实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心
二〇〇八年九月修订
目录
一、细菌培养系统（责任人：郑子峥）
二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜）
三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕）
四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛）
五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、）
六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）
一、细菌培养系统
1、LB培养基:
每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。
2、固体培养基:
LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。
3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）：
注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan）
注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。
注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。
5、细菌培养：
配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性
培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。
6、化学感受态制备：
1）原理:：
细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，在经42℃短暂的热冲击处理（一般热休克90s）后能促进细胞吸收外源DNA复合物。
2）仪器、材料与试剂：
①超净工作台、低温离心机、摇床、-80℃冰箱，装液氮的泡沫盒及液氮、50ml的离心管2个，50ml的注射器及小过滤器各1个。高压灭菌的纸张、透气膜、的EP管约350-500个，两块10cm的平皿板及接种环。
②TB缓冲液：每200ml液体中含、、Kcl、PIPES。（注：在电子天平上的误差<50mg,因在PH=易溶故先将其它药品用超纯水溶解,并用KOH及HCL调PH至。在加入溶解后用超纯水定溶至相应的量，采用50ml的注射器及小过滤器过滤,一般储存在-20℃,时间<25天,否则易被氧化颜色呈粉红。）
③LB液体培养基：参见前面介绍。
④LB固体培养基：参见前面介绍。
⑤1管DH5α的菌种
3）步骤：
①倒无抗性的固体培养板，用接种环沾取感受态甘油菌画线,置于37℃恒温培养箱中培养过夜。
②在超净台里采用小枪尖挑取培养板中的单克隆菌(菌落的大小约2~3mm)转接于200~250ml的LB液体培养基中,盖上透气膜。
③置于摇床上，18℃、200- 250rpm速度摇约需3~5天，使OD600=~（对数生长期或对数生长前期）时开始制备。
④取出TB缓冲液及无菌的50ml离心管置于4℃冰浴中，预冷低温高速离心机（4℃、2500rpm、10min）。
⑤在50ml的离心管中加入约35ml-45ml的菌液，在4℃中冰浴10min。
⑥取出后放置于离心机上离心4℃、2500rpm、10min。
⑦弃上清液，在灭过菌的吸水纸上扣干（可重复多次收集菌体），先用约5~15ml的TB缓冲液重悬，再加至35ml的量（在冰上操作）冰浴10min。
⑧重复⑥+⑦的步骤一次。
⑨在35ml的TB缓冲液重悬后缓慢加入终浓度为7%的DMSO，混匀后在冰上冰浴10min。
⑩分装成100-150ul/管（的EP管）浸入液氮中速冻，分装约300多管后转移放置于-80℃冰箱保存。
4）转化效率的评估：
①采用小量质粒快转（冰浴10min→42℃热休克90s→冰浴2min
→加无抗性LB液体培养基200ul→37℃摇床复温培养30min）。
②涂Kn、AP抗性板并做阴性对照（采用ddH20代替鉴定用的大提标准质粒），可以评价出是否有染菌、突变、转化效率。
③可以用Er2566等感受态做平行对照，评估其的生长快慢情况及转化效率的高低。
转化效率=转化子总数/质粒DNA加入量（1ug/ul）,标准质粒为大提用的N31-EGFP。
5）注意事项：
①严格按照标准操作步骤，整个操作过程要注意温度（4℃冰上操作）且洁净的超净台环境防止污染。
②直接从-80℃取出的菌株培养致敏后比连续使用或4℃短期保存的细菌的转化率要高，一般是受体菌应处于对数生长期或生长前期即OD600=~。
③转化鉴定时，42℃准确热休克90s不要振荡，迅速置于冰上2min,按照标准操作步骤进行评估。一般是感受态制备好在-80℃冰箱冻存2天后再做鉴定，更准确评估。
④质粒分子量的大小对转化效率也有影响，一般来说，随着质粒分子量的增大，其转化效率会相应地降低。但当质粒在~时，所得的转化率基本一致。
7、电转感受态制备：
1）准备工作：（提前一天）
1、250ml LB液体盛于1L三角瓶中；
2、1L超纯水；500mL离心管两支；10%甘油400mL；
3、离心管和200ul枪头若干
以上物品，120℃灭菌20分钟后置于4℃保存备用
4、电转杯经纯水洗净后这置于75%乙醇浸泡
5、挑ER2738菌单克隆，接种于4mlTet抗性的LB中，于37℃190rpm过夜振荡培养。
2）感受态制备：
1、取前一夜扩增的菌液3ml接种于 250mlTet抗性LB中，37℃240rpm振荡培养，约2-3小时OD值可达(其间每1小时测一次OD，其值在之间均可，但在时效率最好)；
2、将菌液置于冰水混合物中冷浴30分钟。同时将前一夜置于4℃保存的物品取出，置于冰水混合物中冷浴30分钟，同时将离心机预冷到4℃；
3、将菌液全部转入500ml离心管中，2500rpm，4℃离心10分钟；
4、弃上清，向离心管中加入约100ml预冷的无菌水，在冰水混合物中摇晃瓶身，使沉淀充分悬起，然后再补加200ml无菌水，与离心机中4000rpm，4℃下离心10分钟；
5、重复步骤4两次；
6、以10%甘油代替无菌水重复步骤4一次；在离心的过程中将离心管插入冰中预冷；
7、充分弃上清，加入200ul10%甘油，要换瓶身，使沉淀充分悬起，用预冷的枪头按100ul/支分装细胞于离心管中；
8、将分装好的细胞放入-80℃保存。
3）质量控制：
将电转杯从乙醇中取出，置于超净台中，用无菌风吹4小时
从-80℃取出一支感受态，立即放入冰盒里；
取1ul标准质粒（1ug/ml）加入感受态中，混匀后，加入预冷的电转杯中；
将电转条件设为，电击2-3秒，立即加入1mlSOC培养基并混匀；
将混合物转入离心管中于37℃，200rpm振荡恢复半小时；
用LB将培养物稀释至103涂于Amp固体培养基上，倒置于37℃温箱中，过夜培养。
计算效率：效率=菌落数×103×103。
二、DNA操作系统
1、溶液 I:
葡萄糖50mmol/L，EDTA 10mmol/L，Tris-HCl 25mmol/L，。
2、溶液 II:
NaOH L，SDS 1%，用ddH2O现配现用。
3、溶液Ⅲ:
取5mol/L NaAc 60mL，冰乙酸，混合后加ddH2O至100mL。
4、酚-氯仿-异戊醇(25:24:1)
以25：24：1的比例混匀平衡酚、氯仿、异戊醇，保存于棕色玻璃瓶中，上覆一层Tris-Cl水相，4℃储存备用。
5、TE缓冲液:
10mmol/L Tris-Cl ，1mmol/L EDTA ，灭菌后使用。实验室中配
有100×的TE母液，用时可用ddH2O稀释成1×使用液，灭菌后使用。
6、L CaCl2:
在适量纯水中溶解54g ，定容至100mL，高压除菌后保存于4℃备用。
7、10×DNA上样buffer：
母液：以500ml为例：蔗糖：200g，溴酚蓝：，取去离子水定容至500ml，完全溶解后放置于4℃保存。
*该母液配制完正常颜色为棕红色，颜色与pH值有关；存储时间较长，每次使用时需摇匀，并注意是否长菌。
染料：SYBER Green I（Molecular Probe）10,000×
每次取50ul染料加入50ml母液中，充分摇匀。分装于避光管中，即为10×DNA上样buffer，配制好的buffer均需避光4℃保存。
*配制者需督促使用者及时将避光管放回4℃，并经常检查溶液存量，染料需提前订购。
8、RNase A（DNase free）：
RNase A干粉（Ameresco）溶解于L的CH3COONa（pH ）中，使终浓度为1mg/ml，加热至100℃，15min，室温冷却。用体积的1M Tris-Cl 调pH至后，分装，于-20℃冻存。
*500ul/管分装，供分子克隆实验使用；3ml/管分装，供大提质粒使用。RNase A干粉需提前订购，及时检查使用情况。
三、蛋白质操作系统
（一）、电泳
1、30%丙烯酰胺
将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml 的水中，于磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。补加水至终体积为100ml。以μm孔径过滤溶液，去除不溶性杂质。查证该溶液的pH值应不大于，置棕色瓶中保存于室温。
注意事项：
丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。
2、 Tris-HCl
400ml 水中溶解Tris-Base , 浓盐酸调PH至后定容至500ml
3、 Tris-HCI
400ml 水中溶解Tris-Base , 浓盐酸调PH至后定容至500ml
4、10%SDS
900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节pH值至，加水定容至1L，分装备用。
5、10％过硫酸铵
称取过硫酸铵2g，适量水溶解后，定容至20mL，分装成1mL/管，于-20℃保存备用。
6、蛋白上样Buffer（6×蛋白加样缓冲液）
称取十二烷基硫酸钠12g、溴酚蓝，1M Tris-Cl (pH= 30ml、甘油60ml、β－巯基乙醇5ml，定容至100ml。
7、蛋白质电泳buffer（5×）
称取三羟甲基氨基甲烷、甘氨酸、十二烷基硫酸钠, 在水中溶解并定容至1L。
（二）染色
1、染色液（考马斯亮蓝染液）
甲醇45％，冰乙酸10％，去离子水45％，加考马斯亮蓝R-250或G-250至%，过滤后使用。
2、10×脱色液
称取KCl ，加水定容至1L
3、蛋白快速银染所需溶液
（1）固定液：400mL 甲醇，500uL甲醛，加水定容至1L；
（2）20% AgNO3溶液：20g AgNO3加水定容至100mL；
（3）Na2S2O3溶液: Na2S2O3·3H2O,加水定容至1L；
（4）显色液（未加甲醛）：30g NaCO3,20mL 上述Na2S2O3溶液，加水定容至1L，（临用前加入甲醛，甲醛量如何确定？）。
（5）柠檬酸： C6H8O7·3H2O,加水定容至1 L。
（三）杂交
1、电转液：称取Tris－Base ，甘氨酸，先加4L水溶解，再加甲醇1200ml, 定容至6L。
2、10×TN：称取NaCl , Tris , 加入浓盐酸调节至PH ，定容至5L 。
3、封闭液（WB用）：称取5g 脱脂奶粉，加入TN，定容至100ml。
4、TNT：TN中加 Tween-20至%。
5、AP底物：氯化钠，，Tris－Base ，加水溶解，加浓盐酸320ul 调节pH至, 定容至500ml
注意事项：NBT、BCIP、N-N-二甲基甲酰胺为有毒试剂，戴乳胶手套在通风橱中操作。配制用的EP管最好采用新管子，防止漏液，用后的空管注明有毒，用PE手套或是塑料袋包好再丢弃。
6、NBT配制：500mg NBT粉末溶于7ml N-N-二甲基甲酰胺，3ml 去离子水中，颠倒混匀，溶解即可。
7、BCIP配制：
100mg BCIP粉末溶于10ml N-N-二甲基甲酰胺中，颠倒混匀，溶解即可。
（四）纯化
1、10×裂解液：50mmol/LTris-HCl（），10mmol/LEDTA，300mmol/LNaCl.。
2、Buffer I：20mmol/LTris-HCl，5mmol/LEDTA，100mM NaCl。
3、8M Urea：称取480g的尿素，用Buffer I定容至1升即可。
四、细胞培养相关
（一）胰酶的配制：（浓度为1‰，1L）
1、认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
2、称取牛胰蛋白酶；EDTA 2 g；
3、用超纯水溶解；
4、磁力搅拌器搅拌至胰酶完全溶解，溶液变得澄清；
5、超纯水定容至1L；
6、不锈钢滤器加滤纸两张高温灭菌后，在超净工作台过滤；
7、在血清瓶中加入少量滤好的胰酶，置于细胞培养箱中检测是否染菌，其余置于4℃待用；
8、过滤后洗净滤器再次灭菌，避免残留的胰酶降解蛋白。
（二）DMEM配制：
1、所需试剂及材料：
试剂： DMEM干粉（GIBCO 10L）、超纯水（Milli-Q）、Na2CO3 （Sigma）材料：10L玻璃瓶、 500ml盐水瓶（灭菌）、滤膜、滤器（事先放好两层滤膜并高压灭菌）、磁力搅拌器大号搅拌子蠕动泵胶塞
2、操作步骤：
(1)10L玻璃瓶洗涤，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
(2)在10L玻璃瓶中加入超纯水，将DMEM干粉倒入，在磁力搅拌器上
搅拌溶解。
(3)按照L 加入Na2CO3 。
(4)调节pH值至~。
(5)过滤分装，并注明名称及配制日期。此过程注意无菌操作！
(6)最后用血清瓶取10ml左右置于细胞培养箱中检测是否染菌。
(7)清洗滤器，10L玻璃瓶，软管，将所有实验器具归位。
（三） 1640、MEM培养基的配制同上， Na2CO3的用量见包装说明（四）细胞间100×双抗（青霉素、链霉素）的配制
青霉素及链霉素配制的终浓度为1万单位/毫升。
配制的步骤以400ml为例：
1.认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗
3遍。
2.准备5瓶青霉素（80万单位/瓶）、4瓶链霉素（100万单位/瓶）。
3.加入1-2ml细胞间专用PBS进入青霉素、链霉素的瓶子内，浸泡
后吹吸数次至全部溶解，溶解后的液体吸入配制容器内。用PBS 再次润洗装有青霉素及链霉素的小瓶子，将残留的青霉素及链霉素溶解，将液体并入配制容器内，重复润洗2次。
4.用细胞间专用PBS定容至400ml，搅拌均匀。
5.将配制的母液用的滤膜过滤除菌，分装到灭菌后的4ml EP管内，
2ml/ 管,冻存于-20℃。( 4mlEP管需提前一天灭菌，烘干过夜。)（五）100× L-谷氨酰胺配制（浓度200mM= L ）
所需试剂及材料：L-谷氨酰胺干粉（Sigma）、超纯水（Mili-Q）、 1L
烧杯、量筒、4ml EP管（灭菌）。
步骤：
1．认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。
2．称取相应质量的L-谷氨酰胺干粉，用超纯水溶解后，小滤器过滤除菌。
按需要分装（如2ml/管） -20℃保存。
注：勿高压灭菌，过滤后，尽快分装，切勿放在4℃过久！
（六）100×丙酮酸钠配制（浓度100mM 11g/L）
所需试剂及材料：丙酮酸钠（Sigma）超纯水（Mili-Q） 1L烧杯，量筒， EP管（灭菌）
步骤：
1．认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍
2．称取相应质量的丙酮酸钠干粉，用超纯水溶解后，小滤器过滤除菌。
按需要分装（如1ml/管） -20℃保存。
注：勿高压灭菌过滤后，尽快分装，切勿放在4℃过久！
（七）Verson配制
1.洗净容器：自来水10遍，去离子水5遍，超纯水3遍。
2.配制Verson（超纯水配制）：
Verson (1×)(g/L)
KCl
KH2PO4
NaCl
NaHCO3
Na2HPO4·12H20
EDTA
3.分装到500ml盐水瓶，盖上胶塞（不用灭菌，煮过即可），插上针
头（10mL以下的注射器针头），包上铝箔纸。
4.120℃，20min高压湿热灭菌，灭菌后，摆放至细胞间指定位置。（八）细胞间PBS配液
PBS 缓冲液配方：【1L体系】
NaCl g，KCl g，Na2HPO4·12H2O g，KH2PO4 g
调整pH 至
具体步骤：
1. 清洗配液瓶,自来水10遍，去离子水5遍，超纯水3遍。（一般使用细胞间配液瓶10 L 体系）；
2. 按上述配方准确称量物品，倒入配液瓶（注意：若药品潮解，应更换）；
3. 加入超纯水（细胞间配液用，R206），定容至准确体系，溶解完
全；
4. 使用细胞间pH计，调配pH至；
5. 使用细胞间灭菌过的500mL 盐水瓶进行分装，标记，加橡胶塞针头，120℃，20min高压湿热灭菌；
6. 灭菌完，摆放至细胞间相应位置。
（九）磷酸钙转染试剂
配制试剂前，认真清洗配制容器，自来水10遍，去离子水5遍，超纯水3遍。
CaCl2 M （500ml）
(MW 147) SigmaUltra C5080 g
溶解于500ml超纯水，小滤器过滤除菌。50ml样品管分装后，冻存于-20°C 。
HeBS 2x （1000ml）
NaCl (MW SigmaUltra S7653 g M final)
HEPES (MW SigmaUltra H7523 g final)
Na2HPO4, anhydrous (MW 142) SigmaUltra S7907 g mM final) 800 ml超纯水溶解后，用1Mol NaOH溶液调PH值至，然后定容至1000ml。（准确的PH值对转染效率非常重要，请用细胞间内的精密PH计测量PH值，测量前要校正PH计，线型要在99％～101％）
小滤器过滤除菌。50ml样品管分装后，冻存于-20°C 。
（十）酸液配制（1L）：
重铬酸钾 120g
浓硫酸 200ml
去离子水补至 1000ml
具体步骤：
1 在通风橱中架好塑料桶和搅拌器，确保稳定，不会侧翻。
2 在塑料桶中10L、15L、20L的位置划好刻度线，以利于后续步骤的定容。
3 在塑料桶中加入半桶去离子水，开动磁力搅拌器，缓慢倒入浓硫酸（硫酸遇水放热，倒太快会导致液体飞溅）。
4 缓慢倒入重铬酸钾，定容后，搅拌至完全溶解。
注意事项：废酸液应先用工业级的NaOH中和后方可倒往下水道，否则会腐蚀水管、污染环境，中和过程中会大量放热。
五、单克隆抗体制备系统
1、PRMI 1640HT培养基（10L）:
PRMI 1640干粉10包（10L），称取丙酮酸钠（Sodium Pyruvate，S）10L，适量ddH2O溶解后加入。称取黄嘌呤(hypoxanthn，H) 10L ＋胸腺嘧啶核苷（thymidine，T）10L +谷氨酰胺（L-Glutamine,L-Glu）10L，置适量ddH2O 中在45～50℃条件下溶解后加入。加ddH2O至10L，补加NaHCO320g/10L。用1mol/L HCl调节pH至～(经验值是3ml/10L)。过滤除菌。取少量的培养液置培养瓶中并放入 CO2培养箱中，一周后，如培养中未长菌，同一期配制的基础培养液方可使用。
2、PRMI 1640培养基:
PRMI 1640HT培养基配制时不加H（黄嘌呤）和T （胸腺嘧啶核苷）即可。
3、过氧乙酸：
100ml的H2O2加入到200ml的乙酸中，再加入6ml浓H2SO4，放置过夜即可。
4、细胞冻存液：
90mL胎牛血清＋10mL DMSO（二甲亚砜）,4℃冻存。
EIA系统
六、EIA系统
（一）常用溶液:
1、20×(1L)：Na2CO3；NaHCO3
2、10×(1L)：Na2HPO4·7H2O ；NaH2PO4
3、2×ED：1XPBS+%酪蛋白+2%明胶+%防腐剂（proclin-300）
（二）基本操作：
1、标本的采取和保存
大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再
检测。反复冻融会使抗体效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。
2 试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
3 加样
在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。需稀释的样品可在板孔中加入稀释液，再在其中加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。若每孔所加样品不同,每板的加样时间不宜超过7分钟,另一方面要注意不要造成孔间污染；加酶结合物和底物时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。
4 保温
常见的ELISA中一般有两次抗原抗体反应，即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间，这一保温过程称为温育(incubation)，有人称之为孵育。 ELISA属固相免疫测定，抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例，加入板孔中的标本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会，只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个
实验室消毒液配制标准操作规程
1.目的 建立消毒剂的配制及使用规程，保证消毒剂的正确使用，防止生产区内的污染及交叉污染。 2.范围 适用消毒剂的配制及使用。 3.责任人 配制消毒剂操作人员对本标准的实施负责；QA检查员负责监督。 4.内容 4.1.消毒剂的配制： 4.1.1. 采用稀释法配制消毒剂，其公式是： CV=C 1V 1 C：浓溶液的浓度 V：需用浓溶液的体积 C 1：稀溶液的浓度 V 1 ：欲配制稀溶液的体积。 4.1.1.1. 75%乙醇溶液：取95%乙醇液3947ml加水至5000ml稀释成75%的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.2. 0.1%新洁尔灭溶液：取5%新洁尔灭液100ml加水至5000ml稀释成0.1% 的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.3. 0.2%新洁尔灭溶液：取5%新洁尔灭液200ml加水至5000ml稀释成0.2% 的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.4. 2%甲酚皂溶液：取5%甲酚皂液200ml加水至5000ml稀释成2%的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1. 5. 5%甲酚皂溶液：取50%用甲酚皂液500ml加水至5000ml稀释成5%的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.6. 3%氧水溶液：取30%双氧水液1000ml加水至10000ml稀释成3%的溶液，置干燥容器内密闭保存。
4.1.1.7. 硫酸—重铬酸钾溶液：取250g重铬酸钾加入1000ml的水中，加热充 分溶 解后，缓慢加入4000ml硫酸液。（按重名铬酸钾:注射用:硫酸液=1:4:16） 4.1.1.8. 1%NaOH溶液：取100gNaOH加至10000ml。 4.1.2配制消毒剂时必须二人复核操作。 4.1.3配制消毒剂必须戴保护用品，避免烧伤。 4.1.4在指定地点配制消毒剂，避免造成污染。 4.2. 消毒剂的使用： 4.2.1.手部消毒时用2%甲酚皂溶液、0.1%新洁尔灭溶液、75%乙醇溶液。 4.2.2.设备及室内消毒时用5%甲酚皂溶液、0.2%新洁尔灭溶液、75%乙醇溶液。 4.2.3.管路消毒时用3%双氧水溶液。 4.2.4.消毒剂配制后使用时间不超过24小时。 4.2. 5.消毒剂定期更换，每月轮换使用。
实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP） 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 二〇〇八年九月修订
目录 一、细菌培养系统（责任人：郑子峥） 二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜） 三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕） 四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛） 五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、） 六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）
一、细菌培养系统 1、LB培养基: 每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。 2、固体培养基: LB培养基中加入琼脂至1.5％，高压蒸汽灭菌15min后使用。3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）： 注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。 4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan） 注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含0.5g卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。 5、细菌培养： 配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性
配液室操作规程
配液室操作规程 配液室是化学实验室中非常重要的一个环节，它主要用于配制各种化学试剂的溶液、标准溶液和稀释液。为了保证实验的准确性和安全性，在配液室进行操作时需要遵循一些规程和注意事项。下面是配液室操作规程，共2000字。 1. 安全措施 1.1 进入配液室前，必须戴好实验室所规定的个人防护装备，包括实验服、手套、护目镜等，并确保个人卫生消毒做好。 1.2 配液室内禁止吸烟、饮食和随意储物。 1.3 在操作过程中，切忌直接触摸强酸、强碱和有毒物质，以免引起中毒或灼伤。若不小心触摸到有害物质，请及时用清水冲洗。 1.4 配液室内应保持通风良好，以防有害气体积聚。 1.5 在使用酸和碱溶液时，要注意加入溶液时会产生热量，应小心操作，并避免溅溶液。 1.6 配液室内的仪器、试剂和药品等应分类储存，严禁乱放乱堆，以免引发意外。 2. 操作步骤 2.1 操作前检查 在进行任何配液操作之前，要对所需试剂进行仔细检查，确保试剂的性质、纯度和有效期都符合要求。同时，对需要使用的
仪器和容器也要进行检查，以确保其完好无损并进行适当的消毒处理。 2.2 称量试剂 使用精密天平进行试剂的称量时，需要先将天平归零，并使用干净的称量纸或容器。 2.3 配制溶液 2.3.1 根据实验要求准确称量所需的试剂，并逐一加入容器中。 2.3.2 对于固体试剂的溶解，一般先加入少量溶剂进行搅拌，待完全溶解后再加入剩余的溶剂。 2.3.3 搅拌过程中应尽量避免溅出，以免造成损失或伤害。 2.3.4 搅拌时间需充分保证，以确保溶液均匀混合。 2.4 校正浓度 在配制标准溶液时，应事先准备好已知浓度的标准溶液进行校正。校正时需要注意准确记录所添加的标准溶液体积，以保证校正结果的准确性。 2.5 标记标签 每制备一种溶液都要标明试剂名称、浓度、配制日期、制备者等信息，并粘贴到容器上，清晰可见。 2.6 清洗仪器和容器 配制完毕后，及时清洗使用的仪器和容器，以免残留试剂造成交叉污染。
实验室常用液体配制标准操作规程
常用液体配制标准操作规程（SOP）国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心 二〇〇八年九月修订
目录 一、细菌培养系统（责任人：郑子峥） 二、DNA操作系统（责任人：罗文新、陈瑛炜） 三、蛋白质操作系统（责任人：李少伟、顾颖、潘晖榕） 四、细胞培养相关（责任人：程通、张涛） 五、单克隆抗体制备系统（责任人：陈毅歆、） 六、EIA系统（责任人：葛胜祥、熊君辉）
一、细菌培养系统 1、LB培养基: 每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨 10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。 2、固体培养基: LB培养基中加入琼脂至％，高压蒸汽灭菌15min后使用。 3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）： 注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。 4、%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan） 注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用滤膜过滤除菌后再分装。 5、细菌培养： 配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本
细胞培养相关常用液体配制标准SOP操作规程样本 （一）胰酶的配制：（浓度为1‰，1L） 1、认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。 2、称取牛胰蛋白酶1.0g；EDTA 2 g； 3、用超纯水溶解； 4、磁力搅拌器搅拌至胰酶完全溶解，溶液变得澄清； 5、超纯水定容至1L； 6、不锈钢滤器加0.22um滤纸两张高温灭菌后，在超净工作台过滤； 7、在血清瓶中加入少量滤好的胰酶，置于细胞培养箱中检测是否染菌，其余置于4℃待用； 8、过滤后洗净滤器再次灭菌，避免残留的胰酶降解蛋白。 （二）DMEM配制： 1、所需试剂及材料： 试剂：DMEM干粉（GIBCO 10L）、超纯水（Milli-Q）、Na2CO3 （Sigma）材料：10L玻璃瓶、500ml盐水瓶（灭菌）、0.22um滤膜、滤器（事先放好两层滤膜并高压灭菌）、磁力搅拌器大号搅拌子蠕动泵胶塞2、操作步骤： (1)10L玻璃瓶洗涤，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗3遍。 (2)在10L玻璃瓶中加入超纯水9.5L，将DMEM干粉倒入，在磁力
搅拌器上搅拌溶解。 (3)按照3.7g/L 加入Na2CO3 。 (4)调节pH值至7.2~7.4。 (5)过滤分装，并注明名称及配制日期。此过程注意无菌操作！ (6)最后用血清瓶取10ml左右置于细胞培养箱中检测是否染菌。 (7)清洗滤器，10L玻璃瓶，软管，将所有实验器具归位。 （三）1640、MEM培养基的配制同上，Na2CO3的用量见包装说明 （四）细胞间100×双抗（青霉素、链霉素）的配制 青霉素及链霉素配制的终浓度为1万单位/毫升。 配制的步骤以400ml为例： 1.认真清洗配制容器，自来水20遍，去离子水5遍，超纯水润洗 3遍。 2.准备5瓶青霉素（80万单位/瓶）、4瓶链霉素（100万单位/瓶）。 3.加入1-2ml细胞间专用PBS进入青霉素、链霉素的瓶子内，浸泡 后吹吸数次至全部溶解，溶解后的液体吸入配制容器内。用PBS 再次润洗装有青霉素及链霉素的小瓶子，将残留的青霉素及链霉素溶解，将液体并入配制容器内，重复润洗2次。 4.用细胞间专用PBS定容至400ml，搅拌均匀。 5.将配制的母液用0.22um的滤膜过滤除菌，分装到灭菌后的4ml EP管内，2ml/ 管,冻存于-20℃。( 4mlEP管需提前一天灭菌，烘干过夜。)
酸碱配制操作规程
酸碱配制操作规程 酸碱配制是实验室中常见的操作之一，为了确保操作 的安全和准确性，制定规程是必要的。下面是一份酸碱配 制操作规程，供参考： 一、规程目的 1. 确保酸碱配制的安全性，防止事故发生。 2. 确保酸碱配制的准确性和稳定性，保证实验结果的 可靠性。 3. 保护实验人员的健康，避免酸碱溶液对人体的损害。 二、工具与材料 1. 酸碱溶液配制用的试剂瓶、量筒、滴定管等，要保 持干净。 2. 酸碱溶液的试剂必须是纯净的、无杂质的。 3. 选择合适的试剂瓶，要保证配制后的酸碱溶液不易 挥发、不易受到外界污染。 三、配制操作步骤 1. 根据实验需求和配方计算所需的酸碱溶液量。 2. 使用酸碱溶液配制用的容器，进行充分清洗和消毒，确保无杂质。 3. 准备干净的试剂瓶，标明所配溶液的名称、浓度和 配制日期。 4. 用一份量筒或滴定管，精确称取所需量的试剂。
5. 先将试剂加入试剂瓶中，再加入适量的去离子水， 用玻璃棒拌匀。 6. 用PH试纸或PH计检测所配制的溶液的酸碱度，确 保达到所需的目标值。 7. 根据实验要求，将配制好的酸碱溶液进行标签贴好，并储藏在适当的地方。 四、操作注意事项 1. 操作时要戴上实验手套、护目镜和实验服。 2. 配制酸碱溶液要避免使用过量的试剂，以免造成溶 液浓度过高。 3. 操作时要小心防止酸碱溶液的溅洒和飞溅，如溅到 眼睛或皮肤上应立即用大量水冲洗。 4. 严禁将试剂瓶中的酸碱溶液直接倒入嘴中尝试酸碱度。 5. 酸碱溶液配制后要做好标识和储存，避免混淆和误用。 五、事故处理 1. 如发生酸碱溶液溅洒或飞溅到皮肤或眼睛上，需要 立即用大量水冲洗，并及时就医。 2. 如发生严重的酸碱溶液中毒，应立即呼叫急救人员，并采取相应的急救措施。 六、规程的执行 1. 所有从事酸碱配制操作的实验人员，都必须严格按 照本规程执行，不得随意改变操作步骤。
QC试液、溶液、标准溶液配制标准操作规程
一、目的：建立试液配制规程，规定了试液的配制内容、方法与要求 二、范围：适用于试液的配制操作 三、职责：化验室对实施本规程负责 四、内容： 1. 试液配制操作： 1.1 氯化碘试液：取碘化钾0.14g与碘酸钾90mg，加水125ml使溶解，再加盐酸125ml，即得。本液应置玻璃瓶内，密闭，在凉处保存。 1.2 N-乙酰-L-酪氨酸乙酯试液：取N-乙酰-L-酪氨酸乙酯24.0mg，加乙醇0.2ml使溶解，加磷酸盐缓冲液(取0.067mol/L磷酸二氢钾溶液38.9ml与0.067mol/L磷酸氢二钠溶液61.6ml，混合，pH值为7.0)2ml，加指示液(取等量的0.1%甲基红的乙醇溶液与0.05%亚甲蓝的乙醇溶液，混匀)lml，用水稀释至10ml，即得。 1.3 乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液：取对二甲氨基苯甲醛1g，加乙醇9.0ml与盐酸 2.3ml 使溶解，再加乙醇至100ml，即得。 1.4 乙醇制氢氧化钾试液：可取用乙醇制氢氧化钾滴定液(0.5mol/L)。 1.5 乙醇制氨试液：取无水乙醇，加浓氨溶液使每100ml中含NH3 9～11g，即得。本液应置橡皮塞瓶中保存。 1.6 乙醇制硝酸银试液：取硝酸银4g，加水l0ml溶解后，加乙醇使成l00ml，即得。 1.7 乙醇制溴化汞试液：取溴化汞 2.5g，加乙醇50ml，微热使溶解，即得。本液应置玻璃瓶内，在暗处保存。 1.8 二乙基二硫代氨基甲酸钠试液：取二乙基二硫代氨基甲酸钠0.1g，加水l00ml溶解后，滤过，即得。 1.9 二乙基二硫代氨基甲酸银试液：取二乙基二硫代氨基甲酸银0.25g，加氯仿适量与三乙胺1.8ml，加氯仿至100ml，搅拌使溶解，放置过夜，用脱脂棉滤过，即得。本液应置棕色玻璃瓶中，密塞，置阴凉处保存。 1.10 二苯胺试液：取二苯胺1g，加硫酸l00ml使溶解，即得。 1.11 二氨基萘试液：取2,3-二氨基萘0.1g与盐酸羟胺0.5g，加0.1mol/L盐酸溶液 100ml，必要时加热使溶解，放冷滤过，即得。本液应临用新配，避光保存。 1.12 二硝基苯试液：取间二硝基苯2g，加乙醇使溶解成l00ml，即得。 1.13 二硝基苯甲酸试液：取3,5-硝基苯甲酸1g，加乙醇使溶解成l00ml，即得。 1.14 二硝基苯胼试液：取2,4-二硝基苯肼1.5g，加硫酸溶液(1→2)20ml，溶解后，加水使成l00ml，滤过，即得。 1.15 稀二硝基苯胼试液：取2,4-二硝基苯肼0.15g，加含硫酸0.15ml的无醛乙醇l00ml使溶解，即得。 1.16 二氯化汞试液：取二氯化汞6.5g，加水使溶解成l00ml，即得。 1.17 二氯靛酚钠试液：取2,6-二氯靛酚钠0.1g，加水l00ml溶解后，滤过，即得。 1.18 丁二酮肟试液：取丁二酮肟1g，加乙醇l00ml使溶解，即得。
临床试验常用溶液配制的标准操作规程
临床试验常用溶液配制的标准操作规程 【目的】建立常用溶液配制的标准操作规程，为实验室常规清洁消毒工作提供保证。 【适用范围】适用于常用溶液配制。 【规程】 1.合成洗涤液 （1）配法：用温热水将洗衣粉配成浓溶液，摇匀溶解后即可使用。 （2）用法：用毛刷蘸取洗刷或倾入少量荡洗，再用常水、蒸馏水冲洗。 2.铬酸洗液 （1）配法：取重铬酸钾50g，加入100ml水中，加热溶解，冷却，缓缓加入浓硫酸至1000ml，边加边不断搅拌，溶解即得。 （2）作用原理：重铬酸钾与浓硫酸作用生成的铬酐及浓硫酸本身都具有强氧化性，浓硫酸又具有吸水性，可使有机物破坏。 （3）用法：以铬酸洗液浸润或浸泡，再用常水、蒸馏水冲洗。铬酸洗液可反复使用，若呈现绿色时即失去氧化作用，可再生后使用。 （4）再生：取废铬酸洗液，在不断搅拌下，加高锰酸钾粉末（100ml 加6～8g），至溶液呈棕色为止，静置。取上清液在 160℃以下加热，不断搅拌使水分蒸发，得浓稠状棕黑色溶液，放冷，再加入适量浓硫酸。搅拌均匀，使重铬酸钾溶解即得。
3.氢氧化钠-高锰酸钾洗液 （1）配法：取高锰酸钾 40g，溶于100ml 水中，再缓缓加入 10%氢氧化钠溶液至1000ml，搅拌均匀，即得。 （2）用途：适用于洗涤油腻及有机物质。 4.碱性洗液 （1）配法：氢氧化钠或氢氧化钾溶液，浓度为 20%～50%不等。 （2）用法：将洗液倾入玻璃仪器，刷洗或振荡一定时间，用常水、蒸馏水冲洗。 5.硝酸洗液 （1）配法：硝酸溶液，浓度5%～10%。 （2）用途：适用于除去铝及搪瓷器皿中的沉垢。 （3）用法：分批加入。每次要在所发生的气体排尽后再加入，沉垢除去后，立即用水冲洗干净。 6.消毒氯液 （1）配制：将含有有效氯 250mg/片的消毒药片4片溶于1000ml 水中混匀，制成消毒氯液。 （2）用途：适用于各种仪器设备的消毒，废弃物的浸泡。 （3）用法：新鲜配制。
化验室常用试剂配制标准操作规程
化验室常用试剂（溶液）配制标准操作规程 1 制定目的 为使试剂（溶液）配制操作标准化，特建立本操作规程。 2 适用范围 本操作规程适用于化验室常用试剂（溶液）的配制。 3 职责 3.1 QA及管理人员负责监督其实施情况。 4 规程细则 4.1 氢氧化钠滴定液（1mol/L、0.5mol/L或0.1mol/L） 4.1.1 取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料 瓶中，静置数日，澄清后备用。 4.1.2 氢氧化钠滴定液（1mol/L）：取澄清的氢氧化钠饱和溶液56ml，加新 沸过的冷水使成1000ml，摇匀。 4.1.3 氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）：取澄清的氢氧化钠饱和溶液28ml，加新 沸过的冷水使成1000ml，摇匀。 4.1.4 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）：取澄清的氢氧化钠饱和溶液 5.6ml，加 新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。 4.1.5 标定 4.1. 5.1 氢氧化钠滴定液（1mol/L）：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲 酸氢钾约6g，精密称定，加新沸过的冷水50ml，振摇，使其尽量溶 解；加酚酞指示液2滴，用本液滴定；在接近终点时，应使邻苯二甲 酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。每1ml氢氧化钠滴定液
（1mol/L ）相当于204.2mg 的邻苯二甲酸氢钾。根据本液的消耗量 与邻苯二甲酸氢钾的取用量，算出本液的浓度，即得。 4.1. 5.2 氢氧化钠滴定液（0.5mol/L ）：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二 甲酸氢钾约3g ，照4.1.5.1标定。每1ml 氢氧化钠滴定液（0.5mol/L ） 相当于102.1mg 的邻苯二甲酸氢钾。 4.1. 5.3 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲 酸氢钾约0.6g ，照4.1.5.1标定。每1ml 氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ） 相当于20.42mg 的邻苯二甲酸氢钾。 4.1. 5.4 如需用氢氧化钠滴定液（0.05mol/L 、0.02mol/L 或0.01mol/L ）时， 可取氢氧化钠滴定液（0.1mol/L ）加新沸过的冷水稀释制成。必要时， 可用盐酸滴定液（0.05mol/L 、0.02mol/L 或0.01mol/L ）标定浓度。 4.1. 5.5 计算 L mol M V V NaOH c m NaOH c /)() ()(32110-??-?=目标浓度 式中：m ——邻苯二甲酸氢钾的质量，g ； V 1——邻苯二甲酸氢钾溶液消耗的氢氧化钠滴定液的体积，ml ； V 2——空白试验消耗的氢氧化钠滴定液的体积，ml ； M ——每1ml 氢氧化钠滴定液相当邻苯二甲酸氢钾的质量，mg 。 4.1.6 贮藏：置聚乙烯塑料瓶中，密封保存；塞中有2孔，孔内各插入玻璃管 1支，一管与钠石灰管相连，一管供吸出本液使用。 4.2 盐酸滴定液（1mol/L 、0.5mol/L 、0.2mol/L 或0.1mol/L ） 4.2.1 盐酸滴定液（1mol/L ）：取盐酸90ml ，加水适量使成1000ml ，摇匀。 4.2.2 盐酸滴定液（0.5mol/L 、0.2mol/L 或0.1mol/L ）照上法配制，但盐酸的 取用量分别为45ml 、18ml 或9.0ml 。 4.2.3 标定 4.2.3.1 盐酸滴定液（1mol/L ）：取在270～300℃干燥至恒重的基准无水碳 酸钠约1.5g ，精密称定，加水50ml 使溶解，加甲基红-溴甲酚绿混合 指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分 钟，冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。每1ml 盐酸滴 定液（1mol/L ）相当于53.00mg 的无水碳酸钠。根据本液的消耗量
配液室操作规程模版
配液室操作规程模版 配液室操作规程 一、配液室概述 配液室是实验室中的重要环节，主要用于准确稳定地制备各种液体溶液。为了保证实验过程的准确性和安全性，特制定本操作规程，以便规范配液室的操作流程和安全措施。 二、配液室基本要求 1. 配液室应位于干燥、明亮并通风良好的地方，离易燃易爆物品和酸碱等有害物质远离。 2. 配液室内的工作台面应干净整洁，并配备充足的垃圾桶和消毒设备。 3. 配液室应定期进行空气消毒和台面清洁，确保实验操作的卫生环境。 4. 配液室内应配备充足的实验用具，如量筒、滴定管、移液管等。 三、配液室操作规程 1. 在进入配液室前，确保已经换上干净的实验服并佩戴好实验手套和护目镜。 2. 完成实验前应先将配液室内的工作台和玻璃器皿清洗干净，并将各种实验用具按照规定摆放好。 3. 操作前应查看实验操作手册，了解实验步骤和操作要求，并准备好所需的试剂和溶液。
4. 操作过程中应注意量取试剂的准确性，如使用量筒进行量取时应保持水平，并在合适的高度读数，避免出现误差。 5. 液体的混合过程中，应使用适当的工具进行搅拌，以确保溶液均匀。 6. 在溶液配制完成后，应及时检查溶液的浓度和PH值，如不符合要求则及时调整。 7. 操作结束后应及时清洗和归位使用过的玻璃器皿，并将垃圾分类放置，保持工作台面的整洁和清洁。 8. 在每日操作结束后，应对配液室进行日常的清洁和消毒，并定期进行大扫除，确保实验室的卫生环境。 9. 如有发生事故或意外情况，应立即停止操作，并报告相关负责人进行处理。 四、配液室安全措施 1. 操作过程中应佩戴好实验手套和护目镜，防止溶液溅入眼睛和皮肤。 2. 配液室内严禁使用明火，避免引发火灾。 3. 在操作有毒、易燃易爆或腐蚀性试剂时，应通过有效的隔离和防护措施，如操作风机、抽风罩等，确保操作安全。 4. 配液室内禁止吃东西和吸烟，避免食品进入实验溶液。 5. 操作结束后应及时关闭水龙头和电源开关，确保设备和水源的安全。
配液室操作规程
配液室操作规程 一、设备要求 1. 本实验室使用的配液室设备应符合国家标准和行业规范，长 期定期维护、保养和检验，确保设备完好。 2. 配置冷热水和其他符合实验要求的仪器设备，如电子天平、pH计等。 二、操作规程 1. 安全防护 1）在进入配液室前，必须换上实验室專屬的工作服、鞋套、 手套等防护用品，避免污染。 2）在操作时必须注意个人安全，不得在实验过程中扰乱他人。 3）认真学习化学品的物性质和安全性，防止化学品接触皮肤 造成伤害。 4）当配液室内有火苗时必须关闭室内门窗并通风换气。 2. 实验准备 1）将需要的化学品按比例计量好准备在同一处，确保操作流 畅和准确性。 2）清洗好设备和器具，检查是否完好无损。 3）准备所需的稀释液、标准品等。 4）测量量杯、试管、试剂瓶等要清洗干净，不能出现异物。 3. 操作流程 1）按照实验目的，按化学名称的首字母进行灵活排列，遵循 从小到大，从少到多的原则。
2）配置指定容器，如量杯、烧杯、瓶子等，将每种化学品的 不同配置液依次加入容器中，并充分搅拌使其充分混合。 3）在打开化学品之前，先查看标签，确保名称、浓度、用途 等信息无误。 4）必须按照比例进行配置，并逐一记录每个化学品的配置过程。 5）操作时应倍加小心，避免长时间注视化学品，避免化学品 溅出。在操作过程中如有不舒服，应立即停止操作并向班主任汇报。 6）清理过程：将配制好的液体丢入相应的废弃液存储区，将 操作台面及周围清洁整理干净，放归原处。 4. 实验记录与处理 1）记录配液室内每一项涉及化学品的操作，并记录工作人员，操作日期。 2）配制好的液品要贴上标签并记录该液体编号、名称、配制人、配制日期和浓度等信息。 3）实验完成后应将实验器具以及配制好的液体交给实验主持 人审核，由实验主持人决策是否具备实验条件。 4）实验完成后应将实验室内设施及周围环境恢复整洁。 三、操作流程注意事项 1. 配液室采用单人操作，排队按照先来先服务原则。 2. 配液前必须进行实验讲解，并穿上防护用品。 3. 操作时需仔细阅读化学品标签，并按照配方准确配制。 4. 在进出实验室过程中，要保持清洁和整洁，并注意安全。 5. 发现仪器不稳定，仪器损坏、仪器不洁净、仪器异常等情况时，必须及时向主管人员报告。
溶液配制标准操作规程
溶液配制标准操作规程 溶液配制标准操作规程 一、前言 为了保证实验室化学试剂的质量和实验结果的准确性，在实验室中，我们必须严格遵守溶液配制标准操作规程，以确保每一次实验都能够取得准确、可靠的结果。本文将详细介绍溶液配制的标准操作规程，希望对广大实验室工作者有所帮助。 二、实验室安全 1. 在进行任何实验前，必须先了解实验室的安全规定，并严格遵守。实验室必须配备消防器材、急救箱等应急设备，并定期进行维护和检查。 2. 在进行化学试验时，必须佩戴适当的防护设备，如实验服、手套、护目镜等。同时，还要注意实验室内的通风情况，保持空气流通。
3. 在进行化学试验时，必须注意化学品的性质和危险性，并采取相应的防护措施。如有毒气体产生，必须立即停止实验并撤离实验室。 三、溶液配制前的准备工作 1. 在进行溶液配制前，必须先了解所需化学试剂的性质和用途，并准备好所需试剂和仪器设备。 2. 在进行溶液配制前，必须检查所需试剂的纯度和浓度，并选择适当的试剂。 3. 在进行溶液配制前，必须清洗容器，并用去离子水冲洗干净。 4. 在进行溶液配制前，必须称量所需试剂，并记录下称量数据。 四、溶液配制步骤 1. 将所需的试剂按照比例称量好，并放入干净的容器中。 2. 加入适量的去离子水，并用玻璃棒搅拌均匀。
3. 如果需要调节pH值，则可以使用酸或碱来调节。在加入酸或碱时，必须慢慢滴加，并用玻璃棒搅拌均匀，直到达到所需的pH值为止。 4. 如果需要加热或冷却，则可以使用加热器或冷却器来进行控制。在加热或冷却时，必须注意温度的控制，并避免过度加热或过度冷却。 5. 在配制好溶液后，必须进行浓度和纯度的检测，并记录下检测数据。 五、实验后的清理工作 1. 在进行溶液配制后，必须清洗容器和仪器设备，并用去离子水冲洗干净。 2. 在进行化学试验后，必须将废弃物和废液妥善处理，避免对环境造成污染。 3. 在进行化学试验后，必须将实验室清洁干净，并将仪器设备归位。
实验室消毒液配制标准操作规程
1. 目的 建立消毒剂的配制及使用规程，保证消毒剂的正确使用，防止生产区内的污染及交叉污染。 2. 范围 适用消毒剂的配制及使用。 3. 责任人 配制消毒剂操作人员对本标准的实施负责；QA检查员负责监督。 4. 内容 4.1. 消毒剂的配制： 4.1.1. 采用稀释法配制消毒剂，其公式是： CV=C 1V1 C:浓溶液的浓度V :需用浓溶液的体积 G:稀溶液的浓度V仁欲配制稀溶液的体积。 4.1.1.1. 75% 乙醇溶液：取95汇醇液3947ml加水至5000ml稀释成75%勺溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.2. 0.1% 新洁尔灭溶液：取5%新吉尔灭液100ml加水至5000ml稀释成0.1% 的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.3. 0.2% 新洁尔灭溶液：取5%新吉尔灭液200ml加水至5000ml稀释成0.2% 的溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.4. 2% 甲酚皂溶液：取5%甲酚皂液200ml加水至5000ml稀释成2%勺溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1. 5. 5% 甲酚皂溶液：取50%^甲酚皂液500ml加水至5000ml稀释成5%勺溶液，
置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.6. 3% 氧水溶液：取30%双氧水液1000ml加水至10000ml稀释成3%勺溶液，置干燥容器内密闭保存。 4.1.1.7. 硫酸一重铬酸钾溶液：取250g重铬酸钾加入1000ml的水中，加热充 分溶 解后，缓慢加入4000ml硫酸液。（按重名铬酸钾：注射用：硫酸液=1:4:16） 4.1.18 1%NaOH 溶液：取100gNaO!加至10000ml。 4.1.2配制消毒剂时必须二人复核操作。 4.1.3配制消毒剂必须戴保护用品，避免烧伤。 4.1.4在指定地点配制消毒剂，避免造成污染。 4.2. 消毒剂的使用： 4.2.1. 手部消毒时用2%甲酚皂溶液、0.1%新洁尔灭溶液、75%L醇溶液。 4.2.2. 设备及室内消毒时用5%P酚皂溶液、0.2%新洁尔灭溶液、75%L醇溶液。 4.2.3. 管路消毒时用3%双氧水溶液。 4.2.4. 消毒剂配制后使用时间不超过24小时。 4.2. 5. 消毒剂定期更换，每月轮换使用。
实验室配制无菌生理盐水的操作规程
实验室配制无菌生理盐水的操作规程 实验室配制无菌生理盐水的操作规程 在实验室环境中，配制无菌生理盐水是一项常见而重要的操作。无菌生理盐水具有广泛的应用领域，如细胞培养、生物化学实验、动物手术等。本文将为您提供一份详细的操作规程，以确保您能够准确无误地完成无菌生理盐水的配制过程。 一、实验室准备 1. 环境准备： 确保实验室工作台面及周围环境干净整洁，无杂物和灰尘。使用无菌操作罩或无菌柜进行操作，以减少外界细菌的污染。 2. 器具准备： 准备以下器具和试剂： - 烧杯：用于装取所需体积的生理盐水。 - 秤量纸：用于称量需要的重量。 - 秤量仪器：用于准确称量试剂。
- 灭菌培养皿：用于储存制备好的无菌生理盐水。 - 灭菌针筒：用于吸取无菌生理盐水。 二、试剂准备 1. 生理盐水的配制： 按照以下步骤配制无菌生理盐水： 步骤一：称取适量的生理盐粉（约为0.9g），放入已称重过的烧杯中。步骤二：加入适量的去离子水（约为1000ml），并用玻璃棒搅拌均匀。步骤三：将混合液装入无菌培养皿，用锡箔纸或无菌膜覆盖，并使用 灭菌器或高压蒸汽灭菌器对其进行灭菌处理。 2. 质量控制检测： 为确保配制好的无菌生理盐水质量符合要求，可以进行以下检测： - 使用无菌培养基接种无菌生理盐水样品，观察培养基中是否出现细菌或真菌的生长。 - 使用无菌手套操作，将无菌生理盐水注射到琼脂瓶中，观察琼脂瓶内是否有菌落生成。 三、操作规程
1. 身穿实验室防护服，戴上无菌手套，进入无菌操作区域。 2. 将所需的器具和试剂放置在无菌操作台上。 3. 点燃酒精灯，对实验器具进行灭菌处理。 4. 使用称量仪器准确称取所需重量的生理盐粉。 5. 将生理盐粉倒入烧杯中，加入适量的去离子水。 6. 使用玻璃棒搅拌均匀，直至生理盐粉完全溶解。 7. 将混合液装入灭菌培养皿中。 8. 用无菌包装材料，如锡箔纸或无菌膜，覆盖培养皿，并封好。 9. 将培养皿放入灭菌器或高压蒸汽灭菌器中，进行灭菌处理。 10. 等待灭菌处理完成后，将制备好的无菌生理盐水取出。 11. 将取出的无菌生理盐水转移至灭菌针筒中，并封好。 12. 将无菌生理盐水储存于冰箱或其他适当的储存设备中，以确保其保
试液、溶液配制标准操作规程.
5.42 2mol/L氢氧化钠溶液：称取80g氢氧化钠溶于水中，加水稀释至1000ml即得。 海外领土与属地这类特殊的行政区划往往是帝国主义时代殖民风潮遗留下来的遗迹。在第二次世界大战之后兴起的殖民地或保护地独立建国浪潮，大幅地减少了此类地区的数量。今天，世界上仅剩9个国家还拥有海外领土、属地、或是一些因为特殊的缘故而组成的互属或 4mol/L 氢氧化钠溶液：称取160g氢氧化钠溶于水中，加水稀释至1000ml即得。 澳大利亚 5.44 10mol/L氢氧化钠溶液：用40%氢氧化钠溶液代替即可。 • 外部领地（External Territory） 5.45 10%氢氧化钠溶液：称取100g氢氧化钠溶于少量水中，冷却加水至1000ml，摇匀即可。o 亚什摩及卡地尔群岛（Ashmore and Cartier Islands） 5.46 30%氢氧化钠溶液：称取300g氢氧化钠加水溶解，冷却后用水稀释至1000ml，摇匀。圣诞岛（Christmas Island） o 科科斯群岛（Cocos (Keeling Islands） 5.47 40珊瑚海群岛（%氢氧化钠溶液：称取400g氢氧化钠加水溶解，冷却后稀释至1000ml，摇匀。 o 5.48Heard Island and McDonald Islands） 3g，置玻璃瓶内，加水1000ml，密塞，时时猛力振摇，放置1h，即得。用时倾取上清液。 o 诺福克岛（Norfolk Island） 5.49 10 三氯乙酸溶液：称取500g三氯乙酸（AR），加水至 ，摇匀。自治领地 5.50 1+1三乙醇胺溶液：取50ml三乙醇胺倒入50ml水中，混匀即可。o 法罗群岛（Faroe Islands） 5.51 o 格陵兰（Greenland） 法国200ml水中，摇匀即可。
细菌培养系统常用液体配制标准SOP操作规程样本
细菌培养系统常用液体配制标准SOP操作规程样本 1、LB培养基: 每1000mL加分析纯NaCl 10g ，蛋白胨10g，酵母粉5g，用ddH2O 配制，再用10M NaOH调pH至7.4(1000mL一般加450ul)，高压蒸汽灭菌15min冷却后使用。 2、固体培养基: LB培养基中加入琼脂至1.5％，高压蒸汽灭菌15min后使用。3、10%(g/V) 氨苄青霉素钠（Ap）： 注射用氨苄青霉素钠（粉末）50g溶于500ml无菌去离子水中，溶解后分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的氨苄青霉素粉末不是无菌包装的，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。 4、2.5%(g/V)硫酸卡那霉素（Kan） 注射用硫酸卡那霉素（液体）通常是2ml/支，内含0.5g卡那霉素。取25支药剂（50ml），加入450ml无菌去离子水中，分装入4ml灭菌的EP管，全程超净工作台内操作，避免染菌，分装后－20度保存，培养细菌时做1000×使用。 注：如果购买的卡那霉素是粉末状的非无菌包装，溶解后需用0.22滤膜过滤除菌后再分装。 5、细菌培养： 配制相应抗性培养基，每试管倒入3~4ml培养基（卡那霉素抗性
培养采用标记试管），无菌牙签挑取单克隆至试管中，于37℃，220rpm 培养。剩余培养基做好抗性和日期标记，置于4℃保存。 6、化学感受态制备： 1）原理:： 细菌处于容易吸收外源DNA的状态叫感受态，这时的菌细胞称为感受态细胞（Competent cell）。将细菌置于0℃，低渗CaCl2 溶液中时，菌细胞壁和膜的通透性增强，菌体膨胀成球型。外源DNA与Ca2+形成抗DNase的羟基-钙磷酸复合物黏附于细胞表面，在经42℃短暂的热冲击处理（一般热休克90s）后能促进细胞吸收外源DNA 复合物。 2）仪器、材料与试剂： ①超净工作台、低温离心机、摇床、-80℃冰箱，装液氮的泡沫盒及液氮、50ml的离心管2个，50ml的注射器及0.22um小过滤器各1个。高压灭菌的纸张、透气膜、1.5ml的EP管约350-500个，两块10cm的平皿板及接种环。 ②TB缓冲液：每200ml液体中含Mncl2.4H20(2.176g)、Cacl2.2H2O(0.44g)、Kcl(3.73g)、PIPES(0.67g)。（注：在电子天平上的误差<50mg,因Mncl2.4H20在PH=6.7易溶故先将其它药品用超纯水溶解,并用KOH及HCL调PH至6.7。在加入Mncl2.4H20溶解后用超纯水定溶至相应的量，采用50ml的注射器及小过滤器过滤,一般储存在-20℃,时间<25天,否则易被氧化颜色呈粉红。） ③LB液体培养基：参见前面介绍。
蛋白质操作系统常用液体配制标准SOP操作规程样本
蛋白质操作系统常用液体配制标准SOP操作规程样本 （一）、电泳 1、30%丙烯酰胺 将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml 的水中，于磁力搅拌器上搅拌至完全溶解。补加水至终体积为100ml。以0.45μm孔径过滤溶液，去除不溶性杂质。查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。 注意事项： 丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。 2、1.5M Tris-HCl (pH8.8) 400ml 水中溶解Tris-Base 90.855g, 浓盐酸调PH至8.8后定容至500ml 3、1.0M Tris-HCI(pH6.8) 400ml 水中溶解Tris-Base 60.57g, 浓盐酸调PH至6.8后定容至500ml 4、10%SDS 900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐
酸调节pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。 5、10％过硫酸铵 称取过硫酸铵2g，适量水溶解后，定容至20mL，分装成1mL/管，于-20℃保存备用。 6、蛋白上样Buffer（6×蛋白加样缓冲液） 称取十二烷基硫酸钠12g、溴酚蓝0.6g，1M Tris-Cl (pH=6.8) 30ml、甘油60ml、β－巯基乙醇5ml，定容至100ml。 7、蛋白质电泳buffer（5×） 称取三羟甲基氨基甲烷15.1g、甘氨酸94.0g、十二烷基硫酸钠5.0g, 在水中溶解并定容至1L。 （二）染色 1、染色液（考马斯亮蓝染液） 甲醇45％，冰乙酸10％，去离子水45％，加考马斯亮蓝R-250或G-250至0.25%，过滤后使用。 2、10×脱色液 称取KCl 186.5g，加水定容至1L 3、蛋白快速银染所需溶液 （1）固定液：400mL 甲醇，500uL甲醛，加水定容至1L； （2）20% AgNO3溶液：20g AgNO3加水定容至100mL； （3）Na2S2O3溶液: 0.32g Na2S2O3·3H2O,加水定容至1L； （4）显色液（未加甲醛）：30g NaCO3,20mL 上述Na2S2O3溶液，加水定容至1L，（临用前加入甲醛，甲醛量如何确定？）。
配液操作规程
配液操作规程 配液操作规程 一、目的 配液操作规程的目的是为了确保配液过程的安全性、可靠性和准确性，保证配液结果的质量，并防止发生事故和污染物质的泄漏。 二、适用范围 本操作规程适用于所有需要进行配液操作的场景，包括实验室、工厂、医院等。 三、前期准备 1. 确定所需配液的物质种类、浓度和量，根据实际需要准备好所需试剂和仪器设备。 2. 清洁操作台面，确保无杂物和污染。 3. 检查所需仪器设备的工作状态，确保正常运行。 4. 穿戴个人防护装备，包括实验手套、防护眼镜和实验服。 四、操作步骤 1. 将所需试剂按照配液比例准确称量到配液容器中。 2. 倒入适量的溶剂到配液容器中，慢慢加入并同时搅拌，确保试剂充分溶解。 3. 注意容器的最大容量，避免溢出。
4. 配好的液体，用适当的容器贮存，并贴上标签标明配液内容、浓度、日期和贮存条件。 5. 将使用过的容器、试管等废弃物进行分类处理，遵守环境保护规定。 五、注意事项 1. 配液过程中应严格按照配液比例操作，避免因浓度错误导致成品质量不合格或产生副作用。 2. 配液过程中应保持操作台面的清洁整洁，防止污染物质的混入。 3. 操作时应保持稳定，避免剧烈摇晃容器，以免发生溅溢或破碎。 4. 配液容器应选用耐腐蚀、无毒、无味的材料制成，避免对试剂产生污染。 5. 配液过程中如发生意外事故，应立即停止操作，采取相应的应急处理措施。 六、事故应对和处理 1. 发生意外事故时，要立即停止操作，确保人员安全。 2. 迅速清理溢出物，避免扩散和污染环境。 3. 如有需要，立即通知相关人员和部门，做好事故报告和记录。 4. 对事故原因进行调查和分析，采取相应的措施避免类似事故再次发生。 七、后期整理 1. 完成配液操作后，及时清洁操作台面和仪器设备。
1标准溶液配制标定操作规程
标准溶液配制标定规程 文件编号： 版本状态： 编制： 审核： 批准： 受控文件 受控状态： 发布日期：实施日期：
目录 (1) 1-4依据目的引用文件职责 (2) 5.1氢氧化钠滴定液配制及标定 (3) 5.2盐酸滴定液配制及标定 (5) 5.3高氯酸滴定液配制及标定 (6) 5.4乙二胺四乙酸二钠滴定液配制及标定 (7) 5.5硝酸银滴定液配制及标定 (8) 5.6碘滴定液配制及标定 (9) 5.7亚铁氰化钾[K4Fe(CN)6.3H2O]滴定液 (10) 5.8硫代硫酸钠滴定液配制及标定 (11) 5.9氢氧化钾滴定液配制及标定 (12) 5.10硫酸亚铁铵标准溶液配制及标定 (13) 5.11硫酸滴定液配制及标定 (15) 5.12硫氰酸铵标准溶液配制及标定 (17)
1 .依据及范围 依据HG/T2843-1997、GB/T603-2002、GB/T601-2016制定各标准溶液配制标定标准规程，规定了各溶液配制标定的方法及标准，确保使用方法科学，测量数据准确。 2.目的 建立本标准规程，以指导化验室更好的配制标定各标准溶液，质检部检验人员对本标准操作规程实施负责。 3.引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款，凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单或修订版均不适用于本标准 HG/T2843-1997 化肥产品常用标准滴定溶液、试剂溶液和指示溶液 GB/T603-2002 化学试剂试验方法中所有制剂及制品的制备 GB/T601-2016 化学试剂标准滴定溶液的制备 GB/T6682-2008 分析实验室用水规格和实验方法 GB /T8170-2008 数值修约规则 4 职责 质检部化验室