细胞工程复习题
细胞工程复习题
1、细胞工程的概念: 细胞工程是利用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。
2、细胞工程分类：根据细胞类型的不同，细胞工程可以分为动物细胞工程和植物细胞工程。
植物细胞工程通常采用的技术手段是植物组织培养和植物体细胞杂交；采用的理论基础是植物细胞的全能性。
3、植物组织培养：是指分离一个或数个体细胞或植物体的一部分在无菌条件下培养，接种到人工培养基上，在人工控制的条件下进行一段时间的培养，使其分裂分化并最终形成完整的新植株。
4、外植体(explant)：植物细胞组织培养中，由活体(in vivo)上切取下来，接种在培养基上的细胞、组织、器官等均称为外植体。外植体可以是植物器官、组织、细胞、原生质体
5、愈伤组织(callus)：指在人工配制培养基上由外植体形成的具有分生能力一团无序生长的薄壁细胞。
6、分化〔differentiation〕：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。
7、脱分化〔dedifferentiation〕: 已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。
8、再分化〔redifferentiation〕: 植物的成熟细胞经历了脱分化之后，即形成愈伤组织之后，由愈伤组织再形成完整的植株，这一过程叫做再分化，或叫分化、再生(regeneration)。
植物组织培养中再分化的途径有不定器官途径和体细胞胚胎途径。
9、细胞全能性（totipotency）理论：植物每一个具有完整细胞核的体细胞，都含有植物体的全部遗传信息，在适当条件下，具有发育成完整植株的潜在能力。
在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：基因的表达有选择性。
10.脱毒苗:是指利用脱毒技术生产的不含目标病毒的种苗。
11植物脱毒（virus elimination）：利用植物组织培养技术，脱除植物细胞中浸染的病毒，生产健康的繁殖材料。
12．植物细胞工程的应用
（一）快速繁殖苗木
（二）获得脱毒苗木：采用微茎尖组织培养可以得到无病毒苗木。成为解决病毒病危害和品种退化问题的一个重要途径。如利用茎尖培养可解决马铃薯种薯、甘薯、大蒜退化问题。
（三）为农作物育种提供有利手段：倍性育种，缩短育种年限，杂种优势明显；克服远缘杂交的不亲合性；保存种质
（四）实现工厂化育苗：以植物组织培养为基础，将外植体接种在人工配制的培养基上，通过控制环
境条件，使细胞脱分化、再分化成新的组织、器官，进而培育出与母株一样的批量幼苗的方法。如非洲紫罗兰组织培养工厂化育苗的生产。
（五）遗传转化
（六）次生代谢物生产
12.简述植物组织培养过程种污染、褐变与玻璃化的原因及其防止措施？（结合自己做的实验来分析写）
污染——产生原因:细菌污染和真菌污染。
预防措施:无菌室的消毒、减少或防止材料带菌、外植体灭菌要彻底、玻璃器皿和金属器皿的灭菌、布制制品的灭菌、工作人员要按照无菌操作的程序进行接种。
褐变——产生原因:
1.植物材料:基因型、材料年龄、取材部分、取材时期、外植体大小及受伤害程度。
2.培养条件:光、温度
3.培养基:培养基状态、无机盐、植物生长调节物质、抗氧化剂、吸附剂、ph值。
4.材料转瓶周期。
预防措施:选择合适的外植体、合适的培养基和光温条件、加活性炭和其他抑制剂以及加氧化剂、缩短转瓶周期多次转移和细胞筛选。
玻璃化——产生原因:激素浓度、培养基成分、温度、光照时间、通风条件、消毒方法、继代次数。预防措施:1.接种时除去外部韧皮组织,只接内部的分生组织。2.外植体彻底灭菌3.器皿与金属器械的灭菌玻璃器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌，金属器皿一般火焰灭菌,也可干热灭菌 4.布质制品的灭菌:湿热灭菌 5.定期对无菌操作室灭菌 6.严格按照操作程序
13.配制培养基为什么先配母液?如何配制及保存?
答:配制培养基时,如果每次配制都要按照成分表依次称量,即费时,又增加了多次称量的误差.为了提高配制培养基的工作效率,一般将常用的基本培养基先配制成10倍或100倍数的母液。（5分）保存：贮存在冰箱里温度为4～10℃可以用一个月时间.用时,将他们按照一定的比例稀释混合使用。配制母液：按照MS培养基配方配制几种不同的混合液（大量元素母液、微量元素母液、铁盐、有机物质）等母液。首先各种药品必须充分溶解后才能混合，混合时要注意先后顺序。（2分）
1.固体培养基（通气性较好，便于操作，但营养分布不均匀，生长发育不整齐）和液体培养基（营养分布均匀，生长整齐一致，但通气性差）的优缺点
2.MS培养基：琼脂和蔗糖的加入量一般为多少？1L培养基30g 蔗糖和7g琼脂
3.培养基的成分包括哪几类？在离体培养中的功能是什么？
水、无机盐（大量元素和微量元素）、有机化合物、植物激素、琼脂和其他成分（活性炭、抗氧化物和抗生素）
4.在培养基成分中什么决定着外植体发育方向？
在培养基成分中6-BA / NAA 的高低决定着外植体的发育方向，其比值高时分化芽，比值低时分化根。
5. 植物细胞工程技术中常用的生长素和细胞分裂素那些？
生长素（IAA、IBA、NAA、2,4-D）和细胞分裂素（6-BA、KT、
ZT）
6.抗生素的作用？
答.添加抗生素可防止菌类污染，减少培养中材料的损失，尤其是快速繁殖中，常因污染而丢弃成百上千瓶的培养物，采用适当的抗生素便可节约人力、物力和时间。
7.培养基的种类及特点有哪些？
MS培养基无机盐、离子浓度高，硝酸盐含量较高。能够满足植物营养生理需要。
White培养基无机盐量较低，适合生根培养
8.简要说明MS培养基的基本组成？
1）大量元素母液配制MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾（KNO3）、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2，CaCl2?2H2O）五种化合物。
2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe 外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。
3）铁盐母液配制MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA.的螯合物，必须单独配成母液。
4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。
5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素
9．试述植物细胞工程实验室由那些实验室组成，各部分的功能？
答：植物组织培养实验室包括：1、准备室，功能是进行一切与试验有关的准备活动； 2、接种室，功能是进行无菌操作； 3、培养室，功能是对离体材料进行控制培养。4、摄影室和细胞学实验室，功能是进行记录和观察
10．植物细胞工程技术主要包括那些环节？（洗涤技术，灭菌技术，接种技术，培养和驯化技术）11．常用的灭菌方法那些？湿热灭菌（高温高压灭菌）、干热灭菌（玻璃器皿及耐热用具）；燃烧灭菌
（金属器械）；过滤灭菌（不耐热的物质；IAA、ZT、GA3及某些维生素等）；空间空间采用熏蒸和紫外线灭菌；植物表面用消毒剂灭菌等
12．培养基.培养皿和植物材料通常怎样灭菌？培养基培养皿和植物材料通常怎样灭菌？
答:①培养基用湿热灭菌②培养皿:玻璃器皿及耐热用具采用干热灭菌③植物材料表面用消毒剂灭菌.
13.接种室的灭菌如何？
采用紫外线和熏蒸灭菌，应有紫外灯，在操作前照射20分钟。
熏蒸灭菌用高锰酸钾＋甲醛达到无菌的目的。
14、无菌操作技术概念及其操作流程？
概念：通过灭菌的操作空间和使用器皿以及衣服和手都不带有任何活的微生物,在这样的条件下进行操作,叫做无菌操作。
操作流程：空间消毒→器具准备→紫外灯杀菌→双手消毒→外植体消毒→台面、器械消毒→打开培养瓶→材料接种
15.外植体消毒流程
（1）自来水冲洗,滤纸吸干；（2) 70-75%酒精浸泡15～30s；（3）无菌水冲洗；
（4）用灭菌剂处理；（5）用无菌水冲洗。
16、接种:把经表面灭菌处理后植物材料，切碎或分离出器官、组织、细胞，再经无菌操作转接到无菌培养基上，这一过程叫做接种。
外植体培养：指把培养材料放在培养室里，使之生长，分裂和分化形成愈伤组织或进一步分化成再生植株的过程。
17．外植体取材考虑的事项？
答(1)植物基因型.(2)外植体来源.(3)外植体大小.（4）取材季节.(5)外植体的生育状态和发育年龄.
18、外植体成苗途径
（1）外植体→愈伤组织→根、芽→试管苗①同时长芽和根②先长芽，再长根③先长根，再长芽（2）外植体→胚状体→试管苗（胚状体途径）
（3）外植体→根、芽→试管苗（器官发生途径）
19.组织培养中常出现的三大问题是污染、褐变和玻璃化。
20、试管苗生态环境特点：恒温、高湿、弱光、无菌。
试管苗练苗的一般程序是闭瓶强光练苗和开瓶强光练苗，成功标志是试管苗茎叶颜色加深。
1.愈伤组织培养定义：将外植体接种到人工培养基上,通过诱导脱分化形成愈伤组织，继而再分化形成植株，这一过程称为愈伤组织培养。
2、器官分化的植物激素控制理论(激素配比模式)：生长素与细胞分裂素的比值是根和芽形成的控制
条件，决定着发育的方向:是愈伤组织、长根还是长芽。
生长素/细胞分裂素高利于根的形成；生长素/细胞分裂素适中利于愈伤组织的形成；生长素/细胞分裂素低利于芽的形成。
3、愈伤组织分化
从外植体脱分化形成典型的愈伤组织大致可分为三个时期：诱导期（细胞准备进行分裂的时期，是愈伤组织形成起点）、分裂期（细胞快速分裂期，外植体细胞经诱导脱分化，不断分裂、增生子细胞的过程）、分化期（指愈伤组织细胞停止分裂，细胞内发生一系列形态和生理上的变化,形成一些不同形态和功能的细胞的时期）
4、继代培养：培养物在培养基上生长一段时间以后，由于营养物质枯竭，水分散失，以及代谢产物的积累，必须转移到新鲜培养基上培养,这个过程叫做继代培养
5、愈伤组织继代培养目的:使愈伤组织无限期保持在不分化的增殖状态
6、愈伤组织形态发生途径：
不定芽和根方式：愈伤组织的器官发生顺序有四种情况：
（1）先长芽，后长根，多数情况；
（2）先长根，再从根的基部长芽。这种情况较难诱导芽的形成，尤其对于单子叶植物；
（3）先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根，然后两者结
合起来形成一株植株。
（4）愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成，即无根的芽或无芽的根；
体细胞胚方式：双倍体或单倍体的体细胞在特定条件下，未经细胞融合而通过与合子胚胎发生类似的途径发育出新个体的形态发生过程。体细胞胚发育过程包括原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚、子叶胚7、人工种子：人工种子是指利用细胞的全能性，将离体培养所产生的体细胞胚包裹在含有营养和具有保护功能的物质中形成的、并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。
8、人工种子主要组成部分：胚状体、人工胚乳、人工种皮
1．器官培养的概念：指植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体培养，包括根、茎、叶、花、果实及子房和胚的培养。
2、植物器官培养的主要程序包括外植体的选择与消毒、形态发生、诱导生根与再生植株的移栽
3、植物离体根培养是指以植物的根段为外植体进行离体培养的技术。
4、影响离体根生长的因素：基因型、营养条件、生长物质、pH、光照和温度
5、离体根培养所用的培养基多为无机离子浓度低的white培养基或者2/3或1/2的MS、B5培养基
6、试管苗生根的措施：1）用White、1/2或1/3MS、B
等生根培养基。2）降低N，P，K盐的量。
5
3）适当加大生长素（如NAA），不用或少用细胞分裂素，或在无激素的培养基上生根。
4）蔗糖降低到1.0-1.5%，以增强植株自养能力；5）增加光强度，以提高小植株的光合能力。
7、茎尖培养是切取茎的先端部分或者茎尖分生组织部分，进行无菌培养。根据培养目的和取材大小可以分为微茎尖培养（长度0.1mm 左右，含1-2个叶原基的茎尖进行培养，目的是获得无病毒植株）和
普通茎尖培养（对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养，目的是快速繁殖。）
8、快速繁殖(微繁殖):用组织培养的方法，使植物的部分器官、组织迅速扩大培养，并移植到温室或农田繁殖出大量幼苗的繁殖方法。
9、茎尖培养脱毒的原理：感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀，病毒的数量随植株部位及年龄而异，越靠近茎端区域的病毒的感染深度越低生长点（约0.1-1mm区域）则几乎不含或含病毒很少。在切取茎尖时越小越好，但太小则不易成活，过大则不能保证完全除去病毒。
10、茎尖微繁殖技术的过程：（1）无菌培养体系的建立；（2）芽的增殖（3）中间繁殖体的增殖(继代培养)；（4）诱导生根；（5）试管苗的移植
11、茎段的培养：指带有腋（侧）芽或叶柄，长数厘米的，包括块茎、球茎在内的幼茎节段进行的离体培养。培养茎段的主要目的是快繁。
12、叶的培养：离体叶的培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养。
1、胚胎培养：是指将植物的胚（种胚）及胚性器官（子房、胚珠）在离体条件下，使其发育成完整植物的技术。
2、胚培养：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来，再放在无菌的条件下，让其进一步生长发育，以至形成幼苗的过程。
3、胚发育两个阶段：异养期：胚乳和周围母体组织提供营养自养期：主动吸收培养基中无机盐和糖
4、幼胚培养指处于原胚期、球形期、心形期、鱼雷期的离体胚培养（子叶期前的这段时期）。特点：幼胚是尚未成熟的胚，体积小，完全异养，培养困难，要求的技术和条件较高，培养不易成功。
5、成熟胚一般指子叶期至发育成熟的胚,培养较易成功。
特点：成熟的胚，体积大，完全自养，培养容易，要求的技术和条件较低，培养基简单。
6、未成熟胚培养三种不同生长方式：
（1）胚性发育：幼胚--成熟胚--幼苗
（2）早熟萌发：幼胚--幼苗；多是有害的
（3）愈伤组织：幼胚--愈伤组织--胚状体/芽苗
7、幼胚培养植株再生途径（1）器官发生（2）胚状体再生
8、幼胚培养关键技术及培养过程：异养转入自养
9、胚乳培养是指将胚乳从母体上分离出来，在无菌的环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。注意再生植株倍性
10、胚珠培养是指将胚珠从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。受精胚珠的培养和未受精胚珠的培养
11、子房培养是指将子房从母体上分离出来，在无菌的人工环境条件下培养，使其生长发育形成幼苗的过程。未受精子房的培养（获得单倍体）和受精子房的培养（挽救杂种胚）
12、离体受精：离体受精是指用无菌花粉对离体条件下的子房或胚珠进行授粉受精，使子房或胚珠发育为成熟种子的过程。
从花粉萌发到受精形成种子以及种子萌发到幼苗形成的整个过程，均在试管内完成，又称为试管授精。
13．离体授粉的类型根据无菌花粉授予离体雌蕊的位置，可分为三种类型：
离体柱头授粉（将无菌花粉授予离体培养的雌蕊（未受精的）柱头上，得到含有可育性的种子或果实的技术，又称为雌蕊离体授粉）；
离体子房授粉（在离体条件下，将无菌花粉直接引入子房中，使花粉粒在子房中萌发、完成受精过程，并获得具有生活力的种子的技术）；
离体胚珠授粉（指离体培养未受精的胚珠，并在其上进行人工授粉，最终在试管内结出正常的种子）1、花药培养和花粉培养的概念及其共同点和不同点？
花药培养是将花粉发育至一定时期的花药接种到人工培养基上进行培养，使其脱分化形成细胞团，然后再分化形成胚状体或愈伤组织进而发育成完整植株的技术。
花粉培养技术是指把花粉从花药中分离出来，以单个花粉粒作为外植体进行离体培养的技术，也称小孢子培养技术。
相同点：胚状体成苗途径、愈伤组织再分化成苗途径；都是花粉发育，均可获得单倍体细胞系或单倍体植株
不同点：花药培养属于器官培养范畴；花粉培养属于细胞培养范畴，需进行花粉的分离，不存在体细胞干扰，没有混倍现象
2、花粉培养最佳取材时期单核期,尤其是单核中、晚期(单核靠边期)；花粉发育时期检测方法：外部形态观察和压片染色法
3、花粉分离方法：漂浮培养法；磁搅拌法；挤压法
4、花药培养包括：选择材料-消毒-预处理（低温冷藏是最常用的方法）-接种培养-愈合组织生成-
分化出单倍体植株-倍性鉴定-染色体加倍-双单倍体。
5、通过离体培养获得单倍体的途径有哪些？单倍体细胞培养的应用？（论述题）
途径：（1）通过胚胎发育途径形成单倍体植株，通过早期的分裂，单个花粉粒形成胚性细胞团，再
继续培养中逐渐进入胚胎发育途径，进而形成球形胚、心形胚进一步发育完成单倍体花粉植株
(2）通过愈伤组织形成单倍体花粉粒早期分裂的细胞团如果一直保持无序分裂状态，就会形成多细胞
团的愈伤组织，这种愈伤组织进一步分化成单倍体植株。
应用：(1).可以使后代迅速纯合,缩短育种周期. (2).可以提高选择效率. (3)遗传研究的良好的材料.
(4).克服远缘杂交的不育性. (5).快速获得自交系的超亲植株
6、花粉植株的鉴定方法和染色体的加倍方法
鉴定方法:1）基于染色体数鉴定2）基于流式细胞仪鉴定3）基于气孔鉴定 4）基于植株形态鉴定
加倍方法：自然加倍、化学加倍（秋水仙素处理加倍、除草剂处理加倍）、培养基加倍（生长素、细
胞分裂素处理加倍）
1、植物细胞培养(plant cell culture):是指对植物器官或愈伤组织上分离出的单细胞或小细胞团进
行培养，形成单细胞无性系或再生植株的技术。
2、单细胞分离方法：
机械法：指通过机械磨碎、切割植物体从而获得游离的单细胞。
优点：细胞不受酶伤害，无须质壁分离。缺点：只适合于排列松散的薄壁细胞、效率低、产量少。
酶解法：指用专一的水解酶(纤维素酶、果胶酶、琼脂酶等）在温和条件下分解胞间层，分离细胞。
优点：最有效的一种方法。缺点：成本较高，酶对细胞有一定伤害，对一些禾本科植物不适用，
需要通过愈伤组织分离细胞。
由愈伤组织分离单细胞：指将愈伤组织反复继代，再转移至液体培养基振荡培养。添加生长素或酶
有利。这是分离单细胞通常采取的方法。
3、单细胞培养方法
平板培养法指将一定量细胞接种到薄层固体培养基里进行培养的方法。平板培养的效果一般用植板率
来衡量。植板率是能长出细胞团的单细胞在接种单细胞总和中所占的比例。
看护培养是指用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂和增殖的培养方法。
液体浅层静置培养法指将一定密度的悬浮细胞放在培养皿中形成一浅薄层，在静止条件下进行培养，
使细胞生长繁殖的培养过程。
细胞悬浮培养法指将细胞接种于液体培养基中，在保持良好的分散状态下培养。
微室培养是指将含有单细胞的培养液小滴滴入无菌小室中，在无菌条件下使细胞生长和增殖，形成单细胞无性系的培养方法。
4、单细胞培养程序：建立细胞株高产细胞株的选择分化培养或扩
大培养鉴定和提取
5、细胞悬浮培养技术
成批培养：又称分批培养，指在一个固定容积的培养基中培养细胞，当培养基中主要的营养物质耗尽时生长就停止。
连续培养：在培养过程中由于不断注入新鲜培养基，故培养液中营养物质能够连续得到补充，培养物的容积一般是恒定的。
半连续培养：指新鲜培养液不是连续加入，而是在隔一定时间后把培养液倒出部分，同时再加入新鲜培养液。这相当于成批培养频繁地进行再培养。
6、细胞活力测定：
醋酸酯-荧光素染色法（FDA）：在活细胞中，FDA被裂解，荧光素被释放出来，在活细胞积累，而在死细胞中不能积累。
死细胞染色法：酚藏红花、伊万斯蓝、洋红、甲基蓝等染色，与FDA相反，死细胞能摄取染料。
7、次级代谢产物（Secondary metabolites）是通过次级代谢合成的产物，是指植物中一大类并非植物生长发育所必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性。
1.原生质体（protoplast）是指用特殊方法除去细胞壁的、裸露的、有生活力的原生质团。
2.原生质体培养是指将原生质体放在人工配制的培养基上，在人工控制的条件下培养成再生植株的过程
3.原生质体的分离方法
机械分离法先将细胞放在高渗糖溶液中预处理，待细胞发生轻微质壁分离，原生质体收缩成球形后，再用机械法磨碎组织，从伤口处可以释放出完整的原生质体。
优点：可避免酶制剂对原生质体结构和代谢活性的有害破影响。
缺点：获得完整的原生质体数量较少,需要高度质壁分离，局限性大。
酶解分离法指用细胞壁降解酶脱除植物细胞壁获得原生质体的方法。
优点：可获得大量原生质体，几乎所有植物均适用。
缺点：酶制剂会影响所获原生质体的活力。
4.原生质体纯化方法：沉降法、漂浮法、不连续梯度离心法
5.影响原生质体培养的主要因素有哪些？
1）细胞降解酶的种类和组合2）渗透压稳定剂3）质膜稳定剂4）pH值的影响 5）温度 6）植物材料的生理状态p189
6.原生质体培养的方法有哪些？液体浅层培养法；固体平板培养法；固液双层培养法；饲养层培养法
7.原生质体培养流程
原生质体分离——原生质体纯化——原生质体培养——细胞壁再生——细胞分裂成细胞团——愈伤组织或胚状体形成——植株再生
1.体细胞杂交指把两种不同基因型个体或不同种、属、科生物细胞的原生质体分别分离出来，再用一
定的技术融合成一个新的杂种细胞，乃至发育成杂种植株的过程。
2.诱导细胞融合的方法：
化学诱导融合法：盐类融合法：硝酸钠；高钙（Ca2+）和高pH 值融合法；聚乙二醇融合法（PEG法）；
聚乙二醇与高Ca2+、高pH值相结合的融合法
物理诱导融合法：电融合法
目前常用的诱导细胞融合的方法是： PEG法和电融合法
3.电融合法原理：利用不对称的电极结构，产生不均匀的电场，使黏合相连的原生质体膜瞬间破裂，
与相邻的原生质体连接、闭合、产生融合体。
4.植物细胞融合从融合的性质可分为:
对称融合（symmetric fusion）是指两个完整的细胞原生质体融合。
非对称融合（asymmetric fusion）是指利用物理或化学的方法使亲本的核或细胞质失活后再进行融合。
5.杂种细胞类型：
（1）对称杂种：双方原生质体完全融合在一起，相互之间未发生
排斥，杂种的体细胞染色体数目为双亲之和，其外部形态呈中间类型，后代遗传稳定。
（2）非对称杂种：亲本双方原生质体发生部分融合，或发生了融合，但融合体在分裂过程中一方的部分核或质被排斥，其体细胞染色体数达不到双亲之和。
亲缘关系和原生质体融合方式是形成不对称杂种的主要因子。
（3）细胞质杂种：只含有亲本一方的核基因组而含有亲本双方的细胞质基因（叶绿体和线粒体基因）的细胞杂种称为细胞质杂种或胞质杂种（cybrid）
一个正常的原生质体与一个去核的原生质体融合；
一个正常的原生质体与一个核失活的原生质体融合；
在杂种细胞的增殖过程中一个亲本的染色体丢失；
用抑制剂处理得到胞质杂种等。
6.杂种植株的鉴定：杂种植物形态特征、杂种植物的细胞学鉴定、分子标记法、同工酶鉴定
7、植物体细胞杂交过程
植物原生质体分离——原生质体纯化——原生质体融合——细胞杂种的选择——愈伤组织形成，器官分化植株再生——杂种植株鉴定
1. 转基因技术(transgene technology)是指将人工分离和修饰过的外源基因导入生物体的基因组中，从而使生物体的遗传性状发生改变的技术。
2. 转基因植物(transgenic plant)是指利用重组DNA技术将克隆的优良目的基因整合到植物的基因组中，并使其得以表达，从而获得具有新的遗传性状的植物。
3. 植物转化受体系统是指用于转化的外植体通过组织培养途径或其它非组织培养途径，能高效、稳定地再生无性系，并能接受外源DNA整合，对转化选择抗生素敏感的再生系统。
4.基因转化的方法概括起来说主要有两类：
第一类是以载体为媒介的遗传转化，即载体转化系统。如农杆菌介导法、病毒介导法。
第二类是外源目的DNA的直接导入，包括直接转化系统和种质转化系统。如基因枪法、电激法、超声波法、显微注射法、花粉管通道法等。
5. 农杆菌介导法：人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。
6.农杆菌介导法步骤：
（1）含重组Ti质粒的工程菌培养及菌液制备
a.目的载体构建：用限制性核酸内切酶获取目的基因；用DNA连接酶将目的基因与质粒连接，构建重组质粒（植物启动子、目的基因、报告基因、选择标记基因、终止子）
b.载体的农杆菌转化——将含目的基因的重组质粒导入农杆菌；目的基因的检测与鉴定
（2）合适外植体选择和预培养
（3）农杆菌与外植体共培养：植株转化实验，在溶液中加入促进植株愈伤生长的激素能一定程度提高转化率。
（4）外植体脱菌与筛选培养：常采用抗生素筛选
（5）转化植株再生（6）转基因植株鉴定和分析：一般采用PCR 法。
7.基因抢法利用火药爆炸、高压气体或高压放电加速驱动，将包裹有外源目的基因或DNA片段的钨粒或金粒高速射入受体细胞或组织，使外源目的基因直接导入到受体细胞内，从而实现遗传转化的一种方法。
8.花粉管通道法：利用植物开花、受精过程中形成的花粉管通道，直接将外源目的基因导入尚不具备正常细胞壁的卵细胞、受精卵或早期胚细胞中，从而实现基因的转移。
1.试述人工种子的概念
是指利用细胞的全能性，将离体培养所产生的体细胞胚包裹在含有营养和具有保护功能的物质中形成的，并在适宜的条件下能够发芽出苗的颗粒体。
2.超低温保存的程序：
超低温保存种质指在-196℃的超低温下使保存的活细胞的物质代谢和生长活动几乎完全停止，不仅可以保持生物材料的遗传稳定性，也不会丧失形态发生的潜能。
超低温保存种质的程序：1.预培养和低温处理2.冷冻保护剂处理3.降温冷冻及超低温保存4.解冻2.目前人工种子生产中需要研究解决的问题有哪些？
1）优良体细胞胚胎发生体系的建立和高质量胚状体的诱导
2）人工种皮材料的筛选；
3）人工种子的包被技术；
4）人工种子干燥和贮藏方法的研究和改进
5）人工种子的制种和播种技术尚需进一步研究；
6）制作成本的降低
3.植物离体超低温保存的概念及超低温保存的方法、原理、程序是什么？
概念:在-80℃以下的超低温中保存种质的一套生物学技术。
方法:增加培养基中糖浓度提高渗透压、添加冰冻保护剂
原理:根据细胞内外蒸汽压力差。
程序:材料的选择与准备、预处理、降温冰冻、保护、化冻与恢复生长、存活率鉴定、遗传稳定性分析
三、填空题
1、植物组织培养按培养过程中是否需要光，可分为光培养培养和暗培养培养。
2、单倍体染色体加倍的方法有自然加倍、人工加倍、培养基加倍。
3、物理灭菌方法有高温灭菌、射线灭菌、过滤灭菌、熏蒸灭菌等。
4、影响器官分化的因素主要有植株材料、培养基成分、环境条件。
5、外植体的消毒程序自来水冲洗、70-75％酒精10-30s 、无菌水冲洗、消毒剂浸泡、无菌水冲洗。
6、杂种植株的鉴定方法有形态学鉴定法、细胞学鉴定法、同功酶分析法、分子标记法。
7、植物组织培养中常用的生长素有吲哚乙酸(ＩＡＡ)、吲哚丁酸(ＩＢＡ)、萘乙酸(ＮＡＡ)、 2，
4-二氯苯乙酸(2，4-D)。
8.接种室采用熏蒸灭菌和紫外线照射灭菌。
9、愈伤组织的发育时期有诱导期，分裂期，分化期。
10、细胞培养的方法有中空纤维培养、静止培养（单层细胞培养）、细胞工厂培养、悬浮培养（含微载体培养）、旋转培养。
11、植物细胞杂交的第一步是去掉__细胞壁___，分离出有活力的___原生质体___。
12.杂种植株的鉴定方法有形态学鉴定法、细胞学鉴定法、分子标记法、同功酶分析法。
13.花药培养属于器官培养，花粉培养属于细胞培养，最后发育成单倍体植株。
14.生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向，其比值高时有利于根的形成；比值低时有利于芽的形成。
15.常用于分离原生质体的材料有愈伤组织，悬浮培养细胞，叶尖茎尖等无菌材料。
16.根据细胞类型的不同，细胞工程可以分为动物细胞工程和植物细胞工程。
17.接种室一般采用紫外线照射和熏蒸灭菌；培养基一般采用高压蒸汽灭菌；镊子等接种用工具则采用灼烧灭菌。
18.试管苗生存环境特点恒温、高湿、弱光、无菌。
19.外植体培养过程中最常见问题是污染、褐变和玻璃化现象。
20.人工种子包括培养物、人工胚乳、人工种皮。
21.单细胞分离方法包括机械法、酶解法、由愈伤组织分离单细胞。
细胞工程学复习题
细胞工程学习题 1．诱导试管苗生根时，培养基的调整应 A．加大盐的浓度B．加活性炭 C．加大分裂素的浓度D．加大生长素的浓度 2．下列实验中可能获得三倍体植株的是 A．小麦的茎尖培养B．番茄花药培养 C．玉米胚乳培养D．玉米花粉培养 3．动物体内各种类型的细胞中，具有最高全能性的细胞是 A．体细胞B．生殖细胞C．受精卵D．干细胞 4．下列哪个是植物离体培养常用的主要糖类 A．葡萄糖B．果糖C．麦芽糖D．蔗糖 5．农杆菌介导的转化方法主要适用于 A．草本植物B．木本植物C．单子叶植物D．双子叶植物 6．原生质体纯化步骤大致有如下几步： ①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。
②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。 ③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。 ④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。 正确的操作步骤是：（） A ①②③④B②③①④C③①②④D③②①④ 7．常用的细胞融合剂是 A．刀豆球蛋白B．聚乙二醇（PEG）C．细胞松弛素B D．脂质体 8．利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，HAT培养基用来进行 A．细胞融合B．杂交瘤选择C．检测抗体D．动物免疫 9．下列过程中，没有发生膜融合的是 A．植物体细胞杂交B．受精过程 C．氧进入细胞中的线粒体D．单克隆抗体的产生 10．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生 大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是 A．经过免疫的B细胞B．没经过免疫的T细胞
细胞工程复习题
细胞工程复习题 1、细胞工程的概念: 细胞工程是利用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。 2、细胞工程分类：根据细胞类型的不同，细胞工程可以分为动物细胞工程和植物细胞工程。 植物细胞工程通常采用的技术手段是植物组织培养和植物体细胞杂交；采用的理论基础是植物细胞的全能性。 3、植物组织培养：是指分离一个或数个体细胞或植物体的一部分在无菌条件下培养，接种到人工培养基上，在人工控制的条件下进行一段时间的培养，使其分裂分化并最终形成完整的新植株。 4、外植体(explant)：植物细胞组织培养中，由活体(in vivo)上切取下来，接种在培养基上的细胞、组织、器官等均称为外植体。外植体可以是植物器官、组织、细胞、原生质体 5、愈伤组织(callus)：指在人工配制培养基上由外植体形成的具有分生能力一团无序生长的薄壁细胞。 6、分化〔differentiation〕：细胞在分裂过程中发生结构和功能上的改变，从而在个体发育中形成各类组织和器官完成整个生活周期。 7、脱分化〔dedifferentiation〕: 已分化好的细胞在人工诱导条件下，恢复分生能力，回复到分生组织状态的过程。 8、再分化〔redifferentiation〕: 植物的成熟细胞经历了脱分化之后，即形成愈伤组织之后，由愈伤组织再形成完整的植株，这一过程叫做再分化，或叫分化、再生(regeneration)。 植物组织培养中再分化的途径有不定器官途径和体细胞胚胎途径。 9、细胞全能性（totipotency）理论：植物每一个具有完整细胞核的体细胞，都含有植物体的全部遗传信息，在适当条件下，具有发育成完整植株的潜在能力。 在生物体内，细胞没有表现出全能性，而是分化为不同的组织、器官，是因为：基因的表达有选择性。
细胞工程期末复习-名词解释
细胞工程复习题 一、名词解释 [1]细胞工程：是指主要以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗 传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。 [2]细胞融合：是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。 [3]细胞重组：从活细胞中将细胞器及其组分分离出来，再在体外一定条件下将不同来源的细胞器及其组分重新组 合，使之重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器的一种实验技术 [4]细胞培养：泛指所有体外培养，其含义是指从动物活体体内取出组织，于模拟体内生理环境等特定的体内条件 下，进行孵育培养，使之生存并生长 [5]细胞全能性：指分化细胞保留全部的核基因组，具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息，具有发育成 完整个体的潜能。 [6]细胞分化：是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程，包括时间上和空间上的分化。 [7]细胞核移植：是一种利用显微操作技术将一种动物的细胞核移入同种或异种动物的去核成熟卵细胞内的技术。 主要包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植。 [8]细胞悬浮培养：是将细胞接种于液体培养基中并保持良好的分散状态的培养方式 [9]细胞系：由原代培养经传代培养纯化，获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一的细胞群体。第 一次传代培养后的细胞即称之为细胞系 [10]细胞株：是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的 细胞群，称细胞株 [11]细胞凋亡：也叫程序性细胞死亡是机体维持环境稳定、有基因控制的细胞自主的有序性死亡 [12]细胞团培养：细胞培养时，本身代谢就慢或者脆弱，细胞密度太低或者太高都会导致细胞的凋亡，死亡的 细胞裂解物包裹未凋亡的细胞形成絮状物，这些絮状物在显微镜下看就是细胞聚集。 [13]体细胞核移植：体细胞核移植又称体细胞克隆，原理即细胞核的全能性，是动物细胞工程技术的常用技术 手段 [14]冠瘿组织：是由根癌农杆菌感染引起的植物肿瘤组织，它能在无外加植物激素的培养基上生长。 [15]细胞平板培养:将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状，然后在此平面上培养微生物或多细胞生物 的细胞、组织或器官 [16]抗体酶：又称催化抗体，是一类具有催化能力的免疫球蛋白，即通过一系列化学与生物技术方法制备出的 具有催化活性的抗体，它既具有相应的免疫活性，又能像酶那样催化某种化学反应 [17]植物细胞质工程：植物体的细胞中，含有该植物所有的遗传信息。在合适的条件下，一个细胞可以独立 发育成完整的植物体。利用细胞的这种全能性，通过组培来繁殖名贵花卉、消灭果树上的病毒，以及通过对细胞核物质的重新组合，进行植物遗传改造等。这就是人们常说的植物细胞工程 [18]愈伤组织：指脱分化后的植物细胞经过细胞分裂，产生无组织结构、无明显极性的松散的细胞团。 [19]试管婴儿：是指将卵子与精子取出在体外受精，培养发育成早期胚胎，再植回母体子宫内发育出生的婴儿, 也就是采用体外受精联合胚胎移植技术培育的婴儿。 [20]发根农杆菌：是一种革兰氏阴性菌，能侵染大多数的双子叶植物、少数单子叶植物及个别的裸子植物，诱 发被感染植物的受伤部位长出毛状根。 [21]胚胎工程：是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术。包括体外受精、胚胎移植、胚 胎分割移植、胚胎干细胞培养等技术 [22]两相培养：在培养体系中加入水溶性或脂溶性的有机物或者具有吸附作用的多聚化合物，使培养体系形成 上、下两相;细胞在水相中生长，合成的次生代谢物质分泌出来后转移至有机相中 [23]HAT选择系统：细胞融合前必须做骨髓瘤细胞对HAT选择培养基敏感性试验，不敏感的细胞不能用于细胞 融合。HAT选择培养基成分：次黄嘌呤（H）、氨基蝶呤（A）和胸腺嘧啶核苷（T），取三者第一个字母称为HAT培养基。 [24]转基因技术：通过人工方式将外源基因整合到生物体基因组内，并使该转基因生物能稳定地将此基因遗 传给后代的技术。 [25]吸附固定法：通过物理吸附、离子吸附（依靠静电引力固着在带有异电荷的载体上）使细胞固定在载体上 [26]微囊化：是利用天然的或者合成的高分子材料作为囊壁材料将细胞包裹成微米级的微小球囊，形成的微囊膜是 亲水半透膜，培养基的营养成分以及代谢产物可以通过微囊膜进行交换 [27]初级代谢产物是通过初级代谢产生的维持细胞生命活动必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类等。在不 同种类的细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。初级代谢产物的合成无时无刻都在进行着，任何一种产物的合成发生障碍都会影响细胞正常的生命活动，甚至导致死亡。
细胞工程复习题
《细胞工程》复习题 一、选择题： 1．在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（Ｂ）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同 C．操作过程中酶的作用相同 D．诱导融合的手段相同 2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞 诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在 这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ C ） ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A．②④B．①③⑤ C．①②③④D．②③ 3．动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的有（ D ）
A．诱导融合的方法完全相同B．所用的技术手段完全相同 C．所采用的原理完全相同D．都能形成杂种细胞 4.单克隆抗体是指（C ） A．单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体 B．单个B淋巴细胞增殖产生的抗体 C．单个杂交瘤细胞增殖产生的抗体 D．单个抗体通过克隆化，产生大量抗体 5.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是（多选） （AC ） A．B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 B．B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体 C．骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体 D．骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能无限增殖 6.要想获得大量的单克隆抗体就必须用单个的B淋巴细胞进行无性繁殖，形成细胞群。其原因是（ D ） A．在体外培养条件下B淋巴细胞可以无限增殖 B．在动物体内B淋巴细胞可产生多达百万种以上的抗体 C．每一个B淋巴细胞都参与特异性免疫反应
D．每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体 7.关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（D ） A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产 8. 以下不属于生长素的是(D) A IAA B NAA C 2,4- D D 6-BA 9.植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D) A细胞质B线粒体C内质网D叶绿体 10.拥有接触抑制的是(B) A原核细胞B动物细胞C植物细胞D真核细胞 11.产生自胸腺的淋巴细胞是(A) A T淋巴细胞 B B淋巴细胞 C C淋巴细胞 D G淋巴细胞
细胞工程复习题
细胞工程复习题一、名词解释每小题3分,共21分 1．酶工程： 2．继代培养 3．人工种子： 4．单倍体培养： 5．微细胞： 6．胚胎工程： 7．克隆： 8．蛋白质工程： 9．外植体： 10．动物细胞与组织培养： 11．组织工程： 12．雌核发育： 13．胚胎融合： 14．转基因动物： 15．生物化学工程：
16．愈伤组织： 17．看护培养： 18．细胞固定化： 19．染色体工程 20．细胞重组： 21．基因工程技术： 二、简答题 1．细胞工程的重要应用体现在哪些方面 2．何为植物细胞两相培养技术建立植物细胞的两相培养系统必须满足的条件是什么 3．动物细胞体外培养有哪些特点 4．动物器官培养技术中,传统的器官培养方法主要有哪些 5．什么是细胞核移植技术以鱼类细胞核移植为例,其技术要点有哪些方面6．植物组织培养与植物细胞培养有什么区别
7．何为细胞悬浮培养怎样做到悬浮培养细胞的同步化 8．动物细胞生物反应器培养生产的生物制品主要有哪些种类9．什么是试管动物试管动物技术主要包括哪几个主要技术环节10．何为体细胞克隆技术多莉羊是怎样培育出的 11．芦荟组织培养快速繁殖中,通过哪些途径可以得到完整的植株 12．人工种子利用有何优势 13．用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备哪些基本要求14．何为胚胎移植主要包括哪些关键技术 15．转基因动物技术的应用主要体现在哪几个方面 三、论述题 1．请阐述单克隆抗体的制备过程
2．植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容有哪些 3．请阐述原生质的分离,纯化和活力鉴定的技术过程 四、计算题 μ和ppm浓度各是什么1．有一培养基的IAA浓度是1.5/ mg L,问其/ mol L 分子量175.18 2．培养基的配方是 2.0/0.5/ +++水解酪蛋白 MS BA mg L NAA mg L 500mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂粉;MS母液的浓度分别是：大量元素10倍,微量元素100倍,铁盐100倍,有机物100倍；BA母液浓度0.5mg/ml,NAA母液浓度0.1mg/ml;要配制800ml该培养基,需要吸取各种母液各多少ml 分别称取蔗糖、琼脂粉各多少克 3．要配制1mol/L的NaOH100ml, 要称取98%的固体NaOH多少克要配制1mol/L的HCl1000 ml,要量取浓HCl多少ml NaOH分子量40,HCl 分子量36.45,浓HCl含量38%,比重1.18 五、填空题 1．生物工程操作的对象是什么这是与化学工程等其他工程类学科最明显的不同 2．根据研究对象不同,可以将细胞工程分为哪三大类
高考生物一轮总复习 专题二 细胞工程试题(含解析)新人教版选修3
高考生物一轮总复习专题二细胞工程试题（含解析）新 人教版选修3 考点分类抓基础点点击破我能行 1．下面所列过程是植物组织培养的简略过程。请据此回答： ①→脱分化→②→再分化→③→④ (1)①表示__________________________________，它能被培养成④的根本原因是______________________________。 (2)②表示__________，它的细胞特点是______________________________________________，它的颜色特点是______________________________。 (3)若想制造人工种子，应该选择(写编号)__________。 (4)若①是花药，则④是______________，这项技术可用在__________上。 (5)若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④叶片的颜色是__________，这说明根尖细胞__________________________________。 (6)若利用此项技术制造治疗烫伤的药物——紫草素，培养将进行到(写编号)__________。 答案：(1)离体的植物器官、组织或细胞植物细胞具有全能性(2)愈伤组织细胞排列疏松、高度液泡化、细胞壁薄、呈无定形状态色浅(3)③(4)单倍体植株单倍体育种(5)绿色含有表达叶绿体的基因(6)② 解析：此题考查了对植物组织培养过程有关知识的理解。植物组织培养必须用离体的植物细胞、组织或器官，因为细胞中含有本物种的全套遗传物质，因此可以被培养成植株。制造人工种子必须选择再分化后的胚状体。 2．如图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答： (1)步骤①是__________，最常用的方法是__________。
细胞工程复习题
第一章动物细胞工程学概论 1.何谓动物细胞工程？ 以动物细胞或其组成成分为研究对象，对其进行操作、加工或改造，使其按照人的意图发生结构或功能等生物学特性的改变，获得人类所需的生物产品或创造新的动物品种的一门综合性技术科学。 2.动物细胞工程的主要研究内容？简单说明。 动物细胞、组织和器官的培养，动物细胞融合，动物染色体工程，动物干细胞工程，动物胚胎工程，转基因动物及生物反应器，动物克隆技术，嵌合体技术。 2.细胞工程技术的用途？ 临床医学与制药、动物遗传育种与繁殖、濒临动物保护、蛋白质生产、生命科学基础研究 第二章动物细胞工程基础 1. 名词解释： 1)细胞增殖：细胞通过分裂产生子细胞的现象。它是生命的基本特征之一， 是动物个体生长发育和生命延续的基本保证。 2)减数分裂：有性繁殖的有机体成熟时在生殖细胞中发生的特殊分裂方式 3)细胞周期：活细胞一次分裂结束开始，到下一次分裂终止所经历的时间。 4)全能性：指细胞经分裂和分化后仍具有形成完整有机体的潜能或特性 5）细胞分化：同一来源的细胞通过细胞分裂在结构和功能上产生稳定性差异的过程。细胞分化贯穿个体发生的全过程 6)细胞凋亡：动物的大多数细胞在发育到一定阶段出现正常的自然死亡，2．影响细胞分化的因素有哪些？ 卵细胞质细胞间互作激素 3．简述细胞凋亡的一般程序。 （1）染色质浓缩前此期的长度不等，无形态学变化，谷氨酰胺转移酶合成增加，另外一些蛋白酶被激活。 （2）染色质开始浓缩染色质分布在核膜周围，一些钙、镁离子依赖的核酸内切酶被激活，这时染色质断裂成核小体大小的片段。 （3）细胞质浓缩此时桥粒与中间纤维的连接被破坏，细胞膜形成膜泡，膜中糖蛋白的组成发生很大变化。 （4）膜泡形成凋亡小体形成的凋亡小体通过特异识别被周围细胞或巨噬细胞吞噬，然后被溶酶体分解。 第三章动物细胞工程研究办法 1.名词解释： 1)流式细胞术：20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质或化学性 质进行快速测量并进行分类收集和定量检测的高技术，它综合了激光技术、计算机技术、半导体技术、流体力学、细胞化学等多项技术，是一项仍在 不断发展且富有生命力的新技术。 2)ISHH技术：一种在组织细胞原位进行的核酸分子杂交技术，敏感度高， 特异性强，是当前分子生物学研究的重要手段
细胞工程复习题
细胞工程 如何正确区分正常细胞与凋亡细胞？P49 1、细胞培养的操作方式。P57 2、植物组织培养的优点。P75 植物无性繁殖过程中器官发生的方式。P74 3、植物组织培养的问题分析。P83 4、人工授精动物与体外受精动物有什么异同？P96/105 人工授精是动物受精方式的一种，比如鱼类和两栖类，精子和卵细胞的结合是在体外的人工授精是人为的取出动物（或人）的精子和卵细胞，在体外人工环境下完成精子和卵细胞的结合二者一个是自发的，一个是人为的人工授精的应用可以体现在多方面，比如近年来的试管婴儿技术；另外，人工授精在动物转基因上也有很多的的应用。 5、如何看待试管婴儿和体细胞克隆带来的伦理学问题？ 与技术问题相比，人们更为担忧或恐慌的是克隆技术给传统的伦理道德、社会观念及价值体系带来的巨大冲击和挑战。 A、克隆人的法律地位和伦理关系难以确定。克隆人的出现，使世代的秩序和个人身份的确立出了问题。这种秩序和定位是构成人和社会关系的基本部分（如果产生了混乱，人和社会的意义将发生偏移）。另外，当克隆人在社会上与人相处时，由于其身份的特殊性，可能在心理上产生孤独感、恐惧感和绝望感，造成新的社会问题； B、打破“哺乳动物不能无性繁殖”的自然规律，挑战传统的性伦理关系。千百年来，人类一直遵循着有性繁殖方式，而克隆这种“实验室里人为操纵下制造出生命”的方式，完全改变了人类自然的生育方式，从有性繁殖回到无性繁殖，人类繁殖后代的过程不再需要两性共同参与，这将对现有的社会关系、家庭结构造成难以承受的巨大冲击； C、人类克隆技术可能破坏基因的多样性遗传机制。基因的多样性是物种得以进化适应环境的源泉所在，人类传统生育方式保证了不同基因组之； D、从遗传学看，它破坏了人拥有独特基因型的权利。克隆技术使人类基因单一地遗传下去，导致人种退化，基因突变、新型病毒出现等一系列严重的问题。 7、.胚胎工程动物培育的关键技术环节有哪些？如何控制成功率？ 关键技术环节有：体外受精、人工受精、核移植和胚胎移植四个环节； 控制成功率：要对各个环节技术的熟悉了解及掌握，即深化理论知识，对各个环节的相关技术、应注意的问题进行精细控制. 8、从培养基、培养方法、培养设备上比较分析植物细胞培养与微生物细胞培养的异同？ 不同点: , 的全能性。 植物细胞培养主要是获得新个体或细胞产品应用与快速繁殖试管苗、细胞产品、人工种子、转基因植物的培育等。动物细胞培养是获得大量新生细胞或细胞产品应用是获得细胞的产物
细胞工程复习题
细胞工程复习题 细胞工程复习题 细胞工程是一门涉及生物学、工程学和医学的交叉学科，旨在利用细胞和分子生物学的原理和技术，对细胞进行改造和利用。它的应用领域广泛，包括生物制药、组织工程、再生医学等。为了帮助大家复习细胞工程的知识，下面将提供一些细胞工程的复习题。 1. 什么是细胞工程？ 细胞工程是一门涉及生物学、工程学和医学的交叉学科，旨在利用细胞和分子生物学的原理和技术，对细胞进行改造和利用。 2. 细胞工程的应用领域有哪些？ 细胞工程的应用领域包括生物制药、组织工程、再生医学等。 3. 请简要介绍细胞培养的步骤。 细胞培养的步骤包括细胞分离、细胞培养基的配制、细胞培养器的选择和培养条件的控制等。 4. 什么是细胞培养基？ 细胞培养基是供细胞生长和繁殖所需的营养物质的混合物，包括氨基酸、维生素、无机盐等。 5. 细胞培养器的选择有哪些因素？ 细胞培养器的选择受到细胞类型、培养规模和培养目的的影响。 6. 请简要介绍细胞冻存的原理和方法。 细胞冻存是将细胞在低温下保存，以便长期保存和使用。其原理是通过降低细胞活性和代谢，减缓细胞的老化和死亡。
7. 细胞工程在生物制药中的应用有哪些？ 细胞工程在生物制药中的应用包括重组蛋白的生产、抗体的制备和基因治疗等。 8. 请简要介绍组织工程的原理和应用。 组织工程是利用细胞和支架材料构建人工组织或器官的技术。其原理是将细胞 种植在支架材料上，通过细胞的生长和分化，形成具有特定功能的组织或器官。 9. 细胞工程在再生医学中的应用有哪些？ 细胞工程在再生医学中的应用包括组织修复、器官再生和干细胞治疗等。 10. 请简要介绍干细胞的类型和特点。 干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞。其特点是具有自我更新和多向分化的能力，可以分化为各种不同类型的细胞。 通过以上的复习题，我们可以回顾和巩固细胞工程的相关知识。细胞工程作为 一门前沿的学科，对于推动生物医学的发展和应用具有重要意义。希望大家能 够通过复习和理解，更好地掌握细胞工程的核心概念和技术，为未来的研究和 应用做好准备。
细胞工程复习题
一、名词解释 1、接触抑制：细胞汇合相互接触后失去运动的现象。 2、原代培养：从体内取出细胞或组织的第一次培养。 3、传代：也称再培养，无论是否稀释，将细胞从一个培养瓶转移或移植到另一个培养瓶即称为传代或传代培养。 4、细胞系：原代培养物经首次传代成功后即为细胞系。 5、密度抑制：细胞数量到一定数量后引起抑制增殖的现象。 6、细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质或标志的培养物称细胞株。 7、无血清培养基：又称化学限定性培养基或化学成分明确的培养基。指不需要添加血清就可维持细胞在体外较长时间生长和繁殖的合成培养基。 8、天然培养基：来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基。如血浆、血清、组织浸出液、淋巴液等。 9、合成培养基：人们用各种化学物质设计出的用于细胞培养的培养基。 10、细胞工程：是按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。 11、细胞融合又称细胞杂交，是指两个或两个以上的细胞融合形成一个细胞的过程。 12、体外活细胞染色：在体外培养条件下，用某种染料对活细胞或组织进行染色，而不影响活细胞生命活动的一种方法。利用这种方法，可以对培养物进行染色观察，经染色的培养物还可以继续进行培养。 13、体外受精（IVF）：人为操作使成熟的卵子与精子在合适的体外环境中完成受精过程。 14、发育阻滞：体外受精的早期胚胎在体外发育中往往会停滞在某一阶段不再发育，即发育阻滞。 15、胚胎移植：也称受精卵移植，是将良种母畜配种后的受精卵或早期胚胎取出，移植到具同种生理状态的母畜体内，使之继续发育成新个体，所以也成“借腹怀胎”。 16、细胞脱分化：一定培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程就是细胞脱分化。 17、细胞再分化：脱分化后的分生细胞（愈伤组织）在一定条件下，重新分化为各种类型的细胞，并进一步发育成完整植株。 18、外植体〔explant〕：从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。 19、愈伤组织:原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞，在组培中则指在离体培养过程中形成的无组织结构，无明显极性，松散的细胞团。 20、植物组织培养：在含有营养物质及植物生长物质的培养基中，培养离体植物组织（器官或细胞）并诱导使其长成完整植株的技术。 21、褐化：又称为褐变，是指培养材料向培养基释放褐色物质，致使培养基逐渐变褐，培养材料也随之变褐甚至死亡的现象。 22、污染：是指在组织培养过程中，由于细菌、真菌等微生物的侵染，在培养基的表面滋生大量菌斑，造成培养材料不能生长和发育的现象。 23、玻璃化：当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往
细胞工程高考复习专题及历年高考试题
细胞工程 1.【2007Ⅰ】下图表示用3H-亮氨酸标记细胞内的分泌蛋白，追踪不同时间具有放射性的分泌蛋白颗粒在细胞内分布情况和运输过程。其中正确的是 2.【2007Ⅱ】若采用植物组织培养技术，从上述F1番茄叶片取材制备人工种子、繁殖种苗，其过程可简述为如下5个步骤： 上述过程中去分化发生在第________步骤，再分化发生在第_______步骤，从叶组织块到种苗形成的过程说明番茄叶片细胞具有__________________________。 3.【2010Ⅱ】下列关于高尔基体的叙述，错误 ．．的是 A.高尔基体膜具有流动性 B.抗体从合成到分泌不经过高尔基体 C.高尔基体膜主要由磷脂和蛋白质构成 D.高尔基体具有对蛋白质进行加工的功能 答案：1.C 2：b c 全能性3.B 一.选择题 1.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的 A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 2.下列关于植物组织培养的叙述中，错误 ．．的是 A.培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 B.培养基中的生长素和细胞分裂素影响愈伤组织的生长和分化 C.离体器官或组织的细胞都必须通过脱分化才能形成愈伤组织 D.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同 3.细胞的生物膜系统指的是 A.由细胞膜、核膜以及由膜围成的细胞器形成的统一膜系统 B.全部的细胞膜 C.由内质网、高尔基体和核膜形成的具有特定功能的结构 D.细胞膜和核膜 4.除哪一项外，下面都是生物膜系统在细胞生命活动中的作用 A.在细胞内外的物质运输等过程中起决定性作用 B.使核内遗传信息的传递不受细胞质的影响 C.广阔的核面积为酶提供大量的附着位点 D.使细胞的结构与功能区域化 5.下列关于单克隆抗体的叙述，错误的是 A.特异性强、灵敏度高 B.与抗癌药物结合可制成“生物导弹”
2023届高考生物二轮复习命题点专训8细胞工程(选择题)含答案
命题点专训(八) 细胞工程(选择题) (建议用时：20分钟) 1．(2022·大连高三二模)下列关于细胞工程应用方面的叙述，错误的是( ) A ．应用动物细胞培养技术构建人造皮肤 B ．应用植物细胞培养技术生产人参皂苷 C ．应用动物细胞融合技术获得iPS 细胞 D ．应用植物体细胞杂交技术培育“白菜－甘蓝” C [动物细胞培养技术可以用于克隆皮肤细胞，构建人造皮肤，A 正确；人参皂苷是人参细胞产生的，可应用植物细胞培养技术培养人参细胞来生产人参皂苷，B 正确；将特定基因转入成纤维细胞，可获得类似胚胎干细胞的一种细胞，即诱导多能干细胞(iPS 细胞)，因此iPS 细胞的获得应用了动物细胞培养技术，没有利用动物细胞融合技术，C 错误；植物体细胞杂交可打破生殖隔离的界限，因此应用植物体细胞杂交技术可培育“白菜－甘蓝”， D 正确。] 2．(2022·山东青岛二模)草莓是无性繁殖的作物，它感染的病毒很容易传播给后代。病毒在草莓体内逐年积累，会导致产量降低，品质变差。下图是育种工作者选育高品质草莓的流程图。下列说法正确的是( ) 方法一：草莓 ―→甲 ――→A 无病毒苗 方法二：SMYELV －CP ――→B 草莓细胞 ――→C 抗病毒草莓 注：SMYELV －CP 是草莓轻型黄边病毒的外壳蛋白基因。 A ．方法一中选择甲作为组织培养材料的原因是该部位细胞的分生能力强 B ．需要用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%的次氯酸钠溶液对甲进行消毒 C ．A 、C 两个培育过程一般都不需要光照但需要生长素和细胞分裂素 D ．需要通过病毒接种的方式来判断两种选育方法的效果 B [方法一选择甲的原因在于该部位含病毒少，甚至不含病毒，A 错误；在
细胞工程习题总结及参考答案
细胞工程习题总结及参考答案LT
6、胚状体是在植物组织培养的哪一阶段上获得的（B） A．愈伤组织 B．再分化 C．形成完整植株 D．取离体组织 二、判断改错题 •1、无病毒苗（脱毒苗）就是植物体已没有病毒感染了（×） •2、茎尖外植体越大，脱毒效果越好。（×） •3、一般情况下，细胞分裂素与生长素的比值高有利于根的分化（×） •4、污染、褐变和玻璃化现象都是因无菌操作不规范造成的（×）。 •5、褐变现象是由于培养条件不适应引起的而与培养物本身无关（×） •6、一般的植物组织培养体系中，培养物是异养生长的（ ） 第五章 一．思考题 1. 复习：什么是初级代谢产物和次级代谢产物？ 答：初级代谢产物：通过初级代谢产生的维持细胞生命活动必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂质、维生素等。在不同种类的细胞中，初级代谢产物的种类基本相同。 次级代谢产物：通过次级代谢合成的产物，大多是分子结构比较复杂的小 分子化合物，并非细胞生长所必需的。如酚类、香豆素、生物碱、萜类等。 大多具有生物活性,是目前研究的热点. 2. 为什么要采用两步法培养？ 答：由于细胞生长和次生代谢物产生对培养基和培养条件要求不同。所以在大规模植物细胞悬浮培养中，为了提高生物量和次生代谢产物一般采用二步法培养 工艺。 二.练习题 一、选择题 1、植物细胞大规模培养中下列哪种培养方法不能使细胞保持在对数生长期（C） A、连续培养 B、半连续培养 C、成批培养 D、开放式连续培养 2、与冠瘿培养技术有关的是（D） A、根癌农杆菌与Ri质粒 B、发根农杆菌与Ri质粒 C、发根农杆菌与Ti质粒 D、根癌农杆菌与Ti质粒 3、在进行细胞培养时细胞起始密度不能低于某一临界值，一般为（C）个/mL。 A、 101~102 B、103~104 C、104~105 D、 105~106 4、细胞两相培养技术中正确的是（C） A、细胞在有机相中生长,产物转移至水相中. B、产物能较容易地被吸附或溶解于水相中. C、减少了产物的反馈作用, 可以提高产物含量. D、有机物或多聚化合物能吸收培养基中的有效成分. 5、通过流态化来强化固体颗粒与流体相之间的混合、传质和传热的反应装置是（B） A、填充床生物反应器 B、流化床生物反应器 C、中空纤维反应器 D、机械搅拌式生物反应器 二、判断改错题： 1、伊凡蓝染色法可使有活力的细胞吸收染料显蓝色，无活力的原生质不吸收显示无色。
2022-2023年生物技术期末复习-细胞工程原理(生物技术)考试题库全真模拟卷3套(含答案)试卷号
2022-2023年生物技术期末复习-细胞工程原理（生物技术）考试题库全真模拟卷3套（含答案） （图片大小可自由调整） 全文为Word可编辑，若为PDF皆为盗版，请谨慎购买！ 第1卷 一.综合考核题库(共30题) 1.花药培养属于细胞培养范畴，也称小孢子培养。 正确答案:错误 2.以下不是动物细胞生物制药的是() A、干扰素 B、单克隆抗体 C、病毒疫苗 D、人工胚乳 正确答案:D 3.植物组织培养之父是（） A、Haberlandt B、Gautheret C、White D、Steward 正确答案:A 4.下列有关动物细胞融合、植物体细胞杂交和生物个体杂交的比较中，正确的是 ( ) A、动物与植物体细胞杂交可以克服不同种生物之间的生殖隔离 B、动物细胞融合与植物体细胞杂交的基本原理相同，均是细胞全能性的表达 C、生物个体杂交属于有性生殖，而植物体细胞杂交属于无性生殖 D、以上都对 正确答案:D 5.动物细胞工程主要有哪些内容？这些技术有何用途？ 正确答案:内容：1. 组织和细胞培养技术2. 细胞融合与单克隆抗体技术3. 细胞核移植技术4. 胚胎工程技术5. 干细胞技术6. 转基因技术7. 染色体工程细胞工程的应用有：A. 单克隆抗体的应用：疾病诊断与治疗、微量大分子物资的检测、贵重生物活性物的分离与提纯、特殊疾病治疗、与药物交联治疗疾病；B. 转基因技术的应用：建立疾病的动物模型、品种改良和抗病育种、“乳腺生物发应器”、基因代替治疗、异种器官移植、基因功能研究；C. 细胞与组织替代治疗；D. 治疗人类不孕症；E. 优良品种繁育；F. 生产转基因家畜；G. 保护濒危动物。 6.农杆菌介导的转化方法主要适用于（）。 A、草本植物 B、木本植物 C、单子叶植物 D、双子叶植物 正确答案:D 7.一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 ( ) A、有选择地繁殖某一性别的家畜 B、繁殖家畜中的优秀个体 C、用于保存物种 D、改变动物的基因型 正确答案:D 8.病毒在植物体中的分布规律为（） A、从茎尖到底部含量越来越多 B、从茎尖到底部含量越来越少 C、病毒在植株体的分布是均匀的 D、茎尖含量最多，底部几乎没有 正确答案:A
2023届高考生物二轮复习专题细胞工程作业含答案
第2练细胞工程 一、单项选择题 1. (2022·扬州三模)寒兰为名贵的兰花品种，一般生长在深山幽谷的山腰谷壁。由于人类的过度采摘，现在很难找到寒兰，偶尔能发现的也是较小的植株。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对其进行人工大量繁殖，再移栽至原有生境。在人工繁殖时可以应用的最适合的生物工程技术手段是() A. 将寒兰体细胞与繁殖力强的其他植物细胞进行融合 B. 将寒兰的组织放置在培养基中进行植物组织培养 C. 将寒兰的体细胞核移植到其他植物去核卵细胞中 D. 将生长素基因转入野生寒兰获得生长速度快的寒兰 2. (2022·盐城三模)病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列有关叙述正确的是() A. 配制MS固体培养基时，经高压蒸汽灭菌后再调pH B. 植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达 C. 切取的植株茎尖用70%的酒精消毒后，需放在清水中反复清洗 D. 脱毒苗培育是否成功，最终还需要通过接种病毒进行个体水平的检测 3. (2022·连云港三模)我省研究人员利用体细胞核移植技术成功培育出苏淮猪“龙凤胎”，主要步骤如下。相关叙述错误的是() 步骤①：分离培养一对苏淮猪的耳组织体细胞，低温保存。 步骤②：从其他品种母猪卵巢中获取卵母细胞并培养。 步骤③：细胞核移植获得重构胚胎。 步骤④：将不同性别的多个胚胎移植到代孕母猪体内。 步骤⑤：孕育出苏淮小猪“龙凤胎”。 A. 步骤①分离获取苏淮猪耳组织体细胞时需要使用胰蛋白酶、动物细胞培养液等 B. 步骤②培养卵母细胞时，应该一直培养到卵母细胞外出现1个极体 C. 步骤③可将步骤①获得的体细胞直接显微注射到培养成熟的卵母细胞中 D. 步骤④移植胚胎的性别可依据步骤①提供体细胞个体的性别确定 4. (2022·连云港三模)某学校生物学研究小组以蝴蝶兰为材料开展了植物组织培养试验，过程如下图所示。相关叙述错误的是()