用。
纤维素酶测定方法
纤维素酶测定方法 纤维素酶是一类能够降解纤维素的酶，广泛应用于生物质降解、生物燃料生产、食品加工和纸浆制造等领域。纤维素酶的测定方法可以用来评估纤维素酶的活性，指导纤维素酶的生产和应用。目前，纤维素酶的测定方法主要包括分光光度法、滴定法、高效液相色谱法等多种方法。 分光光度法是一种常用的纤维素酶测定方法，其原理是利用纤维素酶对纤维素底物的降解作用，使纤维素底物溶液中产生可被分光光度计检测的产物。一般情况下，纤维素酶的活性与产物的浓度成正比。因此，通过测定产物的浓度，可以间接反映纤维素酶的活性。这种方法简便易行，结果可靠，因此在实际应用中得到广泛应用。 滴定法是另一种常用的纤维素酶测定方法，其原理是利用纤维素酶对纤维素底物的降解作用，使底物溶液中的某种物质产生变化，然后用滴定法来定量测定底物中该物质的含量。常用的滴定法有碘滴定法和二硫蒽滴定法。这种方法操作简单，结果准确，适用于测定不同类型的纤维素酶。 高效液相色谱法是一种高灵敏度、高精确度的纤维素酶测定方法。其原理是利用高效液相色谱仪对纤维素底物和产物进行定量分析。该方法对底物和产物的特异性较大，结果准确可靠。然而，该方法操作复杂，设备昂贵，一般只在科研实验室中使用。
除了上述常用的纤维素酶测定方法，还有一些其他方法可以用于测定纤维素酶活性，如放射性同位素法、荧光法、电化学法等。这些方法都具有一定的优点和局限性，可以根据具体实验目的和条件选择合适的方法。 总的来说，纤维素酶的测定方法多种多样，每种方法都有其自身的特点和适用范围。在实际研究和应用中，应根据实验目的、所需结果的精确度和灵敏度等因素选择合适的方法。此外，不同的纤维素酶可能对不同的测定方法具有不同的适应性，因此需要根据具体情况进行优化和改良。未来，随着科学技术的发展，纤维素酶测定方法也会越来越完善，为纤维素降解和利用提供更好的技术支持。
粗纤维的测定
粗纤维的测定 粗纤维：是指动物饲料中那些稀酸、稀碱难溶的、家畜（特别是反刍动物） 不容易消化的部分。其中主要成分是纤维素和木质素。 膳食纤维：是指人们的消化系统或者消化系统中的酶不能消化、分解、吸收的物质。 纤维素是高分子化合物，分子式以（C6H10O5）n表示，不溶于任何有机溶剂，对稀酸或稀碱相当稳定，但纤维素与硫酸或盐酸共热时完全水解得α-葡萄糖，不完全水解得纤维二糖。 根据纤维素的性质，用稀酸或稀碱处理样品，将杂质去除后用重量法测定。如果与浓硫酸共热可得葡萄糖，用容量法测定。重量法简便、快速，比较粗糙。 （一）重量法测纤维素 1.原理：在稀硫酸作用下，可使淀粉、糖、果胶质、色素和半纤维素水解而除去，再用NaOH 溶液皂化脂肪酸，溶解蛋白质而除去，最后残渣减去灰分即得粗纤维素。 2.操作步骤： 称样2-5g（鲜样20-30g）→用乙醚提脂肪后（无脂肪可省略）→转入500ml锥型瓶→加煮沸的200ml→连接回流冷凝后→加热煮沸→保持30mim→30min后取下→立即用布氏漏斗过滤→用沸水洗至不显酸性（用甲基红检查）。 用煮沸的0.3N NaOH200ml冲洗滤布上的残物于烧杯中→（连接回流冷凝管）→微沸30分钟→取出用滤布过滤→沸水洗2-3次→洗到酚酞指示剂不呈碱性反应为止→用蒸馏水把滤布上的残存物洗入100ml烧杯内→倒入有石棉的古氏坩埚内→抽去水份→用10-20mlC2H5OH洗一次→抽干（或用乙醚洗几次）→将坩埚与内容物→于105℃烘干箱烘2-4h→移入干燥器30min→称重（恒重）→于700℃灼烧1hr→使残留物全部灰化→干燥冷却→称重（损失重量即为粗纤维的含量）。 3．计算 粗纤维%=(a-b)×100/W a：在105下经干燥后称得的恒重，g b：灼烧后称得的重量，g w：样品重量，g 用这种方法测出不完全是粗纤维，还有部分半粗纤维素，戊乳粉及含氮物质。 （二）容量法：
2015.02.02 纤维素测定资料
食品中 不溶性膳食纤维测定 1. 范围：适用于各类植物性食品和含有植物性食品的混合食品中不溶性膳食纤维：其方法检出限为0.1mg。 2. 原理：在中性洗涤剂的消化作用下，试样中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，还包括不溶性灰分。 3. 试剂 （1）无水硫酸钠； （2）石油醚：沸程30℃~60℃； （3）丙酮； （4）甲苯； （5）中性洗涤剂溶液：将18.61gEDTA二钠盐和6.81g四硼酸钠（含10H2O）置于烧杯中，加水约150ml，加热使之溶解，将30g月桂基硫酸钠（化学纯）和10ml乙二醇独乙醚（化学纯）溶于约700ml热水中，合并上述两种溶液，再将4.56g无水磷酸氢二钠溶于150ml热水中，再并入上述溶液中，用磷酸调节上述混合液至pH6.9~7.1，最后加水至1000ml； （6）磷酸磷酸盐缓冲液：由38.7ml 0.1mol/L磷酸氢二钠混合而成，pH为7.0； （7）2.5% α-淀粉酶溶液：称取2.5g α-淀粉酶（美国Sigma公司，VI-A型，产品号6880）溶于100mlpH值7.0的磷酸盐缓冲液中，离心、过滤，滤过的酶液备用； （8）耐热玻璃棉（耐热130℃，美国Corning玻璃厂出品，要耐热并不易折断的玻璃棉）。 4. 仪器 （1）实验室常用设备； （2）烘箱：110℃~130℃； （3）恒温箱：37℃±2℃； （4）纤维测定仪； （5）没有纤维测定仪，可由下列部件组成： 电热板：带控温装置；高型无嘴烧杯：600ml；坩埚式耐热玻璃滤器：容量60ml，