病理科切片质量控制评分表

病理科切片质量控制评分表
病理科切片质量控制评分表

组织切片制备的质量控制评分标准

1.组织制片过程中,应确保切片号与蜡块号一致。

2.制片工作一般应在取材后2个工作日内完成(不含脱钙、脱脂等特殊自理的标本)。

3.制片完成后,技术人员应检查制片质量,并加帖标有本病理科病理号的标签。常规石蜡包埋—HE 染色片的优良率(甲、乙级切片所占的比例)≥90%,优级率(甲级切片所占的比例)≥35%。不合格切片应立即重做。切片质量的基本标准参见下表。

常规石蜡包埋—HE染色切片质量的基本标准

分序号

优质标准

质量缺陷减分

组织切面完整,内镜咬检、穿

刺标本切面数

1

组织稍不完整:减1~3分;不完整,:减4~10

分;未达到规定面数:减5分

②切片薄(3~5μm),厚薄均匀1

切片厚(细胞重叠),影响诊断:减6~10分;

厚薄不均匀:减3~5分

③切片无刀痕、裂隙、颤痕1

有刀痕、裂隙、颤痕,尚不影响诊断:减2分;

有刀痕、裂痕、颤痕,影响诊断:减5分

④切片平坦,无皱褶、折叠1

有皱褶或折叠,沿不影响诊断:各减2分;有

皱褶或折叠,影响诊断:各减5分

⑤切片无污染物1

有污染物:减10分

无气泡(切片与载玻片间/

盖玻片与切片、载玻片间),盖

玻片周围无胶液外溢

1

有气泡:减3分;胶液外溢:减3分

⑦透明度好1

透明度差:减1~3分;组织结构模糊:减5~7分

细胞核与细胞质染色对比清

1

细胞核着色灰淡或过蓝:减5分;红(细胞质)

与蓝(细胞核)对比不清晰:减5分

⑨切片无松散,裱贴位置适当1

切片松散:减5分;切片裱贴位置不当:减5分

切片整洁,标签端正粘牢,

编号清晰

1

切片不整洁:减3分;标签粘贴不牢:减3分;

编号不清晰:减4分

合计 100

注:切片质量分级标准:①甲级片:≥90分(优);②乙级片:75~89分(良)③丙级片:60~74分(基本合格);

④丁级片:≤59分(不合格)

4.制片过程发生意外情况时,有关技术人员和技术室负责人人应及时向病理科主任报告,并积极设法予以补救。

5.制片完成后,技术人员应将所制片与基相应的活检申请单/活检记录单、取材工作单等一并移交给病理医师。双方经核对无误后,办理移交签字手续。

年月切片质量控制评分表

编号:

术中冰冻与石蜡切片诊断准确性分析

XX医院病理科2010~2012年术中冰冻与石蜡切片诊断准确性分析 肿瘤手术中冰冻切片快速病理诊断具有十分重要的意义,它不仅是鉴别良、恶性肿瘤准确快速的方法,也是指导临床医生决定手术切除范围及制定下一步治疗方案的关键手段。比较冰冻切片快速病理诊断与石蜡切片病理诊断的符合率,分析可能导致误诊的原因。现 对我科2010年1月~2012年5月间所有冰冻切片诊断工作进行回顾性分析。 一、材料与方法 为防止制成的冰冻切片镜下组织形态发生改变,送检标本要求用干纱布包裹或置于不加任何液体的洁净容器内及时送达病理科,病理医师详细检查大体标本后取肉眼确认病变最明显区域1~2块组织,迅速置全自动恒冷切片机(英国产SHANDN )上制作切片。切片厚4μm,经酒精固定,HE 染色,普通光镜(Olympus BX41)下观察。 二、结果

三、讨论 冰冻切片与石蜡切片诊断的符合率逐年有所提高,说明我科病理医生对冰冻切片诊断的知识面及经验都有所提高。误诊原因分析

1、科外因素: ⑴.术中标本送检时放入生理盐水或其它液体中,或用湿纱布包裹标本,或术者用水冲洗标本等,做冰冻切片时由于骤冷产生大量冰晶使组织呈空网状,使病理医师误认为是粘液或脂肪组织来源的肿瘤,被迫第二次取材。 ⑵.手术医师取材不当或取材错误,可造成冰冻切片诊断的准确率和预测值之间的差异,如滑膜肉瘤送检组织为纤维结缔组织;胰腺癌时切取正常胰腺组织送检;脑胶质瘤送检脓性坏死渗出物,从客观上导致假阴性。 ⑶.有些病变由于组织结构的特殊性,冰冻切片很难确诊,例如:①乳腺硬化性病变,包括某些类型的腺病(硬化性腺病)及放射状瘢痕。有人认为良性硬化性病变与硬癌的鉴别很困难,在冷冻切片中尤其如此。我们曾遇见过乳腺硬化性腺病的假浸润现象而诊断为乳腺癌的病例。②乳腺乳头状病变,包括导管内乳头状瘤与末梢导管的乳头状瘤病。③乳腺导管上皮增生性病变,包括不典型增生。本组有一例导管上皮增生呈“搭桥”样生长,并形成不规则的间隙,误诊为恶性。这些病变有时在石蜡切片中多处取材都可能难以确诊,不能苛求在一张切片短时间内作出确切诊断,必须等待石蜡切片最后确诊,特别是对年轻患者。 2、科内因素:

病理科常规切片HE切片质量PDCA管理循环案例示范剖析

病理科常规切片(HE切片)质量PDCA管理循环案例示范病理切片质量的好坏关系到病理诊断质量和水平的高低,正确的病理诊断往往取决于准确的显微镜下观察,因此病理切片质量的好坏将直接影响诊断结果的准确性,甚至会带来错误的结果。一张好的病理切片与标本的固定、取材、脱水、包埋、切片、染色等环节有密切的关系。过去,我科一直严抓病理切片质量,每月都随机抽查30例常规切片进行质量评价,总体来说切片质量较高,基本达到诊断的要求。但是每月的切片质量检查或多或少总发现存在一些缺陷,如切片刀痕、裂隙、气泡、胶液外溢等。 目的:通过检查常规切片质量,发现存在影响切片质量的问题,查找原因,提高切片质量。 数据收集:参照《临床技术操作规范病理学分册》中的常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准(见表1),对今年1-7月常规病理切 片进行质量分级评定(每月随机抽查30例常规切片,见表2),总的优级率87.1%,优良率97.6%,总体达标。 表1 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准 质量缺陷减分满分(分)优质标准 分;不完整:310 1~组织切面完整,内镜咬组织稍不完整:减510分;未达到规定面数:减4 检、

穿刺标本切面数减~分切片薄(3~5μm),厚薄均10 切片厚(细胞重叠),影响诊断:减6~分5~3分;厚薄不均匀:减10 匀. 切片无刀痕、裂隙、颤痕10 有刀痕、裂隙、颤痕,尚不影响诊断:减2分;有刀痕、裂隙、颤痕,影响诊断:减5分 切片平坦,无皱褶、折叠10 有皱褶或折叠,尚不影响诊断:各减2分;有皱褶折或折叠,影响诊断:各减5分 切片无污染10 有污染:减10分 有气泡:减3无气泡(切片与载玻片间分;胶液外溢:减10 3分 ,载玻片间)/盖片与切片、盖片周围无胶液外溢10 透明度好透明度差:减1~3分;组织结构模糊:减5~7分 细胞核与细胞浆染色对10 细胞核着色灰淡或过蓝:减5分红(细胞浆)与蓝(比清晰细胞核)对比不清晰:减5分 切片无松散,裱贴位置适10 切片松散:减5分;切片裱贴位置不当:减5分当10 切片不整洁:减切片整洁,标签端正粘3分;标签粘贴不牢:减3牢,编号清晰分;编号不清晰:减4分 计100 合 注:切片质量分级标准:①甲级片:≥90分(优);②乙级片:75~89分(良);③丙分(不合格)59≤;④丁级片:分(基本合格)74~60级片:

检验科质量与安全管理内容及质量控制指标

检验科质量与安全管理内容及质量控制指标 一、质量管理内容 1、质量管理制度用以监控和评价每个方法的分析过程质量,确保病人检验结果的准确性和可靠性。 2、实验室的场地和环境条件必须与提供的检验服务相适应。 3、使用良好的测定方法、设备、仪器、试剂、材料和辅助品,保证获得准确而可靠的检验结果。 4、操作人员上岗前应仔细阅读仪器说明书或接受良好的培训,必须有高度的责任心和事业心。 5、建立操作手册,按此手册进行检验操作。所有操作手册必须由实验室主任认可、签名和注明日期。方法的任何改变都必须由主任认可、签名、注明日期。 6、在引用新方法对病人样品检验前必须建立或认可每个方法的下列操作特性:准确度、精密度、灵敏度、线性范围、干扰试验、回收试验、特异性,病人检验结果的可报告范围、参考范围等。并建立校准和控制方法。新方法的材料应完整。由主任认可、签名后方可生效。 7、定期进行设备保养和功能检查,并建立仪器操作手册以使设备、仪器和检测系统保持完善的实验性能,保证准确和可靠的结果和报告。 8、明确在标本采集前对病人的要求,保证收集符合要求的标本。建立标本采集、运送、接收、登记及处理的质量管理制度,确保分析前标本准确无误。 9、按照检验申请单(书面或计算机打印)申请的项目作检验。检验申请记录须保存2年以上。 10、定期进行校准和校准确认,在校准确认中没有符合实验室规定的可接受范围,必须重新校准并做好记录,备案。 11、各专业组制定测定方法的质量控制制度。包括所需的质控品的类型、使用频率、使用的控制规则、靶值和控制范围。每天报告病人检验结果前,质控结果必须在控制下。失控必须有记录,有纠正措施。保留所有质量控制工作的记录,保存期2年。质控品和校准品结果不在实验室建立的可接受范围内时应对最后一次可接受控制结果以后或者这次失控的所有病人结果作评价,确定这些病人结果是否受影响;实验室是否必须要重做,以保证结果准确、可靠。 12、认真参加由国家卫生部临床检验中心及省临床检验中心组织的各个检验专业的临床检验室间质评计划。保留所有记录材料,原始记录保留不少于2年。 13、检验报告必须及时、完整地发出给申请者。若不能在原来规定的时间内报告病人结果,必须根据病人检验要求的紧迫程度,采取措施。发现已报告的病人结果有问题时必须立即通知有关医师和临床部门并尽快提供已校正的准确结果。检验结果记录保存2年以上。 14、定期征询临床医护人员对本科结果的评价,及时纠正潜在引起实验偏差的趋势,不断改进实验室的工作。 二、质量管理指标 谷丙转氨酶靶值±20% 天门冬氨酸氨基转移酶靶值±20%

快速石蜡切片在临床病理中的应用总结

快速石蜡切片在临床病理中的应用总结 发表时间:2013-10-29T14:40:51.750Z 来源:《中外健康文摘》2013年第28期供稿作者:杨麦青王雪冬[导读] 快速诊断结果与常规病理诊断结果符合率100%。自我院开展快速病理诊断以来未出现差错情况。 杨麦青王雪冬(山东省昌邑市人民医院病理科 261300) 【中图分类号】R197.3【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)28-0403-01 1.资料和对象 我院自开展快速石蜡切片至今5000余例临床病例。 2.讨论 快速病理诊断在临床手术中应用的越来越广泛。随着临床手术新技术项目的开展,临床手术科室在很多手术中期待着以快速病理诊断对病变进行定性,决定手术方式,快速病理诊断在这些过程中起着至关重要的作用。近几年来快速病理诊断的病例逐年增多,并且在基层医院也日益普及,目前在综合性医院中冰冻切片是最常用的快速诊断技术,但是一些基层医院尚不具备冰冻切片的条件,并且冰冻切片机价格比较贵,冰冻切片的组织结构和细胞形态与石蜡切片相比较清晰度差,对于基层医院而言,由于送检的病例标本比较局限、片面,冰冻切片的诊断较石蜡切片要困难得多,使冰冻切片技术的应用受到一定限制。所以快速石蜡切片制做无疑是弥补这一缺欠的最好方法。我院应用超声波快速组织处理仪,将改进的快速石蜡切片技术应用于临床,从接收标本至发出病理诊断结果时间控制在30分钟之内,取得了良好的成效。回顾5000余例快速石蜡病例,我们成功地为临床手术科室提供便利,取得了较为满意的效果,并总结了相关经验,现总结报告如下。 (一)快速石蜡详细过程 (1)快速石蜡预约由临床大夫提前一天以书面形式告知病理科,使病理科大夫对手术情况及患者病情有所了解,并通知家属签署快速石蜡知情同意书,根据临床大夫预约手术时间提前将机器开启预热。 (2)术中由家属迅速将切除的标本送至病理科。 (3)由病理诊断医师核对标本并取材,取材要求:为了易于脱水浸蜡,取材组织块必须规整且不能太大,大小1.5cm×1.0cm,厚度<2mm,一般切取组织2块。将所取组织块放入预热好(水温设定为75℃)的超声波快速组织处理仪中将组织按照既定程序逐步处理,第一步:20%甲醛固定液固定7分钟,在振荡过程中将组织取出整修,削得更薄些。第二步:将已经固定的组织取出放在滤纸上吸一下,放入丙酮中脱水5分钟。第三步:将已经脱水的组织取出。直接放入石蜡溶液中浸蜡5分钟。将已经浸蜡的组织包埋在事先准备好的蜡块中,放入冰箱冷却后进行切片。快速HE染色,此过程需5分钟左右,然后阅片,将诊断意见以书面形式通知手术医生。剩余标本行常规病理检查并与快速诊断结果相对比。 (二)对比总结 (1)与快速冰冻切片相对比,从时间而言:快速石蜡切片出具结果时间要比快速冰冻推迟10分钟,但相对于基层医院而言,该设备价格便宜,且取材标本比较局限,能够满足临床需要。 (2)快速诊断结果与常规病理诊断结果相比,除去特殊标本如:标本比较大、脂肪比较多等不易制片结果待常规情况。快速诊断结果与常规病理诊断结果符合率100%。自我院开展快速病理诊断以来未出现差错情况。 3.总结 综上所述,快速石蜡切片与冰冻切片相比较,对于基层医院而言,基本能够满足临床需要,在病理科向更深远的层面发展前,积累了丰富的诊断经验,对于病理科的发展和临床手术科室的发展都起到了至关重要的作用。使病理科诊断医师能够掌握更多的病历资料,为适应以后更多快速病理的诊断积累经验。为将来娴熟的开展快速冰冻切片奠定基础。

XX医院病理科质量管理制度

病理科工作制度 制订日期: 2014-6-15 修订日期: 病理科质量管理制度 一、根据卫生部和省市、医院主管部门文件精神及综合医院评价标准,制定明确质量管理目标; 二、成立病理科质量检查小组,由科主任担任组长,督促本科人员认真执行规章制度和技术操作规程,并组织进行质量检查;由经验丰富的高年资医师和技师数人担任组员,根据分工每月进行质量检查,及时发现问题并予以纠正。 三、制订病理科规范化制度 四、规范化制度是质量管理的标准,只有制订切实可行、行之有效的各项规章制度和管理标准,才能保障工作的规范化和标准化。 五、坚持室内质控,实行标准化管理 室内质控系指科室内部根据医院病理科规章制度所作的自我检查、自我评估,并记录、讨论、分析检查结果,认真总结不足,不断提高。它是病理科质控工作的基础,也是保证病理科各项规章制度得以执行的重要措施。室内质控检查内容及检查方法: (一)常规病理诊断正确率:由高年资医生复验病理诊断结果。 (二)冰冻与石蜡切片诊断符合率:核对快速冰冻检查结果与最后诊断。 (三)冰冻与石蜡切片诊断发出报告时间统计。 (四)切片优良率:根据每日切片质量检查记录,统计每月切片优良率。 (五)病理报告书写:检查病理送检单及病理报告单。 (六)大体标本检查及记录:检查送检单中标本检查及取材记录。 (七)仪器使用及保养:检查各种仪器的使用及保养记录。 六、搞好室间质控评价活动,推动全面质控工作的开展 室间质控评价活动是各级医院病理科间的病理质量的评比和交流,是推动各级医院病理科质控工作全面提高的重要环节。评价内容应包括科室管理、技术及诊断质量、人员培养及规章制度执行情况等方面的综合评价。评价方式可采用自查、互查、地区交叉检查以及组织专家实地考查等多种形式,以尽量体现所检科室实际工作水平及状况。 附:病理科质量与安全控制指标 病理诊断准确率≥ 95% 冰冻切片检查与常规病理诊断符合率≥ 90% HE切片优良率≥ 94% 临床主要诊断、病理诊断符合率≥ 60% 快速病理诊断结果出具时间≤ 30分钟 大体标本常规病理诊断结果出具时间≤ 5个工作日 病理报告书写合格率≥ 90% 细胞学诊断结果出具时间≤ 2个工作日 1

检验科质量控制内容及标准

七、检验科质量控制内容及标准 (一)科室管理 1、严格执行医疗卫生管理法律、法规和规章。 (1)无非卫生技术人员从事检测活动。 (2)所有在科室执业的医师、技师均已注册。 (3)执业医师、技师无超范围执业。 (4)无虚假、违法医疗广告。 (5)实验室工作客观、公正、不受任何部门及经济利益影响。 2、建立健全各项规章制度和岗位职责。 (1)科室制定有健全的规章制度和各级各类员工的岗位职责。重点包括传染病疫情报告,急诊检验,标本接收与处理管理,防止院内感染制度,检验质量管理,仪器使用、校准及维护保养制度,试剂管理,危险品及废弃物管理,差错事故等级管理,教育培训制度,信息反馈制度,实验室安全管理,生物安全防护管理制度,检验报告审核与发放,检验结果登记等。(2)本岗位的工作人员熟知其工作职责与相关规章制度。重点是《中华人民共和国执业医师法》、《中华人民共和国传染病防治法》、《医疗事故处理条件》、《医疗工作制度》、《突发公共卫生事件应急条例》、《医疗废物管理条例》以及《医疗机构临床试验室管理办法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》、《医院感染管理办法》。 3、医务人员严格遵守医疗卫生管理法律、法规、规章诊疗

护理规范和常规。 医务人员在临床的检验活动中能遵循与其执业活动相关的主要法律、法规、规章、规范和常规。 4、制定本科室突发事件应急预案(医疗和非医疗事件)及医疗救援任务。 (1)制定有本科室突发事件应急预案。 (2)有与相关部门或上级主管部门的联系渠道 5、建立卫生专业技术人员梯队建设制度、继续教育制度并组织实施。 (1)科室有专业技术人员梯队建设目标、制度和实施措施。 (2)科室有专业技术人员继续教育的培训计划和实施目标 (3)每年对本科室专业技术人员的专科技术、科研、继续教育进行考评。 6、科主任/学科带头人的专业技术水平领先。 (1)科主任/学科带头人具备承担县市级以上(含县市级)继续教育项目或科研的能力 (2)科主任/学科带头人在本专业县市级以上(含县市级)学术组织任委员以上职务。 (二)患者服务与患者安全 1、医疗服务的可及性与连贯性。 (1)应尽力使患者从标本采集、检验、取报告具有连贯性。 (2)各项医疗活动均符合法律、法规、条例、部门规章和行业

HE石蜡切片步骤,免疫组化步骤.

HE染色 1.取材 切取的组织块不宜太大,以利于固定剂穿透,通常以6mm×6mm×5mm为宜。 注意事项: (1取材动作要迅速,不宜作太久的拖延以免组织细胞的成分、结构等发生变化。 (2切片材料应根据需要观察的部位进行选,尽可能不要损伤所需要的部分。 2.固定 将切好的组织用生理盐水组织洗3次,立即投入10%中性福尔马林固定液或4%多聚甲醛中固定,固定36小时。 注意事项: (1一般固定液,都以新配为好,配好后应贮存在阴凉处,不宜放在日光下,以免引起化学变化,失去固定作用。 (2有些混合固定液的成份之间会发生氧化还原作用,一定要在使用前才混合,如果混合太早,固定时就没有作用了。 (3固定材料时,固定液必须充足,一般为材料块的20~30倍,有些水分多的材料,中间应更换1-2次新液。 (4材料固定完毕后,保存于严密紧塞或加盖的容器里,同时在容器外上标签,并随同材料在溶液中投入相应的标签,以免相互混淆。标签上注明固定液、材料来源、日期等。标签上的文字,应用黑色铅笔或绘图黑墨水书写。 脱钙72小时中间不换液是样本30倍中杉金桥(进口脱钙液

镊子触质粒由硬变韧性为准。 (美:固定3-5天根据组织大小确定天数,越大固定时间越长。 3. 洗涤 材料经固定后,PBS或双蒸水冲洗约3小时。(20,30,30,60 (美:流水冲洗约4小时 4. 脱水 材料依次经80%、90%、100%、100%各级乙醇溶液脱水,各30min 注意事项: (1脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。 (2在更换高一级的脱水剂时,最好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。 (3在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。 (4在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。 (5如需过夜,应停留在80%酒精中。 (6脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象 (美:80%的酒精×2小时 95%的酒精×2小时 100%的酒精×2小时×2

2018年临床检验医疗质量控制指标

2018年临床检验医疗质量控制指标

附件二2018年临床检验医疗质量控制指标 室间质量评价上报表 一、医院和实验室基本信息 1.实验室所在机构性质? A 公立(继续第2题,跳过第3题) B 私立 (跳过第2题,继续第3题) 2.若选公立,则您实验室所在机构等级及类 型? A 三甲综合B三甲专科 C 三乙综合 D 三乙专科 E 二甲综合 F 二甲专科 G 二乙综合H 二乙专科I 二级以下医 院J 其他 3.若选私立,则您实验室所在机构等级及类 型? A民营医院B独立实验室C体检中心 D门诊部E其他 4.实验室所在医院床位数? A 0-500 B 501-1000 C 1001-1500 D 1501-2000 E 2000以上 5.实验室所在医院是否有LIS(实验室信息系

统)和HIS(医院信息系统)? A有LIS和HIS B有LIS,无HIS C无LIS,有HIS D无LIS和HIS LIS系统厂商为:,该厂商联 系人,联系电话 HIS系统厂商为: 6.实验室所在医院日均门诊量?()人次 7.实验室建筑面积?m2 8.实验室所有仪器设备总值? 万元 9.医院年业务额?万元/年;实验 室年业务额?万元/年 10.本实验室目前为止已开展检验项目总数 (不包括外送)项 其中:自动化仪器检测项目数? 项 手工检测项目数? 项 各专业检验项目数: 临检项,占总业务额百分比% 生化项,占总业务额百分

比% 免疫项,占总业务额百分比% 微生物项,占总业务额百分比% 基因扩增项,占总业务额百分比% 其他项,占总业务额百分比% 本实验室外送项目项 11.科室人员组成 实验室负责人:性别年龄学 位 学历职称已任职时间年 实验室总人数 人员数比例(%) 职称正高职称 副高职称 中级职称 初级及以下 学历博士 硕士 本科 大专及以下

动物病理学学习心得

动物病理学学习心得 我认为要想成为一位称职的兽医,必须学好各门专业课,而动物病理学又是重中之重。通过近一学期的学习,我了解到动物病理学是研究动物疾病的原因,发生机制及其发展过程中各器官组织功能,代谢和形态结构等变化的一门科学,由病理解剖学和病理生理学两门科学组成。 大二上学期我们主要学习了病理解剖学,在郑明学老师的引导下,我们学习了疾病的概念,疾病发生的原因,疾病的经过和转归,血液循环障碍,细胞与组织的损伤,炎症,败血症,肺炎,非化脓性脑炎,肾小球肾炎等一些最基本,最普遍的病理变化。最后我们做了一个病鸡解剖的实验。通过一个学期的学习我感到受益匪浅。接下来是我对这一学期所学知识的大体总结。 首先,我了解到疾病是机体与互作用产生的损伤与抗损伤的复杂斗争过程,在此过程中机体对环境的适应能力下降,动物的生产力降低。疾病有如下特点;一是在一定条件下由病因作用于机体而引起的;二疾病是完整机体的反应;三疾病是一个矛盾斗争的过程;四是生产力降低是疾病的一个标准。疾病有多种分类方法,依据病因分类可分为传染病,寄生虫病,普通病。依据病程长短可为最急性病,急性病,亚急性病,慢性病。依据治疗方法分类可分为内科病和外科病。疾病发展有四个阶段,分别为潜伏期,前驱期,明显期,终结期。致病因素有外因和内因之分,外因有生物性致病因素,化学性致病因素,物理性致病因素,机械性致病因素,营养型致病因素。内因主要包括机体对外界致病因素的反应性,机体的防御能力。 然后,我学习了一系列最基本的病理变化。其中有血液循环障碍,细胞与组织损伤,炎症,肿瘤。这些病理变化在绝大部分疾病中都有体现。 血液循环是指血液在心血管系统周而复始的流动过程。它是机体的重要生理机能之一,他通过血液循环向各器官及组织输送氧气,营养物质,激素和抗体等,同时又不断从器官和组织代谢产物,从而保证机体物质代谢正常进行。血液循环受神经和体液因素调节,并与其他系统之间有着密切联系。无论是心血管系统本身及其调节过程发生损伤或障碍,还是血液,呼吸系统出现病理过程,都可使血液循环障碍与其病理过程也有着密切关系。血液循环障碍根据其发生原因与波及范围不同,可分为全身性和局部性两类。局部血液循环障碍表现为局部血量改变引起的充血和缺血,血管壁的通透性和完整性改变引起的血栓形成和栓塞,由于缺血而引起的坏死。充血指某些器官或局部组织血液含量增多的现象。可分为静脉性充血和动脉性充血两种。血液流出心脏或血管的现象称为出血。血液流至体外称为外出血,血液流入组织间隙或体腔内称为内出血。血栓形成指在活体心脏或血管内流动的血液形成固体物质的过程。所形成的固体物质称为血栓。栓塞指正常血液中不存在的物质随血液运行而阻塞血管的过程。引起栓塞的物质称为栓子。局部缺血指局部组织或器官血液量供应不足或缺失。个梗死指局部组织或器官因动脉血流断绝而引起的坏死。 组织与细胞损伤包括萎缩,变性,坏死。萎缩是指已经发育成熟的组织,器官,细胞,由于物质代谢障碍而体积缩小,功能减退的变化过程。是由于组成该器官的实质细胞体积缩小或数量减少所致。萎缩的病理变化为眼观全身脂肪,心冠脂肪,肾周围脂肪萎缩变为灰白色或灰黄色,呈半透明胶冻样,即发生浆液萎缩。实质器官体积成比例缩小,器官边缘变薄变锐,被膜增厚皱缩,重量减轻,质度变硬,管状器官管壁变薄,管腔变大,出现衰竭症象逐渐消弱严重贫血,被毛粗乱无光,全身水肿。镜检﹕实质细胞体积减小,数量减少,线粒体,内质网等细胞器数量减少,溶酶体和自噬体增多。变性是在致病因素的作用下,物质代谢障碍而引起细胞内或细胞间出现某些异常物质或正常物质蓄积过度的现象,细胞变性有颗

病理科质控制度

病理科质控制度 一、质量控制与管理制度总则全面规范化质控管理是病理科确保优质服务、优质医疗、高效低耗的关键环节,也是病理科日常工作的一项重要内容。它包括室内质控和室间评价两个方面。 (一)建立质量控制管理组织建立质量控制管理组织是开展质控管理工作的关键。根据我院实际情况,组建了由质控科指导的医院病理科质控小组。质控小组成员赵超,李海博。 (二)制订病理科规范化制度标准化工作是质量管理的基础工作,医院在广泛征求专家、病理科工作人员及群众意见,进行认真调查研究的基础上,系统制订病理科切实可行、行之有效的各项规章制度和管理标准,并可组织编印成册,下发各科室,从而使标准化管理行有依据,查有出处。 (三)开展质量教育活动,树立质量意识质量教育的深入与否对质量意识的树立和质控工作好坏有重要的影响。现代的科学管理制度必须由具有高度责任心和严谨科学态度的人来执行。只有充分提高全体人员的质量意识,才能使质量管理富有成效。因此我院利用多形式、多渠道进行全员质量意识教育,做好病理科工作人员的培训工作,推动全面质控管工作的开展。 (四)坚持室内质控,实行标准化管理室内质控系指科室内部按各级医院病理科规定要求所作的自我检查、自我评估,从而达到及时发扬优点、克服缺点、不断提高的目的。它是病理科质控工作的基础,

也是保证病理科项规章制度得以执行的重要措施。室内质控主要包括科室管理、切片质量和诊断质量等诸多环节的质量控制。医院制定了明确的质量考核指标和考核办法,并有配套的整改措施和整改结果,从而使室内质控落到实处。 (五)搞好室间质控评价活动,推动全面质控工作的开展室间质控评价活动是各级医院病理科间的病理质量的评比和交流,是推动我医院病理科质控工作全面提高的重要环节。我院病理科在室内质控基础上,本着执行规范、严格检查、注重整改、虚心受教、真诚交流的原则积极参加室间评价活动并形成制度。采用自查、互查及组织专家实地考查等多种形式对包括科室管理、技术及诊断质量、人员培养及规章制度执行情况等方面的内容进行综合评价,对于评价中存在的问题,要及时进行分析研究,及时进行整改,从而提高我院病理科质控工作的整体水平。 二、质量管理小组的组成和职能 (一)病理科质量管理组的组成:赵超,李海博。 (二)质量管理小组的职能: 1.定期检查(每季度)病理科病理切片的优良率、冷冻切片诊断的复合率、小标本与大体标本诊断的复合率。 2.检查各类病理报告完成的时间及抽查病理报告完成质量。3.检查各类病理资料是否按期归档。 4.制定和修订病理科各类技术操作常规和诊断常规、各类技术操作标准和诊断标准、各类管理常规和管理标准、技术操作流程和病理诊断流程、医疗设备操作和维护常规。 5.负责科室医疗安全方面的工作。 6.负责医疗文件的收

病理科切片质量控制评分表

组织切片制备的质量控制评分标准 1.组织制片过程中,应确保切片号与蜡块号一致。 2.制片工作一般应在取材后2个工作日内完成(不含脱钙、脱脂等特殊 自理的标本)。 3.制片完成后,技术人员应检查制片质量,并加帖标有本病理 科病理号的标签。常规石蜡包埋—HE染色片的优良率(甲、乙级 切片所占的比例)≥90%,优级率(甲级切片所占的比例)≥35%。 不合格切片应立即重做。切片质量的基本标准参见下表。 常规石蜡包埋—HE染色切片质量的基本标准 评分 序号优质标准 满 分 质量缺陷减分 ①组织切面完整,内镜咬检、 穿刺标本切面数10 组织稍不完整:减1~3分;不完整,: 减4~10分;未达到规定面数:减5 分 ② 切片薄(3~5μm),厚薄 均匀10 切片厚(细胞重叠),影响诊断:减6~10 分;厚薄不均匀:减3~5分 ③切片无刀痕、裂隙、颤痕 10 有刀痕、裂隙、颤痕,尚不影响诊断: 减2分;有刀痕、裂痕、颤痕,影响 诊断:减5分 ④切片平坦,无皱褶、折叠 10 有皱褶或折叠,沿不影响诊断:各减2 分;有皱褶或折叠,影响诊断:各减 5分 ⑤切片无污染物10 有污染物:减10分 ⑥无气泡(切片与载玻片间/10 有气泡:减3分;胶液外溢:减3分

盖玻片与切片、载玻片间),盖玻片周围无胶液 外溢 ⑦透明度好 10 透明度差:减1~3分;组织结构模糊: 减5~7分 ⑧细胞核与细胞质染色对比 清晰10 细胞核着色灰淡或过蓝:减5分;红(细 胞质)与蓝(细胞核)对比不清晰: 减5分 ⑨ 切片无松散,裱贴位置适 当10 切片松散:减5分;切片裱贴位置不当: 减5分 ⑩ 切片整洁,标签端正粘牢, 编号清晰10 切片不整洁:减3分;标签粘贴不牢:减3分;编号不清晰:减4分 合计100 注:切片质量分级标准:①甲级片:≥90分(优);②乙级片:75~89分(良)③丙级片:60~74分(基本合 格); ④丁级片:≤59分(不合格) 4.制片过程发生意外情况时,有关技术人员和技术室负责人人 应及时向病理科主任报告,并积极设法予以补救。 5.制片完成后,技术人员应将所制片与基相应的活检申请单/ 活检记录单、取材工作单等一并移交给病理医师。双方经核 对无误后,办理移交签字手续。 年 编号:

病理科质控标准

病理科质控标准 常规 1、标本接收必须登记、签名、十三查十三对。 2、取材医生在取材时应与记录员对每一个标本进行查对,取材结束时还应该核对取材数 量。 3、包埋时取材医生与技术员应同时在场,确保包埋准确无误。 4、切片染色时每一批切片应进行镜下评价,并定期结合染色剂及染色时间进行分析、总结, 最终找出原因。 5、制片完成后应接受切片的医生应与制片技术员共同根据工作清单进行切片的核对并签 名。 6、诊断医生在诊断时应查对患者申请单与切片信息是否一致,如果遇到镜下诊断与临床 诊断不符的时候应再次核对申请单与切片信息是否一致,如果有必要应及时与临床送检医生联系。 7、诊断医生镜下判断需要免疫组化进一步诊断的病例,并告知技术员,诊断医生找出相应 的蜡块送达免疫组化室。 8、认真执行三级报告制度:初诊医生可对典型、常见病例做出诊断;疑难或初诊医生有疑 问的应由上级医生诊断;如果上级医生也无法做出的诊断应交由全科医生会诊(专家参与)。 9、报告发送时应做好登记及签收工作。 术中冰冻 1、手术室送达的标本及申请单应十三查、十三对。 2、收到标本后要及时做好登记及接收签名。 3、取材医生在取材时应与记录员对标本进行查对,查看送检标本与申请单注明的是否一 致。 4、技术员应该在15分钟内完成制片,送到诊断室。 5、诊断医生应查对申请单与切片是否一致。 6、15分钟内做出诊断并打印报告。 7、报告送达手术室时必须要有接收人签字。 制片质量 1、每天诊断医生应粗略的对制片质量进行简单的评价并记录。 2、每2个月科内医疗质量与安全管理委员会对两个月的切片进行抽查按照制片评判标准进 行评判(百分制)。 3、技术组应有人参加制片质量评价。 术中冰冻中遇到与临床不符时 1、检查申请单与切片是否一致,如果一致应看切片镜下形态与临床送检标本是否一致。 2、如果一致可请别的有资质的医生再次复查一遍。 3、如果还是一致,可发出病理报告并及时与临床沟通。

临床检验医疗质量控制指标

附件二2018年临床检验医疗质量控制指标 室间质量评价上报表 一、医院和实验室基本信息 1.实验室所在机构性质? A 公立(继续第2题,跳过第3题) B 私立(跳过第2题,继续第3题) 2.若选公立,则您实验室所在机构等级及类型? A 三甲综合B三甲专科 C 三乙综合 D 三乙专科 E 二甲综合 F 二甲专科 G 二乙综合H 二乙专科I 二级以下医院J 其他 3.若选私立,则您实验室所在机构等级及类型? A民营医院B独立实验室C体检中心D门诊部E其他 4.实验室所在医院床位数? A 0-500 B 501-1000 C 1001-1500 D 1501-2000 E 2000以上 5.实验室所在医院是否有LIS(实验室信息系统)和HIS(医院信息系统)? A有LIS和HIS B有LIS,无HIS C无LIS,有HIS D无LIS和HIS LIS系统厂商为:,该厂商联系人,联系电话 HIS系统厂商为: 6.实验室所在医院日均门诊量?()人次 7.实验室建筑面积?m2 8.实验室所有仪器设备总值?万元 9.医院年业务额?万元/年;实验室年业务额?万元/年 10.本实验室目前为止已开展检验项目总数(不包括外送)项 其中:自动化仪器检测项目数?项 手工检测项目数?项 各专业检验项目数: 临检项,占总业务额百分比% 生化项,占总业务额百分比% 免疫项,占总业务额百分比% 微生物项,占总业务额百分比% 基因扩增项,占总业务额百分比% 其他项,占总业务额百分比% 本实验室外送项目项 11.科室人员组成 实验室负责人:性别年龄学位 学历职称已任职时间年

实验室总人数 二、检验全过程质量指标 您实验室LIS是否纳入质量指标相关数据采集与统计:□是□否 注意事项:如您实验室无某条目项目数据,请填写“未统计”,如数据为0,请填写数字“0” 1. 月度指标

病理专业医疗质量控制指标(2015版)

附件5 病理专业医疗质量控制指标 (2015年版) 一、每百病床病理医师数 定义:平均每100实际开放病床病理医师的数量。 计算公式: 每百病床病理医师数= 病理医师数 同期该医疗机构实际开放床位数/100 意义:反映病理医师资源配置情况。 二、每百病床病理技术人员数 定义:病理技术人员是指进行病理切片、染色、免疫组化及分子病理等工作的专业技术人员。每百病床病理技术人员数,是指平均每100实际开放病床病理技术人员的数量。 计算公式: 每百病床病理技术人员数= 病理技术人员数 同期该医疗机构实际开放床位数/100意义:反映病理技术人员资源配置情况。 三、标本规化固定率

定义:标本规化固定是指病理标本及时按行业推荐方法切开,以足量10%中性缓冲福尔马林充分固定。有特殊要求者可使用行业规许可的其它固定液。标本规化固定率是指规化固定的标本数占同期标本总数的比例。 计算公式: 标本规化固定率= 规化固定的标本数 ×100% 同期标本总数 意义:反映处理标本是否及时规的重要指标。 四、HE染色切片优良率 定义:HE染色优良切片是指达到行业优良标准要求的HE染色切片。HE染色优良切片优良率,是指HE染色优良切片数占同期HE染色切片总数的比例。 计算公式: ×100% HE染色切片优良率= HE染色优良切片数 同期HE染色切片总数 意义:反映病理科HE染色、制片质量的重要指标。 五、免疫组化染色切片优良率 定义:免疫组化染色优良切片是指达到行业优良标准要求的免疫组化染色切片。免疫组化染色优良切片优良率,是

指免疫组化染色优良切片数占同期免疫组化染色切片总数的比例。 计算公式: 免疫组化染色切片优良率= 免疫组化染色优良切片数同期免疫组化染色切片总数×100% 意义:反映病理科免疫组化染色、制片质量的重要指标。 六、术中快速病理诊断及时率 定义:在规定时间,完成术中快速病理诊断报告的标本数占同期术中快速病理诊断标本总数的比例。规定时间是指单例标本术中快速病理诊断报告在收到标本后30分钟完成。若前一例标本术中快速病理诊断报告未完成,新标本术中快速病理诊断报告在收到标本后45分钟完成。 计算公式: 术中快速病理诊断及时率= 在规定时间完成 术中快速病理诊断报告的标本数 同期术中快速病理诊断标本总数×100% 意义:反映病理科术中快速病理诊断及时率的重要指标。 七、组织病理诊断及时率

1-附件一2019年全国临床检验医疗质量控制指标室间质量评价活动 ...

附件一2019年全国临床检验医疗质量控制指标 室间质量评价活动安排及注意事项 2019年临床检验质量指标室间质量评价共包含20项必填质量指标和29项选填质量指标。 一、评价质量指标与数据采集时间 1)月度指标34项(12项必填+22项选填)12项(以月为单位统计): 必填项:标本类型错误率、标本容器错误率、标本采集量错误率、抗凝标本凝集率、标本溶血率、标本丢失率、血培养污染率、检验前周转时间、实验室内周转时间、检验报告不正确率、危急值通报率、危急值通报及时率; 选填项:申请单标识错误率、实验室人员申请单抄录错误率、非实验室人员申请单抄录错误率、门诊检验申请单无临床问题率、门诊检验申请单无法辨识率、住院检验申请单无法辨识率、门诊检验申请单不适当率、住院检验申请单不适当率、标本标识错误率、标本检验前储存不适当率、标本运输途中损坏率、标本运输温度不适当率、标本运输时间过长率、标本采集时机不正确率、实验室人员导致的标本重新采集率、非实验室人员导致的标本重新采集率、微生物标本污染率、信息系统录入结果错误率、手工抄写结果错误率、检验结果纠正率、检验报告发送超时率、解释性注释有效率。 第1次调查要求回顾采集和统计2018年12月份数据;第2次调查要求回顾采集和统计2019年6月份数据。 2)年度指标15项(8项必填+7项选填)(以年为单位统计): 必填项:室内质控项目开展率、室内质控项目变异系数不合格率、室间质评项目参加率、室间质评项目不合格率、实验室间比对率(用于无室间质评计划检验项目)、分析设备故障数、国家级室间质评项目参加率(三级公立医院)和国家级室间质评项目不合格率(三级公立医院)。 选填项:针刺伤害发生率、实验室人员培训合格率、医护满意度、患者满意度、不良事件发生次数、实验室人员培训次数、实验室信息系统(LIS)故障数。 第1次调查要求回顾采集和统计2018年一整年数据;第2次调查不需要进行年度指标的数据上报。 二、回报方式 与常规室间质量评价计划相同,参加实验室通过在线EQA回报结果。用户以所在省临床检验中心提供的室间质量评价用户名及密码登录“室间质评用户登录”,进入“室间质评”—“质评试验上报”上报结果。网上上报后请在“已上报数据”中核对数据。回报表分为三部分:(一)医院和实验室基本信息、(二)检验全过程质量指标和(三)新增检验全过程质量指标,其中前两部分为必填项,第三部分为选填项,前两项均填完才为上报成功。 三、调查对象 所有医院的检验科(包括有医疗机构许可证的独立实验室,厂家除外)

快速石蜡切片在病理诊断中的应用

快速石蜡切片在病理诊断中的应用 【关键词】快速石蜡切片;病理诊断 随着临床手术的发展,要求送检手术中快速病理诊断的病例逐年增多,而且在基层医院也日益普及,目前冰冻切片是最常用的快速诊断技术,但冰冻切片机价格昂贵,冰冻切片的组织结构和细胞形态清晰度差,所以冰冻切片的诊断较石蜡切片要困难得多,再加上基层医院病材有限,使其应用受到一定限制。我院应用快速组织处理仪,将改进的快速石蜡切片技术应用于临床,从1998~2005年底共开展了1 337例,取得了较为满意的结果,现总结报告如下。 1对象与方法 1.1对象收集我院1998~2005年底手术中快速石蜡切片病例1 337例。 1.2方法手术前1天由手术医生预约,送快速病理通知单,病理医师应详细了解病情,并征得患者本人或其家属的同意,才能行使这项工作。手术标本送达后迅速取材(为了易于脱水,要求组织块不能太大,大小0.5 cm×0.5 cm,厚度<2 mm,一般切取组织3~4块),放入预热好(水温设定为75 ℃)的快速组织处理仪中,用AF液固定,丙酮进一步脱水后浸蜡(共需15 min左右),而后将组织块石蜡包埋,常规切片,HE染色需10~15 min,阅片,将诊断意见以电话和书面两种形式通知手术医生。剩余标本行常规病理检查并和快速诊断结果相对照。 2结果 2.1时间从收到送检标本到作出病理诊断全过程平均时间30~40 min。 2.2诊断符合率从1998~2005年底,我院共开展快速石蜡切片1 337例组织来源主要是卵巢、乳腺、子宫、甲状腺、肺等,经快速石蜡切片诊断良性675例(与常规石蜡切片诊断良性625例,符合率92.6%);交界性25例,有1例误诊为良性(与常规病理切片诊断交界性24例,符合率96%);恶性225例(与常规病理切片268例,符合率83.9%),其中有10例快速石蜡诊断良性而常规石蜡切片为恶性,占恶性病例的3.7%,占总病例的0.7%;有12例未明确定性,报告为不排除恶性变,占总病例的0.8%,后被常规石蜡切片证实10例为恶性。快速石蜡切片与常规石蜡切片总的符合率为92.7%,在1 337例病例中无1例良性病变被误诊恶性。 3讨论 3.1时间快速石蜡切片取材组织块小,大小0.5 cm×0.5 cm,厚度<2 mm 通过快速组织处理仪,设定水温和超声波大小,进行处理,简化了固定脱水程序,进一步缩短了固定、脱水、浸蜡的时间,使整个过程能够在30~40 min时间内完成,虽然比冰冻切片用时长了5~10 min,但同样满足临床对快速诊断的需要。 3.2切片质量快速石蜡切片的质量与常规石蜡切片接近,远超出冰冻切片的质量,有利于病理医师作出正确的诊断。应用快速组织处理仪代替传统的烧灼的加热方法,很容易控制温度,既节省了时间,又不至于烧坏组织,再加上超声波的作用,使快速石蜡切片的质量得到进一步提高。 3.3诊断符合率本组病例快速石蜡切片与常规石蜡切片诊断符合率达

病理科全面质量管理与持续改进方案与控制流程(参考模板)

病理科全面质量管理与持续改进方案与控制流程检查标准1:病理部门布局、设施、设备、工作流程和人员结构合理,管理规范,满足临床工作需要。 考核方法与措施措施:①依法执业,设备人员准入,各类证书完备。加强梯队建设,促进人员结构合理化;②进一步完善病理科布局及用房,设施、设备及技术项目符合要求,满足临床诊断、科研及教学工作需要;③健全各项规章制度、工作职责、工作流程,并落实执行情况,对发现的问题进行分析、总结,及时改进,从制度建设上不断补充、完善;④加强科室新业务新技术、法律、法规的学习,有培训计划和记录,建立员工培训档案。 检查标准2:建立并执行病理质量管理制度,定期开展质量评价和改进工作,严格执行标本核对制度。 考核方法与改进措施:①严格执行标本核对制度,两人同时对标本与送检内容是否相符;病史、实验室检查、手术所见等是否填写详实进行核对,病房手术室标本由手术室护理人员送病理科,然后验收同时签字;②严格执行标本、切片核对交接制度,交接环节由诊断医师和病理技师同时核对;③严格执行标本保存及销毁制度,制定工作流程;④加强病理报告发送制度的落实,认真做好签收工作;⑤加强病理结果登记制度的落实,做好各项信息核对和准确编写病理号的工作;⑥严格执行冰冻快速预约和报告制度。临床医师要提前一天预约,详细填写;病理医师与病人或家属沟通,共同签署检查同意书;检查结果由病人家属签收送手术室;⑦科室质控人员定期对各项制度的执行情况进行自查并记录。每季度召开质量安全管理和持续改进工作会议,对存在的问题及时分析、总结、讲评、改进并备案。 检查标准3:病理报告及时、准确、规范,严格审核制度。 考核方法:定期抽查常规制片、冷冻切片制作、术中冰冻病历送检结果出具、一般病理检查报告时间。查看高级诊断医师审核诊断、会诊的记录。 改进措施:①严格工作流程,明确职责任务,司职到位,确保常规及疑难诊断报告质量。对疑难病例做好特殊检查记录、会诊记录等;②严格执行病理上级医师复片制、科内疑难病理读片制和会诊制。加强与上级医院病理专业的技术交流,经常性的开展疑难病理上级医院会诊业务,提高医院病理诊断能力;③加强青年技师“三基”训练,开展岗位练兵,每月安排一次业务培训并考试,不断提高工作人员的诊断技术水平;④科室质控人员检查标本、切片核对交接纪录和报告审核执行情况;每

石蜡切片免疫组化操作步骤

石蜡切片免疫组织化学操作流程 一、组织获取(本实验室多做脑组织,所以以脑组织为例) 1.动物麻醉:所用麻醉药物(水合氯醛水溶剂)剂量为350mg/kg动物体重,常用麻醉药 物浓度为5%、6%、7%、10%(麻醉浓度越大,动物进入麻醉时间越短,但麻醉致死率相应较高,本人使用7%浓度,若注射位置正确,约3min进入麻醉状态);动物麻醉后,将其固定于灌流操作平台,仰卧位; 2.动物灌流手术:以胸骨剑突为起点,沿左右两侧肋下缘剪开老鼠皮肤至腋下,再次以剑 突为起点,剪开皮下肌肉层,沿同样方向剪开肌肉至腋下,避免伤到内部脏器,剪破膈膜,沿左右两侧剪断胸骨,用止血钳夹住剑突向上翻转,充分暴露心脏;用弯镊分离心脏表面黏膜;左手持止血钳轻夹起心脏,倾斜一定角度,使心尖方向与升主动脉尽量位于同一直线上,右手持灌流针,沿直线所在所在角度由左心室进针,将灌流针直接插入升主动脉(可挑动灌流针于升主动脉内观察是否正确插入,此方法操作不熟练易插错血管或是直接刺穿心脏——或者直接将灌流针插入左心室,但前方法灌流效率较高);固定器械(器械松动或是位置变化会严重影响灌流质量,有时会因为器械位置的变动直接将心脏牵扯下来导致灌流失败,应给与充分注意) 3.动物灌流:C57小鼠25-30g左右,灌流开始,可见右心耳充盈,用剪刀剪开,便于血液 流出:吊瓶灌流——以生理盐水50-100ml快速冲洗血液,持续最好不要超过5min(时间过长会导致脑组织降解),待无明显血迹流出后换用4%多聚甲醛进行灌流,约 100-150ml,灌流速度不宜过快,约10min,固定液较充分的固定组织;注射器灌流——生理盐水50ml快速推注,后换用4%多聚甲醛50ml缓慢推注。灌流成功的标志——灌流开始,可见肝脏颜色迅速变浅,随着灌流进行,肝脏颜色逐渐变为乳黄色或是白色; 换用4%多甲固定液后小鼠全身痉挛抽搐,组织僵硬。 4.开颅取脑:根据实验取材位置的不同,分为不同的取脑方式:应注意需要的组织区域, 避免取脑过程中损坏,多从小脑后方依次向前剥离颅骨,获取脑组织(在颅骨剥开后,应注意脑膜的存在,因为会发生脑膜将皮层割裂损伤的情况) 5.脑组织修块:将多余脑组织去除,便于固定充分均匀,应留出试刀或找平的部分多余组 织(本人实验中因需要海马组织,故修块时沿大脑皮层后边缘切除多余小脑,人字缝前约2.5-3mm切除前脑部分) 6.固定过夜:将修块完成的脑组织,浸泡于4%多聚甲醛中,固定过夜,通常不要超过18 小时(固定时间越长,组织抗原损失越严重,呈数量级损失),一般控制在12小时以内为宜 二、组织石蜡包埋 7.组织梯度脱水透明:将过夜固定的脑组织取出置于包埋窗内,并用铅笔做好相应标记, 自来水流水冲洗约10min,去除残留的杂质成分,进行梯度酒精脱水(注意:不同的组织类型,同组织类型不同组织块大小所需的每阶段脱水时间不同,需根据自身需要进行简单摸索;若盲目脱水透明,脱水透明过头,会使组织脆性增加,切片时全为粉末状,无法成形;脱水透明不够,会使组织与蜡块分离,无法获取平整组织切片) 本实验中,组织样本为脑组织,组织修块后所进行的脱水流程如下: 自来水冲洗完成→50%乙醇 25min→70%乙醇 25min→80%乙醇 25min→90%乙醇 25min →95%乙醇I 10min→95%乙醇II 15min→无水乙醇I 10min→无水乙醇II 15min→二甲苯I 15min→二甲苯II 15min 8.组织浸蜡:在进行二甲苯透明开始的时候,将石蜡用沸水融化,置于60度烘箱内备用 (此过程中应注意将盛放石蜡的烧杯上口封闭,避免水分溅入;根据组织块的数目准备

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