药理学实验 镇痛药的镇痛作用

药理学实验镇痛药的镇痛作用

【实验目的】

学习镇痛实验化学刺激法，观察镇痛药的镇痛作用，并联系其临床用途。

【原理】

疼痛概念系伤害性刺激所引起的情绪反应、行为反应以及生理功能障碍，是许多疾病的症状，是机体受到不良刺激或损害的一种信号和反应。根据疼痛所表现出的行为反应，目前应用的疼痛模型有：1．热刺激法

⑴辐射热刺激法：用一定强度的温度来刺激动物躯体的某一部分使其产生疼痛反应。大白鼠以甩尾反应时间为痛反应指标。实验时，用秒表计时，从照射开始到甩尾的时间作为痛阈。

⑵热板法：实验时，把小白鼠放在预先加热到55℃金属板上，以舔后足为常用痛反应指标。给药后痛反应时间延长一倍以上者作为有效镇痛药物。

注意事项：

①反复连续测定应注意防止局部烫伤而影响结果。

②注意正常鼠体温应与室温相近，室温应在20℃左右。

③给药前测试痛阈时，注意反应时间少于2s（10s，热板法）或大于10s（30s，热板法）表示该动物反应过敏或迟钝，则剔除不用。

④热板法要求必须用雌性动物。

方法评价：

①仪器装置简单，反应灵敏，指标明确。

②对组织损伤小，可反复利用动物。

③痛反应潜伏期长，利于比较药物镇痛作用的强弱、快慢、持续时间。

④可用于筛选麻醉性和非麻醉性镇痛药。

⑤但由于辐射热刺激法甩尾反应纯粹是一种脊髓反射，因此骨骼肌松弛药也会出现阳性结果，应加以注意。

2．机械刺激法

大白鼠尾尖压痛法用钝刀口用力压大白鼠尾，以产生嘶叫作为痛阈值。此法与大白鼠的年龄关系很大，以100~150g体重为宜。压痛部位以大白鼠尾尖1/3处敏感性较高。

3．电刺激法

⑴齿髓刺激法目前公认牙髓神经是对痛颇敏感的刺激部位，其痛反应近似临床病理性疼痛。因此齿髓刺激法是评价镇痛药的标准而可靠的方法。此法适用于狗、猫、家兔、大白鼠等，其中以家兔应用最多。动物在麻醉下用电钻在牙齿上钻孔后，将电极插入齿髓作慢性埋藏电极。电刺激时，动物因疼痛会出现咀嚼运动与摆头等反应，这些反应可视为痛阈的指标。

方法评价：反应灵敏、稳定，电刺激引起的舔舌/咀嚼反应比较一致。

⑵鼠尾刺激法以串脉冲方波刺激大白鼠尾尖1/3处，以引起甩尾和嘶叫反应的电流强度作为痛反应指标。

4．化学刺激法许多化学物质如强酸、强碱、钾离子、缓激肽等，接触到完整的皮肤和粘膜时，

即引起疼痛反应。因此，将某些化学物质给入动物体内可产生疼痛，造成疼痛模型，作为研究疼痛生理及筛选镇痛药物的方法。小白鼠扭体法是筛选镇痛药的常用方法之一，采用一些化学刺激物注入小鼠腹腔内，引起深部的、大面积而较持久的疼痛刺激，致使小白鼠产生“扭体”反应（腹部内凹、躯干与后腿伸张、臀部高起）。观察给予化学刺激药物15分钟内发生“扭体”反应的小白鼠或各小白鼠发生的“扭体”次数，将给药组与对照组相比，若使扭体反应发生率减少50%以上的，可认为有镇痛作用。常用致痛剂如：酒石酸蒂钾、醋酸等。化学刺激法是筛选非麻醉性镇痛药的常用方法。

【实验材料】

器材：架盘天平、注射器、5#针头、玻璃钟罩。

药品：1%醋酸溶液、0.2%盐酸哌替啶溶液、0.2%颅痛定溶液、生理盐水。

动物：小白鼠。

【实验方法】

取小白鼠3只，称体重，编号，置于玻璃钟罩中观察小鼠正常活动。分别给小白鼠腹腔注射0.2%盐酸哌替啶溶液0.2ml/10g、0.2%颅痛定溶液0.2ml/10g及等容量生理盐水。30min后，每鼠再由腹腔注射１%醋酸溶液0.2ml/10g，观察各组出现扭体反应的小白鼠数量。

【实验结果】

将结果记录于下表中，综合全实验室数据，计算镇痛药的镇痛百分率。

实验组无扭体反应动物数－对照组无扭体反应动物数

药物镇痛百分率＝————————————————————————X100%

对照组扭体反应动物数

鼠号体重(ｇ) 剂量(ml) 给药扭体反应的

鼠数(只)

发生扭体反

应百分率

1 0.2%盐酸哌替啶溶液+１%醋酸溶液

2 0.2%颅痛定溶液+１%醋酸溶液

3 生理盐水+１%醋酸溶液

【注意事项】

1．腹腔注射在小白鼠下腹部，切勿进针过深损伤内脏，否则内脏出血小白鼠而死，影响实验进行。

2．结果可以班统计，当给药组比对照组的扭体发生率减少50%以上时，才能认为有镇痛效力。

3．小鼠体重轻，扭体反应发生率低。

4．扭体反应表现为小鼠腹部内凹，躯干与后腿伸张，臀部抬高。

【思考题】

吗啡类镇痛药与解热镇痛药的作用机理有何不同？