枯草芽孢杆菌饲料应用
枯草芽孢杆菌(活菌数200亿/400亿)
一、枯草杆菌概述：枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。单个细胞
0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。
二、枯草芽孢杆菌的作用机理：
1.促进动物生长在动物体内合成多种酶类物质和多种B族维生素，从而提高饲料消化吸收利用率。
2.抑制致病菌，菌体产生的枯草菌类、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等多种抗菌活性物质，对动物体内的致病菌或内源性感染的条件致病菌有明显的抑制作用。
3.提高免疫力，刺激动物免疫器官的生长发育，提高免疫球蛋白和抗体水平，提高机体免疫力。
4.减缓应激，减缓有多种原因导致的动物应激反应。
5.调节肠道平衡，建立肠道内优势有益菌群，调整消化道内微生态平衡。
6.改善饲料环境，减少粪便臭味及有害气体排放，从而改善饲料环境。
三、枯草芽孢杆菌的使用说明：
特点：1.肠道定殖能力强。
2.耐氧化、耐高温、耐酸碱、耐挤压和耐温度变化，满足不同的饲料生产需求。
3.绿色、安全、高效、较少抗生素药物的使用。
成分含量：枯草芽胞杆菌有效活菌数大于200亿/克应用范围：畜牧、水产养殖。
用法用量：饲料中，建议添加量为0.5-10%，均匀混合。亦可根据不同的养殖动物视其实际情况酌情增减。
贮藏：阴凉、干燥处密封保存。
保质期：密封保存不少于18个月。
三、枯草芽孢杆菌的应用范围：
枯草芽孢杆菌不仅在饲料中应用比较广泛，在污水处理及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛，是一种多功能的微生物。
1、市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理；
2、畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖；
3、可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用。
枯草芽孢杆菌在农业领域的应用研究进展
龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/883344128.html, 枯草芽孢杆菌在农业领域的应用研究进展 作者：张洁朱仁胜王春芳千淋兆冯梦喜许鹏 来源：《现代农业科技》2019年第13期 摘要 ; ;本文綜述了近年来枯草芽孢杆菌在农业中的应用研究进展，包括提高作物抗性、促进作物生长、改良土壤、改良作物品质等方面内容，以期为枯草芽孢杆菌未来在农业上的应用提供一定的参考。 关键词 ; ;枯草芽孢杆菌;作物生长;土壤改良 中图分类号 ; ;S154.3 ; ; ; ;文献标识码 ; ;A 文章编号 ; 1007-5739（2019）13-0163- 01 ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; 开放科学（资源服务）标识码（OSID） 枯草芽孢杆菌是一种植物根际促生细菌，于1872年由Cohn正式命名[1]，其广泛存在于 自然界中，便于筛选分离，其所需营养成分简单、生长繁殖速度快、适应性及抗逆性极强，利于大量培养。枯草芽孢杆菌能够分泌多种蛋白类和激素类活性物质，天然无毒害，是一种高效、经济、环保的微生物“工具”。近年来，枯草芽孢杆菌在提高作物抗性、促进作物生长、改良土壤、改良作物品质4个方面的研究不断深入，笔者对此进行了综述。 1 ; ;提高作物抗性 枯草芽孢杆菌通过降低作物病害、增加作物抗逆境能力以及克服作物连作障碍等3个方面综合提高作物的抗逆性。枯草芽孢杆菌具备定殖能力，可以在作物根、茎、叶内部和土壤中成功定殖，定殖量均可达到104 CFU/g以上的水平[2-3]，从而抢占空间与营养，阻碍病原菌对作物的侵染与伤害。同时，枯草芽孢杆菌在定殖后可以产生抗生素[4]、抗菌蛋白等活性物质使 菌丝发生扭曲、肿胀和变形[5]，进而抑制病原菌的生长，实现对病害的防治。郑小亮[6]通过分级沉淀，获得一种新的抗菌粗蛋白，可使菌丝生长的形态畸形、底端膨大并抑制孢子的萌发，实现对禾谷镰刀菌的抑制。 枯草芽孢杆菌还可以诱导作物在逆境中产生抗性，经枯草芽孢杆菌GB03菌液浸泡处理后的紫花苜蓿种子，发芽势与发芽率均显著提高，株高、根长和生物量在不同盐浓度处理下，均有不同程度提升[7]。尹汉文等[8]研究发现，在1 g/L NaCl胁迫下，添加枯草芽孢杆菌增加了苜蓿株高与叶面积，苜蓿产量较未添加菌剂处理增加18%且在一定程度上提高了苜蓿的耐盐性。
枯草芽孢杆菌在土壤中的应用
枯草芽孢杆菌在土壤中的应用 概述背景资料 ●化学农药的使用对农业生产的影响 ●微生物制剂等新型环保防治措施在生物防治植物病害领域的兴起 枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)的简介 ●革兰氏阳性杆状细菌，可产生内生芽孢，耐热抗逆性强，在土壤和植物的表面普遍 存在。 ●是植物体内常见的一种内生菌，对人畜无毒无害，不污染环境。生长速度快、营养 需求简单，在植物的表面易于存活、定殖与繁殖， ●生产工艺简单，制剂稳定，施用方便，储存期长。因此是一种理想的生防微生物。 1.生防机制 对植物病菌的作用机制和方式是多样的，主要包括竞争作用、抗生作用、溶菌作用和促进植物生长等几个方面。 1.1竞争作用 ●竞争方式：主要包括营养竞争和位点竞争。 营养和空间位点的竞争是指存在于同一微小生物环境中的两个或两个以上微生物之间争夺这一环境内的空间、营养、氧气等的现象。 ●枯草芽抱杆菌具有较强的竞争和定殖能力，从而抢占病原菌的侵染位点，消耗其周 围养分，阻止和干扰病原菌对植物叶面和其他器官的侵染，起到防病抑菌的作用。 1.2抗生作用 抗生作用是指拈抗微生物通过产生代谢产物在低浓度下就能够对病原微生物的生长和代谢产生抑制作用，从而来影响病原微生物的生存和活动。近半个世纪以来，人们从枯草芽孢杆菌不同菌株的代谢产物中分离纯化了多种有效的抗菌物质。 1.3溶菌作用 枯草芽孢杆菌的溶菌作用主要表现在是通过吸附在病原菌的菌丝上，并随着菌丝生长而生长，而后产生溶菌物质造成原生质泄露使得菌丝体断裂；或者是产生抗菌物质通过溶解病原菌孢子的细胞壁或细胞膜，致使细胞壁穿孔、畸形等现象从而抑制孢子萌发。 1.4诱导植物产生抗性及促进植物生长 ●诱导植物产生抗性作用是指枯草芽孢杆菌不但能够抑制植物病原菌，而且还能够诱 发植物自身抗病机制从而增强植物的抗病性能的作用。 ●什么是PGPR 国际上把土壤中能促进植物生长的根际自生细菌通称为植物促生根圈细菌(Plant growth promoting rhizobaceria)，简称为PGPR。 其中以枯草芽孢杆菌的抗逆性最强、功能最多、适应性最广、效果最稳定。枯草芽孢杆菌能够产生类似细胞分裂素、植物生长激素的物质，促进植物的生长使植物抵抗病原菌的侵害。 枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。当作用于作物或土壤时．能够在作物根际或体内定殖，并起到特定肥料效应。目前，微生物肥料在培肥地力，提高化肥利用率，抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收，净化和修复土壤，降低农作物病害发生，促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用．保护环境。以及提高农作物产品品质和食品安全等方面表现出了不可
酵母菌、枯草芽孢杆菌、乳酸菌简介
由于具有防病、治病、促进动物生长、提高饲料转化率等功效，抗生素作为饲料添加剂在畜禽养殖业生产中被普遍使用。 大量科学研究已经证明，对动物长时间地使用抗生素添加剂，会导致动物体内微生物的耐药性不断增加，动物自身对疾病的抵抗能力越来越差，治疗时使用的抗生素剂量也随着越来越大。人食用了含有抗生素的食物，相应地也会增加人体内微生物的抗药性。30年前，人注射青霉素20万单位就可以了，后来逐渐发展到80万、100万甚至更高。不但危害人民的身体健康，而且还影响养殖业的健康发展。 生物无抗生素饲料可从仔猪营养方面着手，通过添加柠檬酸、酶制剂、益生素、氧化锌、纳米蒙脱石等措施控制仔猪腹泻。 乳酸杆菌 乳酸菌在动物体内能发挥许多的生理功能。大量研究资料表明，乳酸菌能促进动物生长，调节胃畅道正常菌群、维持微生态平衡，从而改善胃肠道功能；提高食物消化率和生物效价；降低血清胆固醇，控制内毒素；抑制肠道内腐败菌生长：提高机体免疫力等。 乳酸菌通过发酵产生的有机酸、特殊酶系、细菌表向成分等物质具有生理功能，可刺激组织发育，对机体的营养状态、生理功能、免疫反应和应激反应等产生作用。 1．提供营养物质，促进机体生长 乳酸菌如果能在体内正常发挥代谢活性，就能直接为宿主提供可利用的必需氨基酸和各种维生素（维生素B族和K等)，还可提高矿物元素的生物活性，进而达到为宿主提必需营养物质、增强动物的营养代谢、直接促其生长的作用。研究报道乳酸菌可以改良水质，提高斑节对虾的存活率、生长速率和健康状况。试验证明，小麦、稻米等谷物进行乳酸发酵后，营养价值大大提高。此外，乳酸菌产生的酸性代谢产物使肠道环境偏酸性，而一般消化酶的最适PH值为偏酸性(淀粉酶6.5、糖化酶4．4)，这样就有利于营养素的消化吸收。何机酸的产生还可
《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》
《饲料添加剂凝结芽孢杆菌》 河南省地方标准编制说明 一、编制的目的和意义 我国饲料添加剂品种目录（2013）中允许使用的微生物种类有34种，其中就包括凝结芽孢杆菌。凝结芽孢杆菌的用途作为“动物保健促长剂”使用。适用范围肉用仔鸡和生长育肥猪，说明其安全性，有效性、经济性和对环境的影响已通过了全国饲料评审委员会评审，并得到农业部批准。美国FDA也已认为“普遍认为安全”的杆菌类。且该芽孢杆菌在人类及动物生产上的应用研究已成热点，且效果显著。 凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans），革兰阳性菌，兼性厌氧，属于硬（或厚）壁菌门、芽孢杆菌纲、芽孢杆菌目、芽孢杆菌科、芽孢杆菌属关于凝结芽孢杆菌的最早记录见于Hammer B.W.在1915年发表的论文，Hammer从酸败的罐头牛奶中分离出该菌，并描述为新种。 乳酸菌是益生菌的一个大类，其中以乳杆菌、双歧杆菌最为大众熟知，但是乳杆菌、双歧杆菌的抗胃酸、抗胆盐和抗高温能力差，所以在功效发挥上很受限制。凝结芽孢杆菌也是乳酸菌的一种，其具备芽孢菌和乳酸菌的双重特性，既可以生成芽孢又可以产生大量L-乳酸。一般乳酸菌不耐热，温度60℃几乎不能存活，而凝结芽孢杆菌可产孢因而耐热性好（75℃高温下，粪肠球
菌、嗜酸乳杆菌等乳酸菌已经不能存活，而凝结芽孢杆菌依然存活，也就是说它比一般乳酸菌抗逆性强，又比一般芽孢菌的益生特性优良，被称为传统乳酸菌的换代产品，近年来成为益生菌研究中的热点。 研究发现，凝结芽孢杆菌TBC169能够分泌抗菌凝固素，有效抑制肠道内出血性大肠杆菌、痢疾志贺菌、金黄色葡萄球菌、伤寒沙门氏菌、铜绿假单胞菌等有害菌的繁殖，同时能促进双歧杆菌的协同增殖，从而快速调节肠道菌群平衡。基于该功能，凝结芽孢杆菌对抗生素相关性腹泻、伪膜性肠炎等消化道细菌感染疾病都有很好疗效。 凝结芽孢杆菌细胞表明有保水功能，能够锁住肠管中的水分，使粪便保持湿润；同时，凝结芽孢杆菌代谢产生乳酸，能够促进肠胃蠕动，恢复肠动力。 凝结芽孢杆菌TBC169能分泌产生40多种酶，与糖类、蛋白质、脂类、核酸的代谢及某些特定功能相关。另外，其可以通过减少产道有害菌、促进粪便排出等途径减少毒素累积，从而解除肠毒素对肠道的毒害作用，恢复肠道消化酶的正常分泌，促进食物在肠道内的分解。 研究发现，凝结芽孢杆菌对右旋葡聚糖硫酸钠诱发的大鼠实验性溃疡性结肠炎，能显著地缩小溃疡面积，降低髓过氧化物酶活性，有明显的抗炎治疗作用。因此，对慢性肠炎等肠道炎症性
饲用枯草芽孢杆菌研究进展
饲用枯草芽孢杆菌研究进展 崔东良 （北京昕大洋科技发展有限公司） 1.枯草芽孢杆菌介绍 枯草芽孢杆菌，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。好氧菌, 可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚[1]，广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故而得名。 2.枯草芽孢杆菌的益生作用 枯草芽孢杆菌的芽孢经食道进入胃后，能顺利通过胃酸环境到达肠道，在肠道中孢子萌发形成营养细胞，并开始大量繁殖。枯草芽孢杆菌为好氧菌，进入肠道后会消耗游离氧，有利于厌氧微生物乳酸菌和双歧杆菌的生长，从而调节肠道内微生态的菌群平衡，提高机体免疫和抗病能力，减少肠道疾病的发生；枯草芽孢杆菌在肠道内繁殖会分泌淀粉酶和蛋白酶，和消化道内的消化酶一起发挥作用，帮助对营养物质的消化和吸收；其产生的维生素、氨基酸、短链脂肪酸等物质能增加小肠蠕动速度，改善肠道消化功能[2]。 3.枯草芽孢杆菌的发酵研究 饲用枯草芽孢杆菌的发酵研究的目的是为了获得大量活菌体和抗逆性强的芽孢，发酵研究的重点主要集中在如何用廉价易得的原料通过优化组合得到得高浓度的菌体，没有复杂的代谢调控和次级代谢的研究。目前关于枯草芽孢杆菌的发酵只要有液体发酵和固体发酵两种工艺。 3.1液体深层发酵 深层液体培养目前发酵工业上常用的一种发酵方法。该方法在发酵罐内完成，设备利用率高、产品质量稳定，便于自动控制，已广泛用于食品、化工、环境行业。液态深层培养是当前饲用枯草芽孢杆菌发酵研究的主要方向。周映华[3]等对枯草芽孢杆菌的发酵培养基和发酵条件进行了筛选优化，通过单因素试验及正交试验方法，确定了该枯草芽孢杆菌的优化培养基和最适发酵条件，通过发酵罐放大培养获得的菌体数量约为1.58×109 cfu/mL。刘辉[4]等通过正交优化试验对一株枯草芽孢杆菌的发酵培养基进行了优化, 当培养基中2%豆粕液浓度为15g/L、红糖浓度为20g/L、硫酸铵浓度为10g/L时, 在接种量为5%的情况下, 采用此
枯草芽孢杆菌简介及应用
枯草芽孢杆菌简介及应用 枯草芽孢杆菌简介 枯草芽孢杆菌（Bacillaceae）编号为Strain Number ACCC 11060，是芽孢杆菌属的一种。单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭，需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚[1]。早在1835 年，Ehrenberg 所描述的“Vibrio subtilis”即是现在大家熟悉的“枯草芽孢杆菌”，它是由Cohn 于1872 年正式命名的，现作为芽孢杆菌科(Bacillaceae) 的模式菌株，芽孢杆菌是人类发现最早的细菌之一。 枯草芽孢杆菌应用 枯草杆菌(B acillus Subtilis) 是一种重要的α-淀粉酶生产菌。同时枯草芽孢杆菌作为一种安全、高效、多功能和极具开发潜力的微生物菌种已广泛应用于工业、农业、医药、卫生、食品、畜牧业、水产及科研诸领域。随着经济的发展、科研水平的提高，枯草芽孢杆菌与人们的日常生活将更为密切，它也必将作为一种十分重要的工业微生物菌种越来越引起人们的普遍关注和青睐。 ①枯草芽孢杆菌在工业酶生产中的应用 工业酶的生产是工业微生物发酵的重要组成部分。枯草芽孢杆菌是当今工业酶生应用最广泛的菌种之一，据不完全统计，枯草芽孢杆菌所产的酶占整个酶市场的50 %。由于其产酶量高、种类多、安全性好和环保等优点，在现代工业生产中被广泛用作生产菌种，其发酵生产的酶已在食品、饲料、洗涤、纺织、皮革、造纸和医药等领域均发挥着十分重要的作用。 ②枯草芽孢杆菌在生物防治领域中的应用 枯草芽孢杆菌作为植物病害生防细菌之一，具有较强的防病作用美国迄今已有4 株枯草芽孢杆菌生防菌株获得环保局商品化或有限商品化生产应用许可，如美国AgraQuest公司用枯草芽孢杆菌QST713 菌株开发出活菌制剂杀菌剂SerenadeTM，并于2000 年通过美国环保局(EPA) 的登记，用于防治多种作物的白粉病、霜露病、疫病、灰霉病等病害。我国利用枯草芽孢杆菌防治植物病害的应用研究也达到了世界先进水
枯草芽孢杆菌使用技术
枯草芽孢杆菌使用技术 制剂：1000亿活芽孢/克可湿性粉剂毒性：低毒级 枯草芽孢杆菌特点： 1、绿色环保――对人畜微毒、对环境无污染、对作物安全（本剂虽属细菌活体杀菌剂，但不会侵染作物引起病 害，亦不会对作物产生药害） 2、高效广谱――对水稻稻瘟病，西瓜、黄瓜、草莓、番茄等多种作物白粉病、灰霉病，马铃薯晚疫病，大豆、油菜菌核病，瓜类、谷物、三七等作物根腐病等多种真菌性病 害具有优良防效。 3、增产提质――枯草芽孢杆菌还能够分泌促进作物生长的活性物质，使植株叶片浓绿肥厚，提高作物免疫力，增产提质效果显著，发酵过程中产生多种氨基酸，对作物有生 长调节的作用。 枯草芽孢杆菌防治机理 １、竞争作用：通过生物间争夺氧气、营养物质及竞争
排它性，形成局部生物优势种群，防止其它菌侵入；同时争夺周围菌的营养，抑制病原菌生长―起到疫苗的作用。 ２、溶菌作用：枯草芽孢杆菌吸附于病原菌的菌丝上，随着菌丝生长而生长，从而消耗病原菌的营养，使病原菌菌丝发生断裂、解体、细胞质消解，使病原菌失去进一步侵染 能力―起到寄生作用。 3、生物拮抗作用：枯草芽孢杆菌生长过程中能产生细菌素（枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌素）、有机酸、天然脂肽类化合物等，对病原菌抑制其生长或溶解其细胞壁、使细胞穿孔、畸形，最终杀死病原菌，。 ４、杀灭作用诱导作物产生抗病性、促进作物生长，增产提质。据统计，使用枯草芽孢杆菌可有效增产 5.6-20.2%。 枯草芽孢杆菌使用方法 1、稻瘟病、纹枯病、稻曲病。施药方法：水稻孕穗破口期和齐穗期各施药一次。每亩用枯草芽孢杆菌10克均匀 喷雾，喷药药间隔7-12天，
2、枯草芽孢杆菌与咪鲜胺、三环唑、井冈霉素等混用，有明显的相互增效作用。在病害集中、急性暴发时，更能显 示出混用的效果。 枯草芽孢杆菌使用注意事项 1、本品用量少，为减少浪费，兑药时应用小容器将所需用量药剂充分溶解后再倒入喷雾器中，加水至喷雾器最佳 水平线进行喷雾； 2、早上10点前或下午4点后施药，避免阳光直射，杀死芽孢。尤其是4点后用药，夜间潮湿的环境更有利于芽孢 萌发。 3、不能与铜制剂、链霉素等杀菌剂及碱性农药混用； 4、病害初期或发病前施药效果最佳，施药时注意使药 液均匀喷至作物各部位。
枯草芽孢杆菌的应用
学年论文（课程设计） 题目：枯草芽孢杆菌的应用 学院生命科学学院 学科门类理科 专业生物技术 学号2010445059 姓名陈家怡 指导教师郭立格 2012年7月6日 目录 枯草芽孢杆菌的应用 (3) 摘要 (3) ABSTRACT (4) 1.枯草芽孢杆菌的基本资料 (5)
1.1简介 (5) 2.枯草芽孢杆菌的研究现状及主要应用领域..................................................................................-5-. 2.1枯草芽孢杆菌的研究现状 (5) 2.2枯草芽孢杆菌的主要应用领域 (5) 2.2.1枯草芽孢杆菌在医药方面的应用 (5) 2.2.1.1纳豆激酶的发现及应用 (5) 2.2.1.2 脂肪酶 (6) 2.2.2枯草芽孢杆菌在农业中的应用 (6) 2.2.2.1枯草芽孢杆菌在饲料中的应用 (6) 2.2.3 枯草芽孢杆菌在动物养殖中的作用 (6) 2.2.4 枯草芽孢杆菌在农作物病虫防治中的作用 (6) 2.2.5枯草芽孢杆菌在现代科学研究中的应用 (7) 2.2.5.1枯草芽孢杆菌表达系统的研究 (7) 2.2.5.2枯草芽孢杆菌细胞质融合方面的研究 (7) 3.枯草芽孢杆菌应用中存在的问题 (7) 4.枯草芽孢杆菌制剂作用机理及应用效果 (7) 4.1枯草芽孢杆菌的作用机理 (7) 4.1.1生物夺氧 (7) 4.1.1.1拮抗致病微生物，改善体内外生态环境 (8) 4.1.1.2增强动物体的免疫功能 (8) 4.1.1.3产生多种消化酶 (8) 4.1.1.4产生多种营养物质 (8) 4.2枯草芽孢杆菌在动物生产上的应用效果 (9) 5.展望 (9) 参考文献 (9) 枯草芽孢杆菌的应用 摘要
凝结芽孢杆菌
凝结芽孢杆菌 Bacillus coagulans 关于凝固芽孢杆菌的最早记录见于Hammer B.W.在1915年发表的论文。1932年俄国科学家L. M. Horowitz-Wlassowa和N. W. Nowotelnow在其发表的科学文献中首次使用了“孢子乳杆菌”（Lactobacillus sporogenes）来描述凝固芽孢杆菌。根据第8版《伯杰氏鉴定细菌学手册》（Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology）的记载，能够形成孢子、又能产生乳酸、兼性耗氧或者需氧的杆状菌应该归于芽孢杆菌属而不应该归于乳杆菌属。1980年，学术界统一规范命名了凝结芽孢杆菌，其模式菌株为ATCC（美国典型培养物保藏中心）7050。我国青岛东海药业有限公司生产的凝结芽孢杆菌活菌片（爽舒宝），20 05年获得国家食品和药品监督管理局新药证书，同年转换为非处方药品。该菌株生长旺盛，芽孢产率高，乳酸产率高，并经中国药品生物制品检定所检定和批准使用。 1、无耐药性 经中国药品生物制品检定所检定凝固芽孢杆菌TBC169菌株对氨苄青霉素、新霉素、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟、氯霉素、呋喃唑酮（痢特灵）、复方新诺明和氟哌酸等抗菌药均敏感，不存在让医生担心的肠球菌（条件致病菌）类微生态制剂的耐药性及耐药质粒传递给有害菌的问题。 2、凝结芽孢杆菌发酵的代谢产物 口服后，凝固芽孢杆菌TBC169在盲、结和直肠定植，发酵产生大量抗菌凝固素、乳酸、氨基酸、维生素和多种消化酶。 3、耐胃酸 凝固芽孢杆菌TBC169经人工胃液（PH1.4）处理2小时后的存活率为95.29%（162/170），双歧杆菌存活率为5.20%（7.7/148），乳酸杆菌的存活率为5.50%（8.69/158）。研究表明凝结芽孢杆菌TBC169对人工胃液的酸性条件耐受性极强，其存活不受影响，明显优于其它微生态制剂，能顺利通过胃进入肠道，从而保证药效的正常发挥。 4、稳定性高
枯草芽孢杆菌的应用现状概述
生物学教学2019年(第44卷)第2期枯草芽孢杆菌的应用现状概述 闫杨刘月静陈芳！（山东聊城大学药学院聊城252059) 摘要枯草芽孢杆菌属革兰氏阳性菌#其细胞壁较厚，不含内毒素。枯草芽孢杆菌是一种应用广泛的益生菌，具有对环境友好、 对粮食安全、对人体及动植物无危害的优良特点，被广泛应用于动物饲料、净化水质、医药和植物病害的生物防治中。枯草芽孢杆 菌作为益生菌在微生物益生制剂中的应用也已展现出巨大的发展潜力。本文概述枯草芽孢杆菌应用的现状和发展趋势。 关键词枯草芽孢杆菌益生菌水质净化生物防治 芽孢杆菌是人们最早开始接触并研究的益生菌类 群，而枯草芽孢杆菌是其属中比较受关注的一种细菌。枯草芽孢杆菌是一种分布广泛、能生成抗逆性孢子、可 厌氧繁殖的革兰氏阳性菌[1]。枯草芽孢杆菌具有液化 明胶、还原硝酸盐以及水解淀粉的功能[2]，对动植物及 人体均有益无害。研究表明，枯草芽孢杆菌在动物饲 料、水产养殖业及植物病害防治等方面展现了优良的 特性，具有广阔的应用前景。 1枯草芽孢杆菌在动物饲料生产中的应用 枯草芽孢杆菌是动物饲料中常添加的益生菌种，它以芽孢的形式添加于动物饲料中。芽孢是处于休眠 状态的活细胞，能够耐受饲料加工过程中的不良环境，制备成菌剂后稳定且易存储，并且在进人动物肠道后 能够迅速复苏和繁殖。枯草芽孢杆菌在动物肠道中复 苏增殖后就可发挥其益生特性，包括改善动物肠道菌 群、增强机体免疫力以及提供多种动物所需的酶类等[3]，可以弥补动物体内源酶的不足，促进动物的生长 发育，具有显著的益生作用。例如，徐登峰等[4]的研究 表明，在动物饲料中添加枯草芽孢杆菌可以有效抑制 动物肠道中有害病原菌的生长，营造良好的肠道环境，保护了幼兔的肠黏膜，幼兔的腹泻发生率明显下降;赵 效南等[5]的研究表明，在动物饲料中添加的枯草芽孢 杆菌，能够有效调节动物肠道中菌群的种类结构，增加 肠道微生物菌群的多样性，能在抑制动物肠道中有害 菌生长的同时促进有益菌生长，进而达到促进家禽健 康生长的目的;华洵璐等[)]的研究表明，在动物饲料中 添加芽孢杆菌组合制剂后，仔猪对饲料中营养物质的 消化和吸收水平明显提高;赵玉超等[*]的研究表明，在 饲料中添加枯草芽孢杆菌能够显著影响三疣梭子蟹免 疫相关酶的活力，并能有效提高幼年三疣梭子蟹的存 活率。研究表明，在禽类、牲畜和水产动物的饲料中添 加枯草芽孢杆菌，可明显升高饲料的利用率，有效提高 动物的肠道菌群多样性，增强消化机能，有利于提高肉 品质量。 #枯草芽孢杆菌在水质净化中的应用 枯草芽孢杆菌可以作为微生物调节剂，起到改善 水质、抑制有害微生物的作用，能够创造优良的水生生态环境。水产养殖的水体由于长期高密度养殖动物，有大量的饵料残余、动物残骸和粪便沉积等污染物积 累，容易引起水质恶化进而危害养殖动物的健康，甚至 削减产量引起亏损，对水产养殖业的可持续发展危害 巨大。而枯草芽孢杆菌可以定殖在水体中，并通过营 养竞争或空间位点竞争形成优势菌群，抑制有害病原 菌（如弧菌、大肠杆菌）等有害微生物在水体中的生长 繁殖，从而改变水体和底泥中的微生物数量和结构，有 效预防水产动物因水质恶化而引起的疾病。同时，枯 草芽孢杆菌作为一种可以分泌胞外酶的菌种，其分泌 的多种酶类能够有效分解水体有机物，改善水质。例 如，枯草芽孢杆菌产生的活性物质几丁质酶、蛋白酶和 脂肪酶等，可以分解水体中的有机物，降解动物饲料中 的营养素，不但使动物充分吸收和利用饲料中的营养 物质，而且能大大改善水质;枯草芽孢杆菌还能调节养 殖水体的pH值。 $枯草芽孢杆菌在医药生产中的应用 枯草芽孢杆菌分泌的多种胞外酶已应用到许多不 同领域中，其中脂肪酶和丝氨酸纤溶蛋白酶（即纳豆激 酶）被广泛应用于医药行业。脂肪酶具有多种催化能 力，其在动物或人体的消化道中与原本存在的消化酶 类共同发挥作用，使消化道处于健康的平衡状态。纳 豆激酶是纳豆枯草芽孢杆菌分泌的一种丝氨酸蛋白 酶，该酶具有溶解血栓、改善血液循环、软化血管以及 增加血管弹性等作用。 枯草芽孢杆菌制剂能够有效促进成纤维细胞和血 管内皮细胞的增生，加速烧伤创面肉芽增生，对于预防 和治疗烧伤创面感染以及促进烧伤创面愈合具有良好 的作用[-]。早期新生儿常见高胆红素血症，目前临床 上常用蓝光照射治疗，但是黄疸程度重者常需要反复 照射，所需住院时间较长。黄永昌等[9]的研究发现，枯 草芽孢杆菌活菌胶囊的安全性较高、基本无不良反应，且口感较好，在临床上使用枯草芽孢杆菌活菌胶囊加 蓝光照射共同治疗早期新生儿高胆红素血症得到了很 好的效果，而且具有住院时间短、复发率低等特点。此 外，枯草芽孢杆菌的芽孢可作为黏膜佐剂用于疫苗的 制备，能有效刺激动物机体产生特异性的免疫反应。
枯草芽孢杆菌使用说明
枯草芽孢杆菌(活菌数200亿/400亿) 一、枯草杆菌概述：枯草芽孢杆菌是芽孢杆菌属的一种。单个细胞 0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。在遗传学研究中应用广泛，对此菌的嘌呤核苷酸的合成途径与其调节机制研究较清楚。广泛分布在土壤及腐败的有机物中，易在枯草浸汁中繁殖，故名。 二、枯草芽孢杆菌的作用机理：枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。当作用于作物或土壤时．能够在作物根际或体内定殖，并起到特定肥料效应。目前，微生物肥料在培肥地力，提高化肥利用率，抑制农作物对硝态氮、重金属、农药的吸收，净化和修复土壤，降低农作物病害发生，促进农作物秸秆和城市垃圾的腐熟利用．保护环境。以及提高农作物产品品质和食品安全等方面表现出了不可替代的作用。 三、枯草芽孢杆菌的使用说明： 特点：1.肠道定殖能力强。 2.耐氧化、耐高温、耐酸碱、耐挤压和耐温度变化，满足不同的肥料生产需求。 3.绿色、安全、高效、较少抗生素药物的使用。 成分含量：枯草芽胞杆菌有效活菌数大于200亿/克 用法用量：
贮藏：阴凉、干燥处密封保存。 保质期：密封保存不少于18个月。 四、枯草芽孢杆菌的应用范围：枯草芽孢杆菌不仅在肥料中应用比较广泛，在污水处理及生物肥发酵或发酵床制作中应用也相当广泛，是一种多功能的微生物。 1、市政和工业污水处理，工业循环水处理，腐化槽、化粪池等处理，畜牧养殖动物废料、臭味处理，粪便处理系统，垃圾、粪坑、粪池等处理； 2、畜牧、家禽、特种动物及宠物养殖，水产养殖； 3、可以与多种菌种混配，在农业生产中具有重要作用。
枯草芽孢杆菌在养殖上的应用及其作用效果
枯草芽孢杆菌在各种养殖动物上的应用及其作用效果 1.蛋鸡、种鸡 微生态饲料添加剂应用在产蛋鸡饲料能够提高蛋重，对输卵管和卵巢起到修复保健作用，并显著改善蛋壳质量(增加光洁度，减少脏蛋和斑纹等，增加蛋壳颜色等)，稳定蛋鸡生产性能延长产蛋高峰期。提高种鸡受精率孵化率，减少破蛋率。降低料蛋比0.05-0.10，降低死淘率10%以上，提高产蛋率5%-10%。 2.肉鸡 促进家禽健康成长，能有效改善肉禽羽毛光亮，酮体品质，冠红脚黄。提高饲料转化率，缩短饲养周期，增强抗病力，辅助药物治疗，加快肉禽病体康复。日增重提高7%-15%以上，降低料肉比0.05-0.15以上 3.雏禽 提高雏禽的成活率整齐度，增强品相。预防骨质疏松，促进排除胎毒和卵黄快速吸收，预防雏禽长途运输引起脱水症。预防因接种疫苗、转群、断喙、换料等应激反应。降低药费50%-80% 4.仔猪、母猪 提高母猪产奶量，增强免疫力，减少仔猪发病率。增强食欲，明显提高日增重。提高种公猪精子活力，增强母猪受精率，提高牲畜生产性能，增加仔猪成活率。日增重增加 7%-10%，降低料肉比0.05-0.15， 降低药费50%-80%。 5.奶牛、肉牛、羊、马 保持饲料品质，改善适口性;调制安全卫生的基础饲料，提高动物生产性能，促进动物健康;减少精料饲喂量，既降低因摄入浓缩料过多而导致的代谢疾病和繁殖障碍，又节约成本，提高养殖收益。杜绝胃酸中毒，能显著增强牛马羊反刍次数，加强瘤胃收缩，有效增强胃肠平滑肌蠕动，促进小肠的消化吸收及胃排空。 产奶量增加5%-10%以上，降低料奶比0.05-0.15 6.毛皮动物 改善毛皮动物毛、爪、表皮等组织生长色泽，毛发均匀度、整齐度。预防皮肤病的发生。 妊娠期出生重5%-8%，成活率提高10%-20%，腹泻率降低50%-90% 7.水产动物 强力分解和矿化水中残饵、粪便、生物残骸等有机物，减轻有机物自然腐败产生的黑臭，促进水草生长和维持高温季节的水草繁茂，为鱼类创造理想的生长环境。抑制病原菌弧菌等繁殖，增强养殖动物免疫力，显著促进鱼类生长发育，提高池塘整体经济效益，减少有机物厌氧腐败耗氧，促进水草光合作用产氧，改善鱼类的摄食和栖息环境。 吃食性鱼类增重30%以上，滤食性鱼类增重20%-25%，饲养密度提高30%以上，中国对虾育苗成活率提高50%-60% 长沙泰莱生物科技有限公司坐落于湖南省长沙市经济技术开发区，紧邻湖南农业大学和湖南农科院，科研条件得天独厚。公司依托国内著名微生物学家、菌种学博士及科研实验室，结合国内外先进的现代生物技术，集研发销售于一体，致力于服务绿色种植、有机肥料、生态养殖、生态环保等领域。 公司以开发各类农业有机肥发酵菌种、饲料发酵菌种、各类芽孢杆菌、微生态制剂等产品为核心，主营有生物有机肥发酵剂、微生物饲料发酵剂、芽孢杆菌、微生态制剂等系列产品。
枯草芽孢杆菌在养殖业中的应用研究进展
枯草芽孢杆菌在养殖业中的应用研究进展 来源：《浙江畜牧兽医》.-2010，（3）.-7-9 作者：翟继鹏，张金枝阅读次数： 264 枯草芽孢杆菌又称枯草杆菌，为革兰氏阳性需氧菌。菌形为杆状，单个细胞大小(0.7～0.8)μm×(2～3)μm，生长到一定阶段，菌体原生质失水形成椭圆形倒柱状的内生孢子，即芽孢，大小(0.6～0.9)μm×(1. 0～l.5)μm，中生到近中生，对不良环境有很强的抗逆性。进入动物消化道后，在肠道上部再次萌发。我国乃至东亚地区早已有采用枯草芽孢杆菌加工豆豉、纳豆等食物，证明是一种无害菌。 1 枯草芽孢杆菌在养殖业中的作用 1.1 提高畜禽生产性能 陈旭东(2005)、朱五文(2007)、张灵启(2008)等报道，仔猪日粮中添加枯草芽孢杆菌制剂后可明显提高断奶仔猪的生长性能。王振华(2008)报道，泌乳母牛饲喂枯草芽孢杆菌后可明显提高其产奶量，且饲喂的活菌剂量不同，提高幅度也不同；且在提高产奶量的同时，乳蛋白含量也有相应的提高。 对于禽类，潘康成等(2005)研究表明，在肉鸡的基础日粮中添加0.1%枯草芽孢杆菌制剂后，净增重、日增重均有显著提高；采食量和饲料转化率也有明显提高；鸡肉品质及氨基酸组成则有明显改善。 1.2 防治畜禽疾病 据俞宁等(2009)报道，枯草芽孢杆菌可有效防治消化道疾病，可代替抗生素预防仔猪腹泻症。据徐海燕等(2009)报道，饲粮中添加芽孢杆菌有促进雏鸡胸腺、脾脏和法氏囊发育的功能，能显著提高血清中I gG含量，增强动物的抗应激能力。与单一使用枯草芽孢杆菌相比，多菌种配合疗法更为全面、有效。H.K. Herstad等(2010)使用含枯草芽孢杆菌的多菌种混合剂治疗犬急性腹泻，疗效更为显著。 另外，枯草芽孢杆菌还有防治骨质疏松、促进凝血、抗皮肤感染等作用。然而一些学者认为，目前在防治疾病方面，以枯草芽孢杆菌为代表的益生素尚不能完全替代抗生素，需要二者配合使用，效果更为显著。 1.3 净化养殖环境 由于枯草芽孢杆菌有很强的生物同化作用，故可应用于清除畜禽养殖场的粪便恶臭，其代谢产物对蚊蝇的生长繁殖也有抑制作用。采用圈舍喷洒、加入发酵床垫料等途径，可以有效地改善饲养环境。据曾地刚等(2007)报道，采用海藻酸钙包埋固定枯草芽孢杆菌净化对虾养殖水体，可使池水的亚硝酸盐、硫化氢浓度比对照水池明显降低，总碱度显著上升。 另外，畜禽养殖过程中排放的废渣、废水、粪污等污染物也可用枯草芽孢杆菌处理，使其达到无害化
枯草芽孢杆菌源抗生素研究进展
动物医学进展,2010,31(9):97101Pr ogress in Veterinary Medicine 枯草芽孢杆菌源抗生素研究进展 王 强,彭开松,严 兵,屠利民,涂 健,祁克宗* (安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036) 摘要:枯草芽孢杆菌为革兰阳性菌,其基因组结构复杂,能产生多种抗生素,主要包括肽类物质和非肽 类物质。肽类物质可分为两类,一类由核糖体途径合成,另一类由非核糖体途径合成;非肽类物质包括聚酮化合物、氨基糖和磷脂。论文介绍了已知的枯草芽孢杆菌抗生素的结构和生物合成过程,给出一些抗生素的调控途径。概述了枯草芽孢杆菌抗生素除抗菌活性以外其他的生物学活性,为枯草芽孢杆菌抗生素的研究提供参考。 关键词:枯草芽孢杆菌;抗生素;活性;基因 中图分类号:859.796 文献标识码:A 文章编号:10075038(2010)09009705 枯草芽孢杆菌(Ba cillus sub tilis)是一种嗜热、好氧产芽孢的革兰阳性杆状细菌,其生理特征多样,易分离培养,能产生多种抗生素[12],这些抗生素包括肽类抗生素、脂肽类抗生素、磷脂类抗生素、聚酮化合物、氨基糖等[3] ,它们能克服病原菌对现有抗生素的耐药性问题,其中尤为重要的是具有极高生物工程利用价值的脂肽类和肽类抗生素。如核糖体途径合成的肽类抗生素枯草菌素(Subtilin)、Ericin 和Mersacidin 等,非核糖体途径合成的脂肽类抗生素表面活性素(sur factin)、伊枯草菌素(iturin)、丰原素(fengycin)等。研究发现,所有编码这些抗生素的基因全长共计350kb,没有一株细菌拥有所有这些基因,而且其染色体基因中平均只有4%~5%用于抗生素的表达 [4] 。本文对枯草芽孢杆菌抗生素的结 构、生物合成过程、调控途径及特殊的生物学功能做 一简要概述。 1 核糖体合成的肽类抗生素 1.1 常见的硫醚抗生素 硫醚抗生素(lantibiotics)是一种含有硫醚键独 特结构的抗生素,根据结构的不同,将硫醚抗生素分为A 、B 两个类型[5]。A 型硫醚抗生素(21个~38个氨基酸残基)具有线性化的二级结构,它可以通过电压使细胞膜形成小孔,从而进入细胞杀死革兰阳性细菌。与A 型硫醚抗生素相比,B 型硫醚抗生素具有不同的环状二级结构。值得注意的是,乳球菌 产生的乳酸链球菌素(nisin)[6] 也属于硫醚抗生素, 并且是细胞壁肽聚糖前体脂质,它既是一种重要的受体分子又是细胞膜间隙的固有成分。产硫醚抗生素的枯草芽孢杆菌具有自身保护机制来回避自身产物的作用,这种菌体自身保护机制依靠ATP 结合(AT P binding cassette,ABC)蛋白 与转运蛋白 类似的蛋白质,将硫醚抗生素转运到细胞外[7]。此外,一些产硫醚抗生素的细菌拥有细胞膜内的脂蛋白,这种脂蛋白具有隔绝的功能,阻止高浓度的硫醚抗生素接近细胞膜或者通过硫醚抗生素脂质干扰 细胞膜空隙的形成。 枯草菌素是含有32个氨基酸的五环状硫醚抗生素,它的结构与广泛应用的乳链菌素(nisin )类似[8] 。枯草菌素基因簇可以编码枯草菌素前肽SpaS 、负责翻译后形成硫醚氨酸的SpaBC,以及某些变异株含有的负责输出的转运蛋白SpaT 。另外,胞外的枯草芽孢杆菌丝氨酸蛋白酶Wpra 和Vpr 也参与了枯草菌素的合成。枯草菌素自身免疫受脂质蛋白和ABC 转运蛋白SpaFEG 的调节,它的生物合成是通过正反馈机制来控制的,在这种正反馈系统中,胞外的枯草杆菌素能够激活调控系统中的两种成分感应组氨酸激酶(Spak)和调控蛋白(SpaR),后者与能够启动枯草菌素合成基因(spaS 和spaBT C)和免疫基因(spalFEG)的启动子(spa box)核酸序列结合[9]。SpaRK 的表达受控于芽孢形成转录因子 * 收稿日期3基金项目国家高技术研究发展计划(63计划)(6Z3);科技部科技人员服务企业行动项目(G 3) 作者简介王强(),男,安徽马鞍山人,硕士研究生,主要从事动物生物医药与功能评价。*通讯作者 :2010022 :8200AA10202009JC 0041:1984-
一株凝结芽孢杆菌产芽孢条件的研究
2010No．5Serial No．218 China Brewing FPA 分别达到7105.92U/g 和1463.97U/g 。参考文献： [1]李亚澜，张建强.纤维素高效降解菌的分离鉴定及固态发酵条件的研究[D].西南交通大学硕士论文，2005. [2]姜绪林，张星元.绿色木霉固态发酵产纤维素酶的研究[D].江南大学硕士论文， 2005.[3]马旭光，张宗舟，刘星斌.航天诱变黑曲霉菌株ZM-8产纤维素酶的固态发酵条件研究[J].中国酿造，2008（23）：37-40. [4]邬敏辰， 李江华.里氏木霉固体发酵生产纤维素的研究[J].江苏食品与发酵，1998（2）：2-6. [5]GHOSE T K.Measurement of cellulose activities[J].Pure and Apply Chem,1987,58(2):257-268. [6]范艳丽，邵林广.纤维素降解菌的筛选及特性研究[D].武汉科技大学硕士论文，2004. [7]王艳昆，张建强.纤维素高效降解混合菌的筛选及其糖化发酵条件研究[D].西南交通大学硕士论文，2007. 乳酸菌是一类能利用发酵糖产生大量乳酸的细菌的通称[1]。普通乳酸菌（保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌、嗜酸乳杆菌等）不易存活，不能耐受强酸、强碱和高温，不是理想的微生物制剂。于是，寻找一种抗逆性强的乳酸菌便成了研究的重点。其中最突出的是凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans ），1989年美国FDA 公布的41种可用于饲料的安 全菌株及1992年再次批准42种中包括的5种芽孢杆菌中，凝结芽孢杆菌排在第一位，其是一种可以产生乳酸的芽孢杆菌，兼具芽孢杆菌和乳酸菌的优点，且抗逆性强，能调节动物肠道微生态平衡，促进动物消化和提高动物免疫力等，现已应用于饲料工业中[2-3]。由于最终制成的菌剂要有芽孢的形式才具有高抗性，芽孢没有新陈代谢，能耐热、紫外线、多种溶剂、酸、碱等，是较为理想的微生物制剂[4]。试验主要通过摇瓶液体发酵，优化培养基及培养条件来提高凝结芽孢杆菌菌液中芽孢数，为后期的加工制成高效的凝结芽孢杆菌制剂打下良好的基础。 1材料与检验方法1.1试验材料 菌种：凝结芽孢杆菌F5（华中农业大学农业微生物学国家重点实验室保存）。 培养基：YPD 培养基：葡萄糖20g ，胰蛋白胨20g ，酵母粉10g ，水1000mL ；调pH 值为7.0，115℃灭菌20min 。为菌种活化时用。1.2方法1.2.1菌种活化 将保存的凝结芽孢杆菌转接到YPD 试管斜面培养基中，40℃培养24h ，备用。1.2.2活菌计数法 活菌总数测定采用稀释平板计数法[5]，芽孢计数法是把菌液80℃水浴10min 后稀释平板计数。1.2.3种子液的制备 取1环活化的菌种，接入装有50mL YPD 液体培养基 一株凝结芽孢杆菌产芽孢条件的研究 杨立华，赵述淼，冷一非，梁运祥* （华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉430070） 摘要：通过培养基组成正交试验及培养条件单因素试验，对一株凝结芽孢杆菌的产芽孢条件进行了优化，优化后的培养基组成 （质量分数）为酵母粉3g/L ，蛋白胨5g/L ，牛肉膏2g/L ，MnSO 40.005g/L ，NaCl 2g/L ，K 2HPO 43g/L ，MgSO 40.02g/L 。最优的培养条件为温度40℃，初始pH 值为7.0，转速210r/min ，装液量为250mL 的三角瓶装30mL ，接种量为6%（v/v ），发酵时间为48h 。最终的芽孢数为 9.1×108 cfu/mL 。关键词：凝结芽孢杆菌；芽孢形成；培养条件；优化中图分类号：Q93-335 文献标识码：A 文章编号：0254-5071（2010）05-0096-03 Spore-forming conditions of Bacillus coagulans YANG Lihua,ZHAO Shumiao,LENG Yifei,LIANG Yunxiang* (State Key Laboratory of Agromicrobiology,Huazhong Agricultural University,Wuhan 430070,China) Abstract:The optimal conditions of spore-forming by Bacillus coagulan were investigated using the single factor and orthogonal tests in this paper.The optimal medium were as follows :yeast extract 3g/L,peptone 5g/L,beef extract 2g/L,MnSO 40.005g/L,NaCl 2g/L,K 2HPO 43g/L and MgSO 40.02g/L.The optimal culture conditions were obtained by single-factor test as follows:temperature 40℃,initial pH 7.0,rotation speed 210r/mim,volume of shaking flask 30ml/250ml,and fementation time 48h.Under these conditions,the number of spore reached 9.1×108cfu/ml.Key words ：Bacillus coagulans ;sporulation;culture conditions;optimization 收稿日期：2009-12-26 作者简介：杨立华（1985-）,女，湖北黄冈人，硕士研究生，研究方向为发酵工程；梁运祥*，教授，通讯作者。 !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! Research Report 96··
枯草芽孢杆菌的研究进展
枯草芽孢杆菌的研究进展 摘要 枯草芽孢杆菌是一类好氧型、内生抗逆孢子的革兰氏阳性杆状细菌，广泛存在于土壤、湖泊、海洋、动植物的体表，细胞壁不含内毒素，没有致病性，具有单层细胞外膜，能直接将许多蛋白分泌到培养基中，是一些重要工业酶制剂的生产菌[1]。在营养缺乏的条件下，枯草芽孢杆菌停止生长，但同时加快代谢作用，产生多种大分子的水解酶和抗生素，并诱导自身的能动性和趋化性，从而恢复生长。在极端的条件下，还可以诱导产生抗逆性很强的内源孢子，具有较强的抗逆性。作为革兰氏阳性细菌的典型代表，对于其生理、生化、遗传及分子生物学的研究已有40多年的历史。近年来，随着分子生物学和基因工程的发展，枯草芽孢杆菌作为基因工程表达系统发展迅速，并展现出良好的应用前景。 关键词：枯草芽孢杆菌；启动子；绿色荧光蛋白；载体；表达；异源基因 1 枯草芽孢杆菌基因组研究 枯草杆菌有以下一些优点: ①非致病性，不具有热源性脂多糖和细胞内毒素，具有较好的生物安全性，炭疽杆菌和蜡样芽孢杆菌除外，多数芽孢杆菌对人畜无害[2]；②遗传学特性先进，很多噬菌体和质粒适合于用作克隆载体；转化外源DNA的感受态系统也同样适用于转化重组DNA[3]。③较强的蛋白分泌能力，当分泌蛋白跨过细胞膜后，被加工和直接释放到培养基中，使回收和纯化目的蛋白较为简单[4]。④良好的发酵基础和生产技术。枯草杆菌在工业上长期被用于生产蛋白酶、α-淀粉酶以及苏云金杆菌的杀虫晶体蛋白等。枯草杆菌能在相对简单的培养基中能生长到很高的密度。细胞的生长特性和生理学性质都被广泛、深入研究。⑤细胞壁的组成简单，只含有肽聚糖和磷壁质，因此在分泌的蛋白质产品中不会混杂有胞被内毒素（热源性脂多糖），而这一点是大肠杆菌无法比拟的。 2 枯草芽孢杆菌基因表达特性 2.1 多σ因子 原核基因的转录主要由RNA聚合酶完成。该酶由5个亚基组成，二个α亚基、一个β亚基、一个β′亚基和一个Sigma（σ）因子。5个亚基组成全酶，除去σ因子为核心酶（E）。σ因子的主要功能是帮助核心酶识别特定的启动子而结合到转录的起始部位，转录开始后σ因子就不起作用了［5］。 1